UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

INSTITUTO DE QUÍMICA

LABORATORIO DE PRODUCTOS NATURALES

PRÁCTICA 6: AISLAMIENTO DE NICOTINA EN TABACO

AUTORES:
ANA MARÍA MUÑOZ JARAMILLO
ANDREA CAROLINA RODRÍGUEZ SALAZAR
JACKSON MAURICIO ESPINOSA SILVA

PROFESOR:
ELVER LUIS OTERO TEJADA

MEDELLÍN, ANTIOQUIA 2019

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1. Metodologı́a.

Figura 1: Procedimiento de aislamiento de nicotina en tabaco.

2. Evidencias y observaciones.
La muestra de tabaco impregnado con NaOH (ver figu-
ra 2a) se agitó aproximadamente una hora con varilla
de vidrio para disgregarla y llevar la nicotina a su for-
ma libre, ya que, esta se encuentra en forma de sal
en el tabaco, se filtró utilizando gasa y se procedió a
realizar extracción con diclorometano, en esta parte se
presentó mucha interferencia, primero no se lograban
observar las dos fases, para ello, se adicionó más agua
y fase orgánica, resulto el problema de visualización
(ver figura 2b), se presentó emulsión y para romperla
se adicionó en primera instancia NaCl y posteriormen-
te NH4 Cl, dicha emulsión era ocasionada por un sólido
suspendido para tratar de disolverlo, se agregó acetato (a) Muestra con NaOH (b) Extracción L-L
de etilo y no se logró, entonces se adicionó metanol y Figura 2: Montaje extracción L-L.
tampoco se logró el objetivo. Se procedió a extraer fase orgánica con sólido, pero solo se siguió
trabajando con la mitad, dicha fase se secó, se rotoevaporó y se realizó TLC utilizando como fase
móvil con CH2 Cl2 :CH3 OH 9:1 revelada en UV y con reactivo de Dragendorff.

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 (a) λ = 254 nm (b) λ = 365 nm (c) Dragendorff (d)
Dragendorff
Figura 3: TLC luego de rotoevaporar el solvente

Luego de rotoevaporar la muestra, esta quedó con agua, lo que dificulto realizar la cromatografı́a
en capa fina, de las TLCs (ver figura 3a, 3b y 3c) se observa una mancha que absorbe a longitud de
onda corta y poco en longitud de onda corta, se observa también que en el punto de siembra hay
absorción en ambas longitudes de onda. Cuando se reveló la placa con el reactivo de Dragendorff,
se tiene que el color naranja caracterı́stico de la prueba para alcaloides se presento cerca al punto
de siembra y no en la mancha superior, por lo que se descarta que dicha mancha sea el analito
de interés. El extracto obtenido se guardó 8 dı́as, pasado este tiempo, se observaron cristales de-
finidos de color amarillento, estos se trataron de disolver en agua, pero no funcionó, por lo que
se utilizó como solvente metanol, la disolución ocurrió pero en caliente, para verificar o descartar
la posibilidad que fuese la nicotina precipitada, se realizó prueba de Dragendorff y no se obtuvo
el color naranja caracterı́stico (ver figura 3d), con el anterior resultado queda descartada la hipótesis.

El extracto se redisolvió en diclorometano y se adicionó ácido clorhı́drico con el fin de protonar la

nicotina para ası́ separarla y llevarla a la fase acuosa, se procedió hacer la extracción (ver figura
4a), se verificaron ambas fases con reactivo de Dragendorff (ver figura 4b y 4c) para asegurar que
la mayor cantidad de nicotina se encontrará en la fase acuosa, la extracción se realizó dos veces.
Seguidamente se alcalinizó la fase acuosa con NH4 OH hasta pH=9, se realizó nuevamente extracción
con CH2 Cl2 y se presentó emulsión, para romperla se agregó sal y metanol, se procedió a separar
y se verificó con Dragendorff con la fase orgánica (ver figura 4d) observándose color naranja.

(a) Extracción L-L (b) Izq=FO Der=FA (c) Izq=FO Der=FA (d) Fase orgánica
Figura 4: Adición de KOH y baño marı́a

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La fase orgánica anterior se secó con sulfato de sodio anhı́drido y se rotoevaporó, seguidamente el
extracto obtenido se redisolvió en metanol y se le adicionó una solución saturada de ácido pı́crico
en metanol, inicialmente no se observó formación de precipitado, por lo cual la solución se llevo a
baño de hielo y luego de unos minutos se observó formación de solido, este se filtró por gravedad y
se secó a 55◦ C por 15 minutos (ver figura 5a), el punto de fusión del sólido fue de 222◦ C.

(a) Sólido obtenido (b) Reacción para obtener dipicrato de nicotina

Figura 5: Sı́ntesis dipicrato de nicotina

3. Análisis.
La nicotina (ver figura 5b) es un alcaloide que se encuentra principalmente en las hojas de tabaco,
tiene un porcentaje aproximado entre el 1.8 y 5.8 mg/g [1]. Este alcaloide es polar y soluble en agua,
se encuentra naturalmente en forma de sal, por ello se realizó la primera extracción con NaOH para
llevarla a su forma libre, debido a los interferentes presentes en la muestra, se adicionó HCl para
protonarla, llevarla a la fase acuosa y ası́ separarla de los interferentes de la muestra, nuevamente
se alcalinizo el medio para obtener la nicotina en forma libre.

Una forma practica de rastrear la presencia de nicotina en las diferentes fases fue mediante el
uso del reactivo de Dragendorff, este proporciona una prueba rápida y de fácil identificación para
alcaloides por su color naranja caracterı́stico, finalmente para identificar la presencia de nicotina
aislada, se realizó un derivado (dipricato de nicotina), para el cual se obtuvo un punto de fusión de
de 222◦ C que concuerda con el punto de fusión reportado que es de 218◦ [2].

Durante el procedimiento se presentaron muchas dificultades por la formación de emulsiones y

presencia de sólidos suspendidos, algunos se resolvieron mediante la adición de sales como NaCl y
NH4 Cl, además de la adición de metanol, el cual es el candidato predilecto cuando se tiene analitos
insolubles en ambas fases porque este es afı́n tanto por la fase acuosa como por la fase orgánica.
Se sugiere para próximas experiencias utilizar diferentes métodos de extracción como ultrasonido
con agua o con solución metanólica de hidróxido de potasio, en este ultimo se presentó el mayor
rendimiento de extracción de 4 métodos comparados en la referencia 3.

4. Conclusiones.
Se logró aislar e identificar la nicotina de hojas secas de tabaco por medio de extracción L-L; dicho
compuesto se monitoreo mediante la prueba de Dragendorff, la identificación se realizó indirecta-
mente a través de la sı́ntesis de un derivado, de cual se comparó el punto de fusión con el reportado,
obteniéndose una muy buena correspondencia (4 grados por debajo).
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Referencias
[1] Hadidi, K. A., & Mohammed, F. I. (2004). Nicotine content in tobacco used in hubble-
bubble smoking. Saudi Medical Journal, vol. 25(7), págs. 912-917.

[2] Shriner, R., Hermann, C., Morrill, T., Curtion, D., & Fuson, R. (2004). The Sys-
tematic Identification of Organic Compounds. WILEY, ed. 8, págs. 589.

[3] Jones, Nadiá M., Bernardo-Gil, M. Gabriela., & Lourenco, M. Graço(2001). Com-
parison of Methods for Extraction of Tobacco Alkaloids. Journal of AOAC International, vol.
84(2), págs. 309-316.