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Curso de posgrado

Productos Biofarmacéuticos:
de I + D a control de calidad

Cultivo de tejidos y
células

Dra. Lorena González


FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA, UBA.
¿Cuál es la importancia de los cultivos de tejidos y
celulares para la producción de ?
en I+D….

SISTEMAS DE
EXPRESIÓN

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…y control de calidad

BIOENSAYOS
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Historia del desarrollo del cultivo de tejidos

Cultivo de células de
1885: Wilhem Roux
embrión de pollo en
solución salina

1907: R. G. Harrison Cultivos de médula espinal


embrionaria de anfibios

1910: Burrows Plasma de pollo para nutrir


los explantes de tejidos

1916: Rous y Jones Extractos enriquecidos en


tripsina para disociar células

El aislamiento de los primeros antibióticos


´40s: permitió el gran desarrollo del cultivo de
tejidos
Definición

Cultivo de tejidos: conjunto de técnicas que


permiten el mantenimiento de las células 'in
vitro', manteniendo al máximo sus
propiedades fisiológicas, bioquímicas y
genéticas.

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Tipos de cultivos de tejidos.

El órgano se conserva en un
medio del que obtiene los
nutrientes, al que puede
liberar los desechos y en el
que mantiene su estructura
tridimensional
"Test tube baby" by tarunkant is licensed under CC BY-NC-ND 2.0

Este tipo de cultivo permite mantener los tipos celulares


diferenciados. Es una buena réplica del tejido de
origen, pero no permite su propagación.
Tipos de cultivos de tejidos.

Se coloca un fragmento de
tejido o de órgano en la
interfase sólido-líquido de un
soporte de vidrio o de plástico.
Las células pueden migrar y
proliferar por la superficie del
soporte.

Proteomic identification of new adipokines and miokines


implicated in obesity (Full text in Spanish) - Scientific Figure on
ResearchGate. Available from:
https://www.researchgate.net/figure/Figura-29-Foto-del-
cultivo-de-diferentes-explantes-tisulares-De-izquierda-a-
derecha-y_fig13_259117313 [accessed 28 May, 2019]
Tipos de cultivos de tejidos.

En estos cultivos se pierden las

interacciones célula-célula y las

interacciones de la célula con la

matriz extracelular.

Sin embargo, las células son

capaces de proliferar y la población

celular crece notablemente.

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Definición

Cultivo celular: es el proceso mediante el


que células aisladas pueden cultivarse en
condiciones controladas. Es un modelo de
estudio in vitro por el cual pueden crecer y
mantenerse en suspensión o en monocapa
células, por períodos prolongados
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: las células crecen adheridas
sobre un soporte sólido (plástico o vidrio). El anclaje al sustrato es
un prerrequisito para la proliferación celular (mayoría de las células
excepto para las hematopoyéticas).

: las células se encuentran


dispersas en el medio de cultivo. Su crecimiento no depende del
anclaje. Este tipo de cultivo se restringe a las células
hematopoyéticas, células madre, líneas celulares transformadas y
células tumorales.
Crecimiento de las células en cultivo

 Fase de latencia (período log).


Fijación al sustrato e inicio del
ciclo celular.

 Fase de crecimiento
exponencial. El número de
células se duplica
aproximadamente cada 24
horas.

https://nptel.ac.in/courses/102103016/35
Crecimiento de las células en cultivo

 Fase de confluencia. Las


células dejan de dividirse
(monocapa: inhibición por
contacto; suspensión:
consumo del medio).

Fase de muerte. Las


células entran en una fase
de senescencia que
termina con la muerte de
las células en cultivo.
https://nptel.ac.in/courses/102103016/35
Tipo de cultivos celulares

Cultivos primarios
Cultivos celulares obtenidos de tejidos normales a partir de
un organismo vivo.

Características:
Las células mantienen la viabilidad un
Ejemplo:
periodo de tiempo limitado y no se
reproducen en cultivo.
El cultivo presentan una reducción en
el número total de células vivas a lo
largo del tiempo
Hepatocitos de ratón
Tipo de cultivos celulares

Línea celular primaria


Cultivo establecido a partir de un tejido u órgano, que se
mantiene un periodo de tiempo limitado pero con
reproducción de las células en el cultivo.

Ejemplo:
Características:

Poder limitado de proliferación celular

(número limitado de generaciones).

Fibroblastos dérmicos
Tipo de cultivos celulares

Líneas celulares continuas


Cultivos celulares obtenidos a partir de un cultivo primario,
mediante un fenómeno de transformación.

Características:
Poder ilimitado de proliferación Ejemplo:
celular.
Poder ilimitado de expansión
(número ilimitado de generaciones).

MDA-MB-231
Tipo de cultivos celulares
Línea celular
continua
Cultivo primario

Línea celular
primaria
BASIC TECHNIQUES IN ANIMAL CELL CULTURE - Scientific Figure on ResearchGate. Available from:
https://www.researchgate.net/figure/Growth-of-animal-cells-in-culture_fig3_266455722 [accessed 28 May, 2019]
Líneas celulares continuas
Las células transformadas se caracterizan porque:
• Son inmortales: crecen indefinidamente
• Su crecimiento es aberrante: se pierde la inhibición por
contacto y la dependencia del anclaje
• Son malignas: invaden tejidos y dan lugar al crecimiento de
tumores
• Son genéticamente inestables: son heteroploides (varía el
número de cromosomas) y presentan aberraciones
cromosómicas

En 1952 se obtuvo la primera línea


celular continua humana: las
células HeLa
Bancos de líneas celulares
Sintetizando y, además, para complementar….

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Curso de posgrado
Productos Biofarmacéuticos:
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Muchas gracias

Dra. Lorena González


FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA, UBA.

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