CODIGO: IF-P20-IN11

MACROPROCESO SERVICIO
PROCESO PRESTACIÓN DEL VERSIÓN: 1
SERVICIO
FECHA: Diciembre de 2008

INSTRUCTIVO

USO DE LA CENTRÍFUGA REFRIGERADA EPPENDORF

5810R

REVISADO POR APROBADO POR

Director Instituto de Errores Innatos del

Asistente de Investigación
Metabolismo
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CENTRÍGUGA REFRIGERADA VERSIÓN: 1

EPPENDORF 5810R
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1. OBJETIVO

Describir las instrucciones generales para el adecuado manejo, mantenimiento y

limpieza de la Centrífuga refrigerada Eppendorf 5810R utilizada para la
centrifugación de las muestras procesadas el Instituto de Errores Innatos del
Metabolismo.

2. CONDICIONES GENERALES

Este equipo es de manejo exclusivo de personal capacitado y autorizado para su

uso, previo entrenamiento respectivo. Dicho personal, esta en la obligación de
cumplir las instrucciones descritas en el presente documento.

3. DEFINICIONES

• Cámara: espacio de la centrífuga donde se encuentra el rotor.

• Eje: soporte metálico en el cual se atornilla el rotor. Está unido a la transmisión

del motor de la centrífuga y es el que imprime el movimiento giratorio al rotor.

• Rotor: soporte metálico giratorio en el cual se ponen los tubos para

centrifugarlos. La centrífuga refrigerada 5810R cuenta con 2 tipos de soportes:
uno pequeño para viales de 1,5ml que puede girar hasta una velocidad máxima
de 14000 rpm y un soporte más grande que gira a una velocidad máxima de
4000 rpm de 4 brazos del cual cuelgan 4 dispositivos suspensores metálicos y
puede centrifugar tubos de mayor volumen (usualmente tubos cónicos de 15 y
50 ml).

• Canastilla o contenedor: soporte plástico que va insertado en el dispositivo

suspensor del rotor grande, donde se insertan los tubos cónicos. Las canastillas
son intercambiables de acuerdo al tamaño del tubo que se desee centrifugar.

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4. DESARROLLO DEL INSTRUCTIVO

CENTRIFUGAR POR UN TIEMPO DEFINIDO

1. Enciende el equipo, mediante el botón de encendido localizado en la parte

lateral derecha de la centrífuga. Las características de centrifugación de la
última corrida aparecerán en el display frontal.

2. Abre la tapa de la centrífuga presionando la tecla OPEN en el panel frontal del

equipo.

3. Coloca el rotor indicado para los tubos que va a centrifugar.

4. Carga el rotor simétricamente con respecto al eje, asegurándolo con la llave
diseñada para esta actividad y cierra la tapa de la centrífuga. La luz verde de
la tecla “Open ” debe encenderse si la tapa quedó bien ajustada.

5. Presiona la tecla “Temp” para ajustar la temperatura a la que va a centrifugar

las muestras y selecciona el valor deseado con las flechas. Siguiendo esta
instrucción es posible regular la temperatura durante el proceso de
centrifugado.
6. Ajusta la velocidad de rotación de acuerdo a la necesidad del ensayo,
presionando la tecla “Speed” en el panel de control frontal y las flechas
reguladoras. La velocidad máxima de rotación dependerá del rotor que esté
utilizando.

7. Presiona repetidamente la tecla “Speed”, si desea cambiar la unidad en las

que se da la velocidad de rotación. Para centrifugar en rcf, presiona la tecla
“Speed” hasta que aparezca el símbolo a la izquierda del display de
velocidad e ingresa en el programa de la centrífuga el radio mayor del rotor
que esté usando, para esto, presione nuevamente el botón “Speed” hasta que
el símbolo aparezca a la izquierda del display de velocidad y con las flechas
seleccione el valor del radio deseado. El nuevo valor de rcf aparece tres
segundos después de que el radio del rotor ha sido ingresado.

8. Presiona la tecla “Time” repetidamente hasta que el símbolo (aceleración) o

el símbolo (desaceleración) aparezcan al lado del display del tiempo para
cambiar las velocidades que maneja automáticamente la centrífuga.
Selecciona con las flechas el nivel de aceleración o desaceleración deseado. El
nivel de desaceleración 0 es equivalente a una desaceleración libre en la cual
la centrífuga no frena el rotor.

9. Presiona la tecla “Time” en el panel frontal y las flechas para seleccionar el

tiempo de centrifugación (en min.). Esta actividad puede ser realizada en el
recorrido de la centrifugación.
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10. Presiona la tecla “Start” para empezar a centrifugar. El símbolo aparece

intermitentemente y en el display se observa la velocidad a la que se
encuentra girando el rotor en ese momento. Si desea interrumpir la
centrifugación antes de que se haya acabado el tiempo, presiona la tecla
“Stop”. Cuando la centrífuga se detenga pitará 3 veces y la luz verde del
botón “Open” se encenderá. Cuando se acabe el tiempo de rotación y la
centrífuga se detenga, el equipo pitará 3 veces y la luz verde de la tecla
“Open” se prenderá.

11. Presiona la tecla “Open” para abrir la tapa de la centrífuga, saca los tubos,
cierra la tapa y apaga el equipo presionando el botón “Off”. Registra en el
Formato de Uso Centrífuga Refrigerada (SE-P31-F15) las condiciones y
parámetros de control del equipo.

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CENTRIFUGAR MUESTRAS POR UN CORTO TIEMPO (SHORT SPIN)

1. Enciende el equipo utilizando en botón de encendido localizado en la parte lateral

derecha de la centrífuga. Las características de centrifugación de la última
corrida aparecerán en el “display” frontal.

2. Abre la tapa de la centrífuga presionando la tecla OPEN en el panel frontal del

equipo y levántela.

3. Verifica que el rotor sea el indicado para los tubos que esté utilizando.

4. Carga el rotor simétricamente con respecto al eje y cierra la tapa de la

centrífuga. La luz verde de la tecla “Open” debe encenderse si la tapa quedó bien
ajustada.

5. Ajusta el programa de rotación presionando la tecla “Prog” y las flechas en el

panel de control frontal hasta que aparezca SH en el display de la centrífuga.

6. Presiona la tecla “Start” durante todo el tiempo de centrifugación requerido para

el ensayo. Cuando deje de presionar este botón el corrido se detendrá, el equipo
pitará 3 veces y la luz de la tecla “Open” se prenderá.

7. Presiona la tecla “Open” para la tapa de la centrífuga y saca los tubos.

8. Presiona la tecla “Prog” y con las flechas el programa 0 para regresar al estatus
estándar, apaga el equipo presionando el botón “Off” y registra en el Formato de
uso Centrífuga refrigerada (SE-P31-F15) las condiciones y parámetros de control
del equipo.

CENTRIFUGAR DE MANERA CONTINUA

Esto sólo es necesario si se va a centrifugar más de 99 minutos.

1. Encienda el equipo utilizando en botón de encendido localizado en la parte lateral

derecha de la centrífuga. Las características de centrifugación de la última
corrida aparecerán en el display frontal.

2. Presiona la tecla “Open” para abrir la tapa de la centrífuga y verifica que el rotor
sea el indicado para los tubos que esta utilizando.

3. Carga el rotor simétricamente con respecto al eje y cierra la tapa de la

centrífuga. La luz verde de la tecla “Open” se enciende si la tapa quedó bien
cerrada.
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4. Ajusta el tiempo de rotación de la centrífuga a “oo” presionando la tecla TIME en

el panel de control frontal y las flechas.

5. Presiona la tecla “Temp” y las fechas para ajustar la temperatura requerida para
el ensayo.

6. Presiona la tecla “Start” para iniciar la centrifugación. Durante el corrido en el

display se mostrará la velocidad del rotor en ese momento y el tiempo que lleva
la centrifugación. Si la centrífuga dura en funcionamiento más de 99 segundos,
en el display de tiempo se mostrará “99”.

7. Presiona la tecla “Stop” para detener la centrífuga. Cuando esta se detiene, pita
3 veces y la luz verde de la tecla “Open” se enciende.

8. Presiona la tecla “Open” para abrir la tapa, saca los tubos, cierra la tapa y
presiona la tecla “Off” para apagarla. Registra en el Formato de Uso Centrífuga
Refrigerada (SE-P31-F15) las condiciones y parámetros de control del equipo.

REFRIGERACIÓN

1. Enciende el equipo utilizando en botón de encendido localizado en la parte

lateral derecha de la centrífuga. Las características de centrifugación de la
última corrida aparecerán en el display frontal.

2. Presiona la tecla “Open” para abrir la tapa de la centrífuga y verifica que el

rotor sea el indicado para los tubos que esta utilizando.

3. Cierra la tapa de la centrífuga. La luz verde de la tecla “Open” debe

encenderse si la tapa quedó bien cerrada.

4. Presiona la tecla “Temp” para ajustar la temperatura requerida en el ensayo.

Selecciona el valor deseado por medio de las flechas.

5. Presiona la tecla “Fast Cool” sin cargar el rotor. El rotor empezará a girar a
velocidad constante y la temperatura irá bajando rápidamente. En el campo
de programa del display aparecerá FC, y se oirá una señal a intervalos
regulares. Cuando alcance la temperatura del rotor deseada y esta se
mantenga por 5 minutos la centrífuga se parará automáticamente. Puede
también pararla oprimiendo la tecla “Stop”.Presiona la tecla “Open” cuando el
rotor se detenga completamente y levante la tapa.
6. Carga el rotor simétricamente con respecto al eje y cierra la tapa de la
centrífuga. Presiona la tecla “Star” para iniciar la centrifugación de las
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muestras en las condiciones requeridas. La centrifuga se detiene

automáticamente de acuerdo a la programación definida para el ensayo, pita
3 veces y la luz verde de la tecla “Open” se enciende. Cuando la tapa de la
centrífuga se encuentra cerrada, la cámara se mantiene refrigerada a la
temperatura seleccionada, a condición de que esta sea menor a la
temperatura ambiente, así el rotor no esté girando. Si la centrífuga no se usa
por más de 6 horas o si la tapa no se abre durante este tiempo la
refrigeración automática se apagará y el mensaje “Standby off” aparecerá en
el display al igual que la temperatura real de la cámara.

7. Presiona la tecla “Open” para abrir la tapa y saca las muestras.

8. Limpia la bandeja de agua de condensación que se encuentra debajo del

equipo en la parte frontal inferior después de centrifugar. Deja un tiempo la
tapa de la centrífuga abierta para descongelarla y limpia la cámara
removiendo el hielo y el agua de condensación utilizando un paño suave
húmedo.

9. Cierra la tapa y apaga el equipo presionando el botón OFF. Registra en el

Formato de Uso Centrífuga Refrigerada (SE-P31-F15) las condiciones y
parámetros de control del equipo.

CAMBIAR EL ROTOR

1. Desmonta el rotor que está en la cámara desatornillándolo con la llave

hexagonal (girándola en el sentido contrario de las manecillas del reloj).

2. Limpia la parte del nuevo rotor que va a entrar en contacto con el eje y el eje
mismo con un paño limpio antes de ajustarlo.

3. Verifica que la temperatura del rotor y del eje en el momento de ajustar el

nuevo rotor está entre10°C y 30°C.

4. Coloca el rotor en el eje de manera que ajuste bien y quede horizontal.

5. Atornilla el rotor utilizando la llave hexagonal, girándola en el sentido de las

manecillas del reloj.

6. Verifica que el rotor haya quedado atornillado al eje.

7. Ajusta la tapa del rotor y cierre la tapa de la centrífuga. La luz verde del botón
“Open” debe encenderse si la tapa quedó bien cerrada.
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8. Presiona la tecla “Start” del panel frontal para poner en funcionamiento la

centrífuga durante 1 min sin haber cargado el rotor. La velocidad máxima a la
que puede girar el rotor instalado se ajustará automáticamente. En el display
frontal aparece un letrero diciendo “Max. Speed”.

9. Presiona la tecla “Stop” cuando la velocidad máxima se haya ajustado. El

equipo esta listo para su uso.

CREAR, SELECCIONAR Y BORRAR UN PROGRAMA DE LA CENTRÍFUGA

1. Enciende el equipo utilizando en botón de encendido localizado en la parte lateral

derecha de la centrífuga. Las características de centrifugación de la última
corrida aparecerán en el display frontal.

2. Ajusta los parámetros de la centrífuga (velocidad, temperatura, tiempo de

corrido, etc.)

3. Presiona 2 veces la tecla “Prog” para guardar un programa nuevo, con lo cual el
display del programa titila. El primer número de programa libre esta indicado en
el display de la centrífuga después de la letra P.

4. Selecciona el número que desea asignarle al programa que acaba de crear con las
flechas del panel frontal.

5. Presiona la tecla “Prog” por 2 segundos hasta que aparezca “Ok” en la pantalla.
El programa ha sido guardado exitosamente.
6. Selecciona el programa que desea utilizar mediante la tecla “Prog” y las flechas
de la siguiente forma:
• 1..9, A…Z para los programas creados por los usuarios.
• SH para los parámetros de centrifugaciones cortas (Short Spin). Presiona la
tecla “Start” para empezar la centrifugación.

7. Selecciona el programa 0 ó modifica los parámetros de centrifugación para salir

del programa seleccionado.

8. Presiona “Prog” una sola vez para borrar un programa creado por los usuarios.
Selecciona con las flechas el programa que desea borrar y la tecla “Stop” por 10
segundos hasta que aparezca “Cleared” en la pantalla.

9. Presiona la tecla “Prog” y selecciona con las flechas el programa 0 para regresar
al estatus estándar.

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CÁLCULO DE LA FUERZA CENTRIFUGA RELATIVA

La fuerza centrífuga relativa es la medida de la fuerza aplicada a una muestra en

una ultracentrífuga. Esta puede ser calculada a partir de la velocidad del rotor
(RPM) y el radio rotacional del rotor (cm).

Donde “g” es la fuerza centrífuga relativa, “r” es el radio rotacional del rotor usado y
“N” es la velocidad de rotación.

LIMPIEZA Y MANTENIMIENTO

Solamente se deben usar agentes neutros para la limpieza y desinfección del

equipo.

1. Abre la tapa de la centrífuga y la desconecta de la fuente de poder principal.

Desatornilla el rotor con la llave hexagonal y lo limpia por separado.

2. Limpia la superficie exterior de la centrífuga y la cámara del rotor con detergente

neutro.

3. Limpia la parte interior del rotor con un limpión humedecido en la solución de

jabón neutro y agua. Retire el jabón neutro con un limpión humedecido en agua
y engrase con glicerina las juntas de goma situadas en la cámara interior del
rotor.

4. Seca con un paño absorbente suave la condensación de agua en la cámara del

rotor después de utilizarla en refrigeración.

5. Limpia la cámara de la centrífuga usando un paño húmedo y una solución suave

de jabón neutro cuando se derramen sustancias.

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5. PRECAUCIONES GENERALES

• El rotor debe ser cargado simétricamente con respecto al eje. De lo contrario

el rotor se quedará atorado, se afectará la velocidad de centrifugación y las
partes tenderán a dañarse.

• Por razones de estabilidad mecánica todos los dispositivos suspensores del

rotor grande deben ser cargados con canastillas del mismo tipo. Las
canastillas están marcadas en la parte lateral con una categoría de peso. Las
canastillas y dispositivos suspensores opuestos deben ser de la misma
categoría de peso.

• No mueva o golpee la centrífuga cuando esta se encuentre en

funcionamiento.

• No utilice canastillas ni dispositivos suspensores que muestren señas de

deterioro, corrosión o defectos mecánicos. Revise los accesorios
periódicamente.

• Cuando cambie de rotor asegúrese que el rotor que acaba de instalar no

quede ladeado y quede bien atornillado en el eje.

• Cuando use el rotor pequeño debe asegurarse de ajustar bien la tapa del
rotor.

• Asegúrese que los rotores no estén sometidos a daños mecánicos, dado que
estas partes están sometidas a fuerzas de deformación, un rasguño leve
puede causar un daño interno severo en el material.

• La centrífuga no debe ser manejada en un ambiente inflamable y no debe ser

usada para centrifugar sustancias explosivas o muy reactivas.

• No se deben centrifugar a la máxima velocidad soluciones cuya densidad sea

mayor a 1,2g/cm.

• En centrifugaciones por largo tiempo los tubos tienden a calentarse. Tenga en

cuenta los datos de manufactura de los tubos cuando vaya a centrifugar.

• El uso de solventes orgánicos como el cloroformo puede tener un efecto

adverso en la estabilidad de los tubos. Manéjelos con cuidado.

• Las muestras y reactivos centrifugados deben manejarse usando la protección

necesaria para el analista y para el equipo. En el evento de una
contaminación por impurezas o agentes agresivos las partes de la centrífuga
deben ser limpiadas inmediatamente con un limpiador neutral (e.j. Extran
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neutral o RBS neutral), especialmente los contenedores, las canastillas y los

bornes del rotor y el eje.

• Para abrir la centrífuga en caso de fallo del suministro eléctrico desconectar

el interruptor principal y esperar hasta que el rotor se haya detenido
completamente. Introducir la llave hexagonal en la tuerca debajo del orificio
situado en el centro de la parte frontal de la centrífuga y girar en el sentido
contrario a las manecillas del reloj. Después de abrir la tapa, la llave
hexagonal debe ser sacada.

• En caso de observarse algún mensaje de error en el display, remitirse al

manual del equipo.

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6. RELACIÓN DE REGISTROS

NOMBRE CÓDIGO
Formato de uso
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Centrífuga refrigerada Eppendorf 5810R

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