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Existen dos serotipos del HSV (HSV - 1 Y HSV - 2) con base en diferencias
antigénicas de las partículas virales detectadas mediante la utilización de anticuerpos
• Laboratorio de ViroJogfa, Facultad de Microbiologla, Universidad de Costa Rica. San José - Costa Rica
Programa Financiero de Apoyo a Investigadores del Consejo Nacional de Investigación en Ciencia y
Tecnologla (CONCIT).
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Los beneficios que se derivarían del control de las enfermedades causadas por el
HSV son cada día más evidentes, y con este propósito se han realizado grandes
esfuerzos en la década pasada para obtener información en este semido. Muchos
aspectos de la infección no han sido aún esclarecidos, a pesar de la posibilidad de
aislamiento e identificación del HSV desde hace más de 60 años. El control de estas
enfermedades necesita del estudio de la organización genórnica de este virus y de su
epidemiología; y en particular de la comprensión de aspectos sobre su biología como
lo es el fenómeno de latencia.
.Para entender mejor este tipo de estudios es necesario recordar aspectos básicos
de la biología molecular de estos virus. El HSV pertenece a la familia Herpesviridae,
la que se caracteriza por tener un genoma constituído de ADN lineal de doble banda
(22, 28). Mediante estudios de hibridación de ácidos nucleicos se ha detenninado que
el genoma de los HSV - 1 Y HSV - 2 tiene aproximadamente 50% de homología
(20). La hibridación molecular es una técnica que permite comparar dos moléculas
entre sí para establecer si se trata de moléculas idénticas o diferentes (Figura lA).
Figura 1
A e
Es un proceso en 3 etapas: (A) dos moléculas de ADN están asociadas (l()()q'o de homología), (B)
cuando se separan por calor se obtienen 2 moléculas dematuralizadas, (e) las cuales puestas de
nuevo en oontacto a menor temperaUIr8 asocian las bases oomunes u homólogas de ambas
moléculas.
la realizan al azar, por el contrario, cada enzima de restricción tiene una secuencia de
6 a 8 bases que reconoce y que corta dentro de un ADN. El Cuadro 1 muestra
algunos ejemplos de secuencia y la enzima que la reconoce (15).
Cuadro 1
Figura 2
y
• • .. •
B e D A
I
A ...I ...I ...I .I
Después de la acción de la enznna de restricción se obtienen 4 fragmentos de restricción de
diferente tamaño.
• : sitio de restricción. A: fragmento de restricción de mayor tamaño. D: fragmento de
restricción de menor tamaño.
Somogyi T.: EPIDEMIOLOOIA MOLECULAR DEL VIRUS HERPES SIMPLEX. 41
Una vez que el ADN ha sido cortado, los fragmentos se separan mediante
electroforesis, es decir, son desplazados en un campo eléctrico siendo la distancia
recorrida proporcional al tamaño del fragmento (los fragmentos más pequeños
migrarán más lejos). Se obtiene así el perfil de restricción del ADN para una enzima
de restricción dada.
Esta técnica se emplea para comparar dos moléculas de ADN. Si son idénticas
tendrán el mismo perfil de restricción y si difieren, la migración de uno o más
fragmentos será diferente dependiendo del número y la posición de los sitios de
restricción que varíen. Esta variación se origina en el hecho de que el cambio de una
base en la secuencia reconocida por la enzima de restricción hace que la misma ya no
sea funcional. La modificación de una o más bases puede ocasionar la pérdida de un
sitio de restricción pero también puede crear un sitio de restricción nuevo. La
comparación de perfiles refleja la variación entre las moléculas de ADN por la
aparición y desaparición de sitios de restricción.
3.- Hay una correlación entre la estructura del genoma y su área de localización
en un país o áreas cercanas geográficamente (25, 24).
5.- Trabajos recientes han permitido una clasificación provisional de las cepas de
HSV - 1 YHSV - 2 en varios subgrupos (8 y 12, respectivamente) (24, 27).
Las implicaciones de este tipo de estudios son enormes desde el punto de vista
de elaboración de una vacuna, al permitir la escogencia de la cepa más apropiada para
su producción. Se podría determinar, además, si el tipo de vacuna debe ser escogido
individualmente en cada país en función de las características de las cepas prevalentes
en cada región, si las diferencias son constantes y significativas. En nuestro país se
están realizando estudios para establecer la epidemiología del HSV (9). Recien-
temente hemos iniciado un estudio para determinar los perfiles de restricción de las
cepas de HSV aisladas en Costa Rica lo que permitirá incorporar esta información a
la obtenida por otros investigadores para determinar si están presentes los mismos
patrones de variación genética establecidos para países desarrollados.
Somogyi T.: EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DEL VIRUS HERPES SIMPLEX. 43
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