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Informe 7 Cultivo de Microorganismos
Informe 7 Cultivo de Microorganismos
CULTIVO MICROBIOLÓGICO
Callao, Perú
2014
CULTIVO MICROBIOLÓGICO
1. INTRODUCCIÓN
2. OBJETIVOS
Comparar los principales métodos de cultivo utilizados para los diferentes tipos
de microorganismos.
Conocer los principales métodos de cultivo utilizados para los diferentes tipos de
microorganismos.
3. MARCO TEORICO
Diferentes métodos de siembra
Métodos Generales:
1) Siembra por dilución: Se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el caldo
simple. Se toma el material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada
con el material bacteriológico, se agita, con movimientos moderados.
Medio de cultivo: Liquido
Instrumento: Asa
Finalidad: poner la bacteria en suspensión
Diluciones sucesivas
Consiste en diluir una muestra hasta conseguir muy pocas células que, tras inocularse en
un medio de cultivo, generen colonias aisladas.
4) Por picadura o punción: Con una aguja se toma el material que se quiere sembrar y
se lo introduce en el tubo, con medio semisólido. Introducir la aguja hasta el fondo,
formando un canal de punción, trayecto por el cual la retiraremos luego. Este método se
utiliza para estudiar la movilidad de las bacterias.
Medio de cultivo. Semisólido
Instrumento: aguja bacteriológica
Finalidad: Estudiar la movilidad de las bacterias
5) Siembra en TSI: (Por picadura y estrías en superficie): el TSI (Triple Sugar Iron)
es un medio que contiene glucosa, sacarosa y lactosa, hierro y un indicador que es el
rojo fenol.
En este medio sembraremos por picadura y estrías en superficie, como ya conocemos,
para estudiar los cambios que ocurrirán en superficie y profundidad. A lo largo del canal
se desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en la parte superior o inferior del
tubo, estarán indicando su comportamiento frente a los azucares, los cambios indican lo
siguiente:
Crecimiento microbiano en medio líquido
Si la bacteria crece en un medio líquido, en la mayoría de los casos las células que se
producen en cada división continúan su vida independientemente formándose una
suspensión de células libres.
En un cultivo discontinuo de bacterias en medio líquido, se pueden diferenciar cuatro
fases en la evolución de los parámetros que miden el crecimiento microbiano:
1.- Fase lag o de adaptación durante que los microorganismos adaptan su metabolismo a
las nuevas condiciones ambientales (abundancia de nutrientes y condiciones de cultivo)
para iniciar la fase de crecimiento exponencial.
2.- Fase exponencial o logarítmica: en ella la velocidad de crecimiento es máxima y
el tiempo de generación es mínimo. Durante esta fase las bacterias consumen a
velocidad máxima los nutrientes del medio. La evolución del número de células durante
esta fase se explica con los modelos matemáticos que describiremos a continuación.
4. MATERIALES
medio de cultivo ya preparado
asa de siembra
mechero
tubo de ensayo 1ml de agua destilada y 9ml de chica de jora 1/10
5. PROCEDIMIENTO
Cuando se utilice exclusivamente el asa de platino o nicrón.
Coger el asa por el cabo, en forma similar, a cuando tomamos el lápiz para
escribir.
Con el asa estéril y fría tome el volumen o fragmento de la muestra que será
sembrado y trasládelo de inmediato para el medio del cultivo seleccionado.
Con la mano opuesta a la que sujeta el asa, tome el tubo por l porción inferior.
Con el dedo meñique de la mano que sostiene el asa, retire del tubo el tapón de
algodón o la tapa de rosca y reténgala(no colocar el tapón o la tapa sobre la mesa
de trabajo)
Flamee de inmediato la boca del tubo de ensayo, pasándola una o dos veces por
la llama del mechero, con el objetivo de eliminar por incineración, los
microorganismos contaminantes que se encuentran en esa zona, por la parte
externa del tubo. Esta acción calórica, provoca además una convección del
movimiento del oxígeno presente en el interior del tubo hacia afuera, debido a la
desigualdad de calor, lo cual favorece que decrezca el riesgo de contaminación.
Con la mano opuesta a la que sujeta el asa de platino, tome la placa de Petry, de manera
que la tapa quede hacia arriba. Con ayuda del dedo pulgar abra parcialmente la placa.
Introduzca el asa con la muestra y proceda a deslizarla suavemente en forma de
zigzag, desde la pared, hasta cubrir aproximadamente un tercio de toda la
superficie.
Cierre la placa y gírela varios cm, en contra de las manecillas del reloj,
procediendo a abrirla nuevamente por igual procedimiento.
Una vez que ya tenemos los medios de cultivo preparados, hay que inocularlos, y para
ello se necesita:
Medio de cultivo.
Condiciones óptimas de incubación como temperatura, pH, presión, condiciones
atmosféricas (concentración de O2).
Estos medios de cultivo son sólidos (cultivos en reposo), o líquidos (para cultivos en
agitación)
7. CUESTIONARIO
1. ¿CUANDO REALIZARIA CULTIVO POR DILUCIONES?
Técnica de las diluciones en serie:
Si el microorganismo que se busca en un cultivo mixto se encuentra en mayos
cantidad que cualquiera de los otros microorganismos, es posible obtenerlo en
cultivo puro mediante una serie de diluciones en tubo, del medio de cultivo
apropiado. Cuando la muestra este muy diluida contendrá solamente la bacteria
que buscamos. Aunque es recomendable confirmar mediante el procedimiento
de la siembra en placa la pureza del cultivo que se aisló de la manera descrita.
2. ¿QUE OTRAS FORMAS DE SIEMBRA EXISTEN?
Siembra volumétrica.
Siembra masiva.
8. BIBLIOGRAFIA
http://html.tecnicas-de-cultivo-microbiologia.html
http://www.slideshare.net/aguero-luna/medios-de-cultivos
http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.-
%20Cultivo%20de%20microorganismos.pdf
MEDIO DE CULTIVO, TIPO DE MEDIO, AZUCAR FERMENTABLE, SISTEMA
INDICADOR