1

Actividad 6 - Práctica de Laboratorio

Robert Arnulfo Maigual – Cód. 87069734

Royer Manuel Zambrano Alvarado- Cód. 1081594456
Donal Afid Quiroz – Cóg. 1085900406
Juan Carlos chalacan – cod. 1085931157

Director Curso:

Wilmer Alfonso Cuervo

Bioquímica Metabólica

Grupo 352001_29

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente. (ECAPMA)

Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD)

Cead Pasto (N).

2019
 2

Introducción

El presente trabajo tiene como finalidad el desarrollo de las prácticas de laboratorio busca

que el estudiante pueda muestrear la recolección de Vegetales, Alimento concentrado y Suelo:

Esta actividad se desarrolla para dar respuesta al formulario de la Actividad 6 - Práctica de

Laboratorio del curso Bioquímica metabólica.

Generar la capacidad de analizar e interpretar los resultados obtenidos en la práctica, a partir de la

contrastación con valores reportados y ampliar su comprensión se parte de la observación de los

videos propuestos y del análisis de las lecturas correspondientes.

 3

MUESTRAS REQUERIDAS SEGÚN JORNADA

ANALISIS A REALIZAR MUESTRAS RECOMENDADAS

Ureasa Orina, Sangre, Suelo, Leche

Catalasa Suelo, Orina, Leche, Suelo

Materia Orgánica Suelo, Forraje, Muestras vegetales

Nitrógeno No Proteico Muestras vegetales, Forraje, Alimento

Concentrado

Carbohidratos No estructurales Muestras vegetales, Forraje, Alimento

Concentrado

1 lavado de equipos: primero con agua del grifo y luego agua destilada

ANALISIS DE UREASA

Crisoles a tamizar

1 hora en la Mufla

Análisis de suelo

1 gr de suelo

Peso del papel se

Pesa en la balanza

1 gr de suelo = 1.003

Tubos Falcón
 4

6 minutos -> 3.500 revoluciones

1gr de suelo de 2 a 3 horas

Desecado

Azul sulfato

Reactivo del suelo

Medir el volumen

8 militros de la muestra

Rotula 3 tubos de ensayo

B S M

B. Blanco: No lleva nada

S. Estándar: lleva muestra Ureasea

M. Muestra: Suelo
5
 6

Lavar probeta

0.5 ml de extracto Falcón

Baño María 37°c x 20 minutos

Análisis de carbohidratos no esterilizar 5 gr de

contenido en el mortero Beaker

2 gr de contenido

50 ml de HCL 0,6 N - > Baño María 90°C X 20 minutos

HCL Ácido clorhídrico determinación de (CNE)

Ácido Clorhídrico 50 ml

Peso de Crisol 6gr

Suelo pulverizado

Peso del suelo crisol más muestra

1007

Crisol 600°C

Cloruro de Nitrato de Mercurio

4 gotas

Al blanco no se aplica

Erlenmeger T°90°CX 20 Minutos

Contenido Baño María

Reducción de Ermeger B, S, M.
 7

B S M

3 gotas de indicador Tashiro Titula HCL 0.1N

Ácido clorhídrico
 8

Titular Ácido Clorhídrico 0.1N

3.6 0.8 0.1

0.6 Morado Rosado

Morado Violeta Violeta

Se logró extraer la enzima de Ureasea

Análisis de Ureasea

Medir el volumen de la Ureasea del extracto (VF=)

5ml Titulado Muestra

Na OH 0.6 N Agita por 15 segundos

Concentrado

H2O Agua destilada 2mil - -

Glucosa 1% - 2ml -

Filtrados 5% - 2ml

Fenol 1m 1m 1m

H2SO4 [ ] 5m 5m 5m

H2O Destilada 2m 2m 2m

Baño María 10 minutos a 90°C

 9

ANALISIS DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES

MATERIALES Y EQUIPOS REACTIVOS

Balanza analítica Baño de María HCl 0,6N H2SO4 concentrado

Vaso de precipitados Agitador de vidrio NaOH 0,6N Fenol al 5%

Glucosa al 1%
 10

Carbohidratos no estructurales

Muestra Valor

Blanco 0.61

Estándar 0.374

Muestra 2 gramos

Filtrado final 20 ml

Para determinar los CNE se trabajó con una muestra de suelo, posteriormente se realizó todo el proceso de acuerdo a
las indicaciones de la guía, se observó que en el tubo de la muestra al momento de adicionar Acido Sulfúrico y fenol
ocasiono una reacción generando una coloración café oscuro; De esta manera se obtuvo datos que serán evaluados a
continuación.
 11

Formulas

Solución

Datos

Muestra: 2 gramos
Volumen de filtrado de muestra: 20 ml
Am: 4850
Ast: 2240

1: encontramos el valor de factor de dilución aplicando la siguiente formula

5𝑚𝑙 25 100
Fd = 𝑋 𝑋
2𝑚𝑙 𝑉𝑓 𝑊𝑛

5𝑚𝑙 25 100
Fd = 𝑋 𝑋
2𝑚𝑙 20 𝑚𝑙 2𝑔

Fd = 2.5x1.25x50

Fd = 156.25

2: ahora pasamos a encontrar el porcentaje de carbohidratos no estructurales de la muestra

𝐴𝑚
%CNE = 𝑥 0.01 𝑥 𝐹𝑑
𝐴𝑠𝑡
4850
%CNE = 𝑥 0.01 𝑥 156.25
2240

%CNE = 2.16 x 0.01 x 156.25

%CNE = 3.37
 12

Con este resultado de CNE de la muestra se puede afirmar que contiene un porcentaje medio, es decir que este tipo
de suelo analizado contiene algunas reservas necesarias las cuales son útiles para que realice los procesos a un nivel
rápido generando una mayor productividad.
 13

Conclusiones

 La ureasa es una importante enzima microbiana relacionada con la descomposición de los compuestos
orgánicos.
 La catalasa es la actividad enzimática que se encarga específicamente en liberar todas las sustancias
toxicas que la célula libera en su proceso de desintoxicación, logrando que pueda absorber las fuentes
de nitrógeno que existe en el suelo o en los alimentos para el desarrollo animal y vegetal.
 El nitrógeno no proteico es una sustancia que sirve a los organismos para el mantenimiento y
multiplicación mediante la incorporación de cadenas carbonadas provenientes de los azucares y
almidones.
 Definitivamente los carbohidratos no estructurales juegan un papel importante en el metabolismo,
crecimiento y desarrollo de las plantas
 14

Referencias