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OBJETIVOS:
INTRODUCCIÓN:
MATERIALES Y REACTIVOS:
PROCEDIMIENTO:
* Examen en Fresco
Recolecte una muestra de placa dental o mucosas utilizando un escobillón y
emulsiónela en el tubo con solución salina.
Deposite unas pocas gotas de solución salina en una lámina portaobjeto y
cúbrala con la lámina cubreobjeto ó laminilla.
Enfoque al microscopio con el objetivo de 10x regulando la luz con el
diafragma y el condensador; y luego con el de 40x aumentando la entrada de
luz al lente.
Identifique y tome nota de las estructuras observadas.
* Coloración de Gram
Con el asa redonda previamente esterilizada tome una gota de agua y
colóquela en una lámina portaobjeto debidamente identificada.
Tome una muestra de la bacteria suministrada en la caja con Agar Tripticasa
Soya y emulsiónela en el agua hasta observar turbidez.
Deje secar la preparación al aire. Posteriormente fíjela con el calor del
mechero.
Ponga la lámina sobre la gradilla de coloraciones para realizar la coloración de
Gram de la siguiente manera: Adicione violeta de genciana. Permita que el
colorante actúe durante un minuto.
Lave la lámina con agua corriente.
Cubra la lámina con Lugol, déjelo actuar por un minuto.
Lave la lámina con agua corriente.
Adicione Alcohol Acetona y déjelo actuar durante 30 segundos.
Lave con agua corriente.
Cubra la lámina con Fucsina y déjela actuar por 30 segundos. Lavar con agua
corriente
Escurrir la lámina al aire y secarla por debajo con una toalla absorbente,
Obsérvela al microscopio en objetivo de inmersión (100x).
Identifique lo observado.
* Siembra en medios de cultivo
Con la ayuda de un escobillón tome una muestra de placa dental o mucosas y
deposite el inóculo en la caja con agar sangre. Asi mismo, con un escobillón
tome una muestra de la superficie indicada por el docente y siémbrela en agar
sangre (agotamiento)
Utilizando el asa bacteriológica de argolla realice una siembra por agotamiento.
A partir de la cepa proporcionada en la caja que contiene Agar Tripticasa soya,
tome una porción de una colonia y siémbrela en el caldo Triptona soya.
Con el asa recta tome una colonia de la caja que contiene Escherichia coli (E.
coli) y siémbrela por picadura o punción con asa recta en el medio semisólido
SIM.
Marque con sus datos los medios e incúbelos a 37 oC durante 48 horas.
GUÍA NO 2
OBJETIVOS:
INTRODUCCIÓN:
La observación del crecimiento bacteriano tanto en medios líquidos como sólidos
aporta información importante para la identificación de un microorganismo. En los
medios líquidos, permite recuperar de la muestra bacterias que están en escasa
proporción. Los medios sólidos permiten efectuar un aislamiento de colonias ya
que se da la formación de unidades formadoras de colonias (U.F.C.). La U.F.C es
una población macroscópicamente visible procedente de una sola célula madre.
MATERIALES Y REACTIVOS:
PROCEDIMIENTO:
Identificar en el medio sólido los diferentes tipos de colonias, teniendo en
cuenta características como: tamaño, color, borde, brillo u opacidad, hemólisis,
entre otras.
Realizar tinción de Gram de las diferentes colonias obtenidas en Agar Sangre y
del Caldo Tripticasa Soya.
Observar las características del microorganismo en el medio semisólido SIM
(movilidad, producción de indol, producción de H 2S). Fundamento de las
pruebas.
Relacionar las características de las colonias con la coloración de Gram.
Analizar los resultados y realizar el informe correspondiente.
CUESTIONARIO: