Universidad Nacional del Litoral

FACULTAD DE BIOQUÍMICA
Y CIENCIAS BIOLÓGICAS

Cátedra de Biología Celular y Molecular

CURSO DE BIOLOGÍA GENERAL

TRABAJO PRÁCTICO Nº 5

GENÉTICA Y HERENCIA
Parte II
 OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EN DIVISIÓN MITÓTICA EN CEBOLLA (Allium cepa)

OBJETIVOS

 Observar las diferentes etapas de la división mitótica.

 Reconocer las modificaciones celulares durante la etapa de división
 Adquirir habilidades en la confección de preparados para la observación de células en división.

INTRODUCCIÓN
La división celular implica la separación del material nuclear y del material citoplasmático. La
separación del material citoplasmático recibe el nombre de citocinesis y consiste en el reparto más o
menos equitativo del contenido citoplasmático. La división del material nuclear o cariocinesis puede
presentarse de acuerdo a dos modalidades:
 MEIOSIS: ocurre en células germinales y el objetivo es la formación de células altamente
especializadas, denominadas gametas o células sexuales. Se caracterizan por la reducción del
número de cromosomas (luego de la fecundación se recupera el número cromosómico de la
especie). Para poder observar sus etapas se debe trabajar con los órganos reproductivos de los
animales (ovario y testículo) o vegetales (androceo y gineceo, en la flor).
 MITOSIS: ocurre en células somáticas y la finalidad es permitir el crecimiento, la reparación de
tejidos o la regeneración de los mismos. Para la observación de los estados mitóticos debe
utilizarse tejidos en crecimiento, como por ejemplo los meristemas (apicales o radiculares) en los
vegetales, o las epífisis de huesos largos o la médula ósea en los animales. También se puede
inducir la división en algunos tipos celulares, siendo la más común la realización de cultivos de
linfocitos.

La MITOSIS es un tipo de división celular en la que se definen 5 etapas:

PROFASE: se caracteriza por la condensación de la cromatina y la desaparición

de los nucleolos; a nivel citoplasmático comienzan a migrar los centríolos hacia
polos opuestos (en las células animales) y a formarse el huso mitótico (huso
acromático). En las células vegetales existe un material que actúa como un centro
organizador de microtúbulos. El huso mitótico sin ásteres ni centríolos, propio de
las células vegetales, se llama huso anastral.

PROMETAFASE: la condensación progresa, se desorganiza la envoltura nuclear

y comienzan a migrar los cromosomas hacia la zona central nuclear.

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 METAFASE: los cromosomas ya están organizados, han alcanzado su máxima
condensación y han sido tomados por los microtúbulos cinetocóricos,
acomodándose en el plano ecuatorial celular. Desaparece por completo la
envoltura nuclear.

ANAFASE: es una etapa muy dinámica en la cual los cromosomas son llevados
por los microtúbulos cinetocóricos hacia polos opuestos. La célula se elonga y
aparecen los primeros componentes del anillo contráctil (en células animales).
En las células vegetales comienzan a depositarse las vesículas que formarán
finalmente el fragmoplasto.

TELOFASE: se reorganiza la envoltura nuclear y comienza la descondensación

del material genético. Cada célula se presenta con dos núcleos. En las células
vegetales comienza el tabicamiento en el plano ecuatorial. En las células
animales progresa la contracción del anillo de estrangulamiento.

La citocinesis transcurre de diferente manera según se trate de células vegetales o animales. En las
primeras ocurre con la formación del fragmoplasto, por deposición de vesículas originadas por el
aparato de Golgi, mientras que en las células animales se realiza por constricción del anillo contráctil.

PROCEDIMIENTO
1) Aproximadamente 48-72 hs antes de realizar las observaciones, tomar bulbos de Allium cepa
(cebolla), cortar las raicillas secas y colocar en un recipiente con agua (los bulbos deben quedar
sumergidos).
2) Cosechar (cortar con bisturí) las nuevas raicillas crecidas entre 0,5 y 1 cm y colocar en HCl 1N
durante 3 a 5 minutos. Retirar y lavar con abundante agua destilada.
3) Colocar las raicillas así tratadas en un portaobjetos y agregar dos gotas de orceína acética. Dejar el
material durante 10 minutos en el colorante, a temperatura ambiente, cuidando que no se seque (si
esto ocurriese, agregar unas gotas más del colorante)
4) Transcurrido el tiempo de coloración, proceder al squash o aplastado, colocando un cubreobjetos
sobre la muestra y ejerciendo presión con el dedo pulgar de manera que los tejidos radiculares se
extiendan.
5) Una vez confeccionado el preparado llevar al microscopio óptico y realizar la observación primero a
100 aumentos totales para localizar las células meristemáticas y luego analizar a 450 aumentos
totales.
6) Esquematizar las diferentes etapas observadas y colocar las referencias correspondientes.

Los pasos 2, 3 y 4 deben realizarse con guantes. Manipular con cuidado el HCl y el colorante. Estos
compuestos son corrosivos y tóxicos. Tener precaución de no salpicar ojos o manos (en caso de
salpicaduras, lavar con abundante agua).

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 GLOSARIO
Alelo: dos o más formas diferentes de un gen que ocupan el mismo locus y llevan información
alternativa sobre un mismo rasgo.

Alelo dominante: alelo cuyo efecto en el fenotipo del individuo es el mismo tanto en estado homocigoto
como heterocigoto. Se dice del gen que puede ser transcripto y posteriormente traducido.

Alelo recesivo: alelo cuyo efecto en el fenotipo del individuo solo será observable cuando se encuentre
en estado homocigoto. En el estado heterocigoto su acción está anulada o enmascarada por el alelo
dominante. Se dice del gen que por algún motivo no puede ser transcripto y posteriormente traducido.

Autosoma: cualquier cromosoma que no sea sexual.

Cromosoma: es cada uno de los cuerpos en que se organiza la cromatina del núcleo celular en la
mitosis y la meiosis.

Cromosomas homólogos: pares de cromosomas de igual tamaño, forma y tipo de información

hereditaria (genes) de los organismos diploides.

Fenotipo: características observables de un organismo que resultan de las interacciones genotipo –

ambiente. Es la expresión del genotipo.

Gen: unidad de herencia de un cromosoma. Secuencia de nucleótidos que se expresa para una
función específica.

Genotipo: es el contenido genético de un individuo.

Heterocigoto: organismo diploide que lleva 2 alelos diferentes en uno o más locus génicos.

Homocigoto: organismo diploide que lleva alelos idénticos en uno o más locus génicos.

Linfocito: tipo de glóbulo blanco. Son células especializadas de la sangre, cuya función es la defensa
del organismo ante diversos agentes perjudiciales.

Locus: lugar o posición de un gen en un cromosoma.

Meristema: dentro de los tejidos vegetales, células no diferenciadas que se dividen activamente,
llamadas células totipotentes por su habilidad de dar lugar a todos los tejidos vegetales. Son
homologas funcionales de las células madre que dan lugar a todos los tejidos en animales.