Presentación de Resultados

Diseño de un esquema de control de un

biorreactor de tanque agitado para la producción
de alginatos a partir de Pseudomonas aeruginosa

COLABORACIÓN ITESI – GRUPO RCM

26 DE OCTUBRE DE 2018
 Introducción
• Sales de ácido algínico,
polisacárido lineal que
permite la formación de
biopelículas
Alginatos
Formado • Como agentes
estabilizantes,
• Por unidades de ácido gelificantes, espesantes
manurónico y ácido y formadores de
gulurónico unidos por películas.
enlaces β (1-4).
Actúan
2
 Usos de los alginatos

Industria Uso
Textil Como espesante en colorantes.

Utilizado como espesante en salsas, jarabes,

Alimentaria panaderías y aderezos de ensaladas

Farmacéutica y usos médicos Es agente fijador y emulsificador

Cosméticos
Como estabilizante de espumas e hidratante
del cabello
Utilizado en técnicas para la inmovilización de
Biotecnología
células, en la microencapsulación de células

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Comparativa de microorganismos productores de
alginatos

Bacteria Alga
Pseudomonas aeruginosa Phaeophyta
Azospirillum vulgaris Lessonia nigrescens
klebsiella aerogenes L. Trabeculata
Enterobacter cloacae L. Flavicanst
Azobacter vinelandii L. Vadosa
Pseudomona alginovora Macroystis pyrifera
Sphingomonas sp. M. Integrifolia
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FASE 1:
EXPERIMENTACIÓN
 Pseudomonas aeruginosa
Características:
a. Bacilo Gram negativo
b. Aerobio. Rio Lerma
c. Altamente versátil
d. Condiciones extremas de T, Oxigeno y [nutrientes]

S - Salamanca
A - Sedimento (agua)
1 - Punto de muestra Laboratorio de
12- Cepa aislada en esa zona Biodiversidad Microbiana
SA1-12 (ITESI)
Stover CK y col 2000)
6
 Metodología: Modelo Cinético

 pH [100]
5
Experimental T [80]
 [sustrato]
[100] [60] [20]
Fase pH 7
[80] [40] [10]
Determinar los
Tratamiento datos cinéticos [100]
de datos 9
para los casos [80]
estudiados

7
 Diseño de Experimentos
620
Absorbancia
nm
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A A A A A A A A A A A A A
B A B Concentración 100% pH 7 B Concentración 100% pH 9 A
C A B Concentración 80% pH 7 B Concentración 100% pH 7 A
D A B Concentración 60% pH B Concentración 100% pH 5 A
E A B Concentración 40% pH 7 B Concentración 80% pH 9 A
F A B Concentración 20% pH 7 B Concentración 80% pH 7 A

200 µl
G A B Concentración 10% pH 7 B Concentración 80% Ph 5 A
Donde:
196 µl medio
H A A A A A A A A A A A A
4 µl inoculo
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 Metodología Experimental
Tratamiento del
pre-inóculo

L
X3 a
v
SA1-12 a
Pre-inóculo d
o
X3
Re suspender la Dejar agua
pastilla e Destilada estéril y Decantar
inocular. suspender la
pastilla.

Placa 96 pocillos
Incubadora
25-50°C.
Long. De onda 340-
850 nm.
Agitación
300,660 y 1200 rpm.
interna.
Fotodocumentador
Crecimiento Microbiano pH=7 [S]=100
0.8

0.7

0.6

0.5
Absorbancia

0.4

0.3

0.2
Replica 1 Replica 2
0.1
Replica 3 Replica 4
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Tiempo (h)
 Resultados Datos Cinéticos
Medio King B
Fuente de Carbono Glicerol (𝑪𝟑 𝑯𝟖 𝑶𝟑 )
μ max 0.226
Fuente de Nitrógeno Peptona (𝑵𝒂𝑵𝑶𝟑 ) Ks 0.019
Y x/s 0.225
Microorganismo Aerobio Oxígeno (𝑶𝟐 )
FASE 2:
ESQUEMA DE CONTROL
 ¿Qué es el control?
La habilidad para medir, indicar, grabar y controlar una
variable producida en una aplicación industrial
a. Control de proceso en continuo
b. Control de proceso por batch
 Metodología: Esquema de Control
Modelo no lineal en
continuo Determinar el Linealización
𝑑𝑋𝐼 número de
𝐷 𝑋𝐼𝑓 − 𝑋𝐼 + 𝜇𝑋𝐼 =
𝑑𝑡 estados estables
del modelo No
𝜇𝑋𝐼 𝑑𝑆𝐼
𝐷 𝑆𝐼𝑓 − 𝑆𝐼 −
𝑌𝑋𝑆
=
𝑑𝑡 que tiene Lineal

Variación flujos

Genera
Modelo lineal
modelo de
vs modelo no
primer orden
lineal
de control
 𝑪𝟑 𝑯𝟖 𝑶𝟑 + 𝟔𝟓𝑶𝟐 + 𝑵𝒂𝑵𝑶𝟑 → 𝟓𝑪𝑯𝟏.𝟔𝟔 𝑶𝟎.𝟐𝟕 𝑵𝟎.𝟐 + 𝟓𝟓𝑪𝑶𝟐 + 𝟖𝟏𝑯𝟐 𝑶 + 𝑪𝟔 𝑯𝟕 𝑶𝟔 𝑵𝒂

Donde
𝐶3 𝐻8 𝑂3 : Fuente de Carbono (glicerol)
𝑂2 : Oxígeno
𝑁𝑎𝑁𝑂3 : Fuente de nitrógeno (peptona)
𝐶𝐻1.66 𝑂0.27 𝑁0.2 : Fórmula general MO (Pseudomonas aeruginosa)
𝐶𝑂2 : Dióxido de Carbono
𝐻2 𝑂: Agua
𝐶6 𝐻7 𝑂6 𝑁𝑎: Producto (alginato sódico)
Datos Necesarios para el Control
 Modelo No Lineal Continuo
Modelo no lineal en continuo

𝒅𝑿𝑰
𝑫 𝑿𝑰𝒇 − 𝑿𝑰 + 𝝁𝑿𝑰 =
𝒅𝒕

𝝁𝑿𝑰 𝒅𝑺𝑰
𝑫 𝑺𝑰𝒇 − 𝑺𝑰 − =
𝒀𝑿𝑺 𝒅𝒕
 Estados Estables

Determinar el
número de Realizar
estados Selección
estables que
tiene
 Análisis de Sensibilidad

Perturbaciones
en
[X] y [S]
Modelo Lineal vs No Lineal

Se asemeja el comportamiento
Esquema de Control de 1er Orden

Variable Flujo de entrada

Manipulable (Fin)
Variable [X]
Respuesta [S]
 GRACIAS
Ingeniería Bioquímica
ITESI