Reactivos

Ácido Oxálico 0,4%

Ácido ascórbico al 0,1 %
2,6 diclorofenolindofenol (solución coloreada)
Preparación de la curva estándar de vitamina C
a) Preparar los estándares de trabajo: Tomar alícuotas de 0.1, 0.3, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3,
3.5, y 4 mL de ácido ascórbico al 0,1% y llevar a volúmenes de 50 mL con una
solución de ácido oxálico al 0.4%. Estas soluciones enumeradas contendrán 5 mg
de ácido ascórbico por 100 mL respectivamente
b) Se seleccionó 20 tubos de ensayos y en cada uno agregar 1 mL de contenido de
cada fiola y agregar ácido oxálico en cada tubo con agua destilada.
c) Luego de seleccionar los 20 tubos de ensayo se procedió a preprar la solución para
vitamina C.
d) (L2) Tubo de ensayo Nro 1 a concentración de 0.2, se agrega 1 mL de la solución de
fiola, 9 mL de solución coloreada.
e) Se realiza un blanco para el análisis y se agrega 10 mL de agua destilada.
f) (L1) Tubo de ensayo de concentración 0.2, agregar 1 mL de ácido oxálico y 9 mL de
agua destilada
g) Del mismo modo se realizó para los 20 tubos con sus respectivas concentraciones.
Preparación de 4 tubos de I al IV
I. 10 mL de agua destilada
II. 1 mL de ácido oxálico al 0.4% + 9 mL de solución coloreada.
III. 1 mL de estándares de trabajo N1 + 9mL de solución
IV. 1mL de estándares de trabajo de N1 + 9 mL de solución coloreada

Determinación de vitamina C por espectrofotometría En una licuadora se trituró 25 g de la muestra

con 175mL de ácido oxálico al 0.4%. El homogenizado se filtró dos veces con papel filtro Wathman
N° 42; la muestra filtrada se transfirió 1 mL más 9 mL de agua destilada al tubo de ensayo III
(muestra blanco) y 1 mL mg glucosa/dL = Cpatrón A muestra A patrón 66 Dyana Daysi Rosales
Laguna y Gladys Arias Arroyo Rev Soc Quím Perú. 81(1) 2015 más 9 mL de 2,6 diclorofenol al
0,0012% al tubo de ensayo IV, el tubo I estaba constituido de 10 mL de agua destilada y el tubo II
de 1 mL de ácido oxálico al 0,4% más 9 mL de 2,6 diclorofenol al 0,0012%. La temperatura fue
mantenida a 22°C y las lecturas se hicieron a 520 nm en el espectrofotómetro marca GENESYS,
modelo G 10S UV-Vis. La cuantificación de la vitamina C se realizó en base a la ecuación de la curva
estándar preparada Y = a + bx; donde y = absorbancia (L1 - L2) y X = mg de ácido ascórbico/ 100 mL
de ácido oxálico 19.