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UNIVERSIDAD CATÓLICA LOS ÁNGELES

CHIMBOTE
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ODONTOLOGÍA

“EFECTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE COLUTORIOS A BASE DE


EXTRACTO DE ALOE VERA Y DE COLUTORIOS A BASE DE
MATRICARIA CHAMOMILLA SOBRE EL CRECIMIENTO DE
STREPTOCOCCUS MUTANS ATCC25175”

Autor:

CESAR KENJI DIAZ LEÓN

TRUJILLO– PERÚ

2016
CONTENIDO

1. TÍTULO DE LA TESIS

2. CONTENIDO

3. INTRODUCCIÓN ............................................................................................................ 4

4. PLANTEAMIENTO DE LA INVESTIGACIÓN ......................................................... 6

4.1 Planteamiento del problema ............................................................................................. 6

a) Caracterización del problema ............................................................................................. 6

b) Enunciado del problema ..................................................................................................... 6

4.2 Objetivos de la investigación ............................................................................................ 7

• Objetivo general ................................................................................................................... 7

• Objetivo específico............................................................................................................... 8

4.3 Justificación de la investigación ....................................................................................... 8

5.- MARCO TEÓRICO Y CONCEPTUAL ...................................................................... 9

5.1 Antecedentes ..................................................................................................................... 9

5.2 Bases teóricas ................................................................................................................. 12

5.3Hipótesis .......................................................................................................................... 30

6.- METODOLOGÍA ......................................................................................................... 31

6.1 Tipo investigación .......................................................................................................... 31

6.2 Nivel de investigación .................................................................................................... 31

6.3 Diseño de la investigación .............................................................................................. 31

6.4 Población y muestra........................................................................................................ 32

6.5 Operacionalizacion de variables ..................................................................................... 33

6.6 Plan de Análisis ............................................................................................................... 33

7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ........................................................................ 40

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I. TITULO

“EFECTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE COLUTORIOS A BASE DE EXTRACTO


DE ALOE VERA Y DE COLUTORIOS A BASE DE CHAMAEMELUM NOBILE
SOBRE EL CRECIMIENTO DE STREPTOCOCCUS MUTANS ATCC25175”

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II. INTRODUCCIÓN

La creciente demanda de pacientes con problemas bucodentales e interesantes estudios

sobre las propiedades del Aloe Vera y Matricaria Chamomilla, ha generado el interés de

comprobar la efectividad de las mismas, teniendo en cuenta la prevención y control de

las enfermedades orales , tenemos a la caries dental que es una enfermedad extendida en

el mundo, por lo que ha sido y sigue siendo la enfermedad más frecuente del hombre

moderno debido a los microorganismos presentes en la cavidad oral. Del gran número

de bacterias que se encuentran en la cavidad bucal, son pertenecientes al género

Streptococcus, básicamente las especies Mutans, que se considera como la especie más

frecuentemente aislada en la placa dentobacteriana. Por consiguiente, el hecho de

reconocer a Streptococcus Mutans como el microorganismo más importante en la

iniciación de la caries, conduce a diseñar medidas de prevención dirigidas hacia la

eliminación o disminución de éste, en la cavidad oral,siendo uno de los mecanismos

para su control el uso de antimicrobianos.

Existen investigaciones para estudiar el comportamiento de ciertos compuestos

presentes en vegetales sobre el Streptococcus Mutans, una de ella es la Matricaria

Chamomilla “Manzanilla”, son muchas las propiedades adjudicadas a esta planta una de

ellas son su propiedad antibacteriana que atribuida principalmente al bisabolol que

forma parte de su composición química. Áloe Vera logra disminución de la placa

bacteriana y presentar propiedades antitóxicas, antimicrobianas en bacterias anaerobias

o aerobias, antiinflamatorias, astringentes, analgésicas y anticoagulantes , Propocito es e

valuar la efectividad antibacteriana de un colutorio a base de extracto de Aloe Vera y

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de colutorio a base de Chamaemelum Nobile sobre el crecimiento de Streptococcus

Mutans ATCC 25175 y comparar el efecto antibacteriano de las concentraciones de los

colutorios de Aloe Vera y Chamaemelum Nobile.

la caries dental es uno de los problemas de salud más prevalentes que afectan al ser

humano. Esta enfermedad ha sido infravalorada durante largo tiempo como problema

médico y de salud pública. Por esta razón el motivo por el cual se lleva a cabo la

presente investigación es para determinar la efectividad antibacteriana de un colutorio a

base de extracto de Aloe Vera y de un colutorio a base de extracto Chamaemelum

Nobile sobre el crecimiento de Streptococcus Mutans cultivadas ATCC 25175 por lo

consiguiente esta investigación nos va brindar una innovación en las decisiones sobre el

adecuado manejo clínico de la caries dental, tanto en el nivel de salud pública e

individual.

Las propiedades de la Chameemelum Nobile y Aloe Vera han sido estudiadas mucho a

través de los años y se ha demostrado su efectividad en muchas partes del cuerpo

humano. Por ello se pretende consolidar este aporte a la investigación, dada a la escasez

de investigaciones científicas en el área de odontología y la presente investigación podrá

ser base para estudios aplicativos y brindar una alternativa de elección en la inhibición-

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bactericida de placa dentobacteriana y por consiguiente una alternativa en la prevención

y tratamiento de las patologías más frecuentes de la cavidad bucal.

Actualmente se sabe que las plantas medicinales tienen múltiples beneficios médicos

bien conocidos, pero su posible uso como bacteriostático de la principal bacteria

implicada en la formación de placa dentobacteriana, no reúne mayores referencias. Por

ello el propósito de la investigación es evaluar la efectividad antibacteriana de

colutorios a base de extracto de aloe vera y de colutorios a base de Matricaria Nobile

sobre el crecimiento de Streptococcus Mutans ATCC 25175, logrando contribuir al

desarrollo de la salud oral en el Perú.

III. REVISIÓN DE LA LITERATURA

4.1.- Antecedentes

4.1.1.- Antecedentes Nacionales

Álvarez J.1 (2013) encontro el efecto antibacteriano in vitro del colutorio a base de

Matricaria Chamomilla (Manzanilla) a diferentes concentraciones sobre ATCC2652263

de Streptococcus Mutans.. un grupo al que le corresponde la concentración 0.08ml a

0.10% total del colutorio produjo un promedio UFC de 5.545,un tercer grupo

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corresponde a una concentración 0.08% a 0.50% del colutorio produjo un colutorio

promedio UFC de 4.818,el cual representa la mayor inhibición .Tiene como

conclusiones Los 3 colutorios y los dos controles estudiados, presentan efecto

antibacteriano

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Trujillo V.2 (2012). determinò la eficacia de la terapia con aloe vera en los pacientes con

periodontitis crónica. Estudio de cohorte, prospectivo, longitudinal y de laboratorio. En

los pacientes del grupo A fue muy evidente la disminución de la carga bacteriana del

streptococus viridans, considerado como microorganismo activo de la enfermedad

periodontal, la aplicación del gel de Aloe Vera demostró su eficacia al producir en el

70% de los pacientes la eliminación de dichas bacterias, mientas el 30% de los pacientes

no tubo resultados favorables. Se demostró la eficacia del Aloe Vera gracias a los

resultados favorables del efecto antiinflamatorio, demostrando una disminución notoria

de los pacientes a los que se les aplicó el gel de Aloe,

Balaz E.3 (2012) Tuvo por objetivo encontrò la Eficacia del uso del dentífrico de aloe

vera en tratamientos de gingivitis y periodontitis. Corresponde al tipo experimental

para comprobar la utilización del dentífrico aloe vera en los tratamientos periodontales

en la universidad de Guayaquil Facultad Piloto de Odontología. Se observó una

disminución de índice gingival y se observó la regeneración de los tejidos gingivales.

Podemos concluir que el uso de dentífrico de aloe vera en enfermedades periodontales

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ayuda eficazmente a la regeneración de los tejidos gingivales y disminución de los

agentes causantes de la patología. Durante el estudio se evidencio una aceptación

favorable de los pacientes al utilizar el dentífrico de aloe vera. [Tesis de

Pregrado].Guayaquil (Ecuador): Facultad de Medicina, Escuela de Estomatología,

Universidad de Guayaquil; 2012.

Cosco A4 (2010).Tuvo como objetivo determinar la actividad inhibitoria del crecimiento

de flora mixta salival,cepas aisladas del grupo mutans de la flora mixta salival y cepa

patrón de Streptococcus Mutans ATCC®25175TM del aceite esencial de la Matricaria

chamomilla “manzanilla” a diferentes concentraciones. un diseño de tipo experimental,

in vitro, prospectivo y transversal. En los halos de inhibición para la concentración del

25% se observa que los mayores porcentajes se ubican para los halos de 8mm con una

media de 7.6, para la concentración del 50% se observa que los mayores porcentajes se

ubican para los halos de 7mm con una media de 7.4, para la concentración del 100% se

observa que los mayores porcentajes se ubican para los halos de 10mm con una media

de 9.4; mientras que para el grupo control clorhexidina 0.12%( CH) se observa que los

mayores porcentajes se ubican para los halos de 18mm con una media de 17.8.Concluye

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Existe un efecto inhibitorio positivo a las concentraciones de 25%, 50% y 100% del

aceite esencial de Matricaria chamomilla “manzanilla” en cultivos de flora mixta

salival, cepa aislada del grupo mutans de flora mixta salival y cepa patrón de

Streptoccocus mutans. [Tesis de Pregrado].Lima (Perú): Facultad de Medicina, Escuela

de Estomatología, Universidad Mayor de San Marcos; 2010.

4.1.2.-Antecedentes Internacionales

Bhat G.5 (2010). encontro la efectividad que el aloe vera gel dentífrico era igualmente

eficaz como las pastas dentífricas.tipo experimental.;Los resultados de este estudio

preliminar in vitro demostraron que el aloe vera gel dentífrico era igualmente eficaz

como las pastas dentífricas B y C para el control de todos los organismos en el estudio.

Los tres dentífricos mostraron actividad antimicrobiana máxima contra C. albicans y

todos los anaerobios in vitro. En comparación con los dentífricos B y C, una crema

dental antibacterial demostró un mayor efecto frente a S. mitis.

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4.2.- Bases teóricas de la investigación

.2.2.- Streptococcus Mutans

Streptococcus Mutans es una bacteria cocacea, Gram positiva, microaerofílica. Para poder crecer y

desarrollarse “in vitro” necesita de medios enriquecidos y un ambiente con baja tensión de oxígeno, sus

células se disponen en cadenas

Streptococcus Mutans es una bacteria cocacea, Gram positiva, microaerofílica. Para

poder crecer y desarrollarse “in vitro” necesita de medios enriquecidos y un ambiente

con baja tensión de oxígeno, sus células se disponen en cadenas.3

El rol de Streptococcus Mutans, en cuanto a su participación en la iniciación y

progresión de la caries dental ha sido estudiado durante muchos años. Algunas

características fenotípicas de estas bacterias son determinantes en su cariogenicidad. Su

capacidad de virulencia está asociada a varios factores, como son su poder acidogénico,

ya que metaboliza hidratos de carbono a ácidos; poder acidofílico pues es capaz de

crecer a pH 5.2 y su carácter acidúrico, ya que puede mantenerse metabólicamente

activo a pesar de un pH bajo. 1

Hay que destacar que no todas las cepas poseen estas características y que unas son más

patógenas que otras, por lo que ha cobrado una gran relevancia el estudio de variantes

genotípicas dentro de la especie. Las propiedades de patogenicidad de algunas de ellas


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permiten su adaptación y crecimiento sobre la película adquirida del esmalte y así la

colonización del diente. En esta etapa influyen, también factores exógenos como el

mayor o menor consumo de sacarosa en la dieta.1

Streptococcus Mutans se disemine entre las superficies dentarias debe estar presente en

cantidad suficiente en la saliva, para poder vencer la resistencia a la colonización que

opone la microbiota bucal normal.1

La habilidad de Streptococcus Mutans, en cuanto a su participación en la formación de

placa bacteriana, está relacionada con la producción de las glucosiltransferasas, enzimas

que tienen un rol principal en las interacciones adhesivas y expresión de virulencia de

estos microorganismos debido a que catalizan la síntesis de polisacáridos extracelulares

(glucanos solubles e insolubles en agua) que promueven la adhesión de estreptococos

cariogénicos a la superficie del diente. Dichas enzimas proporcionan a la célula un

sustrato de dónde obtener energía y mantener la producción de ácido durante largos

periodos de tiempo.2

A partir del metabolismo de la sacarosa estos microorganismos producen

principalmente ácido láctico, el cual es fundamental en la virulencia debido a que,

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aparentemente, es el ácido más potente que interviene en la desmineralización del

diente. Otra característica del Streptococcus Mutans es su corto efecto post-pH, que

puede definirse como el tiempo necesario para recuperar su actividad de crecimiento

habitual, tras estar sometido a un bajo pH éste vuelve a la normalidad. Según lo

expuesto, no es de extrañar que estas especies bacterianas sean las que consigan

alcanzar más rápidamente el pH crítico 4.5 necesario para iniciar el proceso de

desmineralización.2

Su principal hábitat es la superficie dentaria del hombre, pero también pueden ser

identificados en las fauces. Su presencia en placa bacteriana se ve favorecida por el alto

nivel de sacarosa de la dieta.4

Desde el punto de vista estructural, no difieren del modelo general de todos los

estreptococos, salvo en la ausencia de cápsula, polisacárido C, complejos fibrilares y las

fimbrias que cuando existen, no son muy prominentes. Por el contrario, en la pared

destacan proteínas dotadas de diversas funciones, y polisacáridos, distintos del C. Estos

polisacáridos muestran distintas especificidades antigénicas, lo que permite distinguir

los serotipos a, b, c, d, e, f, g y h.5

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Asociación entre Caries dental y Streptococcus mutans

La caries dental ha sido definida como un estado dinámico de desmineralización -

remineralización que se produce como resultado del metabolismo bacteriano sobre la

superficie dentaria y que con el avance del tiempo determina la pérdida de mineral y

eventualmente, la aparición de una cavidad.9

Numerosos estudios han demostrado que el S. mutans está relacionado con la placa

cariogénica. En la saliva hay un aumento significativo de estos microorganismos antes

de la formación de la caries dental. Debido a su relación con la caries dental, la

evaluación de la concentración de S. Mutans en placa y saliva puede ayudar al

diagnóstico de la actividad de caries.9

Se observa en varios estudios que la prevalencia de caries dental va en aumento con la

edad. En los niños menores de 12 meses está por debajo del 10%; asimismo, alrededor

de los 36 meses está en el 50%.Cuanto más precoz ocurre la colonización por S. mutans

mayor es la posibilidad de desarrollo cariogénico. Grindefjord et en 1995, halló que el

riesgo para desarrollar caries dental es 4.3 veces mayor en los infantes colonizados por

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S.mutansen el primer año de vida.9

Después de ello durante mucho tiempo estudios farmacognosicos de las plantas

utilizadas que nos permitían avalar razonablemente su utilización .10

Aloe Vera

La planta de Aloe vera es originaria de África. Su nombre genérico Aloe proviene del

término árabe alloeh que significa sustancia brillante y amarga. Fue introducida por

Cristóbal Colón en los tiempos del descubrimiento de América, debido a que éste la

utilizaba como medicina para su tripulación e introducida en nuestro medio durante la

época de la conquista. 10

El Aloe vera durante siglos fue utilizada por sus propiedades medicinales y terapéuticas

sin ningún entendimiento claro o análisis científico de cada una de sus propiedades. En

la actualidad, se usa en muchos lugares del mundo en la medicina moderna para tratar

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múltiples enfermedades, además de ser utilizada en la industria cosmetología,

farmacéutica y alimentaria. 11

El Aloe vera es una planta herbácea de tallo corto, raíz gruesa y nudosa, hojas carnosas,

suberectas, extendidas, con bordes aserrados, distribuidas en forma de roseta, de color

verde amarillento en la hojas más externas, y un tono gris las más internas o jóvenes

Estas hojas miden aproximadamente de 50 a 70 cm de largo y 6 a 9 cm de ancho. Las

flores son tubulares, colgantes, amarillas. Esta planta es xerófila, o sea, se adapta a vivir

en áreas de poca disponibilidad de agua y se caracteriza por poseer tejidos para el

almacenamiento de agua. 11

La acción sinérgica de los diversos principios activos contenidos en el gel de aloe ofrece

acción cicatrizante y regeneradora celular, antiinflamatoria, inmunoduladora,

bactericida y antiviral. El acemanano y, más recientemente, el aloérido se han descrito

como los principales responsables de la acción inmunomoduladora. Ofrecen también

efectos protectores y de regeneración de las mucosas del tracto gastrointestinal y

neutraliza la acidez gástrica, por lo que se utilizan en la enfermedad ulceropéptica

gastroduodenal y en las enfermedades inflamatorias crónicas del tracto gastrointestinal.


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A pesar de que se hacen esfuerzos por identificar a los ingredientes activos no se sabe

con certeza los mecanismos de acción exactos de los efectos atribuidos. Se tienen

algunas teorías que explican los efectos del Aloe vera, aunque se sugiere que dichos

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Es conocido también por su poder astringente ya que limpia profundamente las tres

capas de la piel. Regula el Ph gracias a su contenido de aminoácidos y otros elementos

simples como el sodio, potasio, hierro, zinc, etc. Esto estimula la reproducción de las

células epiteliales normalizando el recambio de células viejas por células nuevas y

retrasando considerablemente su desgaste y envejecimiento. Nutre la células epiteliales

y subepiteliales mediante la absorción por ellas de la vitamina A, B1, B2, B6 , B12 y los

azúcares vegetales que flexibilizan las fibras elásticas de la dermis, fortificando las

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fibras de colágeno y estimulan la reproducción de células epiteliales manteniendo la piel

fresca y juvenil durante mucho más tiempo. 11

El Alóe se utiliza en todo tipo de afecciones dérmicas no solo como cosmético, sino

también como cicatrizante, antiséptico y antiinflamatorio, ya que sus nutrientes ayudan

a la regeneración de las células de todas las capas de la piel. Sus características

bacterianas y regeneradoras lo convierten en un buen remedio en caso de granos,

abscesos y forúnculos. El aloe ha proporcionado excelentes resultados en algunos tipos

de Herpes y puede reducir notablemente la duración del acné. Otras afecciones que

pueden tratarse son verrugas, sabañones, eczemas, psoriasis, dermatitis seborreicas, pie

de atleta, micosis, callosidades y picaduras de insectos. En las quemaduras parece que

detiene en poco tiempo el proceso de necrosis dando paso a la regeneración tejidos y a

la cicatrización, Las cicatrices resultan mucho menos notorias y restablecen a la

sensibilidad perdida. Alivia con rapidez el dolor en golpes, esguinces, luxaciones,

dolores musculares, dolores artríticos y reumáticos, pueden ser empleados en pequeñas

heridas, llagas, ulceraciones externas, excoriaciones y escaras por larga permanencia en

cama. 11

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Su acción cicatrizante se debe a que contiene en su composición aminoácidos y

proteínas que intervienen en la formación de la fibra colágena y la vitamina C que

facilita y acelera la cicatrización de la herida. 11

Efecto Antiinflamatorio

Preparaciones de Aloe Vera ha sido utilizado para aliviar la inflamación procedentes de

una amplia variedad de causas desencadenantes. Su actividad antiinflamatoria: inhibe la

síntesis de prostaglandinas y reduce la migración e infiltración de leucocitos, la

liberación de histamina y la síntesis y secreción de leucotrienos: "La actividad

antiinflamatoria del gel de aloe vera se sinergiza con el resto de propiedades

(cicatrizante e inmunoestimulante) para facilitar la curación de heridas o frente a

procesos artríticos.13

Acción antiinflamatoria de Aloe Vera en la Inflamación Aguda y Crónica

La acción antiinflamatoria de Aloe en la inflamación aguda es una de sus acciones más

conocidas. Está claro que es responsable de todos los beneficios iníciales de la

aplicación de Gel de Aloe o extracto de hoja entera, o preparaciones diferentes y

ungüentos y cremas de Aloe a heridas, cortes y abrasiones de todo tipo. También debe

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ser responsable de los primeros beneficios en lesiones deportivas, congelación,

quemaduras y quemaduras de la radiación, en las aplicaciones de daño de tejido de la

odontología, así como sus primeros efectos sobre la artritis y en infecciones.13

Matricaria Chamomilla (Manzanilla)

La Matricaria chamomillaes una planta herbácea, de tallo cilíndrico, erguido, ramoso,

de hasta 50 cm de altura. Presenta hojas alternas, con los folíolos. En posición terminal

presenta en verano unainflorescencia en forma de capítulo paniculado. Las flores

radiales son unos 20, con la lígula blanca, mientras que los del disco son numerosos,

hermafroditas;el receptáculo es hueco y carece de escamas, lo que permite distinguirla

fácilmente de las demás variedades. 14

Hipótesis
▪ H0: Es efectivo el colutorio a base de un extracto de Aloe Vera y de un extracto

Chamaemelum Nobile sobre el crecimiento de Streptococcus Mutans ATCC

25175.

▪ H1: No es efectivo el colutorio a base de un extracto de Aloe Vera, ni el

colutorio a base de extracto Chamaemelum Nobile sobre el crecimiento de

Streptococcus Mutans ATCC 25175.

IV. METODOLOGÍA

5.1.- Tipo de investigación:


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El presente estudio es de tipo básico, cuantitativo.

5.2.- Nivel de investigación

▪ Nivel explicativo

5.3.- Diseño de investigación

▪ Longitudinal

▪ Analítico
▪ Prospectivo
▪ Experimental

5.4.- Población y muestra

▪ Población: Se trabajó con una cepa estándar de Streptococcus Mutans


ATCC25175.
▪ Muestra: Estará constituida por 48 placas Streptococcus Mutans que serán
evaluados en 3 grupos :

Grupo 1: Grupo control

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Grupo 2: Streptococcus Mutans enfrentado a extracto de aloe y vera
Grupo 3: Streptococcus Mutans enfrenado a extracto de Chamaemelum Nobile

Criterios de selección
▪ Halo de inhibición producido por un colutorio a base de un extracto Aloe Vera y
de un extracto Chamaemelum Nobile en estudio sobre la placa Petri con
Streptococcus Mutans.ATCC25175.

Unidad de Muestreo
Inoculo 10ml de 5° Streptococcus Mutans.
Tamaño muestral
N= (Z +Z )2 2
3 B 25

(X X )2
1– 2

Dónde: Z X =1.96 para un x=0.05


/2

Z =0.84 para un B=0.20


B

S=X - X
1 2

Reemplazando: n= (1.96+0.84)2 2=16 repeticiones. Por concentración Aloe Vera y Chamaemelum


Nobile.

En el cual daría como resultado 16 repeticiones para cada concentraccion.

5.5. Definición y operalizacion de variables.

Escala
Variables Dimensiones Indicadores Categoría de
Medición

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Independiente: Concentración Porcentajes de Categórica:
Concentración Aloe Vera y disolución de 0.10% Nominal
de Extracto de Chamaemelum Aloe Vera y 0.25%
Aloe vera y Nobile Chamaemelum 0.50%
Chamaemelum Nobile
Nobile

ATCC25175 ------------- Crecimiento Cualitativa Cepa aislada


bacteriano Nominal del
Streptococcus
Mutans

Dependiente:
Tamaño del
Efectividad ------------- Halo de 0-25mm Razón
Antibacteriana inhibición

5.7. Plan de Análisis

▪ Para procesar la información se hará uso de los paquetes estadísticos: Excell y


Spss con los cuales se construirán tablas de frecuencia de una entrada con sus
valores absolutos, se calculara la medida y desviación estándar.

▪ Para determinar la efectividad antibacteriana de los colutorios a base de un


extracto de Aloe Vera y de un extracto Chamaemelum Nobile sobre el
crecimiento del Streptococcus Mutans ATCC 25175 se hará un análisis de
varianza de un diseño completamente aleatorizado luego se aplicara una prueba
de comparaciones múltiples. Ambas pruebas con un nivel de significancia del
5%(p<0.05).

▪ Ensayo con el método de disco de difusión: La actividad antibacteriana del


extracto de Aloe Vera fue determinado por la prueba de susceptibilidad de
difusión de disco en un medio solido (placa petri) con agar mueller hinton
fueron usados para sembrar Streptococcus Mutans 50 Ul del colutorio de Aloe
Vera se usan para embeber un papel de filtro estéril de 6 ml de diámetro y son
colocados en el medio de cultivo, enseguida se incuba a 37 C bajo condiciones

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anaerobias por 72 horas. el diámetro de la zona de inhibición alrededor del papel
de filtro fue mediado en mililitros .Cualquier zona de inhibición alrededor del
papel de filtro que mida menos o igual de 7 mm fue considerado como resultado
negativo.

▪ Se usara para determinar el MIC el extracto de Aloe Vera contra el crecimiento


de Streptococcus Mutans.

▪ El crecimiento Streptococcus Mutans se efectuara en el medio de todd-hewitt,


una suspensión de Streptococcus Mutans será preparada agua destilada con una
concentración ajustada de 10 ufc/ ml

▪ 200 ml del colutorio de Aloe Vera fue dispensado en platos de cultivo de 96


posillos a donde se añadió 100 microlitros de la suspensión de Streptococcus
Mutans, se dejó incubando bajo condiciones anaeróbicas al 5% del CO2 a la
temperatura de 37 C por 48 horas la absorbancia medida y la mayor dilución con
la cual no haya crecimiento de Streptococcus Mutans será considerada como la
concentración inhibitoria mínima.

Protocolo de recolección de Aloe Vera y Chamaemelum Nobile

Estandarización de la cepa aislada de Streptoccocus del grupo Mutans:

La estandarización de la cepa fue según escala de Mc Farland 0.5, para lo cual se utilizó
un inóculo de colonias aisladas de Streptoccocus del grupo mutans según las
características mencionadas, en 2 ml de suero fisiológico hasta obtener la misma
turbidez de la escala de Mc Farland 0.5.

Prueba de la Acción antibacteriana del extracto de Aloe Vera y Chamaemelum Nobile


frente a cepa aislada de Streptoccocus del grupo mutans:

Bajo condiciones estériles se procedió a sembrar con un hisopo el inóculo bacteriano en


5 placas con agar TSA.

Con pinzas estériles se procedió a colocar en cada placa 1 disco con 10 ul de


clorhexidina 0.12%, 1 disco de papel de filtro con 10 ul de agua destilada y 3 discos de
papel de filtro con 10 ul del extracto de Aloe Vera y Chamaemelum Nobile en las
concentraciones 25%, 50% y 100%-Las 5 placas fueron colocadas en una jarra de
anaerobiosis y llevadas a incubar a 37o C por un periodo de 48 a 72 horas.

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Se procedió a la lectura de las medidas de los halos de inhibición, con la ayuda del pie
de rey o calibrador.

Cepas bacterianas para el estudio:

Instituto nacional de salud del Perú Streptococcus Mutans ATCC 25175

Crecimiento de cepas bacterianas estándares:

Streptococcus mutans: Crece a 37°C en Agar sangre (5 % de sangre de carnero)

Reconstitución de las cepas estándar Streptococcus mutans ATCC 25175:

Para viabilizar esta cepa bacteriana se utilizó un frasco con caldo de Tioglicolato. Se
llevó a la incubadora a 37oC por el lapso de 24 a 48 horas. Al cabo de las 48 horas se
realizó un repicaje con este inóculo en una placa con agar sangre, llevándose
nuevamente a incubar por 24 horas.1

Estandarización de la cepa patrón Streptoccocus mutans:

La estandarización de la cepa fue según escala de Mc Farland 0.5, para lo cual se utilizó
un inóculo de colonias de Streptoccocus mutans en 2 ml de suero fisiológico hasta
obtener la misma turbidez que el patrón de Mc Farland 0.5.1

Protocolo de desinfección Hojas de Chamaemelum Nobile y Aloe Vera en la


elaboración de los extractos

Chamaemelum Nobile

1) La obtención del extracto se realizara con el método por arrastre de vapor de

agua. Esta técnica resulta una de las más simples y económicas para obtener el

extracto esencial de este tipo de planta y en general para cualquier otro.

2) Las ventajas de este método son su simplicidad, bajo costo y el hecho de poder

maniobrar grandes volúmenes de materia prima.

3) Este método se fundamenta en que los aceites esenciales son arrastrados por la

corriente de vapor de agua que se genera en la fuente de vapor, luego esta

Página 26
mezcla es condensada mediante su paso por un refrigerante de vidrio, para luego

separar el extracto del agua por simple diferencia de densidades.

4) Se recolectaron 10 kg de flores frescas de Chamaemelum Nobile.Los cuales

fueron conservados a temperatura ambiente sin desecar, exponer al sol o lavarlos

hasta el momento de la extracción del aceite esencial. Se procedió a colocar 5kg

de flores con 2 litros de agua, y esta mezcla depositada en un balón de fondo

plano, para luego ser sometidas al proceso de hidrodestilación por arrastre en

vapor de agua, durante 4 horas. Obteniéndose aproximadamente 4 ml del

extracto esencial por cada destilación aproximadamente.

Aloe Vera

1) Lavar por 3 veces las hojas con cloruro de sodio al 9% x 1000cc

2) Se cortaron las hojas quitando la capa superior de modo que queden expuesta la

pulpa o cristalino de las mismas.

3) Luego se recolectó toda la pulpa de las hojas

4) Se mezclaron los ingredientes, para ello se colocó la pulpa de AloeVera dentro

de una licuadora junto con los 500mg de Vitamina C y las 400 IU de Vitamina

E, mezclando todo a una velocidad máxima hasta lograr una pasta homogénea

con un color uniforme. Dichas vitaminas cumplen la función de inhibir la

oxidación del Aloe Vera.

5) Una vez lograda la consistencia deseada, se guardó en un frasco de vidrio o

recipiente apto para largas conservas.

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6) Antes de guardar la preparación de Aloe Vera, se esterilizó el frasco dejándolo

en agua hirviendo como mínimo 15 minutos, luego se colocó la preparación en

el frasco aún caliente para finalmente taparla. Se lo conservó en la heladera,

donde obtuvo una consistencia similar a la de un gel

RECOLECCIÓN E IDENTIFICACIÓN TAXONÓMICA DE LAS


ESPECIES VEGETALES
La sábila, será recolectada del jardín Botánico de la Facultad de Farmacia y
Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, distrito de Trujillo,
provincia de Trujillo, región La Libertad, ubicado a 34 m.sn.m.
La manzanilla será recolectada del distrito de Otuzco, provincia de Otuzco,
región La Libertad, ubicado a 2630 m.s.n.m.
Luego un ejemplar completo de cada una de las especies vegetales se llevará al
Herbarium Truxillense para su identificación taxonómica.

PREPARACIÓN DEL EXTRACTO Y COLUTORIO DEL GEL DE Aloe


vera (sábila)

Preparación del extracto del gel de sábila

Se realizará cortes transversales de las hojas de sábila con un cuchillo


esterilizado y se lavará con agua destilada estéril y se desinfectará con etanol de
96, luego se cortará los extremos de cada hoja y se remojará con agua destilada
para extraer el exudado. Se realizará un recambio de agua cada 24 horas por 2
días. Transcurrido el tiempo se cortará quitando la capa superior de modo que
queden expuesta la pulpa o cristalino de las mismas. Luego toda la pulpa se
procederá a licuar junto con los 500 mg de Vitamina C y las 400 IU de Vitamina
E, mezclando todo a una velocidad máxima hasta lograr una pasta homogénea
con un color uniforme. Dichas vitaminas cumplen la función de inhibir la
oxidación del Aloe vera y luego se filtrará con coladora. Una vez lograda la

Página 28
consistencia deseada, se guardará en un frasco de vidrio de color ámbar y se
guardará el gel de Aloe vera en refrigeración.(2)

Preparación del colutorio de Aloe vera


Se preparará tres concentraciones de colutorio de Aloe vera de acuerdo a la
siguiente formulación:

Tabla 1. Fórmula de colutorio a base del extracto del gel de Aloe vera 0.5%
Sustancia Porcentaje

Emal 70 (Lauril éter sulfato de 5%


sodio)
23%
Glicerina
7%
Sorbitol
0,05%
Sacarina sódica
5%
Alcohol 96º
0.5%
Extracto de gel de Aloe vera
59.45%
Agua destilada

Total 100.00%

Tabla 2. Fórmula de colutorio a base del extracto del gel de Aloe vera 1.0 %

Sustancia Porcentaje

Emal 70 (Lauril éter sulfato de 5%


sodio)
23%
Glicerina
7%
Sorbitol
0,05%
Sacarina sódica
5%
Alcohol 96º

Página 29
Extracto de gel de Aloe vera 1%

Agua destilada 58.95%

Total 100.00%

7)
8) Tabla 3. Fórmula de colutorio a base del extracto del gel de Aloe vera 2.5%
Sustancia Porcentaje

Emal 70 (Lauril éter sulfato de 5%


sodio)
23%
Glicerina
7%
Sorbitol
0,05%
Sacarina sódica
5%
Alcohol 96º
2.5 %
Extracto de gel de Aloe vera
57.45%
Agua destilada

Total 100.00%

Procedimiento
Se pesará cada uno de los ingredientes y se mezclará el lauril éter sulfato de
sodio junto con la glicerina, el sorbitol en un agitador magnético a 800 rpm
durante 10 minutos y, poco a poco, se añadirán las ¾ partes de disolvente
(agua). En este punto se adicionará la sacarina sódica, se agitará durante cinco
minutos hasta su completa disolución. Luego se completará la formulación con
el resto del disolvente hasta alcanzar el volumen total especificado en la
fórmula.
Posteriormente, se procederá al envasado y etiquetado del colutorio en un frasco
de vidrio, dejándolo reposar por 24 horas para que desaparezca la espuma
formada durante el proceso de manufactura.(3)

Página 30
PREPARACIÓN DEL EXTRACTO Y COLUTORIO DEL Matricaria
chamomilla (manzanilla)

Preparación del extracto fluído de Matricaria chamomilla (manzanilla)


Se pesará 100 g de flores de manzanilla desecadas, luego se humectará con
suficiente alcohol de 70° GL. Se colocará el material vegetal en el equipo de
percolación o lixiviación con cantidad suficiente de alcohol de 70°GL,
seguidamente se dejará macerar por un periodo de 48 h. Pasado el periodo de
maceración se procederá a percolar a velocidad constante de 10-20 gotas /min el
equivalente al 75% del extracto fluido total (75mL), guardándose esta en frasco
ámbar.
Posteriormente se percolará el equivalente al 25% (25mL) del extracto fluido
total, lo cual se reunirá con la primera fracción obteniendo un extracto madre de
100 mL. Se filtrará el extracto etanólico al vacío, con papel de filtro Whatman
N° 1. A continuación, el extracto fluido se guardará en frascos de vidrio ámbar
y en refrigeración (4-8°C) hasta su posterior utilización. (2)

Preparación del colutorio de Matricaria chamomilla

Se preparará tres concentraciones de colutorio de Matricaria chamomilla de


acuerdo a la siguiente formulación:
Tabla 1. Fórmula de colutorio a base del extracto fluido de manzanilla 0.5%
Sustancia Porcentaje

Emal 70 (Lauril éter sulfato de 5%


sodio)
23%
Glicerina
7%
Sorbitol
0,05%
Sacarina sódica
5%
Alcohol 96º
0.5%
Extracto fluído de manzanilla
59.45%

Página 31
Agua destilada

Total 100.00%

Tabla 2. Fórmula de colutorio a base del extracto fluído de manzanilla 1.0 %

Sustancia Porcentaje

Emal 70 (Lauril éter sulfato de 5%


sodio)
23%
Glicerina
7%
Sorbitol
0,05%
Sacarina sódica
5%
Alcohol 96º
1%
Extracto fluído de manzanilla
58.95%
Agua destilada

Total 100.00%

Tabla 3. Fórmula de colutorio a base del extracto fluído de manzanilla al 2.5%


Sustancia Porcentaje

Emal 70 (Lauril éter sulfato de 5%


sodio)
23%
Glicerina
7%
Sorbitol
0,05%
Sacarina sódica
5%
Alcohol 96º
2.5 %
Extracto fluído de manzanilla
57.45%
Agua destilada

Página 32
Total 100.00%

Procedimiento
Se pesará cada uno de los ingredientes y se mezclará el lauril éter sulfato de
sodio junto con la glicerina, el sorbitol en un agitador magnético a 800 rpm
durante 10 minutos y, poco a poco, se añadirán las ¾ partes de disolvente
(agua). En este punto se adicionará la sacarina sódica, se agitará durante cinco
minutos hasta su completa disolución. Luego se completará la formulación con
el resto del disolvente hasta alcanzar el volumen total especificado en la
formulación.
9) Posteriormente, se procederá al envasado y etiquetado del colutorio en un frasco
de vidrio, dejándolo reposar por 24 horas para que desaparezca la espuma
formada durante el proceso de manufactura.(3)

Técnica operatoria

Fundir a Emulgin y añadir glicerina.Acondicionar con alcohol estilico a unos 40 Co 16

Detección de actividad antibacteriana de Aloe y Vera

Se utilizó el método de difusión de disco (cuantitativo) también conocido como kirby-


bauer para la detección de la actividad bactericida para la detección de la sensibilidad
bactericida o resistencia al Streptococcus Mutans 14

El método de microdilusion y dilución en agar (cuantitativo) donde se mide la


concentración mínima inhibitoria del agente antibacteriano

• La concentración mínima inhibitoria es definida como la concentración más baja


del agente antibacteriano que inhibe visiblemente el crecimiento de un
microorganismo

• Ambos métodos cuantitativos son considerados el gold estándar para pruebas de


susceptibilidad por su alto nivel de reproducibilidad
La concentración mínima inhibitoria de aloe y vera es mayor e igual a 2250 ml por
militros

Página 33
▪ 0.225 % mínima inhibidora y la máxima inhibidora 0.50% .14

5.8.-Matriz de consistencia

PROBLEMA OBJETIVOS HIPOTESIS METODOLOGIA POBLACIÓN

Problema Objetivo Hipótesis general: Tipo: Población:


general: general:
¿Es efectivo el Evaluar la efectividad Si es efectivo el El presente estudio es de ATCC25175.
colutorio a base de del colutorio a base de colutorio a base de tipo experimental,
extracto de Aloe extracto de Aloe Vera y extracto de Aloe Vera y porque se va a valorar el
Vera y Chamaemelum sobre el de Chamaemelum sobre efecto de una o varias
Chamaemelum sobre crecimiento de el crecimiento de variables, donde el
el crecimiento de Streptococcus Mutans Streptococcus Mutans investigador manipula
Streptococcus ATC 25175. ATCC 25175. las condiciones de la
Mutans ATC Objetivos investigación.
25175? Específicos: Nivel :
Determinar la Aplicativo
concentración mínima
inhibidora de Aloe Vera Diseño de
sobre el crecimiento de investigación:
Streptococcus Mutans
ATC 25175.
Longitudinal
Analítico
Determinar la
concentración mínima Prospectivo
inhibitoria de Experimental
Chamaemelum sobre el
crecimiento de
Streptococcus Mutans
ATC 25175.

Determinar la
concentración mínima
bactericida de Aloe Vera
sobre el crecimiento de
Streptococcus Mutans
ATC 25175.

Determinar la
concentración mínima
bactericida de
Chamaemelum sobre el
crecimiento de
Streptococcus Mutans
ATC 25175.

Determinar efecto
sinérgico Aloe Vera y
Chamaemelum. Sobre el
crecimiento de
Streptococcus Mutans
ATC 25175.

Página 34
VI .REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1.- Jáuregui Álvarez. Efecto antibacteriano in vitro del colutorio a base de Matricaria

Chamomilla (Manzanilla) a diferentes concentraciones sobre ATCC2652263 de

Streptococcus Mutans. . [Tesis de Pregrado].Trujillo (Perú): Facultad de Medicina,

Escuela de Estomatología, Universidad Nacional de Trujillo; 2013.

2.- Valeria Trujillo.Eficacia de la terapia con gel de preparación casera de Aloe Veraen

los pacientes con periodontitis crónica. [Tesis de Pregrado].Loja (Ecuador): Facultad de

Medicina, Escuela de Estomatología, Universidad Nacional de Loja; 2012.

3.- Erika Balaz .Eficacia del uso del dentífrico de aloe vera en tratamientos de gingivitis

y periodontitis. [Tesis de Pregrado].Guayaquil (Ecuador): Facultad de Medicina,

Escuela de Estomatología, Universidad de Guayaquil; 2012.

4.- Cosco A .Actividad inhibitoria del crecimiento de Streptococcus mutans y de flora

mixta salival por acción del aceiteesencial de la Matricaria chamomilla manzanilla

[Tesis de Pregrado].Lima (Perú): Facultad de Medicina, Escuela de Estomatología,

Universidad Mayor de San Marcos; 2010.

5.- Bhat G .Inhibición del Crecimiento en Vitro de Steptococcus Mutans por papaína y

Sanitred,[en línea],Santiago-Chile,2005,[citado 12-06-2010],Tesis Universidad de

Chile,Facultad de Odontología

Página 35
6.- Gaete FM&Oliva MP. Efectividad del colutorio de manzanilla comparado con

placebo y clorhexidina en pacientes con gingivitis entre 19 y 25 años: ensayo clínico

controlado.int.odontostomat, 6(2):151-156,2012

7.- Bhat G .Inhibición del Crecimiento en Vitro de Steptococcus Mutans por papaína y
Sanitred,[en línea],Santiago-Chile,2005,[citado 12-06-2010],Tesis Universidad de
Chile,Facultad de Odontología

8. Moromi H. Manual de prácticas de microbiología general y estomatológica. Lima,


Perú 2002: 92-101

9-. LIÉBANA J. Microbiología Oral. España: 1° edición. Editorial Interamericana Mc.

Graw Hill: 1995: 227- 32, 447-62.

10. Castro R. Determinación de los sitios óptimos para establecimiento de Aloe vera
(Aloe barbadensis Miller) en las comunidades agrícolas de la IV región con fines
reproductivos y de recuperación de suelos. Proyecto CORFO 2004.

11. Rojas R., Bertrán S. Elaboración De Una Forma Farmaceutica De Aplicación


Tópica Con Efecto Cicatrizante A Partir Del Extracto Atomizado De Látex De Croton
Lechleri. Tesis Bachiller. Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de
Farmacia y Bioquímica.Perú 1999.

12. Filoche, Antimicrobial effects of essential oils in combination with clorhexidine


digluconate. Oral Microbiology and Immunology, 2004. 20(4) ,221. Disponible en:
http://www.blackwell-synergy.com/doi/abs/10.1111/j.1399-302X.2005.00216.x

13. Sainz de Net T. Estudio de flora bacteriana en pacientes tratados ortodóncicamente,


aplicando enjuagues bucales de Matricariachamomilla “manzanilla”2004. 22(10) ,250.
disponible en: http://www.odontologia- online. com/casos/part/JRC/JRC01/jrc01.httm

14.- Moromi H. Manual de prácticas de microbiología general y estomatológica. Lima,


Perú 2002: 92-101

14- Ehsani M. A Comparison between Antibacterial Activity of Propolis and Aloe vera
on Enterococcus faecalis (an In Vitro Study) 2013 Summer; 2(3): 110–116.

Página 36
15-Trillo C.Tratado de farmacia galénica Peru 1996 :110-300

16-Ayala C.tecnologia costemica facultad de farmacia y bioquímica .Perú 2011: 92-101

Página 37
FOTOS :

Matricaria chamomilla:

Recolección

Página 38
Recolección

ALOE VERA

Página 39
recolección

Página 40
PREPARACION DEL EXTRACTO FLUIDO DE FLORES DE MANSANILLA

Selección de las flores manzanilla y separación de la hoja

Página 41
Secado de la muestra en estufa (marca JSR) de convección forzada a 40o

Muestra de flores de manzanilla secadas después de 24horas

Página 42
Página 43
Pesado de 100 gr de las flores secadas de mansanilla

Preparación del extracto fluido mediante el método de percolación

Página 44
lixiviación apercolacion del extracto fluido de flores de manzanilla

Obtención de 200 ml de extracto fluido de flores de manzanilla

Página 45
Colocación del extracto fluido de flores de manzanilla en el frasco de vidrio de color

ambar

Filtración al vacio del extracto fluido de flores de manzanilla

Página 46
Página 47
PREPARACION DEL EXTRACTO DE SABILA

Selección de hojas

Página 48
Lavado de las hojas de Aloe Vera

Adecuacion de las hojas de Aloe Vera sobre papel Kraft

Página 49
Corte lateral de las hojas de Aloe Vera y el remojado en agua para sacar las

antraquinonas

Remojado de sabila en agua destilada después de 24 h.

Página 50
Colocacion del gel de Aloe Vera en una capsula de porcelana

Página 51
Licuado de gel de Aloe Vera

Colocacion del gel Aloe Vera

Página 52
Prepacion de colutorio concentraciones

transvasando el gel de Manzanilla en frasco viales

Página 53
Preparacion de colutorio de manzanilla

Página 54
concentraciones de manzanilla

Página 55
Colutorio de manzanilla

Página 56
Colutorios preparados de Aloe Vera y Matricaria Chamomilla

Aloe vera 2.5% , 1 % , 0.5%

Mansanilla 2,5% , 1% , 0,5%

Página 57
Inoculo de difusión , recuentro inicial de las bacterias

Resultado del método de sifusion en base a los porcentajes del colutorio 7 repeticiones

manzanilla

Página 58
Control positivo 0,12% digluconato de clorexdina

Página 59
Después de la incubación no hay crecimiento hasta el 1 %

Determinación de CM I

Página 60
No se observó ningún crecimiento CMI 0,5%

Página 61
Resultado del método de sifusion en base a los porcentajes del colutorio 7 repeticiones

Aloe Vera

Página 62
Aloe Vera han crecido en las 3 concentraciones

Página 63
Falta interpretación

Resultados y grafico

Página 64