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CONTENIDO
1. Degradación de la proteína a nivel ruminal
1.1. Absorción de la proteína
1.2. Absorción del nitrógeno metabólico
1.3. Excreción del nitrógeno metabólico
1.4. Excreción de ácido úrico creatinina y amonio
2. Intoxicaciones causadas por moléculas nitrogenadas
2.1. Intoxicación por amonio
2.2. Intoxicación por nitritos y nitratos
3. Muestras utilizadas para determinar nitrógeno ureico
3.1. Nitrógeno ureico en muestras de leche
3.2. Nitrógeno ureico en muestras de sangre
3.3. Valores de referencia del nitrógeno ureico
3.3.1. Valores reportados a nivel internacional
3.3.2. Valores reportados en Colombia
4. Nitrógeno ureico y la fertilidad del hato lechero
4.1. Nitrógeno ureico y la relación con los parámetros reproductivos
4.2. Nitrógeno ureico y las afecciones a nivel uterino
4.3. Nitrógeno ureico y las afecciones causadas al embrión
4.4. Nitrógeno ureico y la falla en el reconocimiento materno
4.5. Nitrógeno ureico y el proceso de foliculogenesis
4.6. Afecciones del nitrógeno ureico en la ovulación
4.7. Alteraciones en hormonas de interés reproductivo causadas por el nitrógeno
ureico
5. Nitrógeno ureico y las afecciones reproductivas en el macho.
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Hoy en día la reproducción animal es vista como uno de los principales factores en las
ganaderías de leche especializada, es por este motivo se hace necesaria la utilización de todas las
herramientas disponibles para determinar la alteración del ciclo reproductivo y el análisis de las
los microorganismos presentes, una vez se ha pasado por el rumen, parte de la proteína pasa intacta
degradado, para luego convertirse en proteína microbiana siempre y cuando exista energía
disponible (Davila, y otros, 2013). Cuando los niveles de nitrógeno son altos y se agotan todos los
(Blood Urean Nitrogen – BUN), con el fin de que sea reciclado por medio de otros mecanismos,
y para realizar su excreción mediante la orina o la leche (Milk Urean Nitrogen - MUN).
reproducción. Sin embargo los altos niveles aportados en la ingesta pueden resultar en la
disminución de las tasas de preñez (Wittwer, Gallardo, Reyes, & Opitz, 1999), la mortalidad
embrionaria (Rhoads, Rhoads, Gilbert, Toole, & Butler, 2006), incrementando los días abiertos y
La cuenca alta del rio Suarez, tiene excelentes condiciones de suelo para producir biomasa,
la cual la hace una de las zonas de elección para la ganadería de leche especializada, convirtiendo
esta actividad en su fuerte económico. En la zona, el nivel freático y la materia orgánica, juegan
un papel importante, sin embargo dichas condiciones en conjunto con la presencia de heladas y
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sanguíneo de bovinos, generando niveles tóxicos, que en algunos casos han causado su muerte.
Este se convierte entonces en uno de los problemas más preocupantes de la zona, no solamente
por la principal causa de muerte en temporadas de lluvia, sino por las consecuencias a largo plazo
7. Justificación
ambientales, genéticas, entre otras, que determinan en gran medida el desempeño reproductivo.
Uno de los mayores inconvenientes con las vacas lecheras es el balance energético negativo
posparto, y que en compañía de una dieta alta en nitrógeno y un ineficiente aporte de energía en la
dieta genera desbalances que ocasionan un incremento del nitrógeno ureico tanto en sangre como
en leche.
El Nitrógeno ureico en leche (MUN, por sus siglas en inglés: Milk Urean Nitrogen) es un
parámetro importante para ser analizado, pues refleja el estado metabólico de la degradación de
una muestra sencilla de colectar y fácil de analizar; agregando que la correlación entre MUN y
BUN (Blood Urean Nitrogen .. nitrógeno ureico en sangre) es alta (Wittwer, Gallardo, Reyes, &
Opitz, 1999). Los altos niveles de nitrógeno en forma de urea son tóxicos en el medio uterino, en
Algunos estudios sugieren que los valores de urea en leche mayores a 7,3 mmol/l al
momento de la inseminación, están asociados a una baja tasa de preñez al primer servicio.
(Wittwer, Gallardo, Reyes, & Opitz, 1999). En estudios recientes se determinaron que los niveles
más altos de nitrógeno ureico en leche se encontraban en vacas y novillas después del parto, los
cuales se ven asociados a una tasa reducida en la concepción. De igual forma concluye que las
vacas con niveles superiores a 15,4 mg/dl de nitrógeno ureico, son menos propensas a confirmarse
8. Objetivos
Evaluar la relación entre nitrógeno ureico en leche, los días abiertos y el porcentaje
9. Marco Teórico
Los forrajes de la zona lechera de los municipios de San Miguel de Sema, Simijaca y
Chiquinquirá, tienen un alto contenido proteico, constituyen el mayor aporte en la ración diaria
de las vacas lecheras. En algunas fincas se utiliza como la única fuente de alimento, ya que la
disponibilidad del forraje es constante durante todo el año, lo que se convierte en una gran ventaja.
Debido a las manifestaciones clínicas concordantes con intoxicación con nitritos y nitratos, se
puede determinar que los forrajes cuentan con un alto contenido proteico, que supera las
Uno de los principales componentes de la ración es el nitrógeno, y es tal vez uno de los
elementos más costosos de producir, es de vital importancia en todos los grupos etáreos, y aún más
transformado en unos pocos segundos en amonio disponible para los microorganismos del rumen.
La proteína degradable es, en general, proteína verdadera que es degradada por las enzimas de los
microorganismos ruminales a compuestos más simples y amonio para ser también utilizados por
microbianas y, por lo tanto, pasa en forma inalterada hacia el intestino delgado para ser degrada
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por las enzimas del animal y así utilizar los aminoácidos directamente para la síntesis proteica
propia del animal. Finalmente, existe una proteína no degradable, ligada a otros compuestos y que
es excretada como tal a través de las heces del animal. Así, la proteína dietaria presenta diferentes
fracciones con diferentes tasas de degradación ruminal y formación de amonio al ser utilizado por
los microorganismos. El exceso de amonio es absorbido por las paredes ruminales y se dirige al
hígado vía vena porta para ser transformado en urea (Shimada Miyasaka, 2005)
Los altos niveles de energía son necesarios para que los microorganismos puedan sintetizar
su propia proteína. Cuando existe un déficit energético en la dieta, puede existir un exceso de
amonio por la incapacidad de la conversión, y por ende, se obtendrán niveles elevados de urea. Un
exceso de amonio, significará una sobrecarga hepática y a la vez un costo energético de síntesis de
urea muy costoso para el animal. (Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia - UNAM, 2016)
Como la urea es un compuesto nitrogenado que se produce en el hígado como una manera
proteica normal que ocurre en el organismo y especialmente en el rumen o panza de los mamíferos
El hígado como mecanismo de excreción genera urea liberándola a la sangre (Milk Urean
Nitrogen - MUN) que luego es eliminada a través de la orina. Así mismo, el Nitrógeno Ureico se
puede difundir dentro de la glándula, gracias a que por la glándula mamaria fluyen grandes
cantidades de sangre.
La urea rápidamente difunde a todos los fluidos del organismo, incluida la leche. Se ha
visto que los niveles de nitrógeno ureico en sangre están altamente correlacionados con los niveles
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de nitrógeno ureico en leche. La correlación encontrada entre los valores de MUN y BUN (Blood
Urean Nitrogen), es positiva y altamente significativa (r=0,95 p<0,01). (Wittwer, Gallardo, Reyes,
& Opitz, 1999). Así entonces, con la determinación de urea o nitrógeno ureico en leche tenemos
del contenido de urea del suero sanguíneo a través de las células secretoras de la glándula mamaria,
constituyendo una fracción variable del nitrógeno total de la leche (Hammon, Holyoak, & Dhiman,
2005).
El nitrógeno de la leche está presente en tres fracciones principales: Caseína, que constituye
el 77.9, nitrógeno de la proteína del suero, que representa el 17.2%, y nitrógeno no proteico, que
es el 4.9% (Cerbulis & Farrell, 1975). Estas fracciones pueden cambiar de acuerdo a la
temperatura, enfermedades, número de partos, días en lactancia y nutrición (DePeters & Cant,
1992).
En general los valores de MUN dependen de lo que ocurre en los procesos de fermentación
ruminal, se ha visto que por cada 100 gramos de proteína dietaria ofrecida al animal, incrementan
los valores de nitrógeno ureico en 0,56 mg/dl. Se ha observado una variación en MUN, debido a
la composición de la dieta que consume la vaca (Lykos & Varga, 1997). La variación se hace
evidente en la hora del día en que se toma la muestra o en el tiempo transcurrido luego de consumir
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alimento (Baker, Ferguson, & Chalupa, 1995), también puede variar dependiendo de la etapa de
Los valores de MUN que se encuentran en valores menores a 8 mg/dl se consideran bajos,
disponibilidad ruminal de energía, lo que refleja una menor eficiencia en la utilización o en la baja
ingesta de proteína en el alimento. Debido al rápido equilibrio de la urea en los fluidos orgánicos,
Se han demostrado relaciones directamente proporcionales entre los valores del MUN y la
ingesta de proteína en la dieta, de igual forma determinan que un control sobre la composición de
que para obtener un mejor desempeño en la relación de conversión de la urea a nitrógeno ureico,
es necesario realizar la selección genética de los animales que obtuvieron las mejores conversiones
La concentración media de nitrógeno ureico en leche fue de 12,6 mg / 100 ml de leche con
un rango de 9,0 a 18,3 mg (Hof, Vervoorn, Lenaers, & Tamminga, 1997). Los menores valores de
MUN se observaron en las vacas de más alta producción y fueron aumentando a medida que
en leche como índice para evaluar la eficiencia de utilización del nitrógeno en vacas lecheras.
reproductivo depende en su mayoría del manejo y del medio en el que se mantengan los animales.
favorables como los factores no favorables que puedan tener un impacto en el desempeño
reproductivo normal.
La urea y el nitrógeno ureico en leche es una herramienta útil para monitorear los aspectos
nutricionales del hato. Adicionado a esto, los niveles de nitrógeno ureico han sido relacionados
con aspectos de la fertilidad y la salud de hato, basándose en posibles efectos tóxicos que pudiera
tener tanto a nivel embrionario como a nivel uterino. (Butler WR, 2000).
En estudios recientes las correlaciones genéticas entre MUN y días abiertos fueron de 0,23,
0,35 y 0,45 en primera, segunda y tercera lactancia, respectivamente. Sin embargo, la correlación
fenotípica entre MUN en diferentes partos fue moderada (0,28 hasta 0,35), pero la correlación
genética entre MUN en diferentes partos fue alta y varió desde 0,84 hasta 0,97. Este estudio mostro
una aplicación limitada del MUN para su uso en los programas de selección para mejorar el
En otro estudio realizado en el estado de Florida, se encontró una interacción que mostró
que las vacas con MUN alto (17 a 25 mg/dl) que fueron criadas durante el verano fueron 18 veces
más propensas a no quedar en estado de preñez al primer servicio (OR = 17.9; IC del 95% = 10.0
a 31.7) en comparación con las vacas con MUN bajo (6 a 16 mg/dl) que se criaron durante el
invierno. Además, las vacas inseminadas en invierno con bajos y altos niveles de MUN
presentaron el mismo nivel de fertilidad, demostrándose que la urea si tendría cierto efecto
9.4.1. Nitrógeno ureico y las afecciones a nivel uterino. Algunos resultados indican que
los niveles crecientes de MUN parecen estar negativamente relacionados con la fertilidad de la
vaca lechera y están asociados con una menor tasa de preñez detectable en los controles
La elevación de los niveles de amonio se ven asociados con los altos niveles de urea y
amonio en tejidos y fluidos del tracto reproductivo. El desarrollo temprano embrionario requiere
un ambiente oviductal y un medio uterino apropiado. Cuando los niveles de MUN se encuentran
elevados, resultan tóxicos para el esperma, el oocito y el embrión, donde también puede causar la
destrucción de los cilios del oviducto (Wittwer, Gallardo, Reyes, & Opitz, 1999).
Las altas concentraciones de amoniaco y urea tienen efectos negativos sobre la expresión
genética a nivel endometrial; mientras que las concentraciones moderadas tienen efectos positivos.
La expresión relativa del gen FGF2 fue menor con una mayor concentración de cloruro amónico
Rajamahendran, 2013).
Para evidenciar un efecto marcado, se realizaron infusiones intravenosas con altos niveles
intrauterina. Se observó que el pH uterino disminuyó durante la infusión de urea de 7,08 +/- 0,07
a las 6 horas, disminuyendo a 6,88 +/- 0,08 a las 18 horas, pero permaneció inalterado durante la
infusión de solución salina (7,01 +/- 0,08 a las 6 h a 7,06 +/- 0,07 a las 18 h). Las concentraciones
fueron diferentes entre los tratamientos. Los resultados de este estudio indican que un aumento a
corto plazo de Nitrógeno Ureico en Plasma (PUN) puede ejercer efectos directos sobre el medio
concentraciones diferentes de urea; niveles bajos (grupo 1: <13 mg / dl), niveles moderados (grupo
del embrión in vitro, mediante las tasas de crecimiento del blastocito, número total de células de
blastocitos fue mayor (p <0,05) para el grupo 1 que para el grupo 3 (34,0% frente a 23,0%,
totales más altos (p <0,05) para el grupo 1 que para el grupo 3 (123,7 vs 76,3). Se observó una
mayor tasa de células apoptoticas totales (p <0,05) en el grupo 3 (25,9 y 19,0 vs 43,2 para G1, G2
hormonas de interés reproductivo. Para realizar un contraste, otro estudio reporta que no hubo
la supervivencia o el crecimiento de embriones de 20 días en adelante. Esto sugiere que los altos
en sus primeros estadios y la implantación uterina (Laven, Biggadike, & Allison, 2002).
El efecto negativo del nitrógeno ureico sobre las fertilidad se relaciona con el ambiente
uterino y los patrones hormonales durante el ciclo estral y la preñez temprana. En algunos estudios
se ha encontrado que los niveles de progesterona son 30% más bajos en vacas con altos niveles de
nitrógeno ureico en leche (MUN) que en vacas con MUN normal. Las vacas con ausencia de
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preñez con mayores niveles de progesterona (> 2 ng/ml) tenían embriones que iniciaron el
reconocimiento materno y la función lútea de una manera tardía, dichos embriones se vieron
Sin lugar a dudas hay suficiente evidencia científica para demostrar el impacto negativo
del exceso de proteína dietaria y del nitrógeno ureico sobre la fertilidad, y los impactos económicos
que puede acarrear en los modelos de producción lechera. La caracterización de los rangos de
MUN en las vacas de nuestro medio, se hace necesario nos solamente para caracterizar dicha
población, sino para generar nuevas dietas alimenticias con el balance adecuado de proteína y
energía, para optimizar el aprovechamiento de los nutrientes proteicos, sin tener efectos
perjudiciales en la reproducción.
determinar que existe una relación entre ambas características, siendo la fertilidad una de las
características más afectadas cuando los niveles de nitrógeno ureico sobrepasan cierto nivel y
Se seleccionarán hatos ubicados en la cuenca alta del rio Suarez, cercanos a las laderas de
mismo y que se encuentren en los municipios de San Miguel de Sema y Chiquinquirá, dichos hatos
temperatura de 12° a 14° centígrados, 2530 a 2600 msnm y que tengan historial de intoxicaciones
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aproximadamente 130 vacas lecheras de la raza Holstein, que inicialmente se encuentren entre los
40 primeros días posparto, con actividad ovárica evidente, que se encuentren entre el primer y
tercer parto y que consuman pasturas con niveles superiores al 10% de proteína forrajera y baja
disponibilidad de energía.
correlación positiva entre el MUN (Milk Urea Nitrogen) y el BUN (Blood Urea Nitrogen),
La primeras 130 muestras a colectar, será muestras de suero sanguíneo, la cuales se tomará
por punción en la vena coccígea de cada animal, siguiendo los protocolos de asepsia respectivos,
luego se refrigeraran las muestras a una temperatura de 2° a 8° centígrado durante dos a tres horas,
para luego centrifugar las muestras sanguíneas durante 10 min a 6000 rpm. Luego se colectara el
suero sanguíneo en tubos eppendor de 2 ml, para congelarlas a -20°C, hasta el momento del análisis
de muestras en conjunto.
La segunda muestra será de leche obtenida por ordeño manual con guantes de latex, o será
obtenida directamente de los medidores del equipo de ordeño únicamente en el ordeño de la tarde,
obteniendo una cantidad mínima de 10 ml de leche entera en un recipiente, para luego aplicar cuajo
promedio de 30° a 25° centígrados durante dos horas aproximadamente, para luego extraer el suero
lácteo en tubos eppendorf de 2 ml y congelarlos a -20°C, hasta el momento del análisis de dichas
segundo a los 80 días posparto, el tercero a los 120 d, el cuarto a los 160 d y el quinto a los 200 d.
Mastitis Test (CMT). Las muestras de leche, serán procesadas mediante un “kit” comercial para
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Seguido al primer muestreo, el cual se efectuará entre los 35 y 40 días posparto, se realizará
una ecografía vía trasrectal con guante de palpación previa lubricación, para evidenciar la
igual forma evidenciando involución uterina normal, descartando la retención placentaria, y las
En los siguientes muestreos, correspondientes a los 80, 120, 160 y 200 días posparto, se
realizará ecografía vía trasrectal, con el fin de determinar si existe o no una preñez. Una vez se
de tiza en la base de la cola, y la cual se borrara en el momento del celo. Las vacas que manifiesten
celo, y las que evidencien síntomas de celo en conjunto con el marcaje de tiza (reflejo de monta,
de leche) serán inseminadas siempre por la misma persona, y el mismo protocolo de inseminación.
cuenta un grado de confianza de 5% (p<0,05). Se tendrán en cuenta los niveles de MUN, fecha de
último parto, fecha de servicio, número de servicios; para evaluar la relación de los días abiertos
Se agruparan los bajos, medios y altos niveles de MUN, para evaluar el comportamiento
12. Presupuesto
A continuación se muestra una tabla de costos necesarios para la ejecución del proyecto.
VALOR VALOR
MATERIALES CANT. UNIDAD
UNITARIO TOTAL
PAPELERIA DOCUMENTACION 200 HOJAS $200,00 $40,000,00
TUBO DE MUESTRA PARA LECHE 650 UND (50ml) $2,000,00 $1,300,000,00
TUBO VACUTAINER TAPA ROJA 650 UND (6ml) $1,200,00 $780,000,00
VIAL PARA ALMACENAMIENTO 650 UND $800,00 $520,000,00
NEVERA PORTATIL 1 UND $60,000,00 $60,000,00
CUAJO LIQUIDO 1 BOT (200ML) $35,000,00 $35,000,00
AGUA DESTILADA 20 LITRO $3,500,00 $70,000,00
REACTIVO PARA MUESTRAS 5 kit x 10 fcos $250,000,00 $1,250,000,00
REACTIO CONTROL NORMAL 2 fco x 5 ml $220,000,00 $440,000,00
REACTIVO CONTROL PATOLOGICO 2 fco x 5 ml $220,000,00 $440,000,00
JERINGA X 20 ml 2 caja $25,000,00 $50,000,00
JERINGA X 10 ml 650 unidad $300,00 $195,000,00
GUANTES DE LATEX 7 caja $20,000,00 $140,000,00
CENTRIFUGA 1 unidad $800,000,00 $800,000,00
REACTIVO TEST MASTITIS 13 fco x 1000 ml $25,000,00 $325,000,00
PALETA PARA TEST MASTITIS 2 unidad $15,000,00 $30,000,00
PIPETA AUTOMATICA 1 UND $450,000,00 $450,000,00
TOTAL COSTOS $6,925,000,00
13. Cronograma
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tiempo de la ejecución del proyecto. Debido a nuestro gran interés en conocer el comportamiento
del MUN, se hace necesario un seguimiento prolongado para evaluar los niveles a lo largo de la
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