Materiales y métodos

Materiales: para el desarrollo de nuestra practica realizada en ámbitos de estudio hacia la

biología molecular en la Universidad del Magdalena utilizamos:

Azúcar, pan, pescado, miel, leche pura, levadura, orina normal y diabética, huevos, mantequilla,

jugo de limón, vinagre, aceite de cocina, zanahoria, y gelatina.

Pipetas, goteros punta larga, gradillas, espátula, guantes, tapabocas, pipetas, calentador tubos de

ensayo, Baker, papel filtro, papel absorbente.

Soluciones A y B de Fehling o reactivo de Benedict, reactivo de Biuret (A y B) lugol, sudan III,

ácido nítrico concentrado, agua destilada.

Métodos:

Según la biomolécula que queríamos identificar en cada alimento utilizamos un procedimiento y

reactivos distintos sin embargo todas las muestras eran necesarias en estado líquido por lo que

los componentes en estado sólido fueron licuados y convertidos en soluciones acuosas de las

cuales se extrajeron cinco muestras de un cm3 cada una, las cuales fueron rotuladas y puestas en

un tubo de ensayo , los componentes utilizados fueron : aceite, zanahoria , vinagre, mantequilla,

azúcar, orina , orina de una persona diabética , miel , limón , clara de huevo, pescado, leche, pan

, y gelatina sin sabor , en algunas muestras hicimos procesos para determinar otras

características , como por ejemplo la saturación y la miscibilidad , de esta forma los procesos

fueron los siguientes:

 Carbohidratos

Para determinar la presencia de estos componentes en las muestras de alimentos se utilizaron dos

reactivos distintos:

En el primer proceso a una de las muestras de cada alimento se le agregaron 20 gotas de reactivo

de Benedict y posteriormente se calentaron las muestras de 5 a 10 minutos sumergiéndolas en

agua destilada expuesta a una llama sin introducir demasiado la muestra para evitar que el agua

entre en ella, luego se retiraron del agua y se observó detenidamente cada muestra.

El segundo proceso consistió en agregar de 5 a 10 gotas de lugar a las muestras de todos los

alimentos, cabe aclarar que fueron muestras distintas de las que se le agrego reactivo de

Benedict, pero de los mismos alimentos, luego se agitó hasta combinar el contenido de la

muestra y el reactivo para luego observar los cambios en las muestras.

Lípidos o grasas

Para determinar la presencia de lípidos y grasas en las muestras de alimentos a cada una de ellas

se le agregaron 5 gotas de sudan III y observar los cambios.

Para estos componentes además de identificar su presencia en los alimentos se hicieron

experimentos para observar su saturación, para hacerlo se utilizó un pedazo de papel filtro en el

cual se limitaron tres zonas circulares en las cuales se agregó leche, mantequilla y aceite de

manera que cada componente estuviera en una zona diferente, luego se esperó que se secaran las

muestras y fueron colocadas frente a una fuente de luz (bombilla) para hacer las respectivas

observaciones. Por ultimo realizamos la mezcla de agua, aceite y éter en un tubo de ensayo, con

un cm3 de cada una de las sustancias antes mencionados

 Proteínas

Al igual que en los carbohidratos, aquí se utilizaron dos procesos diferentes:

En el primer proceso a todas las muestras se le agregaron 5 gotas de reactivo de Biuret A y al

instante se le agregaron la misma cantidad de gotas de reactivo de bureta B para luego observar y

anotar los cambios.

En el otro proceso a la totalidad de las muestras se le adicionaron cinco gotas de ácido nítrico,

considerando que para realizar este proceso era necesario dirigirse a la campana extractora de

gases y solo allí adicionar el ácido ya que resulta riesgoso para la integridad física realizarla

fuera de este dispositivo, luego de agregar el ácido nítrico las muestras podían ser retiradas de

allí, para realizar las respectivas observaciones.

Resultados

Al realizar las respectivas observaciones y el análisis a las muestras de alimento y su reacción,

además de las experiencias adicionales en los lípidos, obtuvimos:

Lípidos: Para determinar la presencia de estos compuestos en los alimentos teníamos en cuenta

lo siguiente: Si al agregar el sudan III a las muestras estas presentaban micelas o se tornaban de

un color rosado, era positivo para la presencia de lípidos o grasas, mientras que cuando las

muestras no se combinaban con el reactivo o se coloraban rojas, la presencia de lípidos era

negativa.

Teniendo en cuenta estas pautas las muestras que resultaron con presencia de lípidos fueron las

muestras de leche, clara de huevo, triturado de pan, pescado, mantequilla, levadura y aceite.
Clara de huevo Triturado de pan Levadura Mantequilla Leche

Pescado

Aceite

(formación de
micelas)
 Algunas de las muestras que resultaron negativas

Saturación

Para esta experiencia utilizamos tres sustancias con presencia de lípidos, la leche , la mantequilla

y el aceite , de este modo al esparcirlos en una zona delimitada de papel filtro y dejarlas secar , la

llevamos frente a una fuente de luz en la que pudimos observar que el aceite presentaba mayor

transparencia , en ese orden seguía la leche y por último la mantequilla que tenía un color más

concentrado y era menos transparente, por lo que de mayo a menor saturación la mantequilla es

más saturada , sigue la leche y luego el aceite.

ACEITE MANTEQUILLA

LECHE
 Miscibilidad

Al mezclar el éter, el aceite y el agua en un tubo de ensayo, se pudieron observar dos fases en las

que se determinó que una correspondía al agua y la otra a la mezcla del éter con el aceite, ya que

por ser ambas sustancias apolares, por ende, se pueden mezclar mientras que el agua es una

sustancia polar, por lo tanto, no se mezcló con las otras dos sustancias.

De igual forma determinamos que la fase ubicada en el fondo correspondía al agua por su mayor

densidad con respecto a la mezcla de los otros dos componentes que permaneció en la parte

superior.

Mezcla de aceite y éter

agua
 Proteínas

En este caso al utilizar el reactivo de Biuret la presencia de proteínas era positiva cuando las

muestras adquirían un color lila, si estas biomoléculas no estaban presentes la muestra no

cambiaba o no se mezclaba con el reactivo. En este caso solo las muestras de leche, gelatina,

clara de huevo, triturado de pan y pescado resultaron positivas para la presencia de proteínas.

Pescado Clara de huevo Leche Gelatina Triturado de pan

Otras muestras tratadas con el reactivo de Biuret (resultado negativo)

Cuando utilizamos el ácido nítrico como reactivo, resultaron positivas las mismas muestras, sin

embargo, con el ácido nítrico resultaba una reacción diferente, ya que en vez de tornarse lila la

muestra, ésta presentaba un coagulo amarillo claro.

 Triturado de pan leche clara de huevo gelatina pescado

Otras muestras a las que se le adicionó ácido nítrico (resultado negativo)

Carbohidratos

Para determinar la presencia de estas biomoléculas en las muestras se tenía en cuenta que si al

agregar las 20 gotas de reactivo de Benedict y posteriormente calentarlas, la presencia de

carbohidratos resultaba positiva si adquirían un color amarillo o naranja, si no se percibían estos

colores en las muestras no había presencia de carbohidratos en ellas, sin embargo, cabe aclarar

que este reactivo solo demostraba la presencia de carbohidratos de los que se clasifican en

azucares simples.

En las otras muestras idénticas a las anteriores, donde utilizamos lugol en vez de reactivo de

Benedict para que resultara positiva la presencia de polisacáridos (carbohidratos más complejos)
la mezcla se debía tornar gris y con presencia de precipitados, en caso de no existir la presencia

de estas biomoléculas en las muestras, no se daba ninguna coloración.

De esta forma para las muestras de miel, extracto de zanahoria, triturado de pan, y azúcar

resultaron positivas para la presencia de azucares simples al agregar el reactivo de Benedict, las

otras muestras no presentaron la presencia de estas biomoléculas.

Azúcar

Miel

Triturado de pan

Zanahoria
 Algunas muestras que resultaron negativas al adicionar reactivo de Biuret

Mientras que al agregar el lugol las muestras que resultaron con presencia de polisacáridos

fueron la de extracto de zanahoria, y el triturado de pan.

Triturado
de pan
DISCUSION

Las biomoléculas orgánicas son los carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, cada

uno de ellos con características definidas y funciones específicas, propiedades que adquieren

por la variedad de grupos funcionales que poseen. La biomolécula al romper se liberan energía

la cual es utilizada en el proceso del metabolismo para el funcionamiento celular. Las

biomoléculas están presentes en una gran variedad de alimentos que a diario consumimos en

nuestra alimentación.

Como son carbohidratos, que aunque su función principal es la energética, también hay ciertos

hidratos de carbono cuya función está relacionada con la estructura de las células o aparatos del

organismo, sobre todo en el caso de los polisacáridos. Estos pueden dar lugar a estructuras

esqueléticas muy resistentes y también pueden formar parte de la estructura propia de otras

biomoléculas como proteínas, grasas y ácidos nucleicos. Gracias a su resistencia, es posible

sintetizarlos en el exterior del cuerpo y utilizarlos para fabricar diversos tejidos, plásticos y otros

productos artificiales.

Lípidos, pen el laboratorio se sacaron los siguientes laboratorio, el aceite es soluble en éter

de petróleo debido a que ambos compuestos no son polares, en sus moléculas no se presentan

densidades de cargas opuestas.

Las moléculas del agua son polares y las del aceite (lípido) son no polares, debido a las

diferentes estructuras y densidades, no hay adhesión entre las moléculas de agua y la sustancia

lipídica. Por lo tanto estos dos reactivos se repelen entre sí frente a una prueba de solubilidad y

dan como resultado dos fases.

El aceite reacciona con el detergente, al agitarse fuertemente se rompen cadenas y se dividen en

pequeñísimas gotitas, dando como resultado una emulsión con aspecto lechoso, que al

permanecer en reposo, desaparecen y se dividen en fases.

La saponificación es una reacción de un ácido graso (aceite) y una base (NaOH). Las grasas se

combinan con los iones sodio del hidróxido. Al reaccionar con el hidróxido de sodio produce una

sal que es el jabón y otro producto secundario que es la Glicerina.

Proteínas, la practica concluyo con éxito ya que se logro identificar, las proteínas.

Las proteínas están enlazadas con enlaces peptídicos, disulfuros puentes de hidrogeno de la

cadena carbonada.

Las fuentes dietéticas de proteínas incluyen carne, huevos, soya, granos, leguminosas

y productos lácteos tales como queso o yogurt. Las fuentes animales de proteínas poseen los 20

aminoácidos. Las fuentes vegetales son deficientes en aminoácidos y se dice que sus proteínas

son incompletas. Por ejemplo, la mayoría de las leguminosas típicamente carecen de cuatro

aminoácidos incluyendo el aminoácido esencial metionina, mientras los granos carecen de dos,

tres o cuatro aminoácidos incluyendo el aminoácido esencial lisina.