Informe de laboratorio

“Microscopía y niveles de organización

celular”

Asignatura
Laboratorio de biología celular
Primer semestre 2015

Autores: María Melgarejo

María José Peña

Docente: Daniela Rebolledo

Fecha: 01-abril-2015
 Introducción
El presente informe de laboratorio expondrá el tema relacionado con la microscopía
celular basado en la observación de células procariota y eucariota.

“En la actualidad podemos decir que todos los seres vivos están formados por células
(unidad básica de los seres vivos) y que estas unidades de materia viva comparten una
maquinaria común para sus funciones más básicas” (b.Alberts, 2008,2002). Todas las
células comparten dos características esenciales: la primera es la presencia de una
membrana externa que separa la célula del medio externo y la segunda es la presencia
de material genético. A su vez las células se dividen en dos tipos: células eucariontes
(animal y vegetal) y las células procariota (bacterias) que definen a cada especie gracias
a el conjunto de características particulares como lo son los organelos en las células
eucariontes “las células procariota que son mucho más simples y por lo general más
pequeñas que las eucariontes, careciendo a su vez de orgánulos” (By Neil A. Campbell,
2007).

En este practico se observaron distintos tipos de células tanto procariota como

eucariontes en las cuales se destaca el uso de tinción (azul te metileno), aceite de
inmersión y tinciones gram, donde en el desarrollo de este informe se dará a conocer el
procedimiento experimental y los resultados del practico.

Objetivos:

 Observar la estructura y comportamiento de las células procariota y

eucariontes
 Diferenciar entre célula animal y vegetal
 Diferenciar entre eucarionte pluricelular y unicelular
 Reconocer los tipos de tinciones gram mediante muestras de bacterias
 Distinguir algún organelo presente en la célula eucarionte
 Inspección de la membrana plasmática
 Procedimiento experimental
Microscopia: Muestra de letras:

A partir de la preparación del microscopio se procedió a poner el portaobjetos con la

muestra de letras en la platina, luego se observo con el objetivo de menor aumento (4x) y
cuando ya se obtuvo una idea clara de la muestra como por ejemplo el reconocimiento de
estructuras de esta, se paso al objetivo del aumento 10x para así finalizar con este
recopilando la mayor cantidad de datos de la muestra observada desde distintos
objetivos.

Microscopia célula eucariota vegetal: Epidermis de cebolla con tinción:

Como primer material se necesita una cebolla, esta se debe cortar por la mitad con un
bisturí, luego con una pinza y la ayuda del bisturí se le debió extraer la epidermis a la
cebolla con mucho cuidado ya que esta es my delgada y fácil de romperse, después se
puso la epidermis sobre el portaobjetos y se le agregaron 2 gotas de azul de metileno, se
le cubrió con el cubreobjetos para dejarlo reposar por aproximadamente 3 minutos y como
paso final se procedió a observarla al microscopio hasta llegar al aumento 40x.

Microscopia célula eucariota animal: Células descamativas de mucosa bucal con tinción

Para obtener este tipo de muestra se debe tomar una tórula y pasarla por la cara interior
de la mejilla, luego depositar la tórula en el portaobjeto y pasarla suavemente por este
para que la muestra se impregne en este, cuando esto esté listo se debe depositar
alrededor de 1 gota de azul de metileno, luego ponerle un cubreobjetos con mucho
cuidado encima de la muestra y dejarlo reposar por aproximadamente 2 minutos.

Al cabo de los dos minutos se debe poner la muestra en el microscopio y observarla

desde el menor aumento, si la muestra no quedo en buenas condiciones como sucedió en
este caso debido a que el azul de metileno no tiño lo suficiente a las células, la muestra se
tuvo que preparar nuevamente pero con la excepción de agregarle 2 gotas de azul de
metileno y dejarlo reposar durante 3 minutos para luego observarlo en el microscopio.

Microscopia célula procariota: bacterias

Mediante el apoyo del profesor o ayudante se obtuvieron las muestras de bacteria gram
positivas y gram negativas con una gota de aceite de inmersión, para poder trabajarla con
el objetivo 100x que requiere este tipo de aceite para la visualización de la muestra del
tipo bacterias.

Microscopia célula eucariota (Paramecio o Euglena):

Mediante el apoyo de la docente y ayudante se obtuvo el portaobjeto con la gota de

cultivo de paramecio, luego se procedió aponer el portaobjeto en el microscopio y
observar la muestra hasta llegar al aumento 40x. Al observar el paramecio al microscopio
este no se encontró ya que este se había arrancado antes de poner el cubre objetos
sobre la muestra, así que finalmente se observo una muestra de cultivo de Euglena.
 Resultados
Análisis de la muestra de letras:

Con el objetivo de 4x se observó que las letras estaban en posición invertida, se veían
mucho más grandes, con mucha textura pudiéndose observar que la tinta negra estaba un
tanto irregular en el relleno de estas, figura 1(ver anexos).

Con el objetivo de 10x se pudo observar que las letras se veían mucho mas grandes con
mucha más textura en relación a la tinta, en el papel se observaban unas líneas mucho
más claras que el fondo o el color de la mayor parte del papel, también alrededor de las
letras se podían observar una serie de puntos muy poco uniformes alrededor de cada una
de las letras.

Análisis célula eucariota vegetal: epidermis de cebolla con tinción

Con el objetivo de 40x se observo que la célula vegetal de la epidermis de la cebolla (ver
figura 3, anexos) está estructurada de tal manera que al observar por el microscopio se
podían distinguir una especie de “celdillas” que contenían en su interior el núcleo de la
célula, también se observo claramente a pared celular de esta misma todo esto se pudo
observar mediante el uso de la tinción de azul de metileno. Figura 2(ver anexos)

Análisis microscopia célula eucariota animal: células descamativas de mucosa bucal con
tinción

Con el objetivo de 40x se observo que las células descamativas de la mucosa bucal eran
bastante indefinidas habían desde distintos tamaños hasta diferentes figuras y
tonalidades (blancas, amarillas), en estas células se pudo observar grandes círculos muy
irregulares blancos y azules con su membrana plasmática y núcleos definidos por el azul
de metileno figura 3(ver anexos).

Análisis microscopía célula procariota: bacterias

Las bacterias fueron observadas con el aumento de 100x con la ayuda del aceite de
inmersión.

Al poner el objetivo adecuado en el microscopio se pudo observar pequeños círculos

teñidos de color rojo claro que se identifican como células unicelulares , su estructura se
veía muy clara donde se podía identificar un borde más oscuro a su alrededor
correspondientes a la membrana plasmática. Figura 4 (ver anexos)

Análisis microscopia célula eucariota: paramecio o Euglena

Como se indico en el procedimiento experimental no se pudo observar el paramecio así

que en el microscopio se observo la muestra de Euglena.

Con el objetivo de 40x se observó que había varias estructuras alargadas con pequeños
puntitos en su interior. Figura 5(ver anexos).
 Discusión
Muestra de letras: Bajo el microscopio se observaron las letras invertidas, algo que no se
esperaba en el grupo. Esto se debe a que el lente objetivo es convexo y a la desviación
de la luz.

De acuerdo a la obtenido en los resultados el objetivo 10x posee un poder de resolución

mucho mayor que el 4x, ya que tiene una alta capacidad de separa o distinguir objetos
pequeños que están próximos.

Epidermis de cebolla con tinción: Lo observado como “celditas”, corresponde a cada

célula, las cuales tienen formas y tamaños muy variados adaptándose a la estructura que
la recubre llamada pared celular. Los colorantes básicos como el azul de metileno
utilizado en esta tinción, se emplea con frecuencia para determinar el tamaño, la forma y
la organización de las bacterias por lo que no se observó la estructura completa de la
célula como el aparato de golgi, retículo endoplasmatico, ribosomas ni mitocondrias entre
otros.

Células descamativas de mucosa bucal con tinción: Como el material observado procede
de la capa superficial, capa de descamación, del epitelio pluriestratificado (es cuando
tienen más de dos capas de células) de la mucosa bucal, son en su mayoría células
muertas o células que están en período de degeneración.

Bacteria Streptococcus Agalactiae: Al utilizar el objetivo de 100x debemos conseguir una

mayor resolución, consiguiendo aumentar el índice de refracción con aceite de inmersión.
Al sustituir el aire por el aceite de inmersión muchos rayos de luz logran pasar por el
objetivo. Consiguiendo ver la muestra adecuadamente (Prestcott, 2002, p.22)

(Prescott, 2002 p. 29) “La tinción de gram, es el método de tinción más ampliamente
utilizado en bacteriología. Se trata de un método de tinción diferencial porque divide a las
bacterias en dos clases Gram positivo y Gram negativo”. Los colorantes tiñen la pared de
las bacterias de color violeta y tras unos minutos se realiza el lavado del colorante, las
gram positivo mantienen el color violeta y las gram negativo aparecen incoloras.
Nuevamente se tiñe la pared de la bacteria con un color diferente tiñendo las gram
negativas de color rosa. La muestra observada pertenecía a gram positiva, ya que se
observo un color rosado-rojizo.

Paramecium o Euglena: La célula observada posee un flagelo largo, el cual no se observó

dado que no se tiñó por ser muy delgado.

Ambas bacterias son organismos unicelulares pero su notable diferencia radica en su

estructura al desplazarse, la euglena posee organismo flagelado quiere decir que se
mueven por medio de flagelos y el paramecio posee organismos ciliados se desplazan por
medio de cilios.
 Conclusión
En conclusión el práctico rebatió todas las interrogantes que se habían propuestos con el
grupo de trabajo desarrolladas en la parte teórica, hubieron experiencias puntuales como
por ejemplo el observar la muestras de letras que afirmo que estas se ven desde una
perspectiva invertida a la que ve el ojo humano como consecuencia de los lentes
convergentes que forman parte del microscopio óptico compuesto. Pudiendo observar con
todos los lentes objetivos se llego a concluir que el objetivo más adecuado para este
práctico fue el 10x.

También se concluyó la gran diferencia que hay entre las estructuras de las células
eucariotas y procariotas, pero en más detalle se logro profundizar acerca de las
estructuras de las células vegetales y animales el ejemplo más puntual de esto fue el
encontrar núcleos de célula eucariota- vegetal (presentes en la epidermis de la cebolla).

Para finalizar como mayor objetivo se tenía el poder ver una imagen real de los diferentes
tipos de células, aunque este objetivo era el más básico resulto ser el mas importante ya
que el entrará en contacto con lo real hay mayor motivación para seguir investigando y
promoviendo el estudio práctico.
 Referencias
 Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, and
Peter Walter, R. (2002). Biología molecular de la célula (5ta ed.) Ediciones Omega,
S.A. Plato, 26-08006 Barcelona.
 Dr. Jorge Raisman y Dr. Ana maría Gonzales, (2013).Célula Eucariota I:
generalidades. Obtenido de http://www.biologia.edu.ar/cel_euca/celula1.htm
 Neil A. Campbell, Jane B. Reece (2007).biología.(7ma ed.).Editorial Medica
Panamericana, S.A, Madrid, España.
 Lansing M. Prescott, John P. Haley y Donald A. Klein (2002) Microbiologia (5ta
ed.) The McGraw-Hill Campanies, 0-07232041-9 España.
 Anexos
Figura 1: muestras de letras1 Figura 2: epidermis de cebolla con

tinción 2

Figura 3: células descamativas de la

mucosa bucal3

1
Muestra de letras: esta observación microscópica representa como se ven las muestras
en el microscopio óptico compuesto (imágenes invertidas), el objetivo de aumento que se
utilizo fue de 40x, básicamente la muestra se nota muy texturizada en cuanto a la tinta y la
definición de esta.
2
Epidermis de cebolla con tinción: el objetivo utilizado en esta muestra es el de 40x, con
este aumento se puede definir claramente el tipo de célula vegetal que le corresponde,
claramente se distinguen las paredes celulares y el núcleo. La tinción utilizada fue azul de
metileno.
3
Células descamativas de la mucosa bucal: el objetivo utilizado en esta muestra fue el de
40x, donde se pudo observar las células teñidas por la tinción de azul de metileno, estas
se veían claramente irregulares, en relación a la célula vegetal, en su interior se
distinguían pequeños puntitos negros.
Figura 4: célula procariota (bacterias)4

Figura 5: célula eucariota (Euglena)5

4
Célula procariota (bacterias): el objetivo utilizado en esta muestra fue el de 100x , en el
cual se tuvo que utilizar una gota de aceite de inmersión para poder visualizar la muestra
y la tinción de gram para identificar las células ( las que se tiñeron de rojo).
5
Célula eucarionte (Euglena): el objetivo utilizado en esta muestra fue el de 40x, en ella
se pudo observar un cultivo de euglenas (células unicelulares), estas eran alargadas y de
un color oscuro con pequeñas manchitas muy poco visibles.