todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 La caracterización de proteínas puede ser y 8, al ser una prueba que identifica grupos amino libres realizada por reacciones coloridas o de en un compuesto, dio positivo para todos los precipitación; esto debido a la presencia de aminoácidos y proteínas, pero no para el agua, debido a diferentes aminoácidos en las uniones que estas presentan un grupo amino libre, el cual peptídicas que reaccionan con una variedad reacciona con la ninhidrina, el cual es un agente de compuestos formando compuestos oxidante fuerte que efectúa la descarboxilación oxidativa coloreados. Existen reacciones de coloración de los aminoácidos, y forman dióxido de carbono, que son específicas para aminoácidos de esas amoníaco y un aldehído El amoníaco y la hidrindantina proteínas y también otras que sirven para así formadas reaccionan con una segunda molécula de caracterizar grupos comunes a todas las ninhidrina que da lugar a la formación de un pigmento proteínas como grupos amino o uniones color azul o violeta, del que solamente el átomo de peptídicas. nitrógeno pertenece al aminoácido.Este producto OBJETIVOS colorido (llamado azul de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es Identificar la presencia de aminoácidos con independiente de la coloración original del aminoácido. grupos R específicos que constituyen a una proteína a través de reacciones coloridas. Reaccion de Hopkins-Cole. Es específica del grupo RESULTADOS indol característico del Triptófano, y nos indicó la presencia de este en peptona y albumina. El anillo del indol se hace reaccionar con ácido Glioxálico en Grupos - Ninhidrina Hopkins- presencia de ácido Sulfúrico concentrado para formar un SH Cole compuesto violeta que se forma en la interfase entre la solución de proteína y el ácido sulfúrico. Gelatina NO - Peptona NO - SI Reaacion de Millon. Es específica para el grupo Albumina - SI fenólico. El primer paso de la reacción de Millon consiste Tirosina en la nitración del anillo fenólico, por el ácido Nítrico del Triptófano - reactivo, y se forman complejos con los iones Fenilalanina - Mercurioso Hg (I) y Mercúrico Hg (II) del reactivo Cisteína SI produciendo un precipitado rojo o una solución roja, Agua NO NO NO ambos resultados positivos. Algunas proteínas pueden formar el precipitado rojo desde el inicio, mientras que Reacción Reacción Reacción otras primero forman un precipitado blanco, que se debe Millon Xantoproteica de Biuret calentar para dar el color rojo indicativo de la presencia de Tirosina. Cualquier sustancia con un grupo fenólico Gelatina SI SI SI dará positiva la reacción de Millon y puede interferir con Peptona SI SI SI la detección de Tirosina. La gelatina, albumina y Albúmina SI SI SI peptona, al dar positivo a la prueba nos indicaron la Aspartame NO presencia de grupos fenólicos en dichas proteínas. Tirosina SI SI NO Triptófano SI NO Reaccion Xantoprotéica. Algunos aminoácidos Fenilalanina - SI NO como Fenilalanina, Tirosina y Triptófano, tienen anillo aromáticos derivados de benceno y por ello Agua NO NO NO tiene las propiedades químicas del benceno y sus derivados. Una de estas propiedades es la reacción de nitración del anillo bencénico con ácido Nítrico Reacción del plomo para la cisteína. Cuando los concentrado. Los anillos Benceno de Tirosina y aminoácidos y las proteínas que contienen grupo Triptófano están activados y reaccionan fácilmente, tiol se calientan en medio fuertemente alcalino. Es mientras que el benceno de la Fenilalanina no tiene una prueba específica para cisteína, al dar positivo sustituyentes que lo activan y reacciona con más tanto en peptona o albumina, nos indicó la dificultad. reacción para la identificación de grupos presencia de este aminoácido en dichas proteínas. arilo en los aminoácidos, formando nitroderivados En el caso de la cisteína, los grupos tiol de dos de color amarillo. moléculas de cisteína se han oxidado para formar un grupo disulfuro de modo que se establece un enlace covalente transversal entre ellas. La Reaccion de Biuret. La reacción debe su nombre al reacción se lleva a cabo en un medio alcalino, es Biuret, una molécula formada a partir de dos de decir en presencia de NaOH, el cual permite la urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la más sencilla que separación del azufre de la estructura del da positiva esta reacción la presencia de proteínas en aminoácido. Al añadir una sal soluble en agua, una mezcla se puede determinar mediante la reacción como lo fue el acetato de plomo, el azufre se del Biuret. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en combina con el plomo para producir un solución acuosa alcalina (de NaOH o KOH). La reacción precipitado de color negro que corresponde a se basa en la formación de un compuesto de color sulfuro de plomo. violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+. La producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse los aminoácidos. Solo dio positivo para gelatina, peptona y albumina.
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA
Fundamentos de bioquímica estructural; José María