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ÍNDICE

1. RESUMEN..............................................................................................................2

2. INTRODUCCIÓN...................................................................................................3

3. PRINCIPIOS TEÓRICOS.......................................................................................4

4. DETALLES EXPERIMENTALES..........................................................................9

5. TABULACIÓN DE DATOS Y RESULTADOS EXPERIMENTALES................10

6. EJEMPLO DE CÁLCULO....................................................................................15

7. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS..................................................16

8. CONCLUSIONES.................................................................................................17

9. RECOMENDACIONES........................................................................................18

10. BIBLIOGRAFÍA...................................................................................................19

11. APÉNDICE............................................................................................................20
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1. RESUMEN

El objetivo de la presente experiencia es la determinación de nitrato en diferentes muestras

de agua utilizando un espectrofotómetro ultravioleta. Debemos tener en cuenta que esta

técnica mide la absorbancia a 220 nm ya que esta medida es adecuada para el estudio de

aguas no contaminadas con suspensiones orgánicas o solidos suspendidos.

Para realizar esta experiencia se tomó dos muestras de diferentes aguas de mesa de marca

cielo y vida. El equipo utilizado fue un espectrofotómetro UV-visible de marca Shimadzu

1700 el cual contenía su respectiva celda de cuarzo y su respectivo software. Se preparó el

patron primario de nitrato de 100 ppm, luego teniendo este patrón, se obtuvo uno intermedio

de 5 ppm y de este los patrones para la curva de calibración de 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, y 0.5 ppm

diluyéndolo, se tiene un blanco y también Hcl 1N.

De la muestra se tomó 5mL de agua vida y 10mL de agua cielo y con estas soluciones y

patrones se llevó al equipo, se realizó la medición en el equipo. Se determinó una ecuación

lineal con el cual hallamos las concentraciones de la muestras siendo para el agua vida

32.4761 ppm y para el agua cielo 17.7143 ppm de concentración de nitratos. Tomando en

cuenta que la OMS determina un rango aceptable de 50 ppm de nitratos en agua se determinó

que en ambas marcas de agua de mesa es recomendable ya que ambas están en el rango de

aceptación pero se debe tomar en cuenta que el agua con menos nitratos cielo es más

saludable que vida. Debemos tener en cuenta que estas determinaciones se deben preparar

con un análisis exacto ya que el equipo que lo analiza es muy sensible y captara si no se

realizo correctamente las interferencias.

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2. INTRODUCCIÓN

La espectroscopia visible es una de las técnicas más ampliamente y más frecuentemente

empleadas en el análisis químico La base de la espectroscopia Visible y Ultravioleta consiste

en medir la intensidad del color (o de la radiación absorbida en UV) a una longitud de onda

específica comparándola con otras soluciones de concentración conocida (soluciones

estándar) que contengan la misma especie absorbente. Para tener esta relación se emplea la

Ley de Beer, que establece que para una misma especie absorbente en una celda de espesor

constante, la absorbancia es directamente proporcional a la concentración. Espectrometría

Lectura N° 6 La coloración de la solución se debe a la especie absorbente y esta coloración

puede ser natural o inducida. La coloración natural puede ser la base de la cuantificación de

una especie, como por ejemplo: la clorofila en ciertas plantas, los complejos metálicos que se

encuentran presentes en solución acuosa, como son los iones de Cobre (II), Manganeso (VII),

Cobalto (III), etc.. Tambien La espectrometría UV/Vis se utiliza habitualmente en la

determinación cuantitativa de soluciones de iones metálicos de transición y compuestos

orgánicos muy conjugados.

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3. PRINCIPIOS TEÓRICOS

1. Espectrometría uv

El espectro Ultravioleta y Visible de las moléculas está asociado a transiciones

electrónicas entre los diferentes niveles energéticos en ciertos grupos o átomos de la molécula

y no caracterizan a la molécula como entidad. En contraste la absorción de energía en la

región Infrarroja estimulan la molécula completa y causa cambios vibracionales y

rotacionales en esta lo cual caracteriza la entidad estructural de dicha molécula. Los grupos

de átomos que dan origen a la absorción en el UV cercano o UV de cuarzo, se conocen como

grupos cromóforos. La mayoría de los grupos insaturados y heteroatómicos que tienen pares

de electrones no compartidos, son cromóforos potenciales y estos grupos son la base de la

elucidación de grupos estructurales en las moléculas activas en el UV cercano.

2.- Nitratos
El nitrato es un compuesto inorgánico compuesto por un átomo de nitrógeno (N) y tres
átomos de oxígeno (O); el símbolo químico del nitrato es NO3. El nitrato no es normalmente
peligroso para la salud a menos que sea reducido a nitrito (NO2)

3.- Nitratos en el agua potable: efectos sobre la salud

El nitrato es uno de los más frecuentes contaminantes de aguas subterráneas en áreas rurales.
Debe ser controlado en el agua potable principalmente porque niveles excesivos pueden
provocar metahemoglobinemia, o “la enfermedad de los bebés azules”. Aunque los niveles de
nitratos que afectan a los bebés no son peligrosos para niños mayores y adultos, sí indican la
posible presencia de otros contaminantes más peligrosos procedentes de las residencias o de
la agricultura, tales como bacterias o pesticidas.
 5

5.- Los nitratos y la OMS (Organización Mundial de la Salud)

En los estándares europeos para el agua potable, segunda edición, publicada por la OMS

después de la convención de Génova en 1970, encontramos lo siguiente:

Constituyentes del agua que, si presentes en cantidades excesivas, pueden dar lugar a

problemas:

Sustancia Naturaleza del Nivel aproximado por

problema que puede encima del cual pueden
aparecer aparecer problemas

Nitrato (como NO3) Peligro de - Recomendado:

metahemoglobinemia menos de
infantil si el agua es 50 mg/l.
consumida por niños - Aceptable: de 50 a 100
pequeños. mg/l.
- No recomendado:
más de 100 mg/l.

4.- Fundamento del método de análisis

Esta técnica se utiliza para aguas con baja materia orgánica (aguas potables). Y se basa en

la absorción que tienen los nitratos a la luz U.V. a una longitud de onda de 220 nm. Si hay

materia orgánica, como esta puede absorber a 220nm y los nitratos no absorben a 275 nm, se

hace una segunda medida a 275nm, para corregir el valor de los nitratos. Es necesaria la

filtración de las muestras para eliminar las interferencias debidas a las partículas en

suspensión.La acidificación con HCl 1N previene las interferencias al hidróxido ó carbonato

a concentraciones superiores a 1000mg/L de CaCO3. El cloro no interfiere.

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4. DETALLES EXPERIMENTALES

1.- Materiales

Balanza analítica digital, Espectrofotometro UV-Visible Shimadzu 1700, celdas de

cuarzo, fiolas de 100, 50, 500, 1000 mL, pipeta volumétricas de 1, 2, 3, 5, 10, 15, 20 y 25

mL, desecador de vidrio.

2.- Reactivos

Agua excenta de nitratos , KNO3 p.a. , cloroformo (Reactivo controlado), HCl.

3.- Procedimiento

- Soluciones:

a) Solución stock de nitrato: se disolvió 0.1805g de KNO3 , previamente secado a 105

C durante 24 horas, en 250 ml de agua y preservar por adición de 2 ml de

cloroformo. Esta solución contiene 100 ppm de nitrato como N. (es estable por 6

meses)
b) Preparación de solución patrón intermedio (5ppm NO3--N) pipetear 5ml de

100ppm NO3—N /100mL.

c) Soluciones de para la curva de calibración > Preparar soluciones de calibración en

el rango de 0,1-0.2-0.3-0.4-0.5 ppm NO3—N, antes de enrazar a 50 mL, añadir

1mL de HCl, homogenizar la solución por inversión.

d) El blanco: en una fiola de 50 ml colóquese aproximadamente 45 ml de agua

destilada, añádase 1 ml de solución de HCl 1N y luego complétese el volumen

hasta el enrase.
e) Tratamiento de la muestra agregamos 10 mL M1(Cielo) y 5mL M2(Vida) . Leemos

la absorbancia frente al reactivo en agua destilada, ajustada a 0

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5. TABULACIÓN DE DATOS, GRAFICOS Y RESULTADOS EXPERIMENTALES

TABLA Nº 1
Solucion estándar madre

KNO3
Solución
0.1805g/250 mL
Peso/volumen
Concentración 100 ppm

TABLA Nº 2
Patrones a partir de 5ppm

Volumen alícuota (mL) Concentracion (ppm) NO-3 – N

Patron
0 0
BK
1 0.1
P1
2 0.2
P2
3 0.3
P3
P4 4 0.4
P5 5 0.5

TABLA Nº 3
Volumen de muestras de aguas

Agua Volumen alícuota (mL)

VIDA 5

CIELO 10

RESULTADOS DE CURVA DECALIBRACION EN ESPECTOFOTROMETRO

TABLA Nº 4
Absorvancia Vs Concentracion para hallar λ max en software

λ max 249 nm
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Abs. 0.007

TABLA Nº 5
Resultados de Abs. De la Curva de calibración

Vol alícuota (mL) Conc.(ppm) NO-3 – N Absorbancia

Patron
0 0 -0.001
BK
1 0.1 0.007
P1
2 0.2 0.002
P2
3 0.3 0.002
P3
P4 4 0.4 0.005
P5 5 0.5 0.017

Grafico que mostro el equipo : Curva estándar

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Para la curva de calibración tomando en cuenta 3 puntos para la linealidad

TABLA Nº 6
Patrones tomados para el grafico lineal
Conc.(ppm) NO-3 – N Absorbancia
Patron
0 -0.001
BK
0.2 0.002
P2
P4 0.4 0.005

Gráfico Nº1

Curva standard
0.01

0.01
f(x) = 0.02x - 0
0 R² = 1

0
Abs.

0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45
0

Conc (ppm)

Li near ()

TABLA Nº 7
Resultados de Abs. y concentración de las muestras de agua en equipo

Muestra Agua Volalícuota (mL) Abs. Conc. (Equipo)

M1 Cielo 10 0.011 0.500

M2 Vida 5 0.010 0.464

Grafico de software:
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TABLA Nº 8
Resultados de concentraciones de la muestras de agua en gráfico y en equipo

Muestra Agua Resultados

−¿−N 0.8000
Conc. NO 3
¿ (ppm)
Grafica
M1 −¿ 17.7143
Conc. NO¿3 (ppm)
Cielo −¿−N 0.500
Conc. NO 3
¿ (ppm)
Instrumento
−¿ 11.0714
Conc. NO¿3 (ppm)
−¿−N 0.7333
Conc. NO 3
¿ (ppm)
Grafica
M2 −¿ 32.4761
Conc. NO¿3 (ppm)
Vida −¿−N 0.464
Conc. NO ¿3 (ppm)
Instrumento
−¿ 20.5486
Conc. NO¿3 (ppm)

TABLA Nº 8
Resultados finales

Muestra −¿ −¿
Conc. NO¿3 (ppm) Conc. NO¿3 (ppm)
Agua
Grafico Espectometro
M1 Cielo 17.7143 11.0714

M2 Vida 32.4761 20.5486

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6. EJEMPLO DE CÁLCULO

1.-Preparación del patrón primario: Partiendo de la solución madre de KNO3 =0.1805

g/250 ml, se calcula el número de mg NO-3 - N / 1L solución:

14 g
NO 3−N
0.7218 g KNO3 mol 1000 mg
x x =100 ppm
1000 mL g 1g
101. 9 KNO 3
mol

Concentracion del patron primario=100 ppm …(1)

2.- Preparación de la solución patrón intermedia de 5 ppm a partir de la solución

patrón primario (1)

Datos:
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Volumen de madre : 5 mL

Volumen de enraze: 100Ml

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
100 mg 5 mL
[ Intermedia ° NO 3−N ] = x =5.00 ppm
1L 100 mL

[ Intermedia ° NO 3−N ] =5.00 ppm

3.- Preparación de la solución patrón intermedia de 5ppm apartir de la la solcución

patrón intermedia de 10 ppm.

1º Patrón

Datos:

Volumen de madre : 1 mL

Volumen de enraze: 50mL

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )

5 mg 1mL
[ P 1 ° ]= x =0.100 ppm
1 L 50 mL

[ P 1 ° ] =0.100 ppm

2º Patrón

Datos:

Volumen de madre : 2 mL

Volumen de enraze: 50mL

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
5 mg 2mL
[ P 2 ° ]= x =0.200 ppm
1 L 50 mL

[ P 2 ° ] =0.200 ppm

3º Patrón
 13

Datos:

Volumen de madre : 3 mL

Volumen de enraze: 50mL

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )

[ P 3 ° ] = 5 mg x 3 mL =0.300 ppm
1L 50 mL

[ P 3 ° ] =0.300 ppm

4º Patrón

Datos:

Volumen de madre : 4 mL

Volumen de enraze: 50mL

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
5 mg 4 mL
[ P 4 ° ]= x =0.400 ppm
1 L 50 mL

[ P 4 ° ] =0.400 ppm

5º Patrón

Datos:

Volumen de madre : 5 mL

Volumen de enraze: 50mL

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
5 mg 5 mL
[ P 5 ° ]= x =0.500 ppm
1 L 50 mL

[ P 5 ° ] =0. 5 00 ppm
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Blanco: Consiste en agua pura

4.- Calculo de la concentración de la muestra de agua ¨cielo¨

De el equipo se obtuvo mediante un software el λ máxima = 249 nm hallado con el

patrón de concentración intermedia , se graficó Absorbancia Vs. Concentración (gráfica Nº1).

Mediante esta grafica se obtienen la ecuación de la recta siguiente :

A=0.015 x−0.001

Datos :

Absorvancia : 0.011

A=0.015 x−0.001

0.011=0.015 x−0.001

X =0. 800 ppm

Pero el valor registrado en el espectrofotómetro:

X =0.500 ppm

Determinando la concentración de la muestra para una alícuota de 10 ml. de agua cielo.

Datos:

Del grafico:

Vol. Alícuota muestra: 10 mL

Concentración (de grafico) : 0.800 ppm

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−¿
−¿
62 g NO 3
=3.5429 ppm NO¿3
mol 14 g
N
mol
NO−¿−N
3
x¿
L
[ M 1° ] =0.800 ppm ¿

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
−¿
−¿x 50 mL
NO 3
3.5429 ppm =17.7143 ppm NO¿3
10 mL
[ M 1 ° ] =¿
−¿
[ M 1 ° ] =17.7143 ppm NO ¿3

Del espectrofotometro:

Vol. Alícuota muestra: 10 mL

Concentración (de grafico) : 0.500 ppm

−¿
−¿
62 g NO 3
=2.2143 ppm NO¿3
mol 14 g
N
mol
NO−¿−N
3
x¿
L
[ M 1° ] =0.500 ppm ¿

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
−¿
−¿x 50 mL
NO 3
2.2143 ppm =11.0714 ppm NO ¿3
10 mL
[ M 1 ° ] =¿
−¿
[ M 1 ° ] =11.0714 ppm NO ¿3

5.- Calculo de la concentración de la muestra de agua ¨VIDA¨

 16

De el equipo se obtuvo mediante un software el λ máxima = 249 nm hallado con el

patrón de concentración intermedia , se graficó Absorbancia Vs. Concentración (gráfica Nº1).

Mediante esta grafica se obtienen la ecuación de la recta siguiente :

A=0.015 x−0.001

Datos :

Absorvancia : 0.01

0.01=0.015 x−0.001

X =0.7333 ppm

Pero el valor registrado en el espectrofotómetro:

X =0.464 ppm

Determinando la concentración de la muestra para una alícuota de 5 ml. de agua vida.

Datos:

Del grafico:

Vol. Alícuota muestra: 5 mL

Concentración (de grafico) : 0.7333 ppm

−¿
−¿
62 g NO 3
=3.2476 ppm NO¿3
mol 14 g
N
mol
NO−¿−N
3
x¿
L
[ M 2° ]=0.7333 ppm ¿

( [ C 1 ] x V 1) =( [ C 2 ] x V 2 )
−¿
−¿ x50 mL
NO 3
3.2476 ppm =32.4761 ppm NO¿3
5 mL
[ M 2° ] =¿
−¿
[ M 2 ° ] =32.4761 ppm NO ¿3

Del espectrofotometro:
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Vol. Alícuota muestra: 5 mL

Concentración (de grafico) : 0.464 ppm

−¿
−¿
62 g NO 3
=2.0549 ppm NO¿3
mol 14 g
N
mol
NO−¿−N
3
x¿
L
[ M 2 ° ] =0.464 ppm ¿
−¿
50 mL
NO−¿x
3
2.0548 ppm =20.5486 ppm NO¿3
5 mL
[ M 2° ]=¿

−¿
[ M 2 ° ] =20.5486 ppm NO ¿3

7. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Este método fue analizado con muestras de agua potable o de mesa sin solidos organicos,

ya que estos no podrán ser analizados mediante el espectrómetro Ultravioleta, y entonces este

factor seria una desventaja en su aplicación ya que no se podrá analizar aguas contaminadas,

residuales o subterráneas. De la experiencia se logro determinar las concentraciones de

nitratos en las muestras de agua cielo y vida, observando que el agua vida contenia un

porcentaje mayor de nitratos con 32.4 ppm y el agua cielo con 17. ppm pero ambas pueden

ser consumidas ya que la OMS determina respectos a los nitratos que el rango máximo que

debe tener el agua para el consumo humano es de 50 ppm con lo cual ambas se encuentran en

el rango adecuado y aceptable.

Para determinación la ecuación lineal tuvimos que optar por eliminar puntos de los

patrones que no daban una tendencia lineal, esto se debio a una inadecuada prepracion del
 18

patrón, ese inconveniente que se obtuvo hace que nuestros resultados hallados no sean

completamente confiables y presenten un error del operario.

8. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

Se logró determinar las concentraciones de nitratos en las muestras de agua cielo con 17.

y agua vida con 32. Mediante el análisis por espectrofotometría ultravioleta, además también

logramos observar, manipular y conocer este equipo el cual se maneja mediante un software

que nos grafica absorbancias y concentraciones.

Debemos tener en cuenta que la preparación de los patrones deben ser exactos ya que el

equipo consta de una gran sensibilidad al momento del análisis, y en este caso no se obtuvo la

linealidad querida en la curva estándar.

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Se recomienda limpiar cuidadosamente las celdas de cuarzo ya que es un material caro de

laboratorio, al momento del análisis no tocar con huellas dactilares ya que abra se

distorsionara los resultados.

Las fiolas y los materiales de vidrio deben ser lavados con abundante agua destilada varias

veces para evitar que haya interferencias que afecten el método.

9. BIBLIOGRAFÍA

Skoog, D. (2001). Principios de análisis instrumental. México D.F.:Mc Graw.

Bender , G.(1992). Metodos Instrumentales de análisis en química. L.A..: Editorial

Acribia

Harris , D.(2010).Analisis quimico cuantitativo . sexta edición ..: Editorial Reverte

S.A..España
 20

10. APÉNDICE