UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

LABORATORIO DE AMBIENTE E INSTRUMENTAL

NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.7.01-10

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: DETERMINACION DE GLICEMIA EN LA SANGRE
.
1. DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
CICLO/NIVEL: Séptimo A
FECHA: 29 de Agosto del 2018.
DOCENTE RESPONSABLE: Dra. Carolina Mackliff, Mg. Sc

2. FUNDAMENTO
La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente
a través de la alimentación, y se almacena principalmente en el hígado, el cual tiene un papel primordial
en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan
y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precis a la ayuda de la insulina, sustancia producida
por el páncreas.
La glucosa es un azúcar que es utilizado por los tejidos como forma de energía al combinarlo con el
oxígeno de la respiración. Cuando comemos el azúcar en la sangre se eleva, lo que se consume
desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el
páncreas (islotes pancreáticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea
utilizada en forma de glucógeno, aminoácidos, y ácidos grasos. Cuando la glucosa en sangre está muy
baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada glucagón que hace lo
contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se
acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugarar una serie de complicaciones en distintos
órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras
enfermedades y alteraciones que también la provocan.
El tejido más sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en concentraciones muy bajas o muy
altas aparecen síntomas de confusión mental e inconsciencia.
El mantenimiento de la glucemia, o concentración plasmática de glucosa, en los organismos superiores
el fundamental para el funcionamiento de todos los órganos, al ser la glucosa un metabolito energético
principal.
3. OBJETIVO:
 Capacitar al alumno para que conozca, maneje y determine el valor de la glucosa en sangre,
utilizando el análisis objetivo para la deducción de un resultado real.
4. MARCO TEÓRICO
Es un glúcido o carbohidrato, más precisamente un monosacárido, la estructura más sencilla dentro
de los azúcares simples, presente en forma libre en las frutas y la miel. Entre los carbohidratos de
absorción rápida, la glucosa es la que se absorbe más rápidamente.
La glucosa es una fuente importante de energía para la mayoría de las células del cuerpo, incluidas las
del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las frutas, los cereales, el pan, la pasta y el arroz
se transforman rápidamente en glucosa en el cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azúcar en la sangre.
Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagón ayudan a controlar los niveles de
azúcar en la sangre.

Características

La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgánico más abundante de la naturaleza. Es la fuente

primaria de síntesis de energía de las células, mediante su oxidación catabólica, y es el componente
principal de polímeros de importancia estructural como la celulosa y de polímeros de almacenamiento
energético como el almidón y el glucógeno.
A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclación hacia su forma hemiacetálica para dar
sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F- glucopiranosa) que a su vez presentan anómeros alfa
y beta. Estos anómeros no presentan diferencias de composición estructural, pero si diferentes
características físicas y químicas.
La glucosa es uno de los tres monosacáridos dietéticos, junto con fructosa y galactosa, que se absorben
directamente al torrente sanguíneo durante la digestión. Las células lo utilizan como fuente primaria
de energía y es un intermediario metabólico. La glucosa es uno de los principales productos de la
fotosíntesis y combustible para la respiración celular.
Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con fructosa), que puede
extraerse y concentrarse para preparar un azúcar alternativo. Sin embargo, a escala industrial tanto el
jarabe de glucosa (disolución de glucosa) como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir de
la hidrólisis enzimátic a de almidón de cereales (generalmente trigo o maíz.
5. MATERIALES E INSUMOS

MATERIALES Y EQUIPOS REACTIVOS

 Micropipetas de 10ul y 1.0ml  Reactivo glucosa enzimática
 6 tips descartables para  Alcohol.
micropipetas
 Cronometro
 2 tubos vacutainer
 2 agujas vacutainer
 Capuchón
 Gradillas para tubo de ensayo
 Ligadura
 Algodón
 Esparadrapo
 Centrifuga
 3 tubos de ensayo de 6 ml
 Cubetas para
espectrofotómetro
 Baño maría a 37°C
 Espectrofotómetro

MÉTODO TRINDER – PUNTO FINAL

PRINCIPIO:
La glucosa oxidasa (GOD) oxida a la glucosa en ácido glucónico y forma el peróxido hidrógeno. En
presencia de peroxidasa (POD) el peroxido hidrógeno reacciona con el fenol y 4-aminofenazona y
produce un complejo coloreado, cuya intensidad de color es directamente proporcional a la
concentración de glucosa en la muestra.
MUESTRA: (Suero/Plasma)
Evitar muestras hemolizadas.
Separar tan pronto sea posible las células de la sangre puesto que la glicólisis consume la glucosa
(aproximadamente 5% por hora) y proporciona falsamente valores disminuidos.
La glucosa en suero es estable hasta 3 días de 2-8° C.
ESTABILIDAD:
 Los reactivos están listos para su uso.
 Almacenar de 2- 8°C y protegerlo de la luz los reactivos son estables hasta la fecha de
expiración indicada en el rótulo.
 No congelar.
 Una vez abiertos los reactivos son estables por 2 meses de 2º- 8ºC si se evita la contaminación.
 Mantener los frascos cerrados cuando no están en uso. No usar los reactivos en caso de
turbidez.

6. PROCEDIMIENTO:
Calibración y absorbancia del espectrómetro

Método:……………………………. punto final en Incremento

Longitud de onda:…………….510 nm (500-520 )
Cubeta:…………………………….1 cm de vía óptica
Temperatura:……………………37°C
Tiempo de reacción:…………5 - 10 minutos
Lectura:…………………………...Contra reactivo blanco
Reactivo/Muestra:…………....1/100

 Toma de muestra través de la venopunción o flebotomía se utilizan las venas situadas en la

flexura del codo. La estudiante encargada de tomar la muestra utilizará guantes, una aguja
(con una jeringa o tubo de extracción).
 Le pondrá un tortor (cinta de goma-látex) en el brazo para que las venas retengan más
sangre ya parezcan más visibles y accesibles.
 Limpiará la zona del pinchazo con un antiséptico y mediante una palpación localizará la vena
apropiada y accederá a ella con la aguja. Le soltarán el tortor.
 Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizará una aspiración (mediante la jeringa o
mediante la aplicación de un tubo con vacío).
 Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodón o
similar para favorecer la coagulación y se le indicará que flexione el brazo y mantenga la zona
presionada con un esparadrapo durante unas horas
 Colocar en baño maría de 5-10 min para que se coagule la muestra
 Centrifugación de la muestra 3000 rpm 3-5 min
 Rotular los 3 tubos de ensayo R. Blanco, Estándar y muestra.

PREPARACION DE SOLUCIONES:
  Mezclar e incubar de 5-10 minutos a 37°C en baño maría.
 Luego leer la absorbancia del estándar (abstd) y la muestra (absm) contra el blanco de reactivo
en el espectrofotómetro.
 Los volúmenes de reacción pueden ser variados proporcionalmente sin ninguna modificación
en el cálculo.

7. RESULTADOS DE CÁLCULOS:
CALCULAR LA CONCENTRACIÓN DE GLUCOSA EN LA MUESTRA USANDO LA SIGUIENTE FÓRMULA:

Abs muestra x 100

Abs estándar

VALORES:
VALORES DE REFERENCIALES:
 PREMATUROS: 30mg/dl(1.6 mmol/L)
 RECIÉN NACIDOS: 40-60mg/dl(2.2 ÷ 3.3 mmol/L)
 NIÑOS: 60 - 100 mg/dl (3.8 ÷ 6.10 mmol/L)
 ADULTOS: 70 - 110 mg/dl (3.8 ÷ 6.10 mmol/L)

VALORES NORMALES:
Si le hicieron un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 miligramos se considera
normal.
Si le hicieron un examen de glucemia aleatorio, los resultados normales dependen
de cuándo fue la última vez que comió. La mayoría de las veces, los niveles de glucemia estarán por
debajo de 125 mg/dL.
Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre laboratorios . Hable con el médico
acerca del significado de los resultados específicos de su examen.
Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los resultados de estas pruebas.
Algunos laboratorios usan diferentes medidas o pueden evaluar distintas muestras.
SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES
SI LE HICIERON UN EXAMEN DE GLUCEMIA EN AYUNAS:
Un nivel de 100 a 125 mg/dL significa que usted tiene una alteración de la glucosa en ayunas, un tipo
de prediabetes. Esto incrementa el riesgo para la diabetes tipo 2.
Un nivel de 126 mg/dL o mayor casi siempre significa que usted tiene diabetes.

ANEXOS

INTEGRANTES
NOMBRES: FIRMAS:
Ángela Escalante …………………………………..
Santiago Flores …………………………………..
Dayana Marín …………………………………..
Karen Paladines …………………………………..
Nicol Prado …………………………………..
Víctor Yupanqui …………………………………..

CALIFICACION: ………………………..