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PRÁCTICA DE LABORATORIO No.

4
OBSERVACIÓN DE ORGANELOS CELULARES
LEDESMA Sindy., BARRERA María., RODRÍGUEZ Julián.
Biología Celular, Escuela de Medicina. Facultad Ciencias de la Salud.
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia. Tunja, Colombia.
2019

RESUMEN

El lunes 13 de mayo, aproximadamente a las 2:00 de la tarde se llevó a cabo el laboratorio


de biología celular “Clasificación de las Bacterias” en uno de los laboratorios de microscopia
ubicado junto al Torreón, dentro de la facultad de ciencias de la salud de la universidad
pedagógica y Tecnológica de Colombia, bajo la asesoría y direccionamiento del docente
cargo del laboratorio, Cesar Mauricio Baracaldo Barrera.

La ya mencionada práctica de laboratorio, mediante la teoría y la práctica, el objetivo fue


que los estudiantes reconocieran algunas diferencias morfológicas entre las bacterias, así
como clasificación de acuerdo a sus características físicas y químicas. Se logró la observación
de dos tipos de bacterias, de las cuales pudimos concluir que tenían algunas semejanzas y
diferencias.
Palabras Claves: bacterias, diferencias, clasificación.

ABSTRACT

On Monday, May 13, at approximately 2:00 p.m., the cell biology laboratory "Classification
of Bacteria" took place in one of the microscopy laboratories located next to the Tower,
within the Faculty of Health Sciences of the Pedagogical and Technological University of
Colombia, under the advice and direction of the professor in charge of the laboratory, Cesar
Mauricio Baracaldo Barrera.

The aforementioned laboratory practice, through theory and practice, had as its objective that
the students recognize some morphological differences among the bacteria, as well as
classification according to their physical and chemical characteristics. Two types of bacteria
were observed, from which we could conclude that they had some similarities and
differences.

Key words: bacteria, differences, classification.

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OBSERVACIÓN DE ORGANELOS CELULARES
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Biología Celular, Escuela de Medicina. Facultad Ciencias de la Salud.
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2019

INTRODUCCIÓN
Esta práctica relacionada con la dar origen a una población de millones de
clasificación de las bacterias y sus bacterias en poco tiempo.
diferencias morfológicas, la hicimos para
que en nuestro aprendizaje como futuros Las bacterias desempeñan funciones que
médicos se nos sea más fácil son importantes para otras formas de vida.
identificarlas, analizarlas y decir que Muchas son endosimbiontes, esto quiere
patologías están involucradas con este decir que viven dentro de otros organismos
tipo de bacterias para tener un diagnóstico o en estrecha asociación con ellos. Por
claro, recetándole al paciente los ejemplo, existen bacterias que habitan en
medicamentos requeridos, logrando un el tracto digestivo de los animales,
tratamiento adecuado. incluyendo el ser humano, y les ayudan a
procesar los nutrimentos que por sí solos
MARCO TEÓRICO serían incapaces de digerir. (1)
Las bacterias son organismos unicelulares
procariontes,esto quiere decir que están Clasificación de las Bacterias:
formados por una sola celula carente de
nucleo.Su acido Por su forma y agrupación.
desoxirribonucleico(ADN) se encuentra
Los modelos de agrupamiento celular de
libre en el citoplasma y no tienen
las bacterias son característicos de
organelos,como las especies definidas y se utiliza como uno de
mitocondrias,cloroplastos o aparato de los criterios de clasificación
golgu.A pesar de su sencilla organización
celular,cuentan con una pared celular Cuando las células microbianas como los
(capa de polisacáridos)que envuelve la cocos se dividen, pueden permanecer
celula propocionandole rigidez y unidas unas con otras, formando arreglos
protección .Son tan pequeñas que es característicos.
imposible verlas a simple vista,solamente
cuando llegan a agruparse formando
colonias,las podremos reconocer.
Los bacilos se dividen únicamente en un
plano pero en algunas ocasiones pueden
Se reproducen asexualmente por medio de
encontrarse células unidas por los
una forma de división celular denominada
extremos o por los lados debido a la etapa
fisión binaria, que produce copias del desarrollo en que se encuentren o a las
genéticamente idénticas a la célula condiciones del cultivo.
original. En condiciones ideales, algunas
bacterias se duplican en cuestión de Las bacterias en espiral generalmente no
minutos por lo que podrían en principio, se agrupan, crecen individuales y aisladas.
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En la siguiente tabla se resumen algunos


de los aspectos fundamentales en la
clasificación de las bacterias

Por composición de
Por la pared celular que
Por ordenamiento Representación
forma reacciona a la
tinción de Gram
Coco Coco único o micrococo
(esférico) Cuando los cocos se dividen en un
solo plano vertical, se separan y Gram negativas no
conservan su individualidad. retienen el cristal
violeta conservan el
colorante rojo por
ejemplo safranina son
Diplococo cuando las células susceptibles a las
hijas se presentan en parejas cefalosporinas
Diplococo en parejas

Gram positivas
Estreptococo en cadena absorben y conservan
Cuando las células hijas forman el colorante cristal
cadenas violeta son
susceptibles a la
penicilina y
estreptomicina
Estafilococo
las células permanecen unidas
pero después de una división
celular en dos o más planos y los
cocos forman grupos irregulares
en ocasiones de gran volumen
similares a racimos de uvas.
Sarcina grupo de ocho cocos
La división celular se produce
formando paquetes de ocho
células

Tetracoco
La división celular se produce en

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dos o tres planos perpendiculares


formando grupos de cuatro
células.

Espirilos En forma de espiral.

En forma de bastón.
Bacilos

Por su requerimiento de oxígeno. O2, aunque predominan en medios


anaeróbicos.
Otro aspecto a tener en cuenta en la
clasificación de bacterias es la necesidad Microaerófilas: sólo se pueden
de oxígeno para poder vivir. Dependen en desarrollar en presencia de bajas tensiones
buena medida de la disponibilidad de las de O2 (menor del 12% en lugar del 20%
enzimas eliminadoras de peróxidos y que es la atmosférica) y altas tensiones de
superóxidos. CO2.

Aerobias estrictas: Dependen de O2 para Por su óptimo de temperatura.


su crecimiento.
Según la temperatura óptima de
Anaerobias estrictas: se desarrollan en crecimiento las bacterias se clasifican en:
ausencia total de O2, utilizan aceptores
finales distintos del oxígeno: CO2, H2 y Termófilas: se desarrollan entre 25 y
N2, o poseen metabolismo estrictamente 80°C, óptima 50 y60°C
fermentativo.
Mesófilas: se desarrollan entre 10 y 45°C,
Anaerobias Facultativas: pueden óptima 20 y 40°C
desarrollarse en presencia o ausencia de
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Psicrófilas: se desarrollan entre -5y 30°C, mayoría, ayudando a la descomposición de


óptima 10 y 20°C. la materia orgánica muerta.

Según el pH en que se desarrollan. Identificación de Bacterias por


composición de la pared celular que
Las bacterias se clasifican en: reacciona a la tinción de Gram.

Acidófilas: Se desarrollan a pH entre 1.0 y Un método de identificación de las


5.0 bacterias es la Tinción diferencial de Gram
que permite identificar la morfología de la
Neutrófilas: Se desarrollan a pH entre 5.5 célula bacteriana en cocos y bacilos Gram
y 8.5 positivos y Gram negativos según la
estructura de su pared celular.
Basófilas: Se desarrollan pH entre 9.0 y
10.0 Se puede discriminar entre dos grandes
grupos de bacterias: Gram positivas (se
Por su forma de nutrición. tiñen de color violeta) y Gram negativas
(se tiñen de color rosado) debido a las
Según su metabolismo interno, las diferencias en la composición de su pared
bacterias presentan requerimientos celular.
nutricionales diversos y se clasifican en:
Como se mencionó anteriormente la pared
Autótrofas quimiosintéticas o celular está formada por peptidoglucano,
fotosintéticas, Las autótrofas la diferencia consiste en que la pared de las
fotosintéticas utilizan la luz del sol y el bacterias Gram positivas es gruesa y está
bióxido de carbono para fabricar su formada por varias capas de
alimento. Las autótrofas quimiosintéticas peptidoglucano aproximadamente 80%-
utilizan compuestos inorgánicos, por 90% y algo de ácido teicoico, mientras
ejemplo, el azufre para fabricar su que la pared de las bacterias Gram
alimento y su fuente de energía es el CO2 negativas está formada por una sola capa
delgada de peptidoglucano
Heterótrofas (por absorción) pueden aproximadamente hasta un 20% la cual
utilizar fuente de carbono orgánico para su está rodeada por una membrana exterior
alimentación compuesta de fosfolípidos,
lipopolisacáridos, y lipoproteínas.
Las bacterias pueden vivir como parásitos
afectando los organismos donde habitan, Hay otro grupo de bacterias denominadas
como simbiontes formando parte de la bacilos ácido alcohol resistente que son
flora bacteriana normal de la piel, diferenciadas utilizando la coloración de
cavidades y tracto digestivo del hombre y Ziehl Nielsen, estas bacterias son
de los animales y saprofitas la gran

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resistentes a la decoloración ácida  Cristal violeta.


permaneciendo teñidos de fucsia.  Alcohol de 90°.
 Azul de metileno.
MATERIAL:
 Microscopios.
 Porta y cubreobjetos.
 Hisopos estériles.
 Mechero.
 Caja petri con cultivos bacterianos.
 Asa bacteriológica.
 Gotero
 Fucsina básica.
MATERIAL BIOLÓGICO: varias veces el portaobjetos sobre la flama
cuidando que no hierva la preparación.
 Cultivos microbiológicos
bacterianos. 2. Coloca dentro de una caja petri el
portaobjetos, cubriéndolo con la solución
de cristal violeta por un minuto. Lavar al
chorro de agua cuidando que no se arrastre
la muestra.
3. Agrega una gota de lugol, dejar 1
REACTIVOS minuto y lavar al chorro de agua.
 Lugol. 4. Decolorar con alcohol de 90°. Esta
 Fucsina básica. operación debe ser rápida para que no se
 Cristal violeta. elimine todo el colorante.
 Alcohol de 90°.
5. Cubrir con fucsina básica por medio
 Azul de metileno.
minuto. Escurrir el colorante y lavar al
chorro de agua.
TÉCNICA PARA LA OBSERVACIÓN 6. Dejar secar la preparación al aire.
DE BACTERIAS:
7. Observar al microscopio con objetivo de
1. Disolver en una gota de agua sobre un inmersión. Algunas bacterias se verán
portaobjetos, una pequeña porción de teñidas de color rosa y otras de violeta.
cultivo bacteriano y con ésta se realiza un
8. Hacer esquemas de las observaciones,
frotis o extensión. Enseguida fijarlo a la
señalando con su nombre las estructuras
llama de un mechero, para esto pasar
que se puedan distinguir.
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9. Realizar un cuadro comparativo de las caso dar un ejemplo de una bacteria de


bacterias, clasificadas por sus importancia en la salud humana.
características físico químicas y en cada
el siguiente procedimiento para realizar la
práctica y observar exitosamente las
bacterias, en cual consistió en calentar un
asa bacteriológica con el mechero para
tomar la muestra en el cultivo, luego se
extiende en el portaobjetos, realizando la
respectiva tinción con los reactivos
propuestos. Primero la solución de cristal
violeta por un minuto, en seguida se lava,
una gota o varias de lugol durante un
minuto, después con alcohol de 90°
rápidamente para que no se eliminara el
colorante. Por último se aplicó fuscina
básica por otro minuto más, lavamos
nuevamente y dejamos secar la
preparación para colocar en el
microscopio para realizar la visualización
de estas muestras.

RESULTADOS
Durante la realización de la práctica, se
utilizaron cultivos de bacterias que ya
estaban disponibles en el laboratorio. Se
prosiguió a extraer pequeñas muestras
para ser observadas. Teniendo en cuenta

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Imagen No 1. Escherichia Coli.


Clasificación: Gram Negativa,
cocobacilos.

Imagen No 2. Staphylococcus.
Clasificación: Gram positiva

DISCUSIÓN conservan el cristal violeta, mientras que


las Gram negativas no pueden hacerlo,
Basándonos en nuestros resultados, los también se pudo apreciar sus estructuras
cuales obtuvimos en la práctica de las cuales pueden ser en cadenas, en
laboratorio, pudimos encontrar y analizar parejas o individuales, un ejemplo de ello
las características físicas y químicas de las puede ser el Diplococo el cual se divide en
bacterias, usando en algunas fucsina parejas, el objetivo de esta práctica es de
básica, cristal violeta y azul de metileno, conocer los tipos de bacterias que hay,
porque las bacterias Gram positivas si
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además de su conformación, Los ejemplos más populares son los de las


características y clasificación para un buen bacterias de E. Coli y la salmonella, que
análisis y diferenciación de las bacterias. comúnmente, también son las
responsables de males como la
intoxicación por alimentos y la fiebre
CONCLUSIONES tifoidea. Dentro de los bacilos también
Las bacterias que observamos se clasifican podemos nombrar a dos de las bacterias
de acuerdo a sus diferencias en la más peligrosas que existen: el Bacillus
composición de su pared celular que en las anthracis, que causa la mortal enfermedad
Gram positivas está formada por varias pulmonar del ántrax y el Clostridium, que
capas de peptidoglucano causa el botulismo, el tétanos y la
aproximadamente el 80 % -90%, que se gangrena.(3)
tiñen de color violeta porque absorben y Existe otro grupo de bacterias
conservan el cristal violeta, siendo denominadas bacilos acido alcohol,
susceptibles a la penicilina y resistentes que son diferenciados
estreptomicina y en las Gram negativas utilizando la coloración de Ziehl Nielsen,
está formada por una sola capa delgada de implementa una solución decolorante una
peptidoglucano aproximadamente 20 %, mezcla de etanol y ácido clorhídrico. Estas
las cuales se tiñen de color rosado debido bacterias son resistentes a la decoloración
a que no retienen el cristal violeta y son ácida permaneciendo teñidos de fucsia. Se
susceptibles a las cefalosporinas. denominan así porque sus paredes
Las bacterias se pueden clasificar según su celulares de ciertas bacterias contienen
forma en cocos, presentan estructura ácidos grasos (ácidos micólicos) de cadena
esférica, tienen la capacidad de vivir como larga (50 a 90 átomos de carbono) que les
células individuales o bien de enlazarse confieren la propiedad de resistir la
hasta forman cadenas y racimos. decoloración con alcohol-ácido, después
El Staphylococcus y el Streptococcus son de la tinción con colorantes básicos. Los
los dos tipos de bacterias más comunes microorganismos del género
dentro de esta clasificación y ambas suelen Mycobacterium contienen una membrana
ser Gram positivas; espirilos, poseen una citoplasmática formada por una bicapa
marcada forma de espiral. Éstas lipídica similar a los restantes eubacterias.
son bacterias Gram negativas y terribles Por encima de estas membranas se
para la salud. Un claro ejemplo es encuentra el rígido peptidoglicano que
la Treponema, que causa la enfermedad de contiene N-glucolilmurámico en lugar de
transmisión sexual de la sífilis y bacilos, N-acetilglucosamina.(4)
con forma de barras o varillas, suelen CUESTIONARIO
ser bacterias Gram positiva o negativa.

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1) ¿Cuáles fueron las diferencias que


observaste al microscopio entre las
diferentes bacterias?

2) Clasifica las células observadas


BIBLIOGRAFÍA: 3. VIX [Internet]. [Citado el 17 de mayo
de 2019]. Disponible en:
1. Biodiversidad mexicana[Internet].
https://www.vix.com/es/btg/curiosi
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mayo de 2019]. Disponible en: 698013.html
https://es.wikipedia.org/wiki/Tinc
i%C3%B3n_de_Ziehl-Neelsen

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