Métodos Ópticos

CAPÍTULO 2
Espectrofotom etría
ultravioleta y
visible
La espectrofotometría de absorción ultravioleta-visible fue uno de los primeros méto-
dos físicos que se aplicó al análisis cuantitativo y a la determinación de estructuras. Si
bien la espectroscopia infrarroja y de rmn son las técnicas más idóneas para el
análisis cualitativo y estructural, la espectrofotometría ultravioleta-visible supera al
resto de métodos ópticos de análisis en lo referente al análisis cuantitativo y es
también una técnica auxiliar útil para la elucidación de estructuras.
En la fig. 2-1 se indican las longitudes de onda del espectro electromagnético co-
rrespondientes a las regiones ultra.violeta y visible. La región ultravioleta se divide,
Copyright © 1990. Editorial Reverté. All rights reserved.
por comodidad, en ultravioleta lejano (de 1O a 200 nm) y ultravioleta próximo (de
200 a 400 nm). La región del ultravioleta lejano suele llamarse también ultravioleta
de vacío, puesto que el oxígeno absorbe justo por debajo de 200 nm y es preciso elimi-
narlo del espectrofotómetro (hasta 150 nm, donde la absorción empieza a ser in-
tensa, basta con pasar una corriente de nitrógeno). La división entre LiS regiones
ultravioleta próximo y visible se debe principalmente a razones fisiológicas , puesto
que el ojo humano es capaz de percibir las radiaciones de longitud de onda por enci-
ma de 400 nm.
Las radiaciones ultravioleta y visible tienen en común el que la absorción en am-
bas regiones provoca la excitación de electrones a niveles de energía superiores. Para
excitar a los electrones fuertemente unidos se requiere, en general, fotones energé-
ticos (de longitud de onda corta), mientras que los electrones unidos lábilmente
(deslocalizados) pueden excitarse con radiación de longitud de onda más larga. La
teoría del proceso de absorción se tratará en la sección siguiente y la instrumen-
tación, tratamiento de la muestra y aplicaciones se hará en las subsiguientes. Al final
se dedicará una sección específicamente al ultravioleta de vacío.
87
Olsen, Eugene D.. <i>Métodos ópticos de análisis</i>, Editorial Reverté, 1990. ProQuest Ebook Central,
http://ebookcentral.proquest.com/lib/unalbogsp/detail.action?docID=5758273.
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88 Esp ectrofotometr!a ultravioleta y visible
Número de ondas, cm- •

]06 100 000 50 000 33 000 25 000 20 000 16 667 14 286 12 500
---- uv próximo Vi sible
5 1 1
tr------1---.-rr• 1
+Transferencia carg.a-+----t-
o~ a·
1 1l~ 1T · n ___________._ 1T•
Oll
..9
.,· n+ o•1
"'
-o
·;;;
e: 1
3 1
.=
I
10 100 200 300 400
Longitud de ond a , nm
C ampo li ga ndo
500 600 700

1
-----+--+-
800
FIG U RA 2-1 Regiones ultravioleta y visible del espectro y tipos de bandas de absor-
ción más frecuente s. (Seg ún C. N. Bamvel/, <<Fundam entals of Molecular Spectros-
copy », McGra w-Hill Company, N ew York, 1966, con autoriz ación.)
2-1 TEORÍA DE LA ABSORCIÓN

La energía total que posee una molécula puede considerarse como la suma de las
energías electrónica, vibracional, rotacional y translacional. El cambio f')ill de la
energía de una molécula, debido a una absorc ión de radiación electromagnética,
viene dado por
(2-1)
siendo Melcc la diferencia de energía entre dos niveles electrónicos permitidos, M v;b
la diferencia entre dos niveles vibracionales permitidos, etc. Tal como se indica en el
diagrama de niveles de energía de la fig. 1-6, el proceso que requiere más energía es la
excitación de electrones a un nivel superior, M , 1," mientras que la diferencia de
energía entre dos estados vibracionales, M v;b, es del orden de 1O veces menor y la di-
ferencia entre dos estados rotacionales, f')ill"'' es del orden de 1O a 100 veces menor
que la que existe entre dos estados vibracionales. Aunque la energía translacional,
debida al movimiento lineal de la molécula en el espacio, también está cuantizada, las
Espectrofotometr/a ultravioleta v visible 89
diferencias de energía entre niveles translacionales son tan pequeñas que no influyen
en la radiación absorbida en la zona que estamos considerando. t
2-1 A Estructura fina vibracional-rotacional del espectro electrónico
Tal como ya se indicó en la sección 1-3 y en el diagrama de niveles de energía de la

fig. 1-6, la excitación electrónica va acompañada de cambios vibracionales y rotacio-
nales, por ello, lo que debería ser una línea de absorción aparece , en la región ultra-
violeta-visible, como una banda ancha que, debido a los cambios vibracionales y
rotacionales, posee una estructura fina. En fase gaseosa, el espectro observado es
debido a moléculas aisladas y generalmente es posible resolver la estructura fina
vibracional y rotacional. En disolución , las moléculas no se encuentran aisladas sino
solvatadas por moléculas del disolvente que frenan su rotación libre y de.saparece la
estructura rotacional.Esta restricción rotacional existe también en fase gaseosa a pre-
siones altas y el fenómeno es el llamado ensanchamiento por presión. Además, los
campos del disolvente modifican irregularmente los niveles de energía vibracionales
y, si tenemos un número grande de moléculas, los niveles de energía serán poco
definidos y el resultado será la aparición de una banda ancha. En general, un aumen-
to en la polaridad del disolvente provoca una disminución en la resolución de las
bandas vibracionales. En la fig. 2-2 se muestran estos efectos en el espectro de absor-
ción visible de la sim-tetrazina en fase gaseosa y en dos disolventes distintos.
+ Para moléculas neutras. los cambios translacionales !::,.E"'"' por radiación electromagnética estan
prohibidos. ya que no puede haber interacción eléctrica o magnétic a con una molécula neutra. Esta
restricción no existe para cambios en la energía electrónica t:,E, 1cc puesto que los campos electro-
magnéticos de la radiación incidente interaccionan con los campos eléctricos de los electrones.
N/C.:::::::N
11 1
N'-.~N
t
e:
·O
H
-~
o
"'
.o
<(
450 500 550 600

Longitud de onda, nm
FIGURA 2-2 Espectro de absorción de la sim-tetraziná. en fase vapor y en dos disol-
ventes: (a) en fase vapor: (b) disuelto en ciclohexano: (e) disuelto en agua. (Según S. F.
Masan, J. Chem. Soc., 1959: 1265.)
90 Espectrofotometr/a ultravioleta y visible
La resolución de los niveles vibracionales del espectro de una sustancia en diso-

lución generalmente se favorece al disminuir la temperatura ya que. al estar ocupa-
dos menos niveles vibracionales, la interacción soluto disolvente disminuye. En las
bandas de absorción que aparecen en el extremo del espectro visible, las variaciones
en la forma de la curva por efecto de la temperatura pueden provocar termocro-
mismo, es decir. la aparición y desaparición de color al enfriar y calentar.
Aunque normalmente en la región ultravioleta-visible no se observa la estructura
fina rotacional, puede aparecer algunas veces cuando se trabaja en fase vapor y con
espectrógrafos especiales con gran poder de resolución. t
2-1 B Tipos de bandas de absorción
Para poder comprender e interpretar los espectros electrónicos de absorción es pre-

ciso tener en cuenta que tipo de transiciones electrónicas pueden tener lugar cuando
se absorbe radiación ultravioleta o visible. En esta región pueden darse seis tipos de
bandas de absorción (sin tener en cuenta los espectros de resonancia de carga y
resonancia electrónica de los iones y radicales orgánicos inestables) que se deben a
las transiciones electrónicas siguientes: rr _. rr*, n _. rr*, u _. u* , n _. O"'i<, de trans-
ferencia de carga y transiciones de campo ligando. Los distintos tipos de transiciones
pueden identificarse claramente por la zona del espectro donde aparecen, por sus
intensidades relativas y. en algunos casos por los desplazamientos observados al
variar el disolvente.
Las intensidades de absorción suelen expresarse en términos de absortividades
molares que, tal como se indicó en el capítulo 1, se define:
A
~ =- (1-40)
bC
siendo A = absorbancia
b = camino óptico, en cm.
e= concentración molar
El valor de la absortividad molar depende del tamaño de la especie absorbente y de la
probabilidad de la transición. Para que haya interacción, el fotón debe chocar con
la molécula dentro de un espacio de dimensiones aproximadas al tamaño de la
molécula y la probabilidad de la transición es proporcional al número de impactos
que producen absorción. Estos conceptos pueden expresarse matemáticamente
como:j:
(2-2)
donde P es la probabilidad de la transición y A es la superficie de la sección trans-

versal del blanco, en cm2 • La superficie A puede calcularse mediante rayos X
t Ver S. F. Mason.J. Chem. Soc., 1959: 1269. que obtuvo la estructura rotacional de la s im -tetra-
zina en fase vapor alrededor de 551 nm.
:j: E. A. Braude, Nature , 155: 753 (1945); J. Chem. Soc., 1950 : 379.
(cap. 12) o por difracción de electrones y, para muchas moléculas orgánicas, es del
orden de I0- 15 cm 2 • Así, para una transición cuya probabilidad sea la unidad, E= 105 •
Las mayores absortividades molares son de este orden y por ello los procesos de
absorción con valores de E de aproximadamente 1(}4 o mayores se consideran de
intensidad alta o de absorción muy fuerte y son debidos a transiciones de proba-
bilidad elevada (transiciones permitidas según la mecánica cuántica, con P = O, 1 - 1).
Los procesos de absorción con valores de E del orden de 103 - 104 (P = 0,01 - O, 1)
se consideran fuertes y aquellos que tienen valores de E menores que 103 se
consideran débiles o de baja intensidad. Estos últimos suelen ser debidos a
transiciones de baja probabilidad (transiciones prohibidas con P = 0,01 o inferior).
En la fig. 2-1 se indican las energías de absorción (o regiones de longitudes de
onda) para las que tiene lugar las distintas bandas de absorción. En ordenadas se
indica aproximadamente la intensidad de los distintos tipos de bandas de absorción.
Es preciso tener en cuenta que tanto las longitudes de onda como las intensidades que
se representan en la fig. 2-1 se refieren a los casos más generales, pero que existen
muchas excepciones . A continuación se tratará cada tipo de transición y se darán
reglas empíricas que permitan predecir la zona del espectro donde puede aparecer un
máximo de absorción para una determinada estructura química.
BANDAS DE ABSORCIÓN 11"--+ 1r• y n--+ 1r•
Es conveniente tratar simultaneamente las transiciones rr - rr* y las n - rr* puesto

que muchos grupos poseen electrones n y electrones rr y ambos pueden contribuir
al espectro ultravioleta-visible. t Todos los enlaces múltiples, tales como C=C.
C=C, C= N , poseen electrones rr y todos los átomos que están situados a la derecha
del carbono en la tabla periódica, tales como nitrógeno, oxígeno, azufre y halógenos,
poseen electrones n. El grupo carbonilo, por ejemplo, tal como se indica esquemá-
ticamente mediante las fórmulas de la fig. 2-3, presenta ambas transiciones, rr -+ rr*
y n - rr*.
t Los electrones no electrones no enlazan tes son los electrones externos que no intervienen directa-
mente en el enlace.
""' .. ..
e •• o
/
'"' .. ..
®...._ •
e •• o
/
® = electrón excitado
FIGURA 2-3 Representación esquemática de las transiciones rr - rr* y n - rr* del
grupo carbonilo.
92 Espectrofotometrfa ultravioleta y visible
En la tabla 2-1 se indican aproximadamente las longitudes de onda correspon-

dientes al máximo de absorción, Am;x , para las transiciones rr -+ rr* y n -+ rr* de
varios grupos funcionales. Es preciso destacar que mientras que la posición de Amáx
es prácticamente independiente de la naturaleza de los átomos que intervienen en el
enlace múltiple para las transiciones rr-+ rr*, ésta está muy influida por ella en el caso
de las transiciones n __. rr*. Esto puede explicarse fácilmente teniendo en cuenta que
mientras que los electrones rr están deslocalizados y por tanto son relativamente
independientes de los átomos que forman el enlace, los electrones n están cada uno
tABLA 2-1 Máximos de absorción correspondientes a

las transiciones rr -+ rr* y n -+ rr* para algunos grupos fun-
cionalest
Transición, nm
Grupo funcional (absorción intensa) (absorción débil)
""C= C/ 170 No absorbe

/ ""
- C= C- 170 ~o absorbe
""/ C=O 166 280

""C= N/ 190 300

/
/
N= N 340
/
500
N= O 665
/
+ Re f. 5. p. 229 y Ref. 4. p. 9.
Espectrofotometr/a ultravioleta y visible 93
asociado a su átomo y un aumento en la electronegatividad de éste implica que los

electrones no compartidos (o electrones n) sean más atraídos por el átomo lo que
supone un desplazamiento de ,\ma"xhacia longitudes de onda más cortas; esto puede
observarse comparando las lontigudes de onda de absorción de los grupos C=S.
C=N y C=O. Estos datos son evidentemente aproximados, puesto que los
sustituyentes influyen en la longitud de onda de las transiciones rr ~ rr* y especial-
mente en la de las n ...... rr*. Por ejemplo, la Am.{xpara la transición n ...... rr* del
CH 3COCH 3 es 272 nm mientras que para el CH 3CHO es 294 nm. Estos
desplazamientos de la longitud de onda pueden contribuir a la caracterización de los
sustituyentes de un grupo determinado, aunque estos datos no son, en general, tan
concluyentes como los obtenidos a partir de los espectros infrarrojo y rmn. Podemos
ver también que, aunque muchos grupos funcionales dan bandas se absorción rr ...... rr* in-
tensas, los máximos de absorción rr ...... rr* suelen aparecer en el ultravioleta lejano, zona
del espectro que actualmente es poco accesible. Por otra parte, los sistemas con
electrones rr conjugados son mucho más fácilmente excitables y dan transiciones
rr ~ rr* fácilmente accesibles., en la zona del ultravioleta próximo, y estas absorciones
constituyen la base de las aplicaciones más importantes de la espectrofotometría
ultravioleta.
Sistemas con electrones rr conjugados Sistemas con electrones rr conjugados
son aquellos que poseen enlaces dobles y sencillos de forma alternada, como por
ejemplo, -C=C-C=C ó -C=C-C=O. La conjugación produce un despla-
zamiento, tanto de las transiciones rr ~ rr* como de las n ~ rr*, hacia longitudes de
onda más largas y un aumento de la intensidad, que es función del grado de la
conjugación. En la tabla 2-2 se indican aproximadamente los valores ,\m~xY e para las
transiciones rr ...... rr* en varios enlaces carbono-carbono y en la tabla 2-3 se indican
aproximadamente las Amá'x para las transiciones rr ...... rr* y n ...... rr* en algunas
moléculas que contienen oxígeno. Tanto la Tabla 2-2 como la 2-3 , muestran que la
TABLA 2-2 Máximos de absorción y absortivi-

dades molares aproximados para transiciones rr ~
rr* en varios enlaces carbono carbono+
Estructura
-C=C- 170 16 000

-C=C-C=C- 220 21 000
-C=C-C=C-C=C- 260 35 000
t Ref. 5, p. 230.
94 Espectrofotometr!a ultravioleta v visible
conjugación desplaza la banda intensa correspondiente a la transición rr - rr* hasta el

ultravioleta próximo, lo que hace que esta región sea muy útil para el estudio de
sistemas aromaticos y conjugados. En la tabla 2-3, puede observarse también que la
banda de absorción n ...... rr* de lap-benzoquinona entra en la zona correspondiente al
azul del espectro visible, 435 nm. Los compuestos orgánicos coloreados poseen
siempre una conjugación considerable, hecho que reconsideraremos en la sec. 2-1 C.
Definición de algunos términos espectrales Antes de continuar, es conve-
niente definir algunos términos de uso frecuente en la discusión de espectros elec-
trónicos.
Cromóforos Son grupos de átomos responsables de bandas de absorción en las

regiones ultravioleta o visible. Así, de una forma muy general, los sistemas con
electrones rr son cromóforos en las regiones ultravioleta y visible y los sistemas
con electrones u son cromóforos en la región del ultravioleta lejano (de vacío).
Auxocromos Son grupos saturados que, cuando se unen a grupos cromóforos,
desplazan su banda de absorción hacia longitudes de onda mayores y aumentan la
intensidad del pico. Entre los grupos auxocromos comunes podemos citar los
grupos hidroxilo, amino, sulfhidrilo (y sus derivados) y algunos halógenos. Todos
estos grupos poseen electrones no enlazantes y su efecto se atribuye normal-
mente a transiciones n - rr*. Veamos el efecto auxocrómico en la molécula de
benceno: El anillo bencénico es un grupo cromóforo, con .\máx a255 nm y E= 230
(transición rr - rr* prohibida) y la sustitución de uno de sus hidrógenos por un
grupo -OH da lugar a una banda con A máx a 270 nm y E = 1450.
TABLA 2-3 Máximos de absorción aproximados para transicio-

nes rr - rr* y n - rr* en algunas moléculas que contienen oxígenot
Transición, nm
n ---+ 1r*
Estructura (Absorción intensa) (Absorción débil)
-C=O 166 280
-C= C-C=O 240 320

-C=C-C=C-C=O 270 350
Ü=O =Ü 245 435
t Ref. 5, p. 230 .
Espectrofotometría ultravioleta y visible 95
Puesto que los desplazamientos de los máximos de absorción y las variaciones en

la intensidad de absorción son factores muy importantes, tanto al estudiar el efecto
del disolvente y la temperatura sobre los espectros como al considerar los efectos de
los sustituyentes, es preciso definir los siguientes términos:
Efecto Batocrómico, o desplazamiento hacia el rojo Es el desplazamiento del

máximo de absorción hacia longitudes de onda mayores. Los espectros de los
iones y radicales libres suelen estar desplazados hacia longitudes de onda más
largas (efecto batocrómico) con relación a los de sus correspondientes moléculas
no disociadas y neutras. Por ello, es frecuente que iones o radicales, cuyas molé-
culas neutras (no disociadas) sean incoloras, presenten coloración .
Efecto Hipsocrómico, o desplazamiento hacia el azu l Es el desplazamiento

hacia longitudes de onda más cortas.
Efecto Hipercrómico Es un aumento en la intensidad de la absorción.
Efecto Hipocrómico Es una disminución en la intensidad de la absorción.
Influencia del disolvente en las transiciones rr _, rr* y n _, rr* Las transi-

ciones rr _, rr* y n _, rr* pueden diferenciarse variando la polaridad del disolvente. En
general, un aumento en la polaridad del disolvente produce un desplazamiento hipso-
crómico (azul) de las bandas n _, rr* (también de las n _, u*) y un desplazamiento
batocrómico (rojo) de las bandas rr _, rr*. Ello puede explicarse teniendo en cuenta
que en las transiciones rr _, rr* el estado excitado es más polar que el estado
fundamental y por tanto las interacciones dipolo-dipolo, con disolventes polares,
disminuirán más la energía del estado excitado que la del estado fundamental.
Además, los enlaces de puente de hidrógeno o las interacciones electrostáticas con
disolventes polares, estabiliza a los electrones no enlazantes del estado fundamental
en relación con el estado excitado. Por ejemplo, en disoluciones muy ácidas, la banda
n _, rr* «desaparece» completamente (se desplaza hacia energías muy altas) debido a
la formación de un enlace entre el protón y el par de electrones libre. En general, al
pasar del hexano al etanol, se produce un desplazamiento batocrómico de las bandas
rr _, rr* de unos 1O a 20 nm , mientras que la banda n _, rr* de la acetona sufre un
desplazamiento hipsocrómico de unos 7 nm al pasar del hexano al etanol y otro de
unos 8 nm al pasar al agua.
Comportamiento individual de los cromóforos Desde el punto de vista de su
influencia sobre el espectro de absorción , los cromóforos con electrones rr pueden
unirse en una molécula de tres formas distintas:
Si los dos cromóforos, A y B, están unidos directamente , el espectro de la
molécula normalmente es distinto de los espectros de A y de B, ya que en reali-
dad A-B debe considerarse como un nuevo cromóforo. Por ejemplo, mientras
que el grupo etileno ( C=C) tiene una banda a Am;, cerca de 170 nm y E de aproxi-
madamente 1O 000, el grupo al en o( C=C=C) la tiene a Am5, alrededor de 225 nm
y t: aproximadamente 500.
2 Si los dos cromóforos están conjugados, separados por un enlace sencillo.

cada cromóforo tiende a mantener su individualidad. exceptuando. tal como se
indica en las tablas 2-2 y 2-3. el desplazamiento batocrómico (rojo) y el aumento
de intensidad que experimentan tanto las transiciones rr __. rr* como las n __. rr*.
3 Si los dos cromóforos están separados por más de un enlace sencillo. los elec-
trones rr se dice que están aislados y el espectro es prácticamente la suma de los
de A y B. Por ello, cada cromóforo aislado absorbe a una longitud de onda
característica, tal como se indica en la tabla 2-1.
Reglas empíricas para poder predecir la longitud de onda de las bandas de

absorción Actualmente, la naturaleza física del estado electrónico excitado se
conoce, en el mejor de los casos, sólo a nivel semicuantitativo. Además. las molé-
culas en estado excitado interaccionan con las moléculas del disolvente. Por ello.
normalmente, no es posible calcular un espectro ultravioleta completo a partir de
modelos teóricos . Sin embargo, a partir del conjunto de datos empíricos disponibles.
pueden darse ciertas orientaciones y reglas que permiten predecir la longitud de onda
aproximada a la cual absorberá una determinada estructura. Debe tenerse en cuenta
que estas reglas son tan sólo orientativas y es normal que existan excepciones.
Existen cuatro tipos de compuestos que se ajustan particularmente bien a estas corre-
laciones numéricas: ( 1) dienos conjugados y trienos cíclicos. (2) aldehídos y cetonas
no saturados, ( 3) anillos bencénicos sustituidos y ( 4) ácidos, ésteres, nitrilos y amidas
no saturados.
Dienos conjugados y trienos cíclicos La absorción observada en los dienos

conjugados puede explicarse cualitativamente a partir de los diagramas de niveles de
energía de los orbitales moleculares. Uno de los sistemas mejor conocidos es el butadieno,
y en la fig. 2-4 puede apreciarse como los electrones rr de los dos dobles enlaces etiléni-
cos interaccionan para dar cuatro nuevos orbitales rr en ell ,3-butadieno. Puesto que ca-
da doble enlace posee un par de electrones rr, en el butadiendo son posibles, en teoria,
cuatro transiciones rr __. rr* pero la más probable es, con mucha diferencia la rr 2 __. rr, *
que tiene lugar cerca de 217 nm '(ver fig. 2-4). Por ello, a pesar de que el cromóforo
etileno simple no absorbe en el ultravioleta cercano, la conjugación de los dos
cromóforos da lugar a una fuerte absorción a 217 nm(e::::::; 21 OOO).Es preciso señalar
que la introducción de un grupo alquilo en un cromóforo simple, como el etileno,
produce un débil efecto batocrómico, a causa de la ligera interacción entre los elec-
trones u enlazantes del grupo alquilo y el sistema rr enlazante, pero que este efecto es
pequeño comparado con el que produce el aumento de la conjugación.
Afortunadamente, el efecto de la introducción de grupos alqui lo en los dienos es
aditivo y el estudio de un gran número de dienos no cíclicos y de anillos de seis
eslabones ha permitido establecer las siguientes reglas (a veces conocidas como
reglas de Woodward) para predecir la longitud de onda de absorción: t
t R. B. Woodward. J. A m. Chem. S oc., 64: 72. 76 ( 1942): L. Fieser, J. Orf!.. Chem., 15: 930
( 1950) ; y A . l. Scott, «lnterpretation of the Ultraviolet Spectra of Natural Products», Pergamon,
Oxford. 1Y64 .
- C=C- C=C-
1 1 1 1
-c=c- - c=c-
1 1 1 1
/
,. / ,.
170 nm 2 17 nm 175 nm (prohibid a)
"¡
/ ..... ....
/ ......
"
---+-+--<H---<
/ .... "
)>---+0-+-+0-+---
"" /
/
" '~--+o+-<-+---'-'' e 7Tt~/
<O=electrón)
FIGURA 2-4 Diagrama de los niv eles de energía y las tran siciones electrónicas para el
etileno y el butadieno.
Se asigna el valor base de 214 nm al dieno de cadena abierta o al de dos dobles

enlaces conjugados situados uno en cada uno de dos anillos de seis miembros fusio-
nados ( dieno heteroanular); si los dobles enlaces conjugados están situados en el
mismo anillo ( dieno homoanular) , el valor base asignado es 25 3 nm .
2 Se suman 30 nm por cada doble enlace conjugado adicional.
3 Se suman 5 nm por cada grupo sustituyente alquilo o resto de anillo unido al
sistema con dobles enlaces.

4 Se suman 5 nm por cada doble enlace exocíclico; es decir cualquier doble
enlace que parta del anillo (se representa

parte del anillo).
::e= y los dos enlaces sencillos forman
Ejemplo 2-1 Calcular la longitud de onda de absorción del colesta-2,4,6-trieno:
98 Espectrofotometda ultravioleta y visible
Respuesta El compuesto puede considerarse como un dieno homoanular o

como uno heteroanular con un doble enlace adicional; tiene prioridad el dieno
homoanular (en este caso el anillo A).
Dieno homoanular 253 nm

Doble enl ace ( 6, 7) adiciona l, conjugado 30
Tres sustitu yentes en posiciones 2, 5 y 7 3X5= 15
Un doble en lace exocicl ico (el enlace 4,5
es exocícl ico al anillo B 5
Total 303 nm
Experimentalmente la absorción se observa a 306 nm .
Estas reglas se cumplen bien sólo para sistemas cíclicos con dienos conjugados y
trien os. Se pueden obtener buenos resultados con sistemas cíclicos con cuatro dobles
enlaces conjugados, pero son insatisfactorias con más dobles enlaces conjugados;
para estos últimos se han establecido otras reglas empíricas. t
Cetonas y aldehídos no saturados Las bandas de absorción rr ~ rr* de un

grupo carbonilo aislado aparecen en el ultravioleta lejano, pero cuando existe un
doble enlace conjugado se desplaza hasta la región de aproximadamente
215-280 nm (la transición n ~ rr*, que es débil , se desplaza en la mayoría de los
casos por encima de 31 O nm, pero esta transición no está sujeta a ninguna corre-
lac ión numérica) .
Las reglas de Woodward:j: para los compuestos carbonílicos a,f3-insaturados de
fórmula general
o
-y(3al
C=C-C=C-C=O
son las siguientes:
Se asigna el valor base de 215 nm a la cetona a,/3-insaturada y el de 21 Onm al

aldehído a,f3-insaturado (existe una excepción: si la cetona a,f3-insaturada forma
parte de un anillo de cinco eslabones, el valor base que se le debe asignar es de
200 nm).
2 Se suman 30 nm por cada doble enlace conjugado adicional.
3 Se suman 1O nm por un sustituyen te alquilo en a
4 Se suman 12 nm por un sustituyente alquilo en f3
t Fieser, loe. cit.
:j: R. B. Woodward, J. Am. Chem. Soc., 63: 1123 (1941) .
5 Se suman 18 nm por un sustituyente alquilo en y o posiciones más lejanas .

6 Se suman 5 nm por cada doble enlace exocíclico.
7 Se suman 39 nm si existe un dieno homoanular.
Además de estas reglas generales, existen muchas otras que se refieren a sustitu-
yentes auxocrómicos en posiciones a , f3 y y . Normalmente estos sustituyentes pro-
ducen efectos batocrómicos apreciables. que pueden consultarse en la bibliografía. t
Además de estas reglas que hacenreferencia a los sustituyentes. es preciso hacer
correcciones según la naturaleza del disolvente , puesto que la polaridad del disol-
vente afecta considerablemente los espectros de estos compuestos. El etanol se con-
sidera el disolvente patrón, y las correcciones indicadas en la tabla 2-4 para otros
disolventes están referidas al etanol. Los disolventes están tabulados en orden
creciente de polaridad y ello permite observar que un aumento en la polaridad
produce un desplazamiento batocrómico.
Ejemplo 2-2 Calcular la longitud de onda de absorción del ergosta-4.6.8 .(9).

22-tetraeno-3-ona (8):
Respuesta
Cetona base 215 nm

Dos dobles enlaces conjugados adicionales (6 .7 y 8.9) 60
Un sustituyente alquilo en f3 ·(sobre C 5 ) 12
Un sustituyente sobre CR 18
Dos sustituyentes sobre C9 36
Un doble enlace cxocíclico ( 4.5) 5
Presencia de un dieno homoanular 39
Total 385 nm
Experimentalmente la absorción se observa a 388 cm . con E = 12 300.
+ Scott. op. cit., o Ref. 8. p. 23.
TABLA 2-4 Correcciones debidas

al disolvente para cetonas o:,/3-insatu-
radas
Disolvente Corrección, nm
Hexano -11
E ter -7
Dioxano - 5
Cloroformo -1
Etanol, metano! o
Agua +8
Anillos bencénicos sustituidos El benceno presenta una banda de absorción

fuerte en el ultravioleta lejano, a 184 nm (E = 50 000) y otras en el ultravioleta
próximo, a 204 nm (E= 7 000) y a 254 nm (E= 200) . Estas bandas están asociadas a
transiciones rr - rr*. La banda que aparece a 254 nm muestra su estructura fina vi-
bracional, claramente en fase vapor y menos en disolución .
Bencenos monosustituidos Cuando un hidrógeno del benceno es sustituido por
un grupo funcional simple se observa una disminución en la complejidad de la estruc-
tura fina de las bandas, un aumento en su intensidad y un desplazamiento hacia longi-
tudes de onda más largas. Aunque no se dispone de reglas empíricas, en la tabla 2-5
se dan algunas indicaciones. La introducción de un grupo alquilo o de un halógeno
sólo produce un ligero desplazamiento y un pequeño aumento en la intensidad, mien-
tras que la introducción de grupos que posean electrones rr no enlazantes, tales como
-OH , -NH 2 o -CHO, produce un desplazamiento muy acusado y aumenta
mucho la intensidad. Puede observarse que mientras que el catión de la anilina.
- NH/, tiene prácticamente el mismo espectro que el benceno, el espectro de la

anilina , -NH 2 , es muy distinto. Esto se debe a que en el caso de la anilina existe
conjugación entre los electrones del par libre del nitrógeno y los electrones rr del
anillo bencénico (conjugación n-rr) , conjugación que no es posible en el catión ya que
éste no posee el par electrónico libre .
Bencenos disustituidos En el caso de bencenos disustituidos es necesario , para
poder establecer criterios orientativos, dividir los compuestos en dos grupos. En el
grupo I , los sustituyentes son electrónicamente complementarios, es decir, un grupo
es dador de electrones y el otro es aceptar y están situados, el uno respecto al otro, en
posición para. La p-nitroanilina, que absorbe a 3 7 5 nm con E = 16 000, pertenece a
este grupo. Los compuestos de este tipo absorben a longitudes de onda considerable-
mente mayores de lo que podría esperarse considerando cada sustituyente separada-
mente a causa de la extensión del cromó foro desde el grupo dador de electrones hasta
el aceptar, a través del anillo bencénico.
Al grupo II pertenecen el resto de bencenos disustituidos, incluyendo aquéllos
que poseen los dos grupos en posición , uno respecto al otro, meta u orto y los que
TABLA 2-5 Máximos de absorción en el ultravioleta

de algunos bencenos monosustituidos, en disolución
acuosat
Banda primaria Banda secundaria

C6H.X,
donde -X es Amt('x, nm Aro'x' nm
-H 203,5 7400 254 204

-NH3+ 203 7500 254 169
-CH3 206,5 7000 261 225
-I 207 7000 257 700
-Cl 209,5 7400 263,5 190
-Br 210 7900 261 192
-OH 210,5 6200 270 1450
-OCH3 217 6400 269 1480
-CO,H 230 11600 273 970
-NH, 230 8600 280 1430
-COCH3 245,5 9800
-CHO 249,5 11400
-N0 2 268,5 7800
t Según J. R. Dyer, <<A pplications of Absorption spectroscopy of

Organic Compounds», p. 18, Prentice-Hall, Inc., Englewood
Cliffs. N.J .. 1965. reproducido con autorización .
estando en posición para tienen una capacidad dadora de electrones similar. Un ejemplo
de compuesto de este grupo es el p-dinitrobenceno, que absorbe a 260 nm con
e= 13 000. El espectro que presentan los compuestos de este grupo es normalmente
el que podría esperarse considerando la influencia de los dos grupos cromóforos sepa-
radamente.
Dentro del grupo I existe un tipo especial de compuestos para los que pueden
darse reglas empíricas para predecir la posición del máximo de absorción. Se trata de
compuestos del tipo R-C 6 H 4 - COX, donde Res un grupo dador de electrones (que
orienta en orto y para), -COX es un grupo carbonilo aceptor de electrones, y X es
un alquilo, -H, -OH, o O-alquilo. Las reglas que se dan a continuación permiten
calcular la banda de absorción más intensa en el ultravioleta cercano. Para compues-
tos del tipo R-C 6 H 4 -C OX:
Se asigna el valor base 250 nm cuando X = H: 246 nm cuando X= alquilo o

resto de anillo y 230 nm cuando X = -OH o O-alquilo.
2 Se suman 3 nm cuando Res un resto de anillo o un grupo alquilo en orto o
meta.
3 Se suman 1O nm cuando R es un resto de anillo o un grupo alquilo en para.
102 Espectrofotometrla ultravioleta y visible
4 Se suman 7 nm cuando Res un sustituyente -OH 1 -OMe o O-alquilo en

orto o meta.
5 Se suman 25 nm cuando Res un sustituyente - OH,- O Me o O-alquilo en
para.
Existen reglas para otros sustituyentes. +
Ejemplo 2-3 Calcular la longitud de onda de absorción del 6-metoxitetralona:
Respuesta
Cromóforo base con X = resto de anillo 246 nrn

Resto de anillo en orto 3
Grupo metoxi en para 25
Total 274 nm
Experimentalmente la absorción se observa a 276 nm, con t:: = 16 500.

En el caso de bencenos polisustituidos es difícil hacer predicciones, especialmen-

te si e·xiste impedimento estéreo.
Ácidos, ésteres, nitrilos y amidas no saturados Los ácidos, ésteres, nitrilos y

amidas· a,/3-insaturados presentan generalmente una banda de absorción intensa
(t:: = 10 000 - 20 000) en la región de 205 a 225 nm. Las reglas empíricas que
pueden aplic~rse a ácidos y ésteres a,/3-insaturados son las siguientes:
Se asigna el valor base 197 nm al ácido o éster.

2 Se suman 30 nm si existe un doble enlace conjugado.
3 Se suman 1O nm por cada grupo alquilo sustituyente.
t Scott. op. cit., o Ref. 8. p. 31 .
Espectrofotometr!a ultraviole ta v visible 103
4 Se suman S nm por un doble enlace exocíclico.

5 Se suman 5 nm por un doble enlace endocíclico en un anillo de cinco o siete
eslabones.
El desplazamiento observado al pasar de un ácido a un éster es normalmente

menor de 2 nm.
Los nitrilos a ,/3-insaturados no han sido muy estudiados, pero normalmente
absorben a longitudes de onda ligeramente más cortas que los ácidos correspon-
dientes.
Las am idas a ,/3-insaturadas también absorben a longitudes de onda algo más
cortas que los ácidos correspondientes , generalmente cerca de 200 nm (t:: = 8000).
Ejemplo 2-4 Calcular la lon gitud de onda de absorción del (CH 3) 2 C=CH-
COOH.
Respuesta
Grupo ác ido 197 nm
2 sustituyentes alquilo 2 X 10 20
T otal 217 nm
Experimentalmente la absorción se observa a 216 nm , con t:: = 12 000.
BANDAS DE ABSORCIÓN rJ - rJ'"
Los electrones sigma son los electrones enlazan tes de los enlaces sencillos y lastran-
siciones u - a* se producen a causa de absorción en el ultravioleta lejano. Debido a
las dificultades instrumentales, se ha trabajado relativamente poco en esta región del
espectro.
BANDAS DE ABSORCIÓN n -+ a*
Un sustituyente con pares de electrones no compartidos introduce la posibilidad de
transiciones n -+ a*. Los ejemplos más comunes son compuestos saturados que con-
tienen heteroátomos tales como azufre, nitrógeno, bromo o iodo (que absorben a lon-
gitudes de onda de aproximadamente 200 nm) y compuestos con oxígeno o cloro (que
absorben a longitudes de onda más cortas). En la tabla 2-6 se indican las longitudes
de onda y las intensidades de algunos compuestos simples que poseen heteroátomos
comunes. Un aumento en la electronegatividad del heteroátomo produce un despla-
zamiento del máximo de absorción hacia longitudes de onda más cortas, debido a la
mayor energía de unión de los electrones en el estado fundamental. El hecho de que la
mayotia de compuestos saturados que contienen oxígeno absorban por debajo de
200 nm permite poder utilizar compuestos tales como agua, alcoholes y éteres como
disolventes en la zona del ultravioleta próximo.
104 Esoectrofotometr!a ultravioleta y visible
TABLA 2-6 Longitudes de onda e intensidades para transiciones

n --+ a* en algunas moléculas saturadas que poseen heteroátomos t
Heteroátomo Compuesto Am~x, nm fmá :t
-Cl CH3Cl 173 200
/
-0 CH30H 184 150
- Br CH 3Br 204 200
n-PrBrt 208 320
- I CH3I 250 365
CH ,I, 292 1320
CHI3 340 230
/
-N CH 3NH , 215 GOO
"'
/
(C H3)3N 227 820
-,~ (CH3),S 210 1020

Et,St 215 lliOO
-S-S-
Acíclico C,H ,SSC,H 5 202 2100
En anillos de seis eslabones Disulfuro de tetrametilo 295 300
En anillos de cinco eslabones Disulfuro de trimetilo 334 lGO
t Según datos de J . C. D . Brand y G. Eglinton. «Applications of Spectroscopy

to Organic Chemistry>>, Oldbourne, London, 1965 , y Ref. 6.
:j: En disolución de n-hexano, el resto de compuestos en fase vapor.
Si el compuesto posee dos heteroátomos y existe solapamiento entre los orbi-

tales con pares de electrones libres, el máximo de absorción se desplaza hacia longi-
tudes de onda más largas, tal como se indica en la tabla 2-6 en el caso de polihaluros y
disulfuros.
BANDAS DE ABSORCIÓN DE TRANSFERENCIA DE CARGA

La absorción de transferencia de carga es un tipo de proceso de absorción muy impor-
tante y que es responsable de bandas intensas de absorción en el ultravioleta (y a
veces en el visible) de muchos compuestos orgánicos e inorgánicos. En este proceso
se produce una transferencia de electrones de una parte a otra del sistema. En el caso
de un complejo, por ejemplo, podemos representarlo como
(2-3)
siendo M un ion metálico y L un ligando. También puede darse el proceso inverso, o

sea la transferencia de un electrón del ligando al metal. En todos estos procesos
pueden distinguirse dos componentes, un dador (D) y un aceptar (A). (Estos com-
ponentes pueden designarse también como base o ácido de Lewis o como reductor y
oxidante, respectivamente.)
Como ejemplos de procesos de absorción de transferencia de carga podemos in-
dicar la intensa coloración roja del complejo formado entre el cloranil (amarillo) y el
hexametilbenceno (incoloro), el color marrón oscuro del iodo con hidrocarburos aro-
máticos, la intensa absorción de la quinhidrona en la zona visible y la fuerte absor-
ción, también en la región visible, de los polinitros y del ácido pícrico con hidro-
carburos aromáticos, aminas y fenoles . Los procesos de transferencia de carga expli-
can también la absorción ultravioleta de muchos iones inorgánicos hidratados, tales
como
CI - (H20)n---. Cl(H20)n - (2-4)
fe2 + (H 2Ü)n---+ fe3+ (H20)n - (2-5)

feH QH - ---. fe2+ QH (2-6)
Las coloraciones producidas al reaccionar iones de metales de transición con reac-

tivos analíticos cromogénicos también se deben generalmente a bandas de transfe-
rencia de carga. Como ejemplos podemos indicar la reacción del tiocianato con FeH
(se forma FeHCNS-), la determinación de Ti4+ con peróxido (se forma Ti4+-0 2H-),
y el uso de fenoles para detectar F eH, CuH y Ti4+ (se forman complejos del tipo
M•+-0-R-).
En moléculas orgánicas sustituidas, puede también producirse absorción de
transferencia de carga intramolecular, como por ejemplo
o-NR2 --- ON+

R
2 hv (2-7)
R -- Oc-o·
Q-r=o R-
h•
(2-8)
1
106 Espectrofotometr!a ultravioleta y visible
Cálculo de la longitud de onda de absorción La energía (y por tanto la lon-

gitud de onda) de una transición electrónica, que podemos generalizar como
(2-9)
puede calcularse a pattir de la ecuación
hv = lo - EA- e (2-1 O)
donde 10 = potencial de ionización del dador

EA = afinidad electrónica del aceptor
e= energía electrostática mutua de D~ y A-
respecto a D y A
Si sólo uno de los componentes del complejo posee carga, como en el caso CI- (H 20) 11
y otros iones inorgánicos hidratados, y al pasar del estado fundamental al excitado la
carga simplemente se distribuye, el término culómbico es nulo. En realidad, en el e
CI- (Hp)" por ejemplo, existe una pequeña contribución culómbica debido a la dife-
rente energía de polarización del H 2 0 en el campo del CJ- y del Cl en el campo del
H 2 0 - , pero normalmente puede despreciarse.
En las bandas de transferencia de carga de iones diva\entes de metales de transi-
ción, la energía de la transición es directamente proporcional al potencial redox del
sistema
Esto indica que la transición de transferencia de carga es
más que
Ejemplo 2-5 El cloruro sódico gaseoso absorbe en el ultravioleta a causa de una

transición de transferencia de carga. Calcular la longitud de onda a la que puede
esperarse dicha absorción : En fase gaseosa IN. = 5,14 eV, E c1 = 3,82 eV y
e : : : 6.2 eV.
Espectrofotometría ultravioleta v visible 107
Respuesta
hv =In- EA- e
= 5,14- 3,82- 6,2 = -4,9 eVt
Para convertir la energía (en electronvolts) en longitud de onda (en nanometros).

podemos usar el siguiente factor de conversión:
ÁE (eV)A (nm) = 1240

1240
A=--= 253nm
4,9
(Experimentalmente la absorción del N aCI gaseoso se observa alrededor de
248 nm .)
Ejemplo 2-6 El complejo benceno-Br2 presenta una absorción intensa alre-

dedor de 292 nm ( r = 6880) . E 1 potencial de ionización del bromo es 9.24 e V y la
energía culómbica del complejo es de aproximadamente 3.22 e V. Calcular la afi-
nidad electrónica del Br2 •
Respuesta
hv =In- EA- e
1240 1240
hv = t1E = - - = - - = 4 24 eV
A (nm) 292 nm '
4,24 eV = 9,24 eV- EA- 3,22 eV
EA= 1,78 eV
t El signo menos significa que la estructura iónica Na+CI- es más estable (tiene menor energía) que
la forma covalente, NaCI, y por tanto la reacción de transferencia de carga es
Na+ct - ~NaCI
Sólo el valor absoluto de hv tiene significado cuantitativo, el signo indica simplemente el sentido de la
reacción.
108 Espectrofotometría ultravioleta y visible
Los espectros de transferencia de carga son útiles para el cálculo de afinidades

electrónicas, que generalmente son difíciles de determinar por otros métodos
BANDAS DE ABSORCIÓN DE CAMPO LIGANDO

Los iones y compuestos de metales de transición presentan dos tipos de espectros
electrónicos. Junto a las bandas intensas de absorción (e :::::: 10 3 a 104 ) de trans-
ferencia de carga antes descritas, presentan bandas débiles de absorción (e :::::: I0- 1 a
10 2 ) de campo ligando. Mientras que las bandas de transferencia de carga aparecen
principalmente en el ultravioleta (a veces llegan hasta la región visible), las bandas de
campo ligando suelen aparecer en la región visible, aunque ocasionalmente llegan al
ultravioleta próximo o al infrarrojo próximo (ver fig. 2-1). Las coloraciones
características de los iones y compuestos de metales de transición generalmente pue-
den atribuirse a absorciones de campo ligando.
El nombre campo ligando proviene del hecho de que un átomo o ion de un metal
de transición en el vacío posee orbitales d degenerados , o de igual energía, mientras
que la presencia de un ligando crea un campo electrostático que los desdobla en ni-
veles de diferente energía. Si los subniveles d ofno están completos, pueden producirse
transiciones electrónicas entre estos niveles de energía diferentes mediante radiación
de longitud de onda adecuada. Como una primera imagen del desdoblamiento por el
campo ligando vamos a considerar el caso de un complejo octaédrico tal como el
Ti(H 2 0)/ +. El Til+ posee un electrón en un orbital d (3d 1 ) y la forma octaédrica del
ion hidratado puede verse uniendo seis moléculas de H 2 0 a lo largo de los ejes de
coordenadas en cuyo origen se halla el ion metálico. Los cinco orbitales atómicos d ,
que están representados sobre los ejes x, y, z en la fig. 2-5 , en estado libre son
equivalentes (lo que significa que el electrón 3d 1 tiene igual probabilidad de ocupar
y X
FIGURA 2-5 Diagram a esquem ático de los cinco orbitales atómicos d . (Según G. M.
Barro w, «Physical Chemis(l:v>> 2.a ed. , p. 326, McGraw-Hill Book Company, N ew
York, 1966, con autoriz ación.)
Espectrofotometr!a ultravioleta y visible 109
Ion libre
F IGURA 2-6 Desdoblamiento de los orbitales d en un campo octaédrico.
uno cualquiera de los cinco orbitales d). Sin embargo. cuando los seis ligandos Hp
se han unido al ion Ti-'". existe una repulsión eléctrica entre el extremo negativo de la
molécula de H 2 0 (el átomo de oxígeno) y el electrón d del Ti-'" que aumenta la energía
de los orbitales d dirigidos a lo largo de los ejes y disminuye la energía de los orbitales
d concentrados entre los ejes. Así , en un complejo octaédrico, dos de los orbitales d, el
dz, y el d,'-y' aumentarán en energía y los tres restantes orbitales 3d, dxy• dyz y dxz dis-
minuirán. Este desdoblamiento está representado en el diagrama de la fig. 2-6 , donde
~ es la amplitud del desdoblamiento (a veces se usa el término arbitrario 1ODq) y es
una medida de la fuerza del campo ligando. Para el Ti(H 2 0) 63 - , ~ = 20 400 cm- 1 , que
corresponde a una longitud de onda de 490 nm, tal como puede observarse en el espec-
¡¡ ' cm - 1 X 10 3
3S 30 2S 20 !S 10
!Or---,----r---,----.---,
E S
X, nm
FIGURA 2-7 Espectro de absorción del Ti(HP).'+. (Según F. A. Cotton y G.

W ilkinson, <<Advanced lnorganic Chemistry >> 2. a ed., p. 573, John Wiley and Sons, In c.,
N ew Yo rk, 1966, con autoriz ación.)
110 Espectrofotometría ultravioleta v visible
tro de absorción representado en la fig. 2-7. El que la banda de absorción ( f ~ 5) sea
tan débil es debido a que este tipo de transiciones son prohibidas según las reglas de la
mecánica cuántica, y la anchura de la banda se debe a que la transición electrónica se
suman múltiples excitaciones vibracionales que se extienden dentro de un margen de
casi 300 nm. Estas caracteristicas de intensidad y anchura son generales en este tipo
de transiciones d- d (o espectros de campo ligando) a pesar de que en ciertos casos,
por ejemplo los espectros de Mn(II) y Cr(III), aparecen bandas de absorción relativa-
mente estrechas. La banda aguda en la región del ultravioleta cercano (por debajo de
400 nm), de la fig. 2-7, corresponde a una transición de transferencia de carga.
Algunas veces las bandas intensas de transferencia de carga se solapan y general-
mente enmascaran las débiles transiciones d - d.
E s preciso destacar que el modelo de desdoblamiento de niveles de energía
producido por un campo ligando depende de la simetría del complejo formado. es
decir. si su estructura es tetraédrica. octaédrica. tetragonal o plano-cuadrada. Para
los fines de este libro. basta considerar sólo el modelo de desdoblamiento de campo
octaédrico que es el más común. A pesar de la simetría estructural no es en absoluto
posible hacer cálculos referentes al desdoblamiento en el campo ligando y es
imposible predecir la longitud de onda de absorción de un compuesto a partir de
consideraciones puramente teóricas. Es posible. sin embargo. indicar las siguientes
generalizaciones:
Para un determinado ligando. la amplitud ~ del campo ligando aumenta con
la carga iónica del ion metálico central. puesto que al aumentar la carga. aumenta
la atracción electrostática entre el ion metálico y el ligando. Para iones divalentes.
~es en general del orden de 1O 000 cm- 1 ( 1000 nm), y para los trivalentes aumenta
hasta cerca de 20 000 cm- 1 (500 nm).
2 Para un determinado ligando. ~ aumenta con el número cuántico principal del
orbital d del ion metálico. Los orbitales d de niveles más altos se extienden más en
el espacio e interaccionan más fuertemente con los ligandos. Así, por ejemplo. la
amplitud es alrededor de un 40 y un 80% mayor para los orbitales 4d y 5d que
para los 3d.
3 Para un determinado ion metálico. ~ depende de la naturaleza del ligando y es
función de la distribución de su densidad de carga y de su polarizabilidad. Con
pocas excepciones. los ligandos se pueden ordenar (en función de ~ creciente)
según la serie (a veces designado como serie espectroquímica) I- , Br, CI-, F-.
OH:- Cp/- . C 2 H 5 0H. H 2 0. Ncs- . NHJ, etilendiamina, N02 -: 1.1 0-fenantro-
lina. CN- . CO.
Un buen ejemplo de los efectos visibles de la serie espectroquímica es el efecto
que ejercen ciertos ligandos en el color de las sales de cobre y de sus disoluciones. Por
ejemplo, El CuS04 • 5H2 0 y las disoluciones acuosas de CuH, Cu(H 20)/+, presentan
coloración azul pálido, mientras que las disoluciones amoniacales de CuH, Cu(NH 3)/+,
y las sales arnincúpricas presentan una coloración azul-violeta muy intensa: ello es debido
al aumento que experimenta el campo ligando cuando sustituimos el H 20 por el NH J.
Por otra parte, el CuS0 4 anhidro es incoloro debido a que el campo ligando creado
por el ion SO:¡ es tan débil que las bandas de absorción d-d aparecen en la región
infrarroja.
A pesar de que los campos de la mayor parte de ligandos pueden explicarse en
gran parte por las fuerzas electrostáticas (teoría del campo cristalino) generalmente
existe también alguna forma de enlace covalente entre los ligandos y el átomo
metálico central. Para la mayor parte de ligandos existe una cierta contribución CJ en
el enlace y, en el caso de ligandos tales como CO, CN, - , 1,10-fenantrolina y N0 2-
que crean campos particularmente intensos, el considerable aumento que experi-
menta la amplitud del desdoblamiento se debe a la existencia de un enlace rr entre el
ligando y el átomo metálico central.
En la tabla 2-7 se dan algunos valores representativos de desdoblamientos del
campo ligando para varios iones de metales de transición y distintos ligandos. Las
tres generalizaciones indicadas antes se ajustan bastante bien a estos datos
espectrales.
Además de los espectros de campo ligando de los metales de transición los
lantánidos y los actínidos (con subniveles 4fy Sf incompletos) presentan asimismo
TABLA 2-7 Valores repres entativos de algunos desdoblamientos del campo

ligando, <C, en número de ondas (cm- 1)t, :j:
Configu-
ración Ion
electrónica metálico 6Br- 6CI- 6F- 6Hz0 6NH 3 6CN-
3d1 TiH 20 300

3d3 yz+ 12 600
Cra+ 13600 17 400 21600 26300
4d3 Moa+ 19200
3d6 Mn2+ 7000 7500 7800 7800
Fea+ 10 000 13 700 30000
3d6 Fez+ 10 400 33000
Coa+ 18 600 23000 34000
4d6 Rha+ 18 900 20 300 27 000 33900
5d6 Ir+ 23 100 24 900
3d8 Niz+ 7000 7300 8500 10800
3d9 Cuz+ 6500 12 600 15 100
t Para transformar el número de ondas en cm- 1 a nanometros se usa 1/número ondas (cm- 1 ) X 107 =
= nm .
:j: Datos según R. A. Plane y M. J. Sienko, «Physical Inorganic Chemistry,» p. 56, Benjamín.
New York, 1963, y Ref. 11 , p. 523 .
bandas de campo ligando (j-j). Estas bandas tienden a ser más bien estrechas y con
la teoría del campo ligando se ha avanzado mucho en su interpretación.
2-1 C Bases del color y colorimetría
El fenómeno del color merece ser tratado separadamente de la teoría general de la

radiación visible debido a la importancia del criterio del color para el observador
científico. El color tiene bases físicas y fisiológicas en tanto que, por una parte, puede
tener correlaciones matemáticas y, por otra parte, la respuesta humana al color varía
de una persona a otra. La luz que generalmente se considera visible para el ojo
humano es la comprendida entre aproximadamente 400 y 700 nm, pero puede
ampliarse desde 380 hasta 780 nm. Si el ojo recibe luz de todas las longitudes de onda
que constituyen la región visible del espectro, el efecto es de luz blanca. La sensación
de color se produce cuando disminuye apreciablemente una o más zonas de la
región visible. El color aparente siempre es el color complementario del que ha sido
eliminado. En la tabla 2-8 se indican los colores correspondientes a las radiaciones de
las distintas longitudes de onda, así como sus colores complementarios. Las
longitudes de onda límite son tan sólo aproximadas y pueden variar ligeramente de un
observador a otro. Los colores complementarios indicados en la tabla 2-8 son útiles
para predecir la longitud de onda de absorción de compuestos coloreados. Así, una
disolución amarilla, por ejemplo, absorberá luz azul de aproximadamente 450-480 nm.
Para analizar una disolución de Mn0 4- (púrpura) debemos usar luz verde de cerca de
500-560 nm, o bien usar un filtro verde, que transmitirá luz verde.
TABLA 2-8 Relación entre la absorción y el color obser-

vado. t
Intervalo de longitudes Color complementario de

de onda eliminado por, Color la luz residual, tal como
absorción, nm. absorbido la percibe el ojo
4~50 Vioieta Verde-amarillento

450-480 Azul Amariilo
480-490 Azul-verdoso Anaranjado
490-500 Verde-azulado Rojo
500-560 Verde Púrpura
560-580 Verde-amarillento Violeta
580--600 Amarillo Azul
600--650 Anaranjado Azul-verdoso
650-750 Rojo Verde-azulado
t Datos según W . J. Blaedel y V. W. Meloche, «Elementary Quan-

titative Analysis», ,2.• ed., p. 508, Harper and Row, New York, 1963, y
Ref. 1, p. 49.
La colorimetría es un método óptico de análisis que se basa en la comparación

del color, usando el ojo humano como detector. En el mejor de los casos podemos
tener una exactitud de aproximadamente 5%. En general, todo lo que puede hacerse
con un colorímetro o comparador de color (tal como el colorímetro Duboscq) puede
hacerse con más exactitud usando un espectrofotómetro. Por tanto, aunque todavía
se usan ocasionalmente métodos colorimétricos, para detalles específicos debe
consultarse otras obras. t Las ventajas que presenta el espectrofotómetro con
respecto al colorímetro son las siguientes:
Se obtiene una sensibilidad máxima, ya que el espectrofotómetro puede pro-
porcionar luz de sólo una región estrecha de longitudes de onda en el máximo de
ab&orción. (La luz de aquellas longitudes de onda que no son absorbidas, se
desperdicia y ello hace que disminuya la sensibilidad del detector para la radia-
ción deseada.) Además, se cumple mejor la ley de Beer y ello hace que sea más
cómodo y exacto. (Ver sec. 1-5.)
2 Se obtiene mayor selectividad, puesto que el espectrofotómetro puede elimi-
nar longitudes de onda que podrían ser absorbidas por sustancias interferentes.
Generalmente el colorímetro es útil sólo cuando existe un compuesto coloreado,
mientras que el espectrofotómetro permite analizar sistemas con varios
compuestos coloreados.
3 Lafatiga ocular y la ceguera parcial para un color limitan los métodos colori-
métricos basados en la igualación del color y esta dificultad no existe en los
espectrofotómetros provistos de detectores electrónicos.
4 En los procedimientos basados en la igualación del color es preciso usar
continuamente disoluciones patrón o patrones artificiales, mientras que en el
análisis espectrofotómetrico, una vez construida la curva de calibrado, sólo es
necesario comprobar ocasionalmente algún punto.
2-2 INSTRUMENTACIÓN
2 · 2A Nomenclatura en instrumentación
Los dos principales tipos de aparatos usados en las medidas de la absorbancia de la
radiación visible o ultravioleta son los fotómetros y los espectrofotómetros.
Fotómetros Técnicamente la palabra fotómetro se aplica a cualquier dispositi-
vo que pueda medir la intensidad de una radiación, pero normalmente se usa para desig-
nar a los instrumentos relativamente sencillos provistos de filtros para seleccionar
t Por ejemplo, E. B. Sandell, «Colorimetric Determination ofTraces ofMetals», 3.• ed., Wiley,
New York, 1959.
114 Espectrofotometria ultrav1o1era y VIS/Ole
una zona estrecha de longitudes de onda y de unafotocélula ofototubo para medir la

intensidad de la radiación .
Espectrofotómetros Un espectrofotómetro es un instrumento más sofisticado
que posee un monocromador en vez de filtros. El monocromador permite una varia-
ción continua al elegir la longitud de onda y hacer un barrido en una zona amplia de
longitudes de onda. Además. el sistema de detección que posee el espectrofotó-
metro. normalmentefototubos ofotomultiplicadores, es el más sensible que existe.
Puesto que existe cierta confusión en Jo referente a la terminología en la instrumen-
tación. es conveniente. para los propósitos de este libro. definir algunos otros tipos de
instrumentos. Estas definiciones no están aceptadas universalmente. pero son de uso
corriente.
Colorímetros Un colorímetro es un instrumento muy simple que compara.
usando el ojo humano como detector, el color de la sustancia a investigar con el de
una disolución patrón . Este tipo de instrumento se vio brevemente en la sección 2-1 D
y no vamos a comentarlo más. (Es preciso señalar que el nombre colorímetro puede
aplicarse a cualquier instrumento apropiado para medir absorción en la región
correspondiente al visible y. en realidad, así se conocen muchos fotómetros de. filtro
comerciales.)
Espectroscopios Un espectroscopio es un aparato que permite que el ojo pueda
detectar líneas espectrales. (El sufijo-scopio proviene del griego y significa ver o exa-
minar.) El espectroscopio es un instrumento útil para el análisis cualitativo y
semicuantitativo de aquellos elementos que emiten radiación en la región visible del
espectro.
Espectrógrafos Un espectrógrafo es un instrumento que registra las línes es-
pectrales sobre unaplacafotográfica.(EI sufijo -grafo proviene del griego y significa
escribir.) Un espectrógrafo suele usarse casi exclusivamente para registrar emisión o
espectros Raman. En Jos caps. 4 y 6 se verán ejemplos.
Espectrómetros Generalmente la palabra espectrómetro se aplica a los instru-
mentos que poseen sistemas de detección eléctricos. Los espectrómetros suelen po-
seer un registro gráfico aunque la señal de salida puede conectarse tanto a un medidor
sencillo como a un sistema digital.
Un espectrofotómetro es pues un espectrómetro que midefotones, mientras que
un espectrómetro que mide partículas de masa finita, como por ejemplo un espectró-
metro de masas o un espectrómetrofotoelectrónico, caen fuera de los métodos óp-
ticos que se estudian en este libro. El uso de los espectrofotómetros suele restringirse
a la región comprendida entre el ultravioleta y el infrarrojo. mientras que Jos espec-
trómetros se usan a lo largo de todo el espectro electromagnético.
2 -28 Componentes básicos de los fotómetros y espectrofotómetros
Todos los fotómetros y espectrofotómetros, desde los más simples hasta los más so-
fisticados , poseen tres componentes básicos: ( 1) Iafuente de energía radiante, (2) un
filtro o monocromador para aislar una banda estrecha de energía radiante. (3) un
detector para medir la energía radiante transmitida a través de la muestra. La mues-

tra, en disolución,suele colocarse detrás del monocromador y justo delante del de-
tector. Aunque estos tres componentes son los fundamentales , el filtro o monocroma-
dar suele ir asociado a un sistema óptico que proporciona un haz de radiación pa-
ralelo y lo dirige hacia el detector. E 1 detector lleva asociado un sistema de lectura
que traduce la respuesta del detector.
FUENTES DE RADIACIÓN
Una fuente de radiación ideal debe ser continua en una amplia zona del espectro y
tener una intensidad elevada y que no varie apreciablemente con la longitud de onda.
En la práctica, casi todas las fuentes de radiación emiten con una intensidad que varia
con la longitud de onda.
Las fuentes de radiación que emiten en la región ultravioleta y visible del
espectro pueden dividirse en fuentes térmicas, en las que la radiación es debida a
una alta temperatura, y fuente s cuya radiación es debida a descargas eléctricas a
través de gases.
Fuentes térmicas La lámpara dejilamento de wolframio (la de uso más co-
rriente) es una fuente térmica que emite en la zona del visible. Tal como puede verse
en la fig. 2-8 , la lámpara de wolframio tiene el inconveniente de emitir la mayor parte
de su energía en la región del espectro correspondiente al infrarrojo próximo. A la
Uv Visible 1 Ir
1
1
1
1
FIGURA 2-8 Curvas de distribución espectral de una lámpara de wolframio (cuerpo

negro). (Según H. A. Sto be/, «Chemica/ Instrumentation >> 2. a ed., p. 47, Addison-
Wesley Publishing Company, Reading, Mass., !973, con autorización.)
11 6 Espectrofotometría ultravioleta y visible
temperatura normal de trabajo, alrededor de 3000°K, sólo un 15% de la energía total

que emite pertenece a la región visible, y a 2000 K solo un 1%. Al aumentar la
temperatura de trabajo por encima de 3000°K, aumenta la energía total emitida y se
produce un desplazamiento del máximo de intensidad hacia longitudes de onda más
cortas, pero se acorta considerablemente la vida de la lámpara (la temperatura de
fusión del wolframio es de aproximadamente 3600°K). Normalmente, para elimi-
nar la radiación infrarroja, se intercala un filtro de absorción de calor entre la lám-
para y el compartimiento de muestras.
La distribución espectral, representada en la fig. 2-8, es la característica de un
cuerpo negro o fuente incandescente (ambos nombres implican que la radiación es
debida a la temperatura del sólido y prácticamente independiente de su naturaleza).
El wolframio es el mejor material para las lámparas de filamento , pero, en caso de
precisarse un radiación visible más intensa, algunas veces se usa el arco de carbón
(fuente térmica que trabaja cerca de 4000°K). El espectro de emisión de los sólidos
calientes es continuo ya que es el resultado de la excitación térmica de átomos y mo-
léculas a niveles energéticos electrónicos y vibracionales tan próximos entre sí que
forman prácticamente una banda continua. Los niveles de energía están juntos a
causa de la interacción mutua entre los átomos que forman un cuerpo compacto.
Cualitativamente, un aumento de temperatura provocará la excitación de un número
mayor de átomos y a mayores niveles de energía y ello debe traducirse en una mayor
intensidad de radiación y en un desplazamiento hacia longitudes de onda más cortas.
La longitud de onda de máxima emisión puede calcularse (A,.ú en nanometros) a
partir de la ley del desplazamiento de Wien
(2-11)
siendo T la temperatura absoluta en Kelvins. La longitud de onda de máxima emisión

varía pues, de acuerdo con lo indicado en la fig. 2-8, con la inversa de la temperatura
absoluta.
Fuentes de descarga eléctrica En la región ultravioleta se usan varios tipos de
fuentes de descarga eléctrica tales como las lámparas de hidrógeno o deuterio, la
lámpara de descarga de xenón y el arco de mercurio. En todos los casos se hace pasar
una corriente de electrones a través de un gas y las colisiones entre los electrones y las
moléculas gaseosas provocan la excitación electrónica, vibracional y rotacional de
dichas moléculas. El espectro emitido por gases a presiones muy bajas es de rayas,
mientras que a presiones altas es de bandas o continuo ya que la interacción entre
átomos difumina los niveles de energía.
La lámpara de descarga de hidrógeno es la fuente de radiación continua más
usual en la región ultravioleta. Aunque existen lámparas de alto voltaje (de aproxi-
madamente 2500 volts c. a.), generalmente se usan las de bajo voltaje (de aproxi-
madamente 40 volts c.c.). La presión del gas suele oscilar entre 0,2 y 5 mm. En la
fig. 2-9 se representa una curva de distribución espectral en el ultravioleta próximo,
tí pica de una lámpara de descarga de hidrógeno. La emisión continua llega hasta cerca
de 165 nm pero normalmente el material que constituye las ventanas limita la trans-
Espectrofotometría ultravioleta y visible 11 7
FIGURA 2-9 Distribución espectral de energía de una lámpara de arco de hidrógeno de

bajo voltaje. (Según L. R. Koller, «Ultraviolet Radiation», 2. a ed., p. 67. John Wiley &
Sons, Inc. New York, 1965, con autorización.)
misión. El cuarzo absorbe por debajo de 200 nm y la sílice fundida lo hace por debajo
de 185 nm. El límite superior de uso de la lámpara es hasta alrededor de 37 5 nm, ya
que a longitudes de onda superiores emite muy poca energía (ver fig. 2-9). Por encima
de 375 nm puede usarse la lámpara de wolframio.
La lámpara de deuterio abarca una zona de longitudes de onda similar a la de hi-

drógeno, pero su intensidad es de 3 a 5 veces superior a una lámpara de hidrógeno de
diseño y potencia comparables.
La iámpara de descarga de xenón presenta buenas cualidades como fuente de ra-
diación en la región ultravioleta, puesto que trabaja como fuente de bajo voltaje c. c., al
igual que la lámpara de hidrógeno, pero a presiones de xenón entre 1O y 30 atm.
Posee dos electrodos de wolframio, separados unos 8 mm, que forman un arco muy
intenso. En la fig:2-10 se representa una curva típica de distribución espectral de
energía. Su intensidad en el ultravioleta próximo es realmente muy superior a la de la
lámpara de hidrógeno, pero en la región visible, a pesar de su aún mayor intensidad
(emite también líneas muy intensas en el infrarrojo próximo), presenta problemas a
causa de radiaciones parásitas. Otra dificultad es la estabilidad espacial de las extre-
madamente pequeñas e intensas manchas de luz que produce.
El arco de mercurio, que es una fuente patrón para muchos trabajos en el ultravio-
leta, es en general poco adecuada para estudios espectrales continuos a causa de que
presenta líneas o bandas estrechas superpuestas a un fondo continuo, incluso a presio-
400.---,----.--. .----.---.----,---,,---.---.
Uv Vi s ible Ir
Longitud de onda. nm
FIGURA 2-1 O Distribución espectral de energía de una lámpara de xenón de alta

presión.
FIGURA 2-11 Distribución espectral de energía de una lámpara

de arco de mercurio de alta presión. (Según L. R Ko/ler, «Ultraviolet
Radiation », 2d ed, p. 43, John Wiley and Sons, Inc., New York,
1965, con autorización .)
Espectrofotometría ultravioleta v visible 11 9
nes muy altas, del orden de 100 atm. En la fig. 2-11 se representa una típica distri-
bución espectral de su energía. El arco de mercurio de baja presión es muy adecua-
do para calibrados. El mercurio emite 35 líneas separadas desde 127 hasta 405 nm y
24 líneas en la región comprendida entre 200 y 400 nm.
La estabilidad de la fuente es importante, especialmente cuando se trabaja con
instrumentos de haz sencillo. La energía emitida por estas fuentes depende del
potencial aplicado a la lámpara y la señal del detector es proporcional al voltaje de la
lámpara elevado a una potencia superior a la unidad ( 3 ó 4 para la lámpara de wol-
framio) . La fuente de voltaje ha de ser pues muy estable y ello se consigue usando
acumuladores o transformadores de voltaje constante y reguladores electrónicos de
voltaje.
FILTROS Y MONOCROMADORES
Para conseguir que las medidas de absorbancia sean selectivas, exactas y sensibles,
es muy importante poder seleccionar una banda estrecha de longitudes de onda del
espectro amplio que nos proporciona la fuente de radiación. El efecto del aislamien-
to de una banda estrecha sobre la selectividad y la exactitud se comentó ya en la
se c. 1-5. La importancia de este factor sobre la sensibilidad de las medidas de absor-
ción puede ponerse de manifiesto con un ejemplo sencillo.
Ejemplo 2-7 En la fig. 2-12 se representa el espectro de transmisión de una

disolución de ácido m-nitroanilina-N,N -diacético 5 X 10- 4 M entre 340 y 750 nm
usando una cubeta de 1 cm . Calcular la transmitancia de esta disolución con una
fuente de luz blanca que emite radiación uniforme desde 400 hasta 750 nm sin
usar ningún monocromador y compararla con la transmitancia a 415 nm usando
luz monocromática. Suponer que la respuesta del detector es uniforme en toda la
región de la luz visible.
oL----4~oo~--~so~o~--~6o~o----~7~o~o~
Longitud de ond a, nm
FIGURA 2-12 Espectro de transmisión del ácido m-nitroanilino-N,N-diacético

5 X 1o-• M. (cubeta de 1 cm). (Según L. Meites y H C. Thomas, <<Advanced Analytical
Chemistry», p. 252, McGraw-Hill Book Company, New York, 1958, con autorización.)
Respuesta El detector mide la transmitancia media de todas las longitudes de

onda que lo iluminan. La transmitancia media en la zona comprendida entre 400 y
750 nm puede calcularse a partir de la fig. 2-12 y es de aproximadamente del80-
85%, lo que significa que la disolución absorbe sólo un 15-20% de la luz blanca
procedente de la fuente de radiación. En la fig. 2-12 puede verse también que esta
misma disolución absorbe cerca del 70% (30% de transmitancia) de la luz
recibida si la irradiamos con luz monocromática de 415· nm, lo que significa un
aumento de casi cuatro veces en la sensibilidad.
Para aislar una franja estrecha de longitudes de onda podemos usar filtros o
monocromadores.
Filtros Básicamente se usan dos tipos de filtros que son Jos de absorción y los
de interferencia. Losfiltros de absorción se.basan en la absorción selectiva de las lon-
gitudes de onda que no interesan y generalmente son de vidrio en el que se ha disper-
sado o disuelto un pigmento adecuado. También existen filtros de gelatina o
líquidos.
Los filtros de absorción pueden clasificarse enfiltros de corte y filtros de banda.
En la fig. 2-13 se representan las transmitancias caracteristicas de tres filtros de corte
tí picos y en la fig. 2-14 se representan las transmitancias de toda la serie de filtros de
banda. En la fig. 2-13 se pone también de manifiesto que combinando dos filtros de
corte (C-9780 y C-3482 de la fig. 2-13) se consigue el efecto de un filtro de banda
JOO, - - - - - - - - - - "C..;..
-97;.;.
80,;..__ _ C-3482
' Longitud de onda nomiñal (590 nm)
ADchura de banda
720
FIGURA 2-13 Transmitancias características de algunos filtros de corte (vidrio
Corning).
Espectrofotometr/a ultravioleta y visible 1 21
2o
2-t
l-83 l-74 ~~ 71
5
~ f
' 5ñ
1 ~ ~75
4-105
1/"
4-102
V\
/'\
2-77
V\
1
\
1\
2-106_
(1\
5
\4-~4 \ \ '
o
340
J380\ \..
420
1
~ Ji\ /1\lffi 1 1\ ~ "1[
500 540 580 620 660 700 740
¡....
FIGURA 2-14 Transmitancias características de algunos filtro s de band a de vidrio

(vidrio Corning) .
(Combinando un par de filtros de banda se consigue una posterior reducción en la

anchura de la banda de longitudes de onda transmitida.) Los filtros de banda se carac-
terizan por su anchura de banda (también llamada anchura espectral de banda o
anchura efectiva de banda) , su longitud de onda nominal en el centro de la banda y
su transmitancia de pico . Estos términos están indicados en la fig. 2-13. La mayor
parte de filtros de vidrio tienen anchuras de banda relativamente amplias, de unos
35 a 50 nm . y su transmitancia de pico es sólo de un 5 a un 20%. disminuyendo a
medida que mejora el aislamiento espectral.
Los filtros de interferencia, proporcionan. tal como se indica en la fig . 2-15.

anchuras de banda más estrechas. y transmitancias de pico mayores . La composición
y la teoría general de los filtros de interferencia se discutió en la sec. 1-4D. Actual-
mente existen en el comercio una gran variedad de filtros de interferencia.
Moriocromadores Un monocromador es un dispositivo que produce un haz de
radiación de gran pureza espectral (anchura de banda estrecha) y que permite ir va-
riando la longitud de onda. Los elementos esenciales de un monocromador son una
rendija de entrada, que determina el haz de radiación policromática entrante. un
elemento dispersante, que puede ser un prisma o una red, y una rendija de sa lida. El
prisma (o red) dispersa la variación policromática en las longitudes de onda que lo
componen y la rendija de salida transmite la longitud de onda nominal junto a una
banda de longitudes de onda a ambos lados. E 1 prisma (o red) puede girar a fin de
variar la longitud de onda nominal que pasa a través de la rendija de salida.
La teoría del fenómeno de dispersión con redes o prismas se discutió en la
se c. 1-4 F. Las caracteristicas fundamentale s son que los prismas curvan más la s longi-
tudes de onda cortas que las largas y tienen la desventaja de dar dispersiones no
so
40
11
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o ¿ ['..,¿'
420 460 500 540 580 620 '
660 700
FIGURA 2-15 Transmitancias características de algunos filtros de interferencia. (Vacuum

Coating Division, Bausch & Lomb.)
lineales, tal como puede verse en la tabla 2-9. En contrapartida los prismas tienen la
ventaja de su pureza espectral, lo que significa que no existe solapamiento de lon-
gitudes de onda. Las redes tienen mayor poder de resolución y dan dispersiones li-
neales a lo largo de todo el espectro. Además, como normalmente la luz se refleja

(algunas redes transmiten), no existen pérdidas por absorción en el interior de la red
de reflexión. En cambio, las redes tienen el inconveniente del solapamiento es-
pectral, a pesar de que una red tipo echelette concentra la mayor parte de la luz dis-
persada en los dos primeros órdenes. Para reducir la radiación de los distintos or-
denes y la radiación parásita, pueden usarse filtros. Algunas veces, para separar des-
pectro de primer orden, se usa un prisma en combinación con una red.
El papel de la rendija de salida en un monocromador merece ser ~iscutido \1 es-
trechar la rendija de salida se disminuye la intensidad del haz de radiación y se reduce
su anchura de banda. Es posible, por tanto, aumentar la resolución disminuyendo la
anchura de la rendija, pero sólo hasta un límite a partir del cual la difracción de la
rendija empieza a ser apreciable. (Ver sec. l-4E.) Con un buen monocromador este
límite puede ser de 0,01 mm o menos. La sensibilidad del detector puede también
limitar el estrechamiento de la rendija. La mayor parte de instrumentos poseen
rendijas de anchura variable, para dar flexibilidad al instrumento, y las rendijas de
entrada y de salida se ajustan simultáneamente a la misma anchura. Puesto que la dis-

persión de un instrumento que posee monocromador de prisma varía con la longitud
de onda (ver tabla 2-9), para que estos instrumentos suministren radiación de apro-
ximadamente igual anchura de banda en toda la zona del espectro, es preciso que po-
sean una rendija cuya anchura pueda variar de forma continua.
Para un monocromador la anchura de banda espectral se define en términos de la
distribución relativa de energía que pasa a través de la rendija de salida. Esta dis-
tribución se considera que es una distribución triangular de la intensidad con la lon-
gitud de onda. La longitud de onda central ( transmitancia de pico), llamada longitud
de onda nominal, es el valor de la longitud de onda que puede leerse en el
instrumento. La anchura de banda efectiva es la correspondiente a la mitad de la
transmitancia en el pico y contiene aproximadamente el 75% de la energía radiante
transmitida a través de la rendija. Puesto que la distribución de energía se considera
que es un triángulo isósceles, la anchura espectral de la rendija es exactamente dos
veces la anchura de banda efectiva. La relación entre la anchura mecánica de la
rendija (normalmente dada en mm) y la anchura espectral de la rendija (que en las
regiones visible y ultravioleta normalmente se da en nm) depende del diseño y longitud
focal del monocromador y de la naturaleza de la unidad dispersante. En un monocro-
mador de red la anchura de banda efectiva es constante, para una determinada
rendija, a lo largo de todo el espectro y el control de la rendija puede calibrarse, por
tanto, en unidades de anchura de banda efectiva. En un monocromador de prisma,
debido a la dispersión no lineal, es preciso que el fabricante suministre un gráfico que
indique la variación de la anchura de banda efectiva con la longitud de onda y la
TABLA 2-9 Anchuras de banda

efectivas a varias longitudes de
onda nominales con un monocro-
mador(prisma) BeckmanDU (ren-

dija de salida = 1 mm)
Longitud de onda Anchura de banda,

nominal, nm nm
200 1
400 10
600 35
800 75
Según datos de Beckrnan Instruments,

In c.
anchura mecánica de la rendija. En la fig. 2-16 se representa un ejemplo de gráficos

de este tipo. Como norma, dos bandas de absorción agudas o dos líneas de emis ión
pueden resolverse con un espectrofotómetro si sus longitudes de onda de máxima
intensidad (longitud de onda nominal) difieren en una cantidad igual o superior a su
anchura espectral de rendija (dos veces la anchura de banda efectiva) .
El material usado en la fabricación de prismas y componentes de transmisión óp-
tica tales como ventanas, lentes , recipientes para muestras (cubetas) no debe utilizar-
se a longitudes de onda cuya absorbancia sea mayor de 0 ,2 (menos del 60% de
transmitancia). Normalmente los vidrios de silicato son transparentes desde cerca de
350 nm hasta 2.2 ¡.tm y el vidrio especial Corex (Pyrex) se extiende a la región ultra-
violeta hasta cerca de 300 nm . Para trabajar por debajo de 300 nm es preciso usar
cuarzo o sílice fundida. E 1 límite de trabajo para el cuarzo (sílice óptica) es de
190 nm y algunas muestras de sílice fundido pueden usarse hasta 185 nm.
,'O "
.~ E
ü E
2-
" ~
.g g_ 4
~ §
200 800 1000 1200
FIGURA 2-16 Datos de dispersión para un espectro fotómetro Beckman DU (prisma de

cuarzo). (Beckman Insrrumenrs, lnc.)
Electrodo colector
Laca VidJio
~:·::~;~~~~
Resorte de contacto
para el tenninal positivo
FIGURA 2-17 Construcción de una célula fotovoltaica.
DETECTORES
Los tres tipos de dispositivos fotosensibles usados en las regiones visible y ultra-
violeta, células fotovoltaicas , fototubos (llamados también tubos fotoemisores) y
tubos fotomultiplicadore s se describen y evalúan según los criterios siguientes: se nsi-
bilidad (nivel de intensidad mínimo detectable) . linealidad de la respuesta con la in-
tensidad de la radiación, tiempo de respuesta, influencia de la longitud de onda en
la respuesta. capacidad de amplificación de la seña l de salida y estabilidad.
Células fotovoltaicas Las cé lula s fotovoltaic;as son senc illas. no requie ren
suministrador de potencia externo y pueden cone ctarse directamente a un micro-
amperímetro o galvanómetro que permita la lectura. Sin emba rgo. su sensibilidad es
moderada y generalmente su uso se limita a instrumentos tales como fotómetros de
filtros que dejan llegar al detector una banda de radiación ancha . En la fig. 2-1 7 se
indica como está construida una célula foto voltaica. Consta de un electrodo de un
metal como hierro (o aluminio) en cuya base se deposita una capa fina de un material
semiconductor, como el selenio. Después se recubre con una capa muy fina de plata (u
oro) en la superficie del semiconductor para que actúe corno un segundo electrodo
colector.
La radiación que llega a la superficie del semiconductor de selenio excita a los

electrones de la interfase selenio-plata y hace que pasen de la superficie del selenio al
electrodo de plata colector. Aunque los electrones realmente pasan de la capa de
selenio al electrodo de plata, existe una resistencia de los electrones a circular en
dirección inversa. Se genera, por tanto , una fuerza electromotriz entre la base del
electrodo y el electrodo colector y, si la resistencia del circuito externo es pequeña,
(de unos 400n o menos) , se produce un paso de corriente que prácticamente es
proporcional a la intensidad del haz de radiación incidente .
En la figura 2-18 se representa la curva de la respuesta espectral de una célula
fotovoltaica de selenio con una cubierta protectora de vidrio y se compara con la
sensibilidad característica del ojo humano . Las células.fotovoltaicas son sensibles en
toda la zona del espectro visible y su respuesta , en función de la longitud de onda, es
algo más uniforme que la del ojo humano . Una célula fotovoltaica es , sin embargo
menos sensible a la luz azul que a la verde o amarilla.
El tiempo de respuesta de una célula foto voltaica es mediano y el haz luminoso
no puede ser modulado o convertido en una señal intermitente, tal como es posible en
126 Espectrofotometda ultravioleta y visible
FIGURA 2-18 Curva de la respuesta espectral de una célula fotovoltaica de selenio con
cubierta protectora de vidrio (se compara con la respuesta del ojo humano).
otros detectores, con el fin de amplificado o de reducir el ruido. Además las células foto-
voltaicas presentan fenómenos de fatiga, por lo que la corriente inicial puede ser
considerablemente superior al valor estable que se consigue al cabo de unos minutos.
Finalmente, las células envejecen lentamente durante un periodo de años, a causa de
las transformaciones que experimenta la capa de selenio. A pesar de que estas carac-
terísticas impiden el uso de las células fotovoltaicas en espectrofotómetros
sofisticados, son todavía de uso frecuente en fotómetros de filtro baratos.
Fototubos Los fototubos son más sensibles que las células fotovoltaicas ,
debido principalmente a la posibilidad de una buena amplificación externa. Un
fototubo de vacío típico está provisto de un cátodo sensible a la luz en forma de medio
cilindro metálico recubierto interiormente de una capa sensible a la luz y de un
alambre situado aproximadamente a lo largo del eje del cilindro, que actúa como
ánodo. En la fig. 2-19 se representa el circuito de un fototubo sencillo. Cuando la
radiación llega al cátodo K , éste emite fotoelectrones que son atraídos hacia el ánodo
A que, a través del circuito externo, los devuelve al cátodo. La corriente fotovoltaica
produce una caida iR a Jo largo de la resistenciaRL que es proporcional a la corriente.
La resistencia RL es normalmente una resistencia de entrada en un circuito amplifi-
cador y por ello la caida iR puede amplificarse proporcionalmente. La señal del
fototubo que es pequeña, del orden de 1O pA (producida a niveles de iluminación
bajos) puede amplificarse fácilmente . Si se desea una exactitud de hasta un 1% es
preciso calibrar el aparato a fin de corregir la no linealidad existente entre fotoco-
rriente y potencia iluminante, a menos que se utilice un método de compensación .
La sensibilidad espectral del fototubo depende de la naturaleza de la sustancia
que recubre el cátodo y puede variarse usando diferentes metales alcalinos o variando
el método de recubrimiento del cátodo. La composición del material que recubre el
Espectrofotometr!a ultravioleta y visible 127
Radiación incidente
RL Al amplificador
E
L___ _ --f , l f-+_ _ __,
- 90V
FIGURA 2-19 Diagrama de un circuito de un fototubo sencillo.
cátodo, en la mayor parte de los fototubos comerciales, consiste en una mezcla de un

metal alcalino, un óxido de metal alcalino, plata metálica y óxido de plata. En la fig.
2-20 se representan las curvas de respuesta espectral para distintos fototubos prepa-
rados con distintos metales alcalinos. El metal alcalino más fácilmente ionizable, el
más pesado, emite electrones de longitud de onda más larga que el que es más ligero,
lOOr------.-------,-------.-------.------~
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IX 20
FIGURA 2-20 Curvas de respuesta espectral para algunos fotocátodos compuestos de

plata, oxígeno y distintos metales alcalinos. (Según V. K. Zworykin andE. G. Ramberg,
«Photoelectricity» p. 48, John Wiley and Sons, Inc., New York, 1949, con a_utorización.)
128 Espectrofotometr!a ultravioleta y visible
y al pasar del sodio al cesio la respuesta relativa tiende a disminuir y la amplitud de la

respuesta espectral aumenta. En los tubos de la fig. 2-20. las envolturas usadas para
ais lar los electrodos son de vidrio y. en consecuencia, todos los fototubos tienen su
respuesta máxima a unos 400 nm. El máximo a longitudes de onda cortas es atribuido
a los átomos alcalinos situados debajo del recubrimiento superfic ial y el máximo a
longitudes de onda largas a la absorción de luz por los átomos alcalinos situados en el
rec ub rimiento del óxido. Si se usan ventanas de cuarzo o de sílice fundido la zona de
trabajo de estos fototubos puede extenderse a través del ultravioleta próximo y hasta
el ultravioleta lejano.
Tubos fotomultiplicadores Los fotomultiplicadores son un tipo de fototubos
de vacío de respuesta rápida y sensibilidad muy elevada. diseñados de tal forma que
puede conseguirse una amplificación de varios millones dentro de un tubo por
emisión de electrones secundarios. La radiación que llega al fotocátodo provoca la
em isión de electrones primarios. de manera análoga a un fototubo normal de vacío .
pero en el fotomultiplicador estos electrones son acelerados, por aplicación de un
potencial positivo. hacia una segunda superficie sensible. de forma que al chocar con
ella. cada electrón primario es capaz de producir la emisión de cuatro o cinco elec-
trones secundarios. Estos electrones son también acelerados hacia otra superficie
sensible de forma que el número de electrones emitidos vuelve a mu ltipli carse por
cuatro o por cinco. Este proceso puede repetirse tantas veces como se desee. pero la
mayoría de fotomultiplicadores comerciales poseen unos 1O electrodos. o dínodos.
E n la fig. 2-21 se muestra esquemáticamente la sección transversal del diseño de un
fotomultiplicador de caja circular. que es de uso muy frecuente.
El factor de amplificación que puede conseguirse depende del voltaje aplicado a
cada dinodo y se requiere una fuente de alta tensión de gran estabilidad.
Normalmente, cada dinodo es de 75 a 100 V más positivo que el que le pre-
cede y el factor de amplificación global suele ser de cerca de 106 . Además, la señal
de salid a del fotomultiplicador puede ser a su vez amplific ada . Con un fotomulti-
plicador se pueden medir intensidades alrededor de unas 200 veces más débiles de las
que se miden con un fototubo ordinario y un amplificador. El límite de detección viene
determinado por el ruido de fondo que es debido a la emisión termoión ica y otros
midos fortuitos. El ruido de fondo puede reducirse disminuyendo la temperatura de l
tubo. pero ello normalmente no es factible en espectrofotometría. El tiempo de
respuesta es extremadamente corto del o rden de I0- 9 s. La corriente de salida es
función lineal de la iluminación en una zona muy amplia pero empieza a curvarse
para niveles de iluminació n altos.
Para evitar el deterioro de la superficie del electrodo. a causa de un sobrecalenta-
miento local. y evitar la fatiga del tubo. que se manifiesta por una deriva en la señal.
la corriente anódica debe mantenerse por debajo de 1 mA. E sto implica a su vez que
el voltaje entre el último dinodo y el ánodo no sea superior a 50 V y ello se consigue
ev itando energía radiante de intensidad alt a . Los tubos fotomultiplicadores deben
es tar perfectamente protegidos d e la lu z parásita.
En la fi g. 2-2 2 se representa la respuesta espectral relativa de tres tipos de tubos
fotomultiplic adores qu e son es pecialm ente se nsibles a la luz visible y ultravioleta.
' ""' ' Luz incidente
O = Fotocátodo
JO= Anodo
Protección de mica 1-9 = Dinodos
FIGURA 2-21 Diagrama esquemático de un tubo foto-

multiplicador.
FIGURA 2-22 Respuesta espectral relativa de algunos tubos

fotomultiplicadores.
130 Espectrofotometda ultravioleta v visible
Luz procedente del

monocrom ador o del
filtro
1
Muestra
::;;r-- Esfera o superficie reflectante inerte
FIGURA 2-23 Diagrama óptico de un dispositivo de reflectancia. (Según H. H.

Wil/ard, L. L. Merritt, Jr., y J. A. Dean, «Instrumental Methods of Analysis » 4.• ed.,
p. 103, Van Nostrand Reinhold Company, New York, 1965, con autorización.)
Los números S corresponden a un código de clasificación estándar adoptado por los

fabricantes de tubos para identificar las respuestas espectrales características de
todos los tipos de fototubos .
Detectores de reflectancia Existen dispositivos especiales de reflactancia que
se suministran como accesorios para muchos espectrofotómetros y sirven como
sustitutos de los detectores convencionales, que son de gran utilidad para medir
cuantitativamente el color de materiales opacos tales como pinturas, materiales
textiles, plásticos, tintas, colorantes, vidrios, telas y muchos otros productos. En la
fig. 2-23 se representa esquemáticamente un digrama óptico de un dispositivo de
reflectancia corriente. La luz, que proviene de un monocromador, entra en el
dispositivo de reflectancia y es desviada hacia la muestra coloreada opaca, que
absorben parte de la radiación y refleja el resto. Una esfera integradora dirige la luz
reflejada hacia la rendija del fotodetector, donde es medida por un tubo fotomul-
tiplicador. En la fig. 2-24 se representa una curva de reflectancia típica de un material
opaco azul.
2 -2C Principios del diseño del instrumento
Vistos ya los componentes básicos de los fotómetros y espectrofotómetros, podemos

describir los principios fundamentales del diseño de los instrumentos modernos y
después haremos un resumen de algunos de los instrumentos que existen en el
comercio.
DISEÑO BÁSICO DEL INSTRUMENTO

Todos los fotómetros y espectrofotómetros están incluidos en uno de estos cuatro
tipos básicos:
70
----
60
Violeta
Azul
¡.---. Verde
- ~ 50 marillo
.:: ~
~ 1\. ~~ Rojo
~ 40
~
~
., 30
-~
1\
.,
~ 20
1 1\ _j_
~
10
V \ ,/
o '-- /
400 450 500 550 600 650 700
FIGURA 2-24 Curva espectral de reflectancia de un material azul opaco. (Según H. H.
Willard, L. L. Merritt, Jr., and J. A. Dean, «lnstmmental Methods ofAnaly sis », 4.a ed.,
p. 103, Van Nostrand Reinhold Company, Ne w York, 1965, con autorización.)
1 Haz simple, lectura directa

2 Haz simple, de compensación
3 Doble haz, lectura directa
4 Doble haz, de compensación
Cada uno de estos tipos tiene sus ventajas y sus inconvenientes y a continuación
comentaremos brevemente y de forma comparativa las distintas opciones.
Haz simple frente a haz doble En los instrumentos de haz simple, la radiación
sólo pasa a través de una disolución, mientras que en los de haz doble, un haz pasa a
través de la disolución que contiene la muestra al mismo tiempo que otro haz pasa a
través de un blanco que nos da una señal de referencia. Con un instrumento de haz
simple , el número mínimo de etapas para poder hacer una medida de absorbancia (o
de transmitancia) a una longitud de onda determinada son:
Cuando no llega ninguna radiación al detector (obturador cerrado) se ajusta el

medidor a cero (cero de transmitancia o absorbancia infinito)
2 Con el blanco en posición de medida, se abre el obturador y se ajusta la
intensidad de la fuente o la ganancia del amplificador hasta que la lectura sea del
100% de transmitancia (cero de absorbancia)
3 Se coloca la disolución de la muestra en posición de medida y se lee la

correspondiente transmitancia (o absorbancia).
Si se trabaja a más de una longitud de onda estas tre s etapas deben repeti rse cada
vez, puesto que tanto la potencia de salida de la fuente como la respuesta del detector
varían con la longitud de onda (ver sec. 2-2B). Además, la absorbancia del blanco
puede váriar con la longitud de onda. El carácter secuencial de estas tres etapas
requiere que tanto la potencia de la fuente como la sensibilidad del detector
permanezcan constantes durante todo el proceso, lo que implica que el suministrador de
voltaje de la fuente y del detector debe ser muy estable.
Con un instrumento de doble haz la mayoría de estos problemas no existen y la
operación es más sencilla. Para calibrar el instrumento, antes de usarlo. sólo se
requieren estos pasos:
Con el blanco en ambas cubetas, se ajusta el medidor a cero (cero de absor-

bancia o 100% de transmitancia).
2 Con el blanco en la cubeta por la que pasa el haz de referencia y sin que llegue
ninguna radiación al detector (para impedir el paso de radiación se usa un
obturador o un objeto opaco) , se lleva el medidor hasta su valor máximo ( absor-
bancia infinita o transmitancia cero).
Una vez se ha calibrado el instrumento, puede medirse la tran sm itancia de la

muestra a cualquier longitud de onda, dentro del margen que permite el instrumento,
sin necesidad de volverlo a calibrar, puesto que la señal del haz que pasa a través de la
muestra se compara continuamente con la del haz que pasa a través de la referencia y
lo que se amplifica y registra es la dzferencia entre las señales de los dos haces. Esto
equivale a medir la relación de intensidades de los dos haces y esta relación es
independiente del hecho de que la fuente o el detector varíen con la longitud de onda.
Además cualquier absorción por parte del disolvente queda automáticamente restada
con tal que la absorción por las cubetas se ajuste adecuadamente. Las fluctuaciones
en la potencia de la fuente y en la sensibilidad del detector debidas a pequeñas fluc-
tuaciones en el suministrador de voltaje se compensan también automáticamente,
suponiendo que los detectores se ajusten debidamente . (Existe otro tipo de
instrumentos de doble haz, de uso más generalizado, que poseen un mismo detector
para medir ambos haces y así se elimina el problema de ajuste de los detectores.)
En resumen, el trabajar con doble haz presenta importantes ventajas cuando el
registro es automático y tiende a minimizar los errores debidos a fluctuaciones y
derivas en el voltaje aplicado , intensidad de la fuente , respuesta del detector,
ganancia del amplificador y otras irregularidades. Las fluctuaciones rápidas , como
las debidas a un componente defectuoso, no pueden, por supuesto, disminuirse o
elíminarse fácilmente. Los espectrofotómetros de doble haz son evidentemente más
complejos y por ello su construcción y mantenimiento resulta más costoso. Por otra
parte, un buen instrumento de haz sencillo puede ser superior en cuanto a exactitud y
seguridad a uno de doble haz, si los componentes son de buena calidad y se trabaja de
acuerdo con su capacidad o se utiliza un sistema de medida mejor, por ejemplo de
compensación en lugar de lectura directa (se verá en la se c. siguiente). En general, los
espectrofotómetros de haz sencillo son adecuados para análisis cuantitativos de
sustancias simples o de mezclas sencillas, pero no son satisfactorios para análisi s
cualitativos de sustancias que presentan curvas de absorción complejas en una zona
amplia del espectro.
Lectura directa frente a la de compensación Un instrumento de lectura
directa usa un medidor para leer absorbancias o transmitancias. Un instrumento de
compensación en cambio usa, en la etapa de medida, un dispositivo de compensación
que permite comparar la señal a medir con una señal de referencia. El servo registro
potenciométrico es un ejemplo de dispositivo de compensación. El método de
compensación es evidentemente más exacto que el de lectura directa. t
El fundamento de ambos métodos y las ventajas relativas del de compensación
pueden verse, tal como se indica en la fig. 2-25. comparando la medida del voltaje de
una batería según los dos métodos: lectura directa y compensación. El voltímetro M
M R
(a) (b)
FIGURA 2-25 Comparación de la medida del voltaje de una batería según los métodos
de lectura directa y de compensación: (a) lectura directa; (b) compensación. Ex = vo ltaje
a medir, E 5 = voltaje de referencia, conocido y de magnitud superior a Ex, M =
= voltímetro, R = resistencia de contacto móvil, calibrada y lineal, y G = galvanómetro
(detector de cero).
t Los voltímetros digitales de lectura directa, que actualmente empiezan a ser de uso general, son
mucho más precisos que los medidores de lectura directa y, en ciertos casos, quizás más exactos que
los instrumentos de compensación. Los voltímetros digitale s pertenecen a una categoría distinta de la
de los medidores y registradores , puesto que los voltímetros di gitales , por ejemplo, evitan el retraso
mec ánico característico tanto de los potenciometros como de los galvanómetros.
que se usa en ei método de lectura directa puede considerarse un medidor sencillo de

laboratorio (de bobina móvil) , mientras que el circuito usado en el método de com-
pensación es un potenciómetro sencillo de contacto móvil. Aunque en la fig. 2-25 el
voltaje Ex a medir es el de una pila, es análogo a una señal de salida de un detector en
un espectrofotómetro. Las dos razones fundamentales por las que el método de
compensación nos da una lectura más exacta que el método de lectura directa son:
La exactitud de un medidor de lectura directa está limitada por la pequeña lon-

gitud de la escala (capacidad de lectura) y por su inherente falta de exactitud ope-
racional. Para la mayor parte de medidores buenos, la exactitud a fondo de esca-
la es sólo del ± 1% y en el mejor de los casos raramente se consigue más del
±0,5% . En el método de compensación, la exactitud sólo está limitada por la
linealidad de la resistencia variable y por la exactitud con que puede determi-
narse la posición del cursor. Con un buen cursor es posible conseguir una exac-
titud de ± 0,01% o incluso mejor. En la práctica, la exactitud de la mayor parte
de potenciómetros de contacto móvil de espectrofotómetros de compensación es
del ±0, 1%. Es preciso mencionar que el galvanómetro de la fig. 2-25 se usa sim-
plemente para indicar el punto de equilibrio y se elige uno que tenga la suficiente
sensibilidad como para que no limite la exactitud de la medida. En los
instrumentos con registro automático, existe un servomotor que se encarga de
localizar el punto de equilibrio.
2 Los medidores de lectura directa consumen corriente y por tanto modifican el
circuito a medir y varían el voltaje que queremos medir. Esta variación en el vol-
taje (que constituye un error) es tanto más importante cuanto mayor sea la resis-
tencia (o impedancia) del circuito a medir. En cambio, en el método de compen-
sación, el voltaje desconocido se compara con una fuente de voltaje patrón hasta
que , en el equilibrio, la corriente que circula por el circuito es virtualmente nula.
Así, la medición se realiza sin que se distorsione el circuito a medir. (En realidad,
en el punto de equilibrio circula una corriente muy pequeña pero finita y su valor
exacto depende de la sensibilidad del detector de compensación usado; en cual-
quier caso, la corriente es incomparablemente menor que la que circula en un me-
didor de lectura directa.) En los instrumentos de registro automático, el servo
motor mueve un cursor (y la plumilla del registrador) hasta conseguir una corrien-
te nula.
Resumiendo, los instrumentos de lectura directa presentan ventajas sobre los de

compensación en lo que respecta a sencillez, costo y quizás mantenimiento. Además
es más rápido que un medidor de compensación manual. Sin embargo, los instru-
mentos de compensación proporcionan mayor exactitud fotométrica, o exactitud de
medida en escala de transmitancia. En general, los fotómetros y espectrofotómetros
de lectura directa proporcionan una exactitud de un ± 1 a 3% en la transmitancia,
aunque existen algunos instrumentos de lectura directa de calidad excepcional que
dan lecturas de transmitancia con una exactitud del ±0,5%. Los espectrofotómetros
rendija
t
0% T 100% T
Movimiento de la Cuña
FIGURA 2-26 Representación esquemática de una cuña óptica con atenuación lineal
del haz luminoso. Observar la re lación entre la cuña y la imagen de la rendija.
de compensación normalmente dan una exactitud del ±0,2% y, en el caso de instru-

mentos de bajo costo, puede ser del ± 1%.
En instrumentos de lectura directa provistos de terminales de salida para conectar un
registrador adicional en paralelo con el medidor, la exactitud estará también
condicionada por la exactitud del medidor, independientemente de la calidad del
registrador.
Compensación óptica frente a compensación potenciométrica Hasta ahora,
al hablar de instrumentos de compensación nos hemos referido exclusivamente a los
de compensación potenciométrica. En los espectrofotómetros de doble haz puede
usarse también un sistema de compensación óptico. En el método de compensación
óptica se introduce una cuña en el haz de referencia hasta igualar las intensidades de los
haces que pasan a través de la muestra y de la referencia. La cuña puede ser del tipo
indicado en la fig. 2-26, en cuyo caso el movimiento de la cuña es lineal y propor-
cional al porcentaje de luz transmitida, o puede tener la forma indicada en la fig. 2-27,
en cuyo caso la atenuación de la luz es logarítmica y el movimiento de la cuña será
directamente proporcional a la absorbancia. El sistema de compensación óptico es
menos exacto a medida que aumenta la absorbancia de las disoluciones, t aunque es
posible compensarlo en parte electrónicamente. La mayor parte de espectrofotó-
metros ultravioleta y visibles se basan en la compensación potenciométrica más que
en la óptica, pero en la sección siguiente veremos ejemplos de los dos tipos.
t Esto supone que se intercala una cuña en el haz de referencia; en el absorciómetro Hilger-Spekker.
se retira la cuña que existía en el haz de la muestra, y con ello se elimina este problema ya que la in-
tensidad de la radiación se mantiene constante.
FIGURA 2-27 Representación esquemática de una cuña óptica con atenuación loga-
rítmica del haz de luz. (Perkin-Eimer Corp.)
2-20 Instrumentos comerciales
Los instrumentos comerciales adecuados para medir absorbancias en las regiones

ultravioleta y visible pueden dividirse en fotómetros de filtros. espectrofotómetros
manuales (sin registro) y espectrofotómetros con registro automático. A continua-
ción describiremos algunos instrumentos representativos de cada uno de estos tipos.
elegidos de forma que pueda apreciarse claramente las características del diseño. No
se pretende dar una visión exhaustiva de los instrumentos disponibles ni mostrar
ninguna preferencia por un instrumento sobre los demás.
FOTÓMETROS DE FILTRO
La sencillez y bajo costo de los fotómetros de filtro hace que deban ser tenidos en
cuenta al considerar los instrumentos modernos. Si bien. de manera general. es cierto
que ningún fotómetro de filtro puede ser superior en exactitud y sensibilidad a un es-
pectrofotómetro. puede utilizarse un fotómetro de filtro cuando proporcione la exac-
titud y sensibilidad necesarias, como en ciertos análisis de rutina.
Los fotómetros de filtro suelen dividirse en fotómetros de haz simple y de haz
doble. Los instrumentos de haz sencillo suelen ser de lectura directa y por tanto están
sujetos a fluctuaciones debidas a variaciones en la intensidad de la fuente luminosa.
Esto algunas veces puede reducirse algo usando como suministrador de corriente un
acumulador o usando un transformador de voltaje constante de buena calidad.
El mejor método para minimizar el efecto de las fluctuaciones de la intensidad de
la fuente luminosa es usar un circuito de doble haz con dos fotocélulas. de forma que
las fluctuaciones. al afectar por igual a ambas células. se anule. Casi todos los fo-
Espectrofotometr/a ul travioleta y visib le 137
Lentes Filtro
Espejo
Fotocélula
~=-~
- Muestra
~¿- _-_--=- ==- -=-~-=-

= ¡=1-::L-=--------=--=- --~-
r--
~Blanco de
referencia
Fotocélula
de referencia
R2 R¡
G
Cero
Escala en% T
inicial
FIGURA 2-28 Esquema óptico y eléctrico del Fisher Electrophotometer II. (Fisher
Scientific Co.)
tómetros de filtro de doble haz utilizan como sistema de medida el de compensación.

En la fig. 2-28 se representa un diagrama esquemático (óptico y eléctrico) del Fisher
Electrophotometer II, que es un instrumento de doble haz con un sistema de medida
de compensación potenciométrica. Para trabajar con un instrumento de este tipo debe
ajustarse mecánicamente la aguja del galvanómetro de compensación a la mitad de la
escala cuando la lámpara no está en funcionamiento (ello calibra el instru-
mento al 0% de transmitancia cuando no llega luz al detector). Después, con la
lámpara encendida y con la referencia en ambas cubetas, se ajustan la escala de trans-
mitancia al 100%, con el cursor R 2 del potenciómetro, y el galvanómetro a cero, con
el cursor R 1 • A continuación se introducen, en el haz de medida, las disoluciones
patrón y las muestras y, con el cursor R 2 , se ajusta el galvanómetro a cero. El dial del
potenciómetro nos da la lectura de la transmitancia (lineal) o de la absorbancia (no
lineal) correspondiente a cada muestra. ·
Existen muchos otros fotómetros de filtro de doble haz, como el colorímetro
fotométrico Klett-Summerson, el Photovolt's Lumetron modelo 402 y el absorció-
metro Hilger-Spekker, que no disponen de cubeta para la disolución de referencia
sino que usan el haz de referencia sólo para compensar las variaciones de la fuente de
radiación. Estos instrumentos no son en realidad «verdaderos» aparatos de doble
haz, puesto que al desdoblar el haz en dos sólo pretenden estabilizar la fuente y poder
usar como fuente de voltaje la suministrada por la red y no compensan la absorción
debida al blanco del disolvente.
ESPECTROFOTÓMETROS MANUALES (SlN REGISTRO)

Los espectrofotómetros comerciales pueden clasificarse según los cuatro tipos
antes descritos.
138 Espectrofotometrla ultravioleta v visible
Espectrofotómetros de haz simple y lectura directa En la fig. 2-29 se muestra
un ejemplo de un espectrofotómetro de red de lectura directa relativamente barato y
en la fig. 2-30 se representa esquemáticamente su sistema óptico. La zona de trabajo
de este instrumento es desde 340 hasta 650 nm si se utiliza un fototubo sensible al
azul y puede llegarse hasta 950 nm usando un fototubo sensible al rojo y un filtro que
transmita la luz roja. Posee una pequeña red de difracción y unas rendijas fijas que
dan una anchura de banda constante de 20nm. La señal de salida del fototubo se
amplifica mediante un amplificador diferencial de corriente continua estable
conectado a un puente de Wheatstone y el medidor posee una escala graduada lineal-
mente, desde O hasta 100% de transmitancia, y una escala no lineal, en unidades de
absorbancia.
Espectrofotómetros de compensación y haz simple El espectrofotómetro
Beckman modelo DU-2, cuyo esquema se representa en la fig. 2-31 , es un instru-
mento sensible, seguro y exacto, adecuado tanto para trabajos de investigación como
para análisis cuantitativos de rutina. El modelo DU-2 es una versión actualizada del
popular modelo DU . El Beckman modelo DU opera desde 210 hasta 1000 nm,
mientras que el modelo DU-2 llega hasta 190 nm. En ambos modelos se utiliza un
prisma de cuarzo de 30° con un espejo azogado (llamado prisma de Littrow) y posee
,._Control de la luz
(ajuste al 100%)
FIGURA 2-29 Bausc h & Lomb -Spec tronicf 20, con los controles se n atados.
(Analytical Systems Division, Bausch & Lomb.)
t Marc a de fábrica registrada de Bausch & Lomb, lnc.
Espectrofotometria ultravioleta y visible 139
Lámpara
Rendija de entrada
Fototubo Red de
superficie
--...._____.-...:::-__. de aluminio
Leva de longitudes de onda

Control de la luz
(ajuste al 100%)
Cubeta
Filtro
FIGURA 2-30 Diagrama esquemático del sistema óptico del Spectronic 20 de Bausch
& Lomb. (Analytica/ Systems División, Bausch & Lomb.)
Lámpara de wolframio
Espejo de la lámpara ~~, 4[

de wolframio ~~
Lámpara de hidrogeno
~
O o deuteriy
Lente conden-
sadora /
r
"" Cubeta de la muestra

o la referencia
pejo de entrada
FIGURA 2-31 Diagrama esquemático del sistema óptico del espectrofotómetro

Beckman DU-2. (Beckman lnstruments, lnc.)
FIGURA 2-32 Espectrototometro manual Cary modelo 16. (Varian Associa res.)
una rendija que puede ajustarse de forma continua desde 0 ,01 hasta 2,0 mm. La reso-
lución (o paso de banda) de estos aparatos es de aproximadamente 0,01 nm en la

región ultravioleta y de 0 ,5 nm , en la región visible (ver fig. 2- 16). Por debajo de
625 nm se usa un fotomultiplicador sensible al azul (es opcional en el modelo DU) y
por encima de 600 nm se usa uno sensible al rojo. La fuente de radiación ultravioleta
es una lámpara de hidrógeno o de deuterio y la de visible es una de wolframio. La
señal del detector se amplifica mediante un amplificador de corriente continua
conectado a un circuito de compensación. La exactitud fotométrica es superior al
0 ,3% en unidades de transmitancia.
Espectrofotómetros de compensación y haz doble El modelo Cary 16, de la
Applied Physics Corporation, que aparece en la fig. 2-32 , fue el primer espectro-
fotómetro manual de compensación y haz doble que apareció en el mercado, en 1966.
En la fig. 2-33 se representa esquemáticamente su sistema óptico. Puede operar
desde 800 hasta 186 nm y, con un fototubo opcional, puede llegar hasta 170 nm. Su
exactitud fotométrica es del orden de ±0 ,06% de transmitancia en toda la zona de
trabajo (ello equivale a 0 ,00024 unidades de absorbancia cerca del O de absorbancia
y a 0 ,001 unidades de absorbancia cerca del1). Esta exactitud tan grande se consi-
Lampara de deueteno
Muestra
FIGURA 2-3 3 Diagrama esquemáti co del sistema óptico del espectrofotómetro manual
Cary modelo 16. B = espejo, cuando se trabaja con la lámpara de wolframio se suprime:
P 1 , P 2 =p rismas de Littrow de sí lice fundida: E, F, G, H , K y K 1 =es pejos: J =espejo ro-
tatorio «chopper>>. (Varian Associates.)
gue en parte gracias a un potenciómetro de compensación con una resi stencia varia-
ble de 250 cm de longitud para la escala de transmitancias .
ESPECTROFOTÓMETROS CON REGISTRO
Casi todos los espectrofotómetros con registro son de doble haz . Tal como se ex pli có
en la sec. 2-2C , un barrido de longitudes de onda en un aparato de haz sencillo está
sujeto a variaciones en la intensidad de la radiación emitida por la fuente, en la
re spue sta del detector y en la absorbancia del bl anco y tod as estas va riacione s seco-
rrigen automáticamente cuando se trabaja con un modelo de doble haz. Los espectro-
fotómetros de doble haz con registro que ex isten en el mercado pueden dividirse en
espectrofotómetros de lectura directa , de compensación óptica y de compensación
potenciométrica.
Espectrofotómetros con registro, de doble haz y lectura directa Existen gran
número de aparatos de este tipo . Muchos de estos instrumentos pueden sumini strarse
sin registro y se usan como espectrofotómetros manuales, pero se clasifican dentro
del grupo de los espectrofotómetros co n registro porque posee n un motor para el
Espejo condensador
;r,b
1 Fuente Fuente
de H, de W
Espejos vibradores
- Lente
Fototubo
"- ~
L __ __ , Espejo de la rendija de entrada
Seña l ele
Señal de la referencia
muestra
Conmutador. sincronizado con los espejos vibradores
Medidor
Salida al registrador
FIGURA 2-34 Diagrama esquemático del sistema óptico y eléctrico de un espectro-

fotómetro Beckman modelo DB-G. (Beckman /nstruments, In c.)
barrido automático de la longitud de onda y terminales para conectarlo a un registro

y, la simple adición de un registro, los convierte en un espectrofotómetro con registro
de utilidad muy superior. En la fig. 2-34 se representa un esquema del sistema óptico
y eléctrico de un aparato Beckman modelo DB-G. Para conseguir el doble haz se usa
un espejo vibrador, situado en el compartimiento de muestras, que dirige alter-
nativamente el haz de luz hacia la disolución de la muestra y la de la referencia, con
una frecuencia aproximada de 35 Hz. El haz que llega al tubo fotomultiplicador con-
siste en impulsos alternos de energía procedentes de la muestra y la referencia y un

conmutador magnético de alta velocidad, que está sincronizado con el espejo vi-
brador, desvía la señal de referencia hacia un circuito regulador, donde se compara
con el voltaje constante procedente del suministrador de energía. Cualquier diferen-
cia de voltajes hace que el voltaje aplicado a los dínodos del fotomultiplicador varíe
hasta igualar la señal de referencia y el voltaje constante que proporciona la fuente de
energía. De esta forma, la señal de referencia se mantiene estable. Cada semiciclo el
medidor de salida recibe la señal procedente de la disolución de la muestra e indica
directamente su amplitud en % de T. Este sistema opera realmente con un doble haz,
puesto que al variar la lon gitud de onda, el circuito regulador de referencia compensa
cualquier variación tanto en la absorbancia del blanco como en la energía de la fuente
o en la sensibilidad del detector.
El modelo DB-G abarca una zona de longitudes de onda comprendida entre 190 y
700 nm y, usando un fotomultiplicador opcional, puede ampliarse algo. Si se opera
manualmente, las rendijas pueden ajustarse desde 0 ,01 hasta 10 mm y, en caso de
barrido automático, están programadas de forma que compensen las posibles varia-
ciones en la energía de la fuente y en la respuesta del detector y así se mantiene el
nivel de energía aproximadamente constante. La resolución es de unos 0,2 nm a lo
largo de todo el intervalo de longitudes de onda. El compartimiento de muestras
permite el uso de cubetas de hasta 40 mm.
Espectrofotómetros de compensación óptica y de doble haz con registro
Uno de los pocos espectrofotómetros ultravioleta-visible con registro que se basa en
el método de compensación óptico es el espectrofotómetro Perkin-Elmer modelo
202, cuyo esquema se representa en la fig. 2-35. La radiación que sale del monocro-
mador se divide alternativamente en dos haces , mediante un espejo rotatorio o
«chopper», que gira a una frecuencia de 26Hz. Un haz pasa a través de la disolución
de la muestra y el otro a través de la de referencia. Al llegar al detector los dos haces
vuelven a unirse dando una señal, en forma de corriente alterna, que posteriormente
se amplifica. Cuanto mayor sea la diferencia entre las señales de la muestra y la refe-
rencia, tanto mayor será la amplitud de la señal en corriente alterna. Esta señal se en-
vía a un servomotor que mueve una cuña atenuadora, intercalada en el haz de refe-
rencia, hasta igualar las intensidades de los dos haces (en este momento la señal, en
corriente alterna, que recibe el amplificador es cero). El movimiento de la pluma del
registrador está acoplado al movimiento de la cuña atenuadora y, puesto que las
rendijas de la cuña se ensanchan de forma logarítmica (fig. 2-27), las lecturas del re-
gistrador, en unidades de absorbancia, son lineales.
Con este sistema de compensación óptico, la intensidad de la radiación que llega
al fotomultiplicador disminuye rápidamente al aumentar la absorbancia de la
disolución de la muestra y, para valores altos de la absorbancia, la señal medida es
muy débil y, en consecuencia, los errores muy grandes. Para solucionar este problema,
existe un sistema automático que controla la señal del detector y aumenta el
suministro de alto voltaje al fotomultiplicador a medida que dismunuye la señal del
detector, de modo que aumente la ganancia del fotomultiplicador y mantenga cons-
tante la salida del multiplicador.
144 Esp ectrofotom etr/a ultravioleta y visible
Reg istrador
Amplificador
Sercomotcr
Referenc ia
Curia
ate nuadora
1
L------+------ -
de ganancia
automatico
FIGURA 2-35 Diagram a esquemático del sistema de compensac ión óptico del
espectrofotómetro Pe rkin-E im er modelo 202. (Perkin-E!mer Corp.)
El espectrofotómetro Perkin-Elmer modelo 202 opera en un intervalo de longitu-

des de onda comprendido entre 190 y 390 nm y entre 350 y 75 0 nm. Como fuente de
radiación ultravioleta usa un arco de deuterio y como fuent e de radiación visible una
lámpara de wolframio. Su exactitud fotométrica es de ± 0.0 1 unidades de absor-

bancia para valores de absorbancia entre O y 1.0 (que en una esca la de transmitancia
equivale a un 1% de transmitancia) y de ± 1% para le cturas de absorban cía entre 1.0
y 1,5 . El monocromador utiliza un prisma de sílice fundido de 60c y rendijas progra-
madas automáticamente. con una resolución de 0.2 nm a 21 O nm. 0.4 nm a 3 90 nm y
1.5 nm a 700 nm. El control de anulación de la rendija permite. a expensas de la reso-
lución. ampliar el programa de rendija para poder trabajar con blancos absorbente s.
Espectrofotómetros de compensación potenciométrica de doble haz y con re-
gistro La mayor parte de espectrofotómetros ultravioleta-visible con re gistro perte-
necen a este tipo . Algunos de estos in strul)1entos. como por ejemplo los Cary. modelo
10 , 11 y 15 , y el P erkin-Elmer, modelo 450. están provistos de un doble haz separa-
do en el espacio . En otras palabras , estos instrumentos po see n un separado r y unos
espejos que dividen el haz de lu z en dos haces se parados y dos detectores. también
separados, para medir la energía de cada uno de los haces. Este tipo de diseño requie-
re que lo s dos detectores estén perfectamente ajustados. Para evitar el problema del
ajuste de lo s detectores. puede usarse un doble haz separado en el tiempo, de forma
Espectro fo tometr/a ultravioleta v visible 145
que el haz simple que proviene del monocromador sea desviado hacia la referencia y
la muestra de forma alternativa. Después de pasar por el compartimiento de mues-
tra s, los dos haces se desvían hacia un mismo detector. Este sistema de haz doble en
el tiempo, que también se usa en los espectrofotómetros con registro que hemos des-
crito antes, lo vamos a ver también en esta sección en el espectrofotómetro Cary,
modelo 14. El Cary, modelo 14, es un espectrofotómetro de alta resolución y gran
exactitud y que puede operar en una zona de longitudes de onda que comprende el in-
frarrojo cercano. En la fig. 2-36 se puede observar el espectrofotómetro Cary, modelo
14. y en la fig . 2-3 7 se representa esquemáticamente su sistema óptico. El modelo 14
abarca una zona de longitudes de onda comprendida entre 185 nm y 265 ¡J.m. Existen
accesorios que permiten el paso de una corriente de gas inerte para trabajar en la zona
del ultravioleta lejano. Dispone de una lámpara de deuterio (A en la fig . 2-3 7) como
fuente de radiación ultravioleta, una lámpara de wolframio ( C) para la re gión visible y
otra lámpara de wolframio (Y) para trabajar en el infrarrojo próximo. Cuando se
opera en el infrarrojo próximo la dirección de la radiación es in versa a la seguida
cuando se trabaja con luz ultravioleta o visible. La radiación es dispersada mediante
la red (J) y el prisma (F). Posee tres rendijas (D, H , L) cu ya anchura se ajusta
FIG U RA 2- 36 E spe ctrofotor:ne tro C arv mod elo 14. ( Varian rl ssociares.)
FIGURA 2-37 Diagrama esquemático del sistema óptico del espectrofotómetro Cary
modelo 14. (Varían Associates.)
simultáneamente entre O y 3,0 nm. Un espejo semicircular (O) que gira a una frecuen-
cia de 30Hz, dirige la radiación alternativamente hacia la cubeta de referencia (T') y
la de la muestra (T). Un disco rotatorio «chopper» (N), montado sobre el mismo eje
que el espejo semicircular (0), hace que llegue al detector (X), de forma alternativa,
la energía procedente de la muestra y de la referencia, separadas en el tiempo por in-
tervalos pequeños en los que no llega luz. Cuando la energía entre los haces de la
muestra y de la referencia es distinta, el fotomultiplicador emite una señal, en co-
rriente alterna, que, una vez amplificada, alimenta un servomotor que mueve un
cursor a lo largo de la resistencia de medida ( servorregistrador) hasta que compensa
la señal emitida por el circuito de comparación.
Cuando el aparato trabaja en la zona correspondiente al infrarrojo próximo, la
lámpara de wolframio (Y) se coloca en el lugar del fotomultiplicador(X) y la radia-
ción sigue un camino inverso hasta el detector de sulfuro de plomo (j) (los detectores
de infrarrojo se comentarán en la sec. 3-2). El objeto de esta inversión en la dirección
es el de eliminar la energía térmica parásita que emana del chopper. Si no invir-
tiéramos el camino, la radiación térmica policromática infrarroja emitida por el
chopper, interferiría en la medida, mientras que, invirtiendo el camino, esta radia-
ción se elimina por el monocromador antes de llegar al detector.
La resolución del modelo 14 es de O, 1 nm en las regiones ultravioleta y visible y

de 0,3 nm en el infrarrojo cercano. La exactitud fotométrica es de 0,002 unidades de
absorbancia cerca del 1,O de absorbancia y de 0,005 unidades de absorbancia cerca
del2,0 de absorbancia. El hilo y cursor patrón dan una lectura lineal en dos escalas de
absorbancia, de O a 1 y de 1 a 2, con cambio automático entre las dos escalas, que da
efectivamente una lectura sobre el gráfico de 50 cm para una absorbancia entre O y 2.
La exactitud en la longitud de onda es de ±0,4 nm en casi toda la zona de trabajo. La
luz parásita es inferior al 0 ,0001% en una ancha zona de longitudes de onda e infe-
rior al 0 ,1% en los extremos de la zona de trabajo.
2-3 TRATAMIENTO DE LA MUESTRA
La limpieza, interna y externa, de las cubetas es de suma importancia. Entre dos de-
terminaciones sucesivas, es preciso lavar las cubetas con el disolvente, llenarlas con
disolvente, secar sus paredes externas y comprobar su absorbancia. Para lavarlas
puede usarse detergente o ácido nítrico caliente.
Existen muchos disolventes adecuados para trabajar en la región ultravioleta-visi-
ble. En la tabla 2-1O se indican aproximadamente los límites de transmisión de algu-
nos disolventes usuales, referidos a un camino óptico de 1 cm. Los disolventes más
usados son quizás agua, etanol del 95% , ciclohexano y 1,4-dioxano.
TABLA 2-1 O Límites aproximados de transmisión en el ultravioleta de

algunos disolventes usuales , referidos a un camino óptico de 1 cm t
Longitud de Umgitud de
onda límite, onda limite,
Disolvente nm Disolvente nm
Agu a 200 Cloroformo 245

Etanol del 95 % o 100% 195 Tetracloruro de carbono 262
Metano! 195 Benceno 280
Éter dietilico 205 Xileno 290
Alcohol isopropílico 210 Piridina 305
Ciclohexano 212 Acetona 328
l sooctano 215 Disulfuro de carbono 375
1,4-Dioxano 220
t D atos según R. P. Baum an, «Absorption Spectroscopy», p. 173, Wiley, New York, 1962,
y H . B. Kl even s y J. R. Plah, J. Am. Ch em. So c., 69 : 3055 (1947) .
148 Espectrofotometr/a ultravioleta v visible
El agua es preciso que sea destilada o desionizada , pero pequeñas cantidades de
impurezas residuales no presentan normalmente absorción significativa en la zona
ultravioleta accesible. Las disoluciones de etanol del95 % no necesitan purificación y
suele ser el disolvente más usado cuando se requiere un disolvente polar. El etanol
absoluto suele contener benceno, para comprobarlo se mide su transmitancia a
250 nm frente a un blanco de agua.
El ciclohexano puede conseguirse de calidad espectrográfica. Las posibles
impurezas aromáticas se eliminan haciéndolo pasar a través de una columna de sílica
gel activada. Es un buen disolvente para compuestos aromáticos y, en especial, para
los aromáticos polinucleares. La estructura fina de los compuestos aromáticos tiende
a mantenerse en disoluciones de ciclohexano, y no suele aparecer cuando se usan
di solventes más polares .
El dioxano es un disolvente de constante dieléctrica baja, adecuado para cierta
clase de compuestos, pero suele contener benceno o generar peróxidos. Puede
purificarse destilándolo sobre sodio. El benceno puede eliminarse mediante la
adición de metano! y posterior destilación para separar el azeótropo benceno-meta-
no!.+
Al elegir un disolvente, debe tenerse en cuenta que no deben existir interaccione s
soluto-disolvente. Por ejemplo, no debe realizarse el espectro de un aldehido en
disoluciones alcohó licas .
Finalmente, es preciso tener en cuenta la posibilidad de reaccionesfotoquímicas
por efecto de la radiación ultravioleta. Puede comprobarse si existen o no siguiendo la
variac ión de la absorbancia con el tiempo de una muestra expuesta a la luz ultravio-
leta y la de otra muestra análoga no expuesta a dicha radiación.
2-4 APLICACIONES
A continuación se indican las aplicaciones más importante s de la espectrofotometría

ultravioleta y visible, asi como una breve de scripción de cada una. sin pretender hacer
un estudio exhaustivo ni una descripción minuciosa. Para una descripción más
detallada pueden consultarse las referencias que se dan al final del capitulo.
2-4A Análisis cuantitativo

El análisis cuantitativo es, sin duda. la aplicación simple más frecuente de la espec-
trofotometría ultravioleta y visible . Muchas sustancias que no absorben en esta
región pueden a menudo determinarse en forma de un derivado adecuado. como por
ejemplo. la combinación de un compuesto orgánico con un ion metá li co en disolu-
ción. En general. los picos de absorción anchos que aparecen en esta región contri-
+ R . A . Friedel y M. Orchin. « Ultra\·iolet Spect ra of Aromatic Compounds ». 2• ed .. Wiley. New

York. 195 8.
bu yen a la exactitud del análisis , y la intensidad de las bandas de absorción contribu-

ye a la sensibilidad del método de análisis. (El valor de la absortividad molar e suele
ser del orden de 1O• o 10 5 , lo que permite determinar concentraciones en un intervalo
de 1o-• a 10- 6 M.) A un que la exactitud de un método espectrofotométrico
normalmente es menor que la obtenida con los métodos clásicos, volumétricos y
gravimétricos, la mayor sensibilidad y rapidez hacen que muchas veces se elija un
método espectrofotométrico. La exactitud de un método espectrofotométrico varía
según el instrumento usado (as í como con el procedimiento); si bien el error in stru-
mental suele ser de aproximadamente± 1% , trabajando en condiciones favorables , el
error puede disminuir hasta ± 0 ,2% .
La ley de Beer, que ha sido comentada en la sec. 1-5 es la base de la aplicación de
lo s métodos espectrofotométricos al análisis cuantitati vo. Un requisito previo al
análisis cuantitativo de una mezcla es disponer del espectro correspondiente a cada
una de las sustancias pura s. E 1espectro observado de una mezcla ha de considerarse ,
en su totalidad , en función de las bandas de los componentes puros. Si aparece una
banda que no puede ser identificada, probablemente se debe a la pre sencia de otro
componente que contribuirá en una cantidad de sconocida a cualquiera de la s bandas
elegidas para realizar la medida.
Ocasionalmente, en particular antes de publicar un espectro o un método
espectrofotométrico, debe comprobarse la exactitud del espectrofotómetro. Debe
calibrarse la escala de longitude s de onda y la de transmitancias (o absorbancias ),
aunque la exactitud de esta última depende del envejecim iento del fotodetector. La
mejor manera de realizar esta comprobación es registrar el espectro de una disolu-
ción patrón, preferentemente a distintas concentraciones. Se han estudiado distin tas
disoluciones patrón. Quizás el cromato de potasio sea la mejor; 4 m g de cromato de
potasio en 100 mi de hidróxido de potasio 0 ,05 M dan dos máximos de absorción a
275 y 375 nm , con valore s de e de 3675 y 4815 respectivamente .
. 2-48 Análisis cualitativo

Si bien el espectro de absorción en la región ultravioleta y visible puede ser útil a
veces para la identificación cualitativa, en general el espectro infrarrojo es más útil
para este fin, debido a que los espectros ultravioleta y visibles de la mayoría
de sustancias, tanto orgánicas como inorgánicas, son relativamente anchos y poco
característicos , mientras que los espectros infrarrojo son mucho más detallados . La
certeza en la identificación está directamente relacionada con el número total de
identidades espectrales, como por ejemplo, puntos de inflexión, máximos y mínimos,
que existan entre la sustancia investigada y una sustancia patrón de composición
conocida. A partir de los espectros realizados en fase vapor, pueden obtenerse
detalles espectrales adicionales (características vibracionales y rotacionales) , pero
dichos espectros son mucho má s engorrosos de realizar que los obtenidos en disolu-
ción.
El benceno es una de las pocas sustancias orgánicas que posee un espectro
ultravioleta muy característico. Una disolución diluida de benceno presenta, alrededor de
250 nm , cuatro máximos de absorción agudos e intensos, además de otros máximos

de menor intensidad (fig. 2-38). Por ello el espectro ultravioleta suele usarse para
especificar la pureza de algunas sustancias, tales como el alcohol absoluto o el ciclo-
hexano , en las que es importante controlar su contenido en benceno. El benceno
puede también identificarse fácilmente en mezclas de bencenos sustituidos, por
ejemplo, tolueno y etilbenceno.
La intensidad de absorción de un compuesto en disolución , expresada como su
absortividad molar e, es a veces un criterio adicional de identificación útil, especial-
mente si la intensidad es excepcionalmente alta. Sin embargo, si quieren evitarse
resultados que induzcan a error, debe disponerse de compuestos de alto grado de
pureza. Tal como puede verse en las tablas 2-2, 2-5 y 2-6 , las intensidades de
absorción de los compuestos orgánicos son muy variadas. Así , aunque la acetona
absorbe a 272 nm y el fenol a 274 nm , sus bandas de absorción no pueden confundir-
se puesto que la emáx del fenol es de aproximadamente 1450 mientras que la de la
acetona es sólo de 17.
Entre las relativamente pocas sustancias inorgánicas que presentan espectros de
absorción ultravioleta y visible característicos, podemos señalar las disoluciones de
los iones trivalentes de las tierras raras. En la fig. 2-39 se muestra el espectro de
absorción del Ho 2 0 3 disuelto en HC10 4 1 M. Las distintas tierras raras suelen tener
espectros lo suficientemente diferentes como para que sea posible el análisis
cualitativo y cuantitativo de mezclas que contienen varias tierras raras .
200
100
230 250
Longitud de onda
FIGURA 2-38 Espectro de absorción ultravioleta del benceno en etanol del 95 % .
(Según D. H. Williams y J. Fleming, «Sp ectroscopic Methods in Organic Chemistry»,
p. 28, McGraw-Hi/1 Book Company. Ne w Yo_rk, 1966. Reproducido con permiso. )
Espectrofotometr/a ultravioleta y visib le 1 51
J~:itiJG~1L: I :A: l
220 250 300 350 400 450 500 550 600 650
FIGURA 2-39 Espectro de absorción de 0,2 g de Hop 3, disuelto en 10 mi de HCI0 4
700 750
1M, medido en una cubeta de 1 cm con un espectrofotómetro Cary modelo 14. (Según C.
V. Banks y D. W. Klingman, Anal. Chim. Acta, 15: 356 1956. Reproducido con
permiso.)
2-4C Determinación de estructuras

Los espectros de absorción ultravioleta y visible son datos valiosos en la iden-
tificación de grupos cromóforos y en la identificación de estructuras de compuestos
orgánicos; sin embargo, el disponer sólo de estos espectros no permite llegar a
ninguna conclusión, sino que deben usarse en combinación con espectros infrarrojo y
de rmn y cualquier otra información analítica, física o química, de que se disponga.
Por ejemplo, para confirmar la presencia de un grupo carbonilo no basta con la
aparición de una banda en la región de 270-290 (con un valor de e de aproxima-
damente 50) , ya que si bien puede ser debida al grupo carbonilo, podría tratarse
también de una impureza debida a una sustancia con un sistema conjugado. Así , la
presencia de sólo un 0 ,25% de una impureza con una intensidad de absorción alta
(e ""' 20 000) puede dar la impresión de una banda de carbonilo y conducir a deduc-
ciones erróneas.
La principal utilidad de los espectros de absorción ultravioleta y visible, en lo
referente a la elucidación de estructuras, es el decidir entre las posibles estructuras
una vez establecidos ya, por otros métodos, los grupos funcionales existentes y el
esqueleto de la molécula, o el decidir, no la presencia o ausencia de un grupo
funcional , sino sus posiciones relativas. Vamos a ilustrarlo con un ejemplo.
Ejemplo 2-8 El óxido de mesitilo, producto de autocondensación de la

acetona, está formado por dos isómeros , I y II. Uno de los isómeros presenta un
máximo de absorción a 23 5 nm con un valor de E de 12000 mientras que el otro no
presenta absorbancia significativa por encima de 220 nm ¿Cuál de los dos
isómeros es el que absorbe a 235 nm?
CHz-C-CH2-COCH3 CH3-CH=C-COCH3
1 1
CH3 CH3
11
Respuesta El isómero II absorbe a 235 nm , puesto que posee los dobles enlaces
conjugados. mientras que el isómero I , con dos dobles enlaces no conjugados,
debe absorber a longitudes de onda más cortas.
2 -40 Estudios cinéticos
La espectrofotometría ultravioleta y visible ha encontrado también una amplia

aplicación como instrumento analítico para estudios cinéticos. La espectrofotometría
es especialmente adecuada para el problema básico de la cinética. la determinación
de la concentración en función del tiempo. Es preciso. por supuesto. que los reac-
tivos y los productos presenten espectros suficientemente distintos como para que la
variación pueda seguirse fácilmente y que las sustancias absorbentes presenten
absorciones intensas.
Muchos de los espectrofotómetros con registro. permiten un registro continuo de
espectros en función del tiempo simplemente desconectando o desactivando el motor
de accionamiento de las longitudes de onda y permitiendo que el gráfico se desplace
al mismo tiempo que la longitud de onda se sitúa en un valor prefijado. Esto es
particularmente apropiado para el estudio de reacciones moderadamente rápidas.
Los estudios cinéticos permiten analizar ciertas sustancias cuando el problema no
permite otro tratamiento: por ejemplo. sustancias que presentan una influencia catalí-
tica medible sobre una reacción química. pueden determinarse, en base a esta
influencia. en concentraciones extraordinariamente bajas. o bien. dos o más
sustancias con propiedades químicas y físicas similares. pueden presentar una
diferencia suficiente en sus velocidades de reacción como para que las medidas de la
velocidad proporcionen un método para distinguir las sustancias y permitir su análisis
cuantitativo .
2 -4E Determinación de constantes de disociación de ácidos y bases
Si el grupo ácido o básico de un compuesto forma parte de un cromóforo. el espectro

de la sustancia será función del pH de la disolución y. a partir de los espectros
obtenidos a distintos valores de pH. será posible determinar la constante de disocia-
ción. Por ejemplo. la disociación de un ácido. HA. en un disolvente. SH. puede
representarse mediante
(2-12 )
donde SH 2+ es el protón solvatado. La constante de disociación del ácido, Ka, viene

dada por
[_-\-][SHz+]
(2-13 )
[HA]
Para determinar K. sólo es necesario medir la concentración del ácido, HA, y la de la

base conjugada, A-, espectrofotométricamente y determinar la concentración (o
actividad) de la especie SH/ con un pH metro. Para poder determinar K . es
necesario registrar un mínimo de tre s espectros: uno a un pH próximo al pKa del
ácido, otro a un pH más ácido. 2 o más unidades de pH por debajo del pKa, y un
tercero a un pH más básico, 2 o más unidades de pH por encima del valor del pKa. El
espectro obtenido a un valor de pH de al menos 2 unidades por debajo del pKa nos
permite medir la forma ácida (HA) con menos de un 1% de interferencia de la forma
básica (A- ), y viceversa. La existencia de un punto isosbéstico (ver se c. l-5D) indica
que ei equilibrio implica la existencia de sólo dos especies absorbentes. Para un
estudio más detallado deben consultarse la s referencias que se dan al final del
capítulo.
2 · 4F Determinación de pesos moleculares
Otra aplicación útil de la espectrofotometría es la determinación de pesos molecu-

lares. Si un compuesto forma un derivado con un reactivo que presenta una absorción
característica en otra zona del espectro, la absortividad molar del derivado , E, suele
ser aproximadamente la misma que la del reactivo. Por ejemplo, muchos picratos de
ami na presentan máximos a 3 80 nm con E = 13 400, que es constante (en un 1%) e
idéntica a la del ácido pícrico, ya que la absorción se debe al grupo picrilo. De esta
forma , puede determinarse el peso molecular de un determinado picrato de amina
disolviendo una cantidad pesada del derivado sólido en un volumen conocido de
disolvente (normalmente etanol) y midiendo su absorbancia a 380 nm. Según la ley
de Beer,
A= abe (1-39)
donde e es la concentración en gramos por litro y la absortividad a se calcula en litros

por gramo y centímetro. El peso molecular puede calcularse a partir de
f = a x peso molecular (2-14)
puesto que E es conocido e igual a 13 400. Este método implica la presencia de un

sólo grupo amino y que el grupo amino no presente una absorción apreciable a 380
nm. En caso contrario, deben hacerse las correcciones adecuadas.
2-4G Determinación de fórmulas empíricas
Son varios los métodos espectrofotométricos que se usan para la determinación de la

relación molar de los componentes en un complejo. Uno de los métodos más cono-
cidos es el de método de las variaciones continuas de Job. que permite determinar

los valores de los coeficientes m y n en el equilibrio
(2-15)
El método se basa en las medidas de absorbancia, a una longitud de onda adecuada.

de disoluciones en las que se mantiene constante la concentración de A más B y se
varía la relación entre moles de A y moles de B. La representación de la absorbancia
en función de la fracción molar de A o de B presenta un máximo que permite deter-
minar la estequiometría del complejo.
2-4H Valoraciones fotométricas
Los métodos fotométricos y espectrofotométricos pueden usarse para la determina-

ción del punto final de una valoración en la que tiene lugar un cambio de color y. si se
dispone de material adecuado. puede trabajarse también en la región ultravioleta. En
esta técnica. el recipiente de valoración se coloca directamente en el camino óptico
del instrumento (ello normalmente implica la modificación del compartimiento de la
muestra). Se determina la absorbancia de la disolución después de sucesivas adicio-
nes de valorante y se representa la absorbancia en función del volumen de valorante.
En la fig. 2-40 se representan el tipo de curvas obtenidas en las valoraciones
fotométricas. Si la reacción es completa. la curva de valoración consiste en dos rectas
que se cortan en el punto final. de forma similar a las obtenidas en las valoraciones
amperométricas y conductimétricas. Si la reacción no es completa. se observa una
curvatura en la región próxima al punto final. pero el punto final puede determin¡me
por extrapolación de los dos tramos rectilineos hasta su punto de intersección. Este
método presenta la ventaja de no requerir la adición de pequeños volúmenes de
reactivo en las proximidades del punto final. La fig. 2-40a representa una curva de
valoración en la que el valorante es la única especie absorbente. como la valoración
de arsénico (III) con bromato-bromuro. midiendo la absorbancia a una longitud de
onda en la que el bromo absorbe. La fig. 2-40b es típica de un sistema en el que la
única especie absorbente es el producto de la reacción. como la valoración de cobre
(II) con ácido etilendiamintetraacético (EDTA). La fig. 2-40c representa el caso en
que la sustancia a valorar es la única especie absorbente. como por ejemplo la
valoración de la p-toluidina en butano! con ácido perclórico a 290 nm.
Las valoraciones fotométricas presentan varias ventajas sobre el análisis
espectrofotométrico directo. ( 1) Pueden determinarse sustancias no absorbentes.
puesto que sólo es necesario que una de las tres especies. reactivo. sustancia a valorar
o producto de la reacción. sea absorbente. (2) La presencia de otras sustancias que
absorban a la longitud de onda analítica no causa necesariamente interferencia.
puesto que sólo importa la rariación de absorb ancia. Sin embargo. la absorbancia de
la especie extraña no debe ser demasiado intensa ya que ello implicaría que todas las
lecturas de absorbancia se acumularían en una zona estrecha en el extremo de la
/
1--------r-- f-- Punto final
1!/
Volumen de valorante
(a)
/
- -/1:
/.
/
-::;oo-----
Punto final
Volumen de ,·alorante
(b)
Punto final
Volumen de valorante
(e)
FIGURA 2-40 Curvas de valoración fotométrica típicas.
escala. (3) La exactitud obtenida suele ser del 0,5% o superior, puesto que al
construir los tramos rectos de la curva de valoración, se hace el promedio de las
lecturas de absorbancia de varios puntos.
1 56 Espectrofotometda ultravioleta y visible
2-41 Otras aplicaciones
Otras aplicaciones de la espectroscopia ultravioleta y visible incluyen estudios de

enlaces de puente de hidrógeno y otras asociaciones, determinación de configura-
ciones estéricas, diferenciación entre isómeros cis y trans , detección de formas tautó-
meras y estudio de iones y radicales libres. Para una información más detallada
pueden consultarse las referencias que se dan al final del capítulo.
2-5 ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA

DE VACÍO
El ultravioleta de vacío, o ultravioleta lejano, comprende la región del espectro desde

200 nm hasta O, 1 nm ( 1 Á) , o desde el ultravioleta próximo hasta los rayos X.
Aunque existen numerosos estudios en esta región , la espectrofotometria ultra-
violeta de vacío no ha llegado aún a ser una técnica analítica, debido principalmente a
problemas de instrumentación y a la no existencia de instrumentos comerciales.
Puesto que todas las moléculas absorben en esta región, es de esperar que vaya
aumentando la importancia de los estudios moleculares en esta región .
2-SA Teoría
Mientras que las transiciones electrónicas responsables de absorción en la región del

ultravioleta próximo son del orden de 4 eV, las transiciones en el ultravioleta de vacío
son del orden de 6 eV. Puesto que el potencial de ionización de muchas moléculas es
de aproximadamente 6 eV, la mayor parte de transiciones que se observan en el ultra-
violeta de vacío son desde el estado fundamenta l de la molécula hasta el del ion
molecular. Estas transiciones se denominan transiciones de Rydberg.

Las dos dificultades instrumentales principales cuando se quiere trabajar en el
ultravioleta de vacío son la absorbancia debida al aire y el no disponer de sustancias
transparentes para los sistemas ópticos. El hecho de que la mayor parte de gases
absorban en esta región obliga a trabajar con un equipo que permita evacuar el aire o
pasar una corriente de un gas que absorba relativamente poco. De los componentes
de la atmósfera, el oxígeno es el más molesto. El oxígeno empieza a absorber cerca de
19 5 nm , presenta un máximo de absorción alrededor de 145 nm y absorbe , con
valores variables, hasta 0,2 nm. El nitrógeno empieza a absorber cerca de 145 nm y
por ello se usa una corriente de nitrógeno cuando se trabaja a longitudes de onda
mayores de 145 nm , nitrógeno que debe estar libre de oxígeno y de vapor de agua. El
agua empieza a absorber alrededor de 17 8 nm. Los gases nobles presentan, excepto a
longitudes de onda muy cortas, absorbancias relativamente bajas. Por ejemplo, el
argón empieza a absorber cerca de 107 nm, el neón alrededor de 7 4 nm y el helio a
unos 60 nm. Cuando se trabaja con espectrofotómetros de ultravioleta de vacío lo
mejor es hacer pasar una corriente de helio.
Espectrofotometría ultravioleta v visible 157
El otro problema importante de instrumentación cuando se trabaja en esta región

es la escasez de sustancias transparentes para usar en los sistemas ópticos. El cuarzo,
la fluorita y el fluoruro de litio se usan para la fabricación de accesorios ópticos en el
ultravioleta lejano. El cuarzo cristalino absorbe fuertemente por debajo de 185 nm
por lo que no puede usarse ni como prisma ni como lentes para trabajar por debajo de
esta longitud de onda. El cuarzo fundido, que es amorfo, puede usarse hasta cerca de
170 nm. El fluoruro de calcio (fluorita) y el fluoruro de litio son los únicos materiales
adecuados para prismas y lentes a longitudes de onda más cortas, a pesar de que su
límite de transmitancia es de 100 nm. Se han realizado algunos trabajos por debajo de
100 nm, usando películas delgadas de monóxido de silicio, aluminio y berilio, pero
todavía no se ha desarrollado totalmente este tipo de técnicas.
2-58 Instrumentación
FUENTES DE ULTRAVIOLETA DE VACÍO

El disponer de una buena fuente de radiación en el ultravioleta de vacío ha sido
siempre un problema. No existe una fuente de radiación intensa y continua que
abarque toda la región del ultravioleta de vacío, pero existen varias fuentes de
radiación que son adecuadas para distintas zonas del espectro. La mejor en una
fuente tipo Lyman, que usa una descarga de alto voltaje a través de un capilar de
aproximadamente 1 mm de diámetro interno lleno de hidrógeno o de un gas noble. La
lámpara de descarga de hidrógeno emite de forma continua hasta cerca de 165 nm, y
para longitudes de onda menores da un espectro molecular con muchas líneas que
tiene poca utilidad. En la fig. 2-41 se representan los espectros de emisión del
H2 Inicio del espectro de rayas
1e
:~ A
'§
.,
.,
'O
'O
]"'
e
2
.=¡
200
FIGURA 2-41 Espectro de emisión continua del hidrógeno y los gases nobles. (Según
W. C. Price, p. 59 in H. W. Thompson (ed.), «Advances in Spectroscopy » Vol. 1, John
Wiley and Sons, Inc., New York, 1959. Reproducido con autorización.)
hidrógeno y de los gases nobles. La radiación continua emitida por el helio, desde 60
hasta 100 nm es poco estable para poder usarse en estudios espectrofotométricos,
pero las del resto de gases nobles dan resultados satisfactorios. La descarga de argón
en tubo capilar cubre una ancha zona comprendida entre 107 y 165 nm y a partir de
esta longitud de onda es útil la lámpara de descarga de hidrógeno, pero en la región
intermedia las lámparas de criptón y xenón proporcionan mayor intensidad.
MONOCROMADORES EN EL ULTRAVIOLETA DE VACÍO
En la zona de longitudes de onda más largas del ultravioleta de vacío, hasta unos
125 nm, los instrumentos más usados, a causa de su bajo coste y facilidad de cons-
trucción, son los de prismas. Sin embargo, la luz dispersada constituye un problema
serio en el ultravioleta de vacío ya que la radiación dispersada por la cara de un prisma
puede ser de mayor intensidad que la radiación dispersada refractivamente. Un buen
método de eliminar esta luz dispersada es usar un espejo oscilante y sincronizar el
detector a la frecuencia de vibración del espejo, de modo que discrimine la radiación
dispersada.
Cada vez se usan más las redes de difracción cóncavas. Un problema de las redes
de difracción es la disminución de su poder reflectante a medida que disminuye la
longitud de onda. El platino y el aluminio son los mejores reflectores en esta región y
se han preparado buenas redes de difracción con superficies de aluminio platinado.
Una película de un grosor de un cuarto de longitud de onda de MgF 2 mejora mucho la
reflectividad de los espejos.
El espectrofotómetro de ultravioleta lejano Beckman modelo DK-A es un
ejemplo de aparato comercial de prisma y el espectrofotómetro de ultravioleta de vacío
Baird es un ejemplo de aparato comercial de red. Ambos se utilizan hasta unos 160
nm. La McPherson Instrument Corporation comercializa varios monocromadores de
ultravioleta de vacío.
DETECTORES DE ULTRAVIOLETA DE VACÍO
E l detector más adecuado en la región del ultravioleta de vacío es un fotomultipli-

cador con una ventana de cuarzo fundido, que puede usarse hasta cerca de 160 nm.
Cuando se trabaja a longitudes de onda más cortas, suele recubrirse la ventana con un
material fluorescente , tal como el salicilato de sodio. El salicilato de sodio con fós-
foro absorbe la radiación de longitud de onda corta y emite radiación de mayor lon-
gitud de onda, que es detectada por el fotomultiplicador.
Actualmente existen contadores Geiger fotosensitivos que son sensibles en la
región comprendida entre 105 y 250 nm. Al filamento central que actúa como ánodo,
dentro de un cátodo fotosensitivo cilíndrico, se le aplica un potencial positivo de
aproximadamente 1 kV y, después de llenar el cilindro con un gas ionizable, tal como
una mezcla de helio y formiato de etilo, se cierra con una ventana de fluoruro de
litio. Los fotones que entran en el tubo ionizan el gas que llena el cilindro y son ace-
lerados hacia el electrodo correspondiente, chocando con otras moléculas de gas y
produciendo más iones. Debido a esta amplificación interna, la señal de salida es re-
lativamente grande y fácilmente medible. Este tipo de tubos ha sido usado para estu-
diar el espectro solar desde los cohetes y cada vez encontrará más aplicaciones en el
laboratorio.
2-5C Aplicaciones
Aunque todavía se ha hecho muy poco en el ultravioleta de vacío desde el punto de

vista de sus aplicaciones analíticas , es de esperar que , cuando se disponga de instru-
mentos y técnicas adecuados , irán aumentando tales aplicaciones. A continuación se
da una lista breve de las posibles futuras aplicaciones.
El análisis de sustancias que no pueden determinarse espectrofotométrica-

mente de otra manera. Por ejemplo, el metano absorbe sólo cerca de 135 nm, el
octano cerca de 170 nm y el ciclopropano cerca de 190 nm. Existen también
algunos compuestos no saturados que sólo presentan transiciones electrónicas en
el ultra,rioleta lejano; como ejemplos podemos citar los cianuros alifáticos ( nitri-
los) y las sulfonas, además del etileno y polienos no conjugados.
2 La determinación del contenido total de olefinas de una muestra. Jones y
Taylor, t que han publicado uno de los pocos estudios analíticos que existen en
el ultravioleta lejano, han observado, entre otras cosas, que los espectros de los
hidrocarburos no saturados presentan bandas de absorción intensas , anchas y
casi sin estructura, ideales para determinar el contenido total en olefinas . Otras
sustancias dan también espectros característicos adecuados para su identifi-
cación.
3 Estudios sobre la estructura electrónica. Además del problema general de co-
rrelación entre espectro y estructura, pueden estudiarse otros problemas específi-
cos, como isomerizaciones cis-trans fotoquímicas. También pueden ser interesan-
tes las transiciones de Rydberg de los electrones no enlazantes y los efectos de
distintos sustituyentes.
4 Determinación de potenciales de excitación e ionización y energías de diso-
ciación.
5 Estudios fotoeléctricos de metales en fase vapor.
6 Determinación de secciones de fotoionización ( absortividades) y sus correla-
ciones con las predicciones mecánico-cuánticas teóricas.
El futuro del ultravioleta de vacío es prometedor y la investigación , unida a la ex-

ploración del espacio, ha de favorecer la tecnología necesaria para aplicacione s en el la-
boratorio.
L. C. Jones. Jr.. y J. W. T aylos. Anal. Chem., 27:228 ( 1955).
EJ.ERCICIOS
2-1 (a )Explicar por qué, en las regiones visible y ultravioleta, los espectros de diso-
luciones suelen presentar pocas bandas anchas, mientras que, en la región infrarro-
ja, estas mismas disoluciones tienden a dar muchas bandas agudas. (b) Explicar por
qué el espectro ultravioleta del benceno en fase vapor presenta muchas bandas agu-
das y el mismo espectro del benceno disuelto en alcohol carece de estructura fina y
presenta sólo bandas anchas.
2-2 Calcular la concentración molar mínima de soluto que puede determinarse es-
pectrofotométricamente. Suponer que la absorbancia mínima que puede ser medida
con exactitud es 0,01 y que el camino óptico de la cubeta es de 10 cm.
Resp.: w-s M
2-3 Predecir, a partir de las reglas de Woodward, la longitud de onda correspon-
diente al máximo de absorción para cada uno de los siguientes compuestos:
1
A. eO 1
H
(a) (b)
A.cO
(e )
Resp.: (a) 273 nrn (el valor observado es 275 nm); (b) 244 nrn (observado,
242 nm); (e) 343 nm (observado, 355 nm).
2-4 La estructura de la a-ciperona es una de estas dos:
(a) (b)
Espectrofotometrfa ultravioleta y visible 161
La a-ciperona presenta un máximo de absorción en etanol de 25 2 nm. U san do las

reglas de Woodward, indicar cuál de las dos estructuras está de acuerdo con el espec-
tro observado.
Resp.: La estructura (a) debe absorber, según calculo, a 227 nm y la(b) a 254 nm.
La estructura correcta es pues la (b).
2-5 Usando las reglas de Woodward, predecir el máximo de absorción para el
siguiente compuesto:
d): o
Resp.: 349 nm
2-6 Una disolución I0- 3 M de Cu(II) en HC l concentrado es de color azul-verdoso

pálido, mientras que el Cu(II) en amoniaco concentrado es de un color azul-violeta
intenso. ¿Cuál es el mecanismo de absorción responsable de la coloración de las
disoluciones del ion cúprico? (b) Explicar por qué, en medio amoniacal, las diso-
luciones de Cu(II) son de color azul-violeta intenso y en medio clorhídrico son de
color azul-verdoso pálido. (e) ¿Cuál es aproximadamente la longitud de onda adecua-
da para un análisis cuantitativo de una disolución de ion cúprico en disolución amo-
niacal con un espectrofotómetro?
Resp.: (e) Aproximadamente 580 nm.
2-7 La hemoglobina, una porfirina que contiene hierro y existe en la sangre, es de
color rojo-púrpura. Predecir la zona de longitudes de onda, en el espectro visible,
donde debe absorber la hemoglobina.
Resp.: Entre 490 y 560 nm. Para su análisis suele trabajarse a 555 nm.
2-8 Al analizar espectrofotométricamente el colesterol, según la reacción de Lie-

berman-Burchard, da una disolución de color verde. Predecir aproximadamente la
longitud de onda adecuada para el análisis espectrofotométrico.
Resp.: Cerca de 650 nm. En la práctica, suele trabajarse a 625 nm.
2-9 ¿Por qué la mayor parte de fotómetros y espectrofotómetros dan lectura lineal
en la escala de transmitancias más que en la de absorbancias?
2-10 Explicar las ventajas y desventajas de la espectrofotometría en la región del
espectro correspondiente al ultravioleta de vacío.
2-11 Al disolver 5 mg de un determinado picrato de amina en 100 ml de etanol se
observa una absorbancia, medida en una cubeta de 2 cm a 380 nm, de 0,415 . ¿Cuál
es el peso molecular del picrato de amina?
2-12 Discutir las ventajas de un espectrofotómetro de doble haz frente a uno de haz
simple e indicar las dos formas principales de conseguir un haz doble.
REFERENCIAS
A NIVEL DE INTRODUCCIÓN
1 EWING, G. W.: «Instrumental Methods of Chemical Analysi s», 3d ed., McGraw-

Hill, New York, 1969.
2 WILLARD, H. H., L. L. MERRITT, JR., and J. A. DEAN: «Instrumental Me-
thods of Analysis», 4th ed, Van Nostrand, New York, 1965 .
3 SILVERSTEIN, R. M. and G. C. BASSLER: «Spectrometric Identification of
Organic Compounds», 2d ed., Wiley, New York, 1967.
A NIVEL INTERMEDIO
4 DYER, J. R.: «Applications of Absorptiun :spectroscopy of Organic Compounds» ,

Prentice-Hall , Englewood Cliffs, N.J., 1965.
5 BANWELL, C. N.: «Fundamentals of Molecular Spectroscopy», McGraw-Hill,
New York, 1966 .
6 SCHWARZ, J. C. P. (ed.): «Physical Methods in Organic Chemistry», Oliver&
Boyd, Edi nburgh, 1964.
7 STROBEL, H. A.: «Chemical Instrumentation», Addison-Wesley, Reading,
Mass. , 1960.
8 WILLIAM S, D. H., and I. FLEMING, «Spectroscopic Methods in Organic Che-
mistry», McGraw-Hill , New York, 1966 .
9 KOLTHOFF, I. M., and P. J. ELVING (eds.): «Treatise on Analytical Chem.»,
pt. I, vol. 5, Wiley, New York, 1964. El capitulo de A. Schil t y B. Jaselskis trata
muy adecuadamente la instrumentación.
10 FREEMAN, S. K.: «lnterpretative Spectroscopy», Reinhold, New York, 1965 .
A NIVEL AVANZADO
11 JAFFÉ, H. H. and M . ORCHIN: «Theory and Applications of Ultraviolet Spec-

troscopy», Wiley, New York, 1962.
12. SANDORFY, C.: «Electronic Spectra and Quantum Chemistry», Prentice-Hall ,
Englewood Cliffs, N.J., 1964.

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CAPÍTULO 2

Número de ondas, cm- •

1 1l~ 1T · n ___________._ 1T•

500 600 700

2-1 TEORÍA DE LA ABSORCIÓN

2-1 A Estructura fina vibracional-rotacional del espectro electrónico

Tal como ya se indicó en la sección 1-3 y en el diagrama de niveles de energía de la

450 500 550 600

La resolución de los niveles vibracionales del espectro de una sustancia en diso-

2-1 B Tipos de bandas de absorción

Para poder comprender e interpretar los espectros electrónicos de absorción es pre-

donde P es la probabilidad de la transición y A es la superficie de la sección trans-

BANDAS DE ABSORCIÓN 11"--+ 1r• y n--+ 1r•

Es conveniente tratar simultaneamente las transiciones rr - rr* y las n - rr* puesto

En la tabla 2-1 se indican aproximadamente las longitudes de onda correspon-

tABLA 2-1 Máximos de absorción correspondientes a

Grupo funcional (absorción intensa) (absorción débil)

""C= C/ 170 No absorbe

""/ C=O 166 280

""C= N/ 190 300

asociado a su átomo y un aumento en la electronegatividad de éste implica que los

TABLA 2-2 Máximos de absorción y absortivi-

-C=C- 170 16 000

conjugación desplaza la banda intensa correspondiente a la transición rr - rr* hasta el

Cromóforos Son grupos de átomos responsables de bandas de absorción en las

TABLA 2-3 Máximos de absorción aproximados para transicio-

nes rr - rr* y n - rr* en algunas moléculas que contienen oxígenot

-C=O 166 280

-C= C-C=O 240 320

Ü=O =Ü 245 435

Puesto que los desplazamientos de los máximos de absorción y las variaciones en

Efecto Batocrómico, o desplazamiento hacia el rojo Es el desplazamiento del

Efecto Hipsocrómico, o desplazamiento hacia el azu l Es el desplazamiento

Influencia del disolvente en las transiciones rr _, rr* y n _, rr* Las transi-

2 Si los dos cromóforos están conjugados, separados por un enlace sencillo.

Reglas empíricas para poder predecir la longitud de onda de las bandas de

Dienos conjugados y trienos cíclicos La absorción observada en los dienos

170 nm 2 17 nm 175 nm (prohibid a)

" '~--+o+-<-+---'-'' e 7Tt~/

Se asigna el valor base de 214 nm al dieno de cadena abierta o al de dos dobles

sistema con dobles enlaces.

enlace que parta del anillo (se representa

Ejemplo 2-1 Calcular la longitud de onda de absorción del colesta-2,4,6-trieno:

Respuesta El compuesto puede considerarse como un dieno homoanular o

Dieno homoanular 253 nm

Experimentalmente la absorción se observa a 306 nm .

Cetonas y aldehídos no saturados Las bandas de absorción rr ~ rr* de un

Se asigna el valor base de 215 nm a la cetona a,/3-insaturada y el de 21 Onm al

5 Se suman 18 nm por un sustituyente alquilo en y o posiciones más lejanas .

Ejemplo 2-2 Calcular la longitud de onda de absorción del ergosta-4.6.8 .(9).

Cetona base 215 nm

Experimentalmente la absorción se observa a 388 cm . con E = 12 300.

+ Scott. op. cit., o Ref. 8. p. 23.

TABLA 2-4 Correcciones debidas

Anillos bencénicos sustituidos El benceno presenta una banda de absorción

- NH/, tiene prácticamente el mismo espectro que el benceno, el espectro de la

TABLA 2-5 Máximos de absorción en el ultravioleta

Banda primaria Banda secundaria

-H 203,5 7400 254 204

t Según J. R. Dyer, <<A pplications of Absorption spectroscopy of

Se asigna el valor base 250 nm cuando X = H: 246 nm cuando X= alquilo o

4 Se suman 7 nm cuando Res un sustituyente -OH 1 -OMe o O-alquilo en

Existen reglas para otros sustituyentes. +