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Evaluación del efecto de las auxinas en el crecimiento de la lechuga (Lactuca Sativa)

Palacios-Morales, L. Pabón-Pabón, Y.
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RESUMEN
Se evaluó el crecimiento de la lechuga (Lactuca sativa) bajo el efecto del ácido indolacético.
Para esto, se usaron 30 plantas por cada tratamiento, para las plantas que estaban en el
tratamiento 1 se regaron únicamente con agua; las del tratamiento 2 se les aplicó ácido
indolacético a una concentración de 500 ppm el cual fue aplicado de manera foliar una vez
por semana en las mañanas. Para poder si hay o no efecto de las auxinas sobre el crecimiento
de la lechuga, se tuvieron en cuenta algunas variables como el peso seco y peso fresco,
contenido de agua, y concentración de clorofilas y tamaño de las raíces.
MARCO TEORICO
Hormonas vegetales:
Las Hormonas son moléculas orgánicas que se originan en una región de la planta y se
trasladan a otra con el fin de iniciar, acelerar o desencadenar una serie de reacciones en los
procesos vitales. Estas son usadas principalmente para acelerar el crecimiento de las plantas
(Zapata, 2013)
Las auxinas
Las Auxinas son un grupo de hormonas que estimulan el crecimiento (principalmente tallo),
ellas intervienen en la diferenciación, división y elongación entre tejidos y células, la forma
predominante en las plantas es el ácido indolacético (IAA) que en algunos experimentos se
ha demostrado que afecta el crecimiento de los frutos y las flores debido a las elevadas
concentraciones (Jordán & Casaretto, 2006)
Metabolismo de las auxinas.
Las auxinas se sintetizan en los tejidos de la planta, existen dos vías principalmente para la
síntesis:
- Vía dependiente del tiptano
- Vía dependiente del triptano: El triptófano sufre una descarboxilación formando
Triptamina, que luego va a ser oxidada para dar origen al indolacetaldehido.
Finalmente, éste se oxida hasta ácido Indolpiruvico

Es importante saber que estas vías dependen de estímulos externos como la luz, los
nutrientes, la sequía, el frío y de factores internos como son otras hormonas. Hasta el
momento, no se sabe mucho del catabolismo de las auxinas (Garay, Sanchez, García,
Alvarez, & Guitierrez, 2014)
Transporte de auxinas
Existen dos maneras de transportar a las auxinas:
- uno rápido y de larga distancia, este se lleva a cabo por difusión en el floema y el
xilema, este es importante porque es el encargado del desarrollo de la planta. Por
ejemplo en el ápice de los tallos es el tejido se sintetiza las Auxinas principalmente,
estas son trasportados desde el ápice hasta las semillas por el xilema
- lento y de corta distancia que se da fuera de la célula por transportadores de la
membrana, es importante para os procesos de desarrollo (la formación del eje
embrionario, la respuesta a los tropismos, el desarrollo del tejido vascular, la filotaxia,
la dominancia apical y la morfogénesis de la raíz, del fruto y de la flor). Es conocido
como transporte polar o PAT, este tipo necesita de proteínas trasportadoras (Garay et
al., 2014)

- Efectos fisiológicos

- Crecimiento y formación de raíces: las auxinas estimulan el crecimiento de los


tallos, coleoptilos y raíces secundarias e inhiben el crecimiento de la raíz primaria.
La concentración óptima para el promover elongación de tallos es entre 10-6 y 10-5
M, sin embargo esta concentración es muy alta para las raíces y retarda su
crecimiento. Además, las auxinas promueven la síntesis de la hormona etileno que
inhibe el crecimiento radicular.
- Regulación de tropismos. los tropismos son movimientos de crecimiento
direccionales, las auxinas controla los tropismos. A través de la fosforilación en
gradiente de NPH1 induce la acción de las auxinas.
- Dominancia apical
- Abscisión de órganos. Las auxinas actúan negativamente sobre la abscisión de
órganos, retarda principalmente la caída de hojas, flores y frutos jóvenes.
- Desarrollo de flores y frutos. las auxinas exógenas induce el desarrollo floral en
varias especies y actúan sobre el crecimiento normal de frutos.
- Diferenciación vascular. Las auxinas controlan la división celular, allí se da origen
a los elementos de floema y xilema. Esto influencia el contenido debido a que la
cantidad de auxinas es proporcional a el crecimiento de la planta (Jordán & Casaretto,
2006)

- Uso Comercial de las Auxinas

Comercialmente se ha sintetizado químicamente las moléculas estructuralmente parecidas


para usos agrícolas, conocidas como auxinas sintéticas. Estas moléculas ha sido creadas
gracias al conocimiento de las rutas de biosíntesis de auxinas, gracias a esto en la actualidad
es posible su aplicación principalmente para los frutos, flores y raíces. El uso de las auxinas
es foliar (Zapata, 2013).
MATERIALES Y MÉTODOS
El experimento se realizó bajo invernadero en el departamento de biología de la Universidad
Nacional de Colombia, sede Bogotá con un espacio de 3 m2. En dicho espacio se dispusieron
60 bolsas plásticas color negro de 15cmx20cm en las cuales fueron trasplantadas las
lechugas.
En el proceso de siembra se usó una bandeja germinadora en la cual se pusieron las semillas
de lechuga para el proceso de germinación. Después de 15 días las plántulas fueron
trasplantadas a bolsas y ubicadas bajo invernadero, en donde se separaron de acuerdo al
tratamiento que se les iría aplicar. El tratamiento 1 conto con 30 plantas que fueron regadas
diariamente con agua. El tratamiento 2 contó con 30 plantas las cuales fueron regadas
diariamente y se les aplicó una vez por semana ácido indolacético a una concentración de
500 ppm, esta aplicación se hizo una vez por semana en las mañanas y haciendo uso de un
atomizador.
Para realizar la medición el peso fresco y peso secó se hizo una vez por semana, para esto se
escogían 3 plantas a las cuales se le hizo el peso a cada uno de los órganos, es decir, se pesó
por separado las hojas, la raíz y el tallo, luego se secaban en un horno y se volvía a pesar por
órganos, estos datos fueron registrados durante 6 semanas. Con estos datos se calculó el
contenido hídrico por planta, para esto se hizo uso de la ecuación 1
𝑚𝑓−𝑚𝑠
𝐶𝐻 = ( ) ∗ 100; (1)
𝑚𝑠

Dónde: CH= Contenido hídrico; mf = masa fresca; ms = masa seca.


Por otro lado, para la observación de clorofila se utilizaron 6 plantas de lechuga, acetona,
agua destilada, tubos, micro pipeta de 100 µl, puntas para micro pipeta, vaso de precipitado.
Para iniciar, se seleccionaron 3 plantas al tratamiento con auxinas y las otras 3 plantas del
testigo, cada planta fue colocada en un mortero con 1 ml de acetona con la cual se maceró y
el contenido final fue almacenado en un tubo en ensayo. Al tener todos los tubos de ensayo,
se pusieron en una centrifuga durante 5 minutos para finalmente poder observar los
resultados calcular la concentración de clorofilas con las siguientes ecuaciones:
𝐶𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑎 = (12.25 𝑥 𝐴663𝑛𝑚) − (2,79 𝑥 𝐴647𝑛𝑚) (2)
𝐶𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑏 = (21.5 𝑥 𝐴647𝑛𝑚) − (5,1 𝑥 𝐴663𝑛𝑚) (3)
𝐶𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = (7.15 𝑥 𝐴663𝑛𝑚) + (18.7 𝑥 𝐴647𝑛𝑚) (4)
(1000 𝑥 𝐴470𝑛𝑚)−(1.82𝑥 𝑐𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑎 )−(85,02 𝑥 𝑐𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑏)
𝐶𝑎𝑟𝑜𝑡𝑒𝑛𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠 = (5)
198

Para calcular la concentración de clorofilas en la solución se reemplazan los valores de


absorbancia en los las siguientes ecuaciones:
6.36(𝑐𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑎) 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑡𝑜𝑛𝑎
𝐶𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑎 = (6)
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑛𝑡𝑎
6.12(𝑐𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑏) 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑡𝑜𝑛𝑎
𝐶𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑏 = (7)
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑛𝑡𝑎

12.47 (𝑐𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙) 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑡𝑜𝑛𝑎


𝐶𝑙𝑜𝑟𝑜𝑓𝑖𝑙𝑎 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 = (8)
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑛𝑡𝑎

0.48 (𝑐𝑎𝑟𝑜𝑡𝑒𝑛𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠) 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑎𝑐𝑒𝑡𝑜𝑛𝑎


𝐶𝑎𝑟𝑜𝑡𝑒𝑛𝑜𝑖𝑑𝑒𝑠 = (9)
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑝𝑙𝑎𝑛𝑡𝑎

RESULTADOS
Contenido Hídrico.
En las tablas 1, 2, 3 y 4 se puede observar el dato promedio del peso seco y fresco de las
plantas de cada tratamiento.
Tabla 1.Peso seco de las plantas con el tratamiento de auxinas

PESO SECO DE PLANTAS CON AUXINAS


FECHA RAIZ TALLO HOJA Total CH
12/06/2019 0,0002 0,0007 0,0046 0,0055 29,3615
19/06/2019 0,0001 0,0017 0,0037 0,0056 12,4731
26/06/2019 0,0004 0,0017 0,0085 0,0105 16,8291
3/07/2019 0,0013 0,0012 0,0091 0,0116 16,4092
Elaboración propia
Tabla 2 Peso seco de las plantas testigo

PESO SECO PLANTAS TESTIGO


FECHA RAIZ TALLO HOJA Total CH
12/06/2019 0,0004 0,0010 0,0051 0,0065 12,2806
19/06/2019 0,0010 0,0011 0,0043 0,0064 9,1302
26/06/2019 0,0016 0,0008 0,0092 0,0116 14,7608
3/07/2019 0,0018 0,0009 0,0106 0,0133 14,3750
Elaboración propia
Tabla 3. Peso fresco de las plantas con auxinas

PESO FRESCO PLANTAS CON AUXINAS


FECHA RAIZ TALLO HOJA Total CH
12/06/2019 0,0061 0,0137 0,1481 0,1680 29,3615
19/06/2019 0,0017 0,0136 0,0597 0,0750 12,4731
26/06/2019 0,0049 0,0180 0,1649 0,1878 16,8291
3/07/2019 0,0089 0,0111 0,1814 0,2014 16,4092
Elaboración propia
Tabla 4. Peso fresco de las plantas testigo

PESO FRESCO PLANTAS TESTIGO


FECHA RAIZ TALLO HOJA Total CH
12/06/2019 0,0080 0,0138 0,0649 0,0868 12,2806
19/06/2019 0,0016 0,0132 0,0500 0,0648 9,1302
26/06/2019 0,0126 0,0127 0,1570 0,1823 14,7608
3/07/2019 0,0102 0,0163 0,1785 0,2050 14,3750
Elaboración propia
Tabla 5. Contenido hídrico de las plantas con auxinas y de las plantas testigo

FECHA CH de plantas testigo CH de plantas con auxinas


Semana 1 12,28 29,361
Semana 2 9,13 12,473
Semana 3 14,76 16,829
Semana 4 14,37 16,409
Elaboración propia

En la gráfica 1 se puede observar la diferencia de porcentajes en el contenido hídrico de las


plantas con auxinas y las plantas testigo.
Gráfica 1. Porcentaje de contenido hídrico de las plantas con auxinas y de las plantas testigo

CONTENIDO HÍDRICO
40

30
DATOS %

20

10

0
SEMANA 1 SEMANA 2 SEMANA 3 SEMANA 4
Axis Title

TESTIGO AUXINAS
Clorofilas
En la tabla 6 se observan los datos obtenidos en cada absorbancia de las plantas que contenían
auxinas
Tabla 6. Resultados obtenidos en las plantas con auxinas

PLANTAS CON AUXINAS


Planta Masa (g) Volumen (ml) 647 nm 663 nm 470 nm
1 0,0212 0,847 0,516 1,361
2 0,013 1 0,835 0,527 0,966
3 0,0164 1,004 0,686 1,433
PROMEDIO 0,0169 0,895 0,576 1,253
Elaboración propia
Tabla 7. Cantidad y concentración de carotenoides y clorofilas en las plantas con auxinas

Cantidad de clorofilas y Concentración de


carotenoides clorofilas y carotenoides
mg/l mg/l
Clorofila A 4,559 Clorofila A 0,268
Clorofila B 16,305 Clorofila B 0,959
Clorofila total 20,855 Clorofila total 1,227
Carotenoides -1,048 Carotenoides -0,062
Elaboración propia
Tabla 8. Resultados obtenidos en las plantas testigo

SIN AUXINAS
Planta Masa (g) Volumen (ml) 647 nm 663 nm 470 nm
1 0,0155 1,328 0,984 1,574
2 0,0144 1 0,756 0,453 0,5
3 0,0147 1,044 0,733 1,151
PROMEDIO 0,0149 1,043 0,723 1,075
Elaboración propia
Tabla 9. Contenido y concentración de clorofilas en plantas testigo

Cantidad de clorofilas y Concentración de


carotenoides clorofilas y carotenoides
mg/l mg/l
Clorofila A 5,947 Clorofila A 0,399
Clorofila B 18,737 Clorofila B 1,258
Clorofila total 24,674 Clorofila total 1,656
Carotenoides -2,671 Carotenoides -0,179
En la tabla 10 se observa los datos promedio de las raíces de las plantas en cada tratamiento
por semana, se observa que las de auxinas tienen la raíz más larga
Tabla 10. Medidas de las raíces de las plantas

MEDIDAS DE RAICES
FECHA TESTIGO AUXINAS
SEMANA 1 6,2 6,4
SEMANA 2 6,32 6,6
SEMANA 3 6,5 6,9
SEMANA 4 6,7 7,35

Gráfica 2. Relación de las medidas de las raíces de las plantas

MEDIDAS DE RAICES
7.5
MEDIDAS CM

6.5

5.5
SEMANA 1 SEMANA 2 SEMANA 3 SEMANA 4

MEDIDAS DE RAICES TESTIGO MEDIDAS DE RAICES AUXINAS

DISCUSIÓN
Se puede observar en la gráfica 1 que las plantas que tiene mayor contenido hídrico son las
plantas que están tratadas con las auxinas, ya que como se muestran en algunas definiciones
y estudios hechos (Vazquez et al., 2015), se dice que las auxinas benefician al crecimiento
radicular porque estas hormonas son producidas en la parte apical de la planta u se translocan
a otro lugar, es este caso hacia las raíces para permitir una mejor absorción de nutrientes y
agua que son requeridos por las plantas, es por eso que se evidencia un contenido hídrico
mayor en las plantas a las que se les suministro auxinas.
Por otro lado, se las plantas que eran el testigo, presentan mayor contenido de clorofila total
CONCLUSIONES
Se puede concluir que la aplicación de auxinas hace que las plantas tengan mayor absorción
del agua al tener la raíz más grande como se puedo ver en la gráfica 2, es decir,
BIBLIOGRAFIA
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HOMEOSTASIS DE LAS AUXINAS Y SU IMPORTANCIA EN EL
DESARROLLO DE ARABIDOPSIS THALIANA, 33(1), 13–22.
Jordán, M., & Casaretto, J. (2006). Hormonas y Reguladores del Crecimiento : Auxinas ,
Giberelinas y Citocininas, 1–28. Retrieved from
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Vazquez, J., Peña, C., Trejo, C., Villegas, A., Benedicto, S., & Garcia, P. (2015).
Promoción del crecimiento de plantas de lechuga, 38(4), 405–413.
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DE ÁCIDO GIBERÉLICO EN LA FLORACIÓN DE ÁRBOLES DE Coffea arabica
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Grado_5_AGUA_ANEXO6.pdf
Silva, C. (2016). Transpiración, http://exa.
ANEXOS
ESCALA BBCH DE LA LECHUGA
00. Obtención de semillas
01. Imbibición de las semillas
02. Elongación del embrión, ruptura de la testa, germinación
03. Emergencia de brotes y hojas a través de la superficie del suelo.
04. Aparición de la 1 hoja verdadera.
05. Cotiledones completamente desenrollados.
06. Desarrollo del par de hojas
07. Desarrollo de 2 o mas pares de hojas
08. Inicio de formación de roseta
09. Roseta del 0-50% de su formación

00.Obtención de semillas
01.Imbibición de las semillas
02.Elongación del embrión, ruptura de la testa,
germinación

Siembra efectuada el día 16 de mayo de 2019


de 70 semillas de lechuga.

03.Emergencia de brotes y hojas a través de la


superficie del suelo.

Análisis y chequeo el día 16 de mayo de 2019

04.Aparición de la 1 hoja verdadera.


05.Cotiledones completamente desenrollados.

Análisis y chequeo el día 23 de mayo de 2019


04.Aparición de la 1 hoja verdadera.
05.Cotiledones completamente desenrollados.

Primer toma de datos de todas las unidades


experimentales 30 de mayo – 6 de junio de
2019.

06.Desarrollo del par de hojas


07.Desarrollo de 2 o mas pares de hojas

Clasificación de plantas con tratamiento


auxinas primer toma de datos dia 12 de junio de
2019

06.Desarrollo del par de hojas


07.Desarrollo de 2 o mas pares de hojas

Clasificación de plantas testigo primer


toma de datos 12 de junio de 2019

06.Desarrollo del par de hojas


07.Desarrollo de 2 o mas pares de hojas

Segunda toma de datos 19 de junio de 2019


06.Desarrollo del par de hojas
07.Desarrollo de 2 o mas pares de hojas

Segunda toma de datos 19 de junio de 2019

06.Desarrollo del par de hojas


07.Desarrollo de 2 o mas pares de hojas

Tercer y cuarta toma de datos 26 de junio y 03


de julio respectivamente.

08.Inicio de formación de roseta


09.Roseta del 0-50% de su formación

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