UNIVERSIDAD LIBRE SECCIONAL PEREIRA

DETRMINACIÓN DE GLUCOSA EN SANGRE

El principal origen de la glucosa y el glucógeno del organismo está en la

ingesta de los hidratos de carbono constituyentes de los alimentos. La
absorción de los hidratos de carbono simples o monosacáridos preformados
en los alimentos o producidos durante el proceso digestivo se realiza en casi
forma exclusiva por vía sanguínea.
La glicemia debe investigarse con técnicas que dosifique únicamente la
glucosa verdadera y evitar los sistemas que dosifican también otros
sacaroides.

Hoy en día los mejores procedimientos son los enzimáticos. La

hiperglicemia en ayunas es propia del diabético, pero en forma transitoria
puede presentarse en excitaciones psíquicas, esfuerzos musculares, baños
calientes prolongados y alteraciones traumáticas.

Cuando se obtiene la cifra de 60 mg/100 mL, debe verificarse la curva con el

fin de dilucidar si no se trata de un hipoglicémico. La glicemia post-prandial,
es útil cuando se presume alteración hiper o hipoglicemiante, pero para que
tenga efecto deben tomarse alimentos ricos en hidratos de carbono, o mejor
todavía, una cifra conocida de glucosa, 100 g, en soluciones comerciales.

PRINCIPIO:
La glucosa se convierte por la acción de la glucosa oxidasa en ácido
glucónico y peróxido de hidrógeno, que en presencia de peroxidasa oxida el
cromógeno ( 4-aminoantipirina/fenol ) en un compuesto de color rojo.

Glucosa + O2 + H2O GOD gluconato + H2 O2

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H2O2 + 4 aminofenazona + fenol POD

4-(p-benzoquinona-mono-imino)fenazona + H2O
(sustancia de color rojizo)

PROCEDIMIENTO :
Longitud de onda : 500 ± 20 nm
Temperatura : ambiente o 37 °C
Cubeta : 1 cm de paso de luz
Lectura: : contra blanco de reactivo.

BLANCO PATRÓN MUESTRA

PATRÓN __ 10 ul __
MUESTRA __ __ 10 ul
REACTIVO 1 ml 1 ml 1 ml

- Mezclar y tras una incubación de 10 minutos a temperatura ambiente

o 5 minutos a 37°C.
- Medir la absorbancia de muestra y del patrón.

Cálculo:

Absorbancia de la muestra
----------------------------------------- X concentración Patrón = C Muestra
Absorbancia del Patrón

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Las siguientes preguntas deben consultarse para el desarrollo de la práctica.

- Dibujar la estructura de la glucosa, sacarosa, fuctosa, maltosa, lactosa,
glucógeno y almidón.
- Fisiológicamente porqué es importante la glucosa. Describir
claramente.
- Cómo se lleva a cabo el proceso de digestión de los azúcares?
- Describir: glucólisis, gluconeogénesis, glucogenólisis.

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