FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMÁTICAS

LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA

INFORME:

TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
“Determinación de fosfatos en agua por
espectrofotometría”

INTEGRANTE:
Marcos Josué Hernández Bone

PARALELO: 106

PROFESOR: Luis Vaca Salazar

FECHA DE PRESENTACIÓN:
10.01.2019

GUAYAQUIL - ECUADOR
1. Título del Informe: Determinación de fosfatos en agua por espectrofotometría
2. Objetivos:

2.1 Objetivo General:

Determinar por espectrofotometría, la cantidad de fosfatos que se encuentran en una muestra de
agua.
2.2 Objetivos Específicos:
 Comprender en que consiste el método de determinación de fosfatos en agua por
espectrofotometría para conocer cuanto fosfato existe en una muestra.
 Diferenciar las características de la muestra problema utilizada en la práctica para así
conocer si está contaminada o no.
 Relacionar los valores obtenidos de las herramientas de estadística para así verificar la
exactitud y precisión del proceso empleado.
3. Marco teórico.
La determinación de fósforo en fluidos biológicos, fertilizantes, moléculas orgánicas y productos
industriales tiene gran importancia. En la practica que se presenta, se determina fósforo inorgánico en
suero sanguíneo mediante un procedimiento espectrofotométrico.
El fósforo inorgánico (en forma de fosfato), en un filtrado libre de proteínas reacciona con el
2−¿ 3−¿
molibdato(Mo para formar fosfomolibdato , el cual mediante reducción,
O 4¿ (PO 4∗12 Mo O3 )¿
origina una especie cuya estructura exacta se ignora y que suele conocerse con el nombre de “azul de
molibdeno”. Como reductor puede utilizarse, algún derivado de la hidrazina, Sn Cl2 , ácido 1,2.4-
aminonaftosulfónico, ácido ascórbico, etc.[ CITATION Med09 \l 12298 ]

3−¿+ Mo7 O 24 . ( N H 4 )6 → PO 4 .12 Mo O 3 (N H 4 )3 → Mo (V )(azul de molibdeno )

¿
P O4

Los abonos inorgánicos están constituidos por diversas clases de fosfatos solubles, los más comunes de los
cuales derivan de los aniones meta- (PO3 − ), piro- (P2O7 4− ) y ortofosfato (PO4 3− ). Debido a su
elevada solubilidad, estos aniones son arrastrados fácilmente por las aguas superficiales hacia ríos,
acuíferos, etc. Otra fuente de fosfatos la constituyen los vertidos urbanos que contienen detergentes: para
aumentar su eficacia, algunos detergentes utilizan fosfatos inorgánicos en su composición como agentes
alcalinizadores. Las aguas naturales contienen normalmente cantidades de fosfatos por debajo de 1 mg/l.
Cantidades superiores de estos nutrientes favorecen el crecimiento de algas que consumen el oxígeno del
medio acuático y provocan la desaparición de especies vegetales y animales.

La espectrofotometría proporciona información acerca de la concentración, a partir de la luz absorbida por

la solución preparada de muestra. [CITATION Gar093 \p 127 \l 12298 ] La espectrofotometría es una
herramienta valiosa para determinar la composición de iones complejos en disolución y para determinar
sus constantes de formación. El poder de la técnica yace en el hecho de que las mediciones de la absorción
cuantitativa pueden realizarse sin alterar el equilibrio químico bajo consideración. Aunque en varios
estudios espectrofotométricos de sistemas complejos un reactante o un producto puede absorber radiación,
también es posible investigar con éxito sistemas no absorbentes.[ CITATION Sko143 \l 12298 ]

La Mecánica Cuántica nos dice que la luz está compuesta de fotones cada uno de los
cuáles tiene una energía:
Efotón = h⋅ν = h⋅c/λ

2
 donde h = 6.6 10-34 J⋅s es la constante de Planck, c es la velocidad de la luz, ν es su frecuencia
y λ su longitud de onda. Cuando decimos que una molécula absorbe luz de longitud de onda
λ, esto significa que la molécula absorbe un fotón de esa longitud de onda. En esta práctica
estudiaremos la absorción de luz en el visible-ultravioleta cercano (λ ≈ 290-700 nm).

El espectrofotómetro, en lugar de la intensidad, mide la absorbancia A que se define por:

A= C × E × L
Donde C es la concentración, E es el coeficiente de extinción molar y l es la longitud de celda
La concentración esta en un rango de 0 a 100% y la longitud de onda de 0 a 1
La transmitancia se define como la capacidad que tiene un cuerpo para que por el atraviese cierta
cantidad de energía en un determinado tiempo, se define mediante[ CITATION Har921 \l 12298 ]
Ao
T= log ( ¿∗100
A

4. Materiales, equipos y reactivos:

Materiales:  Balanza analítica con cuatro decimales de

 Probeta 25,00 ± 0,25 mL precisión marca ADAMS.
 Matraz 100 ± 0,1 mL  Espectrofotómetro 1100 Marca: Único
 Pipeta 10,00 ± 0,1 mL
 Pipeta 5,00 ± 0,05 mL Reactivos
 Pipeta 2,00 ± 0,02 mL  ( NH 4 )6 Mo7 O24 4 H 2 O
 Pipeta 1,00 ± 0,01 mL
 Sn Cl2 2 H 2 O
 Pera
 Gotero  K H 2 P O4
 Tubos de ensayo  HCl (si hay alcalinidad en la muestra
 Gradilla problema)
 Piseta  H 2 S O 4 ( c)
 Espátula 
S oluci ó n estandar de fosfatos50 ppm
 H2O (d )
Equipos:  Muestra problema

3
5. Procedimiento
Preparación de reactivos:
• Molibdato de amonio: Disolver 2,5 g de molibdato de amonio, (NH4)6Mo7O24.4H2O, en 17,5 ml
agua destilada. Con mucha precaución, agregar 28 ml de H2SO4 concentrado a 40 ml de agua
destilada. Enfriar y añadir la solución de molibdato. Diluir a 100 mL.
• Cloruro estañoso: Disolver 1.25 g de SnCl2.2H2O en 50 ml de glicerina en baño maría.
• Solución estándar de fosfatos: Preparar 100 ml de disolución de 50 ppm de fosforo en fosfatos
−¿
(P- PO 4 ¿ ) a partir de KH2PO4.
• Solución de 10 ppm de fosfatos: A partir de c) preparar 100 ml de solución de fosforo 10 ppm.
• Soluciones para curva de calibración: A partir de d), preparar 100 ml de cada una de las diluciones
−¿
para la curva de calibración del analito (P- PO 4 ¿ ) con concentraciones de 0.1, 0.3, 0.5, 0.8 y 1.0
ppm.
• Muestra problema: Tratamiento preliminar de la muestra problema con HCl o digestión, usando
fenolftaleína, si presenta alcalinidad a ésta.
Procedimiento para los estándares de calibración y la muestra problema.
1. Mida 25 ml de cada una de las soluciones estándar y colóquelas en diferentes tubos de ensayo
rotulados previamente.
2. Agregar 1 ml de la solución de molibdato de amonio a cada tubo.
3. Adicionar 3 gotas de la mezcla de cloruro estañoso en glicerol a cada tubo y agitar hasta su
homogeneización total.
4. Dejar reaccionar las soluciones, hasta coloración azul, en la oscuridad durante 12 minutos
exactos.
5. Realizar las lecturas de absorbancia de los estándares y de la muestra problema en el
espectrofotómetro a 690 nm.
6. Realizar la curva de calibración empleando la herramienta estadística de regresión lineal.
7. En base a la curva de calibración, determine la concentración de la muestra problema en ppm de
−¿
(P- PO 4 ¿ )

6. Reacciones Involucradas

3−¿+ Mo7 O 24 . ( N H 4 )6 → PO 4 .12 Mo O3 ( N H 4 )3 → Mo (V )( azul de molibdeno)

P O 4¿

7. Resultados:

7.1 Datos iniciales

Concentración (ppm) Absorbancia

0,1 0,097
 0,25 0,223

0,5 0,461

0,75 0,671

1 0,875

Muestra problema 0,875

Tabla1. Datos obtenidos en la practica

7.2 Cálculos
 Masa K H 2 P O 4 =? , →100 mL con50 ppm P

50 mg P 1g P 136,07 g K H 2 PO 4
× 0,1 L solución × × =0.02196 g K H 2 PO 4
1 L solución 1000 mg P 30,97 g P
 V 50 ppm=? , →100 mL con10 ppm P

V 1 × C1=V 2 ×C 2

V 1 × 50 ppm=0,1 L× 10 ppm

0,1 L ×10 ppm

V 1=
50 ppm
V 1=0,02 L

 V 10 ppm=? , →100 mL con0,1 ppm

V 1 × C1=V 2 ×C 2

V 1 × 10 ppm=0,1 L× 0,1 ppm

0,1 L ×0,1 ppm

V 1=
10 ppm
V 1=0,0 01 L

 V 10 ppm=? , →100 mL con0,25 ppm

V 1 × C1=V 2 ×C 2
 V 1 × 10 ppm=0,1 L× 0, 25 ppm

0,1 L ×0, 25 ppm

V 1=
10 ppm
V 1=0,00 25 L

 V 10 ppm=? , →100 mL con0,5 ppm

V 1 × C1=V 2 ×C 2

V 1 × 10 ppm=0,1 L× 0,5 ppm

0,1 L ×0,5 ppm

V 1=
10 ppm
V 1=0,005 L

 V 10 ppm=? , →100 mL con0,75 ppm

V 1 × C1=V 2 ×C 2

V 1 × 10 ppm=0,1 L× 0, 75 ppm

0,1 L ×0, 7 5 ppm

V 1=
10 ppm
V 1=0, 0075 L

 V 10 ppm=? , →100 mL con ppm

V 1 × C1=V 2 ×C 2

V 1 × 10 ppm=0,1 L× 1 ppm

0,1 L ×1 ppm
V 1=
10 ppm
V 1=0,01 L

 Determinación de la ecuación de la recta

Y= MX + B

X(absorbancia) Y(Concentración) X × Y X
2
 0,1 0,097 0,0097 0,01
0,25 0,223 0,05575 0,0625
0,5 0,461 0,2305 0,25
0,75 0,671 0,50325 0,5625
1 0,875 0,875 1

∑ X =¿ 2,6 ∑ Y =¿ 2,327 ∑ X =¿ 1,6742 ∑ X 2=¿

1,885
Tabla 2. Valores para determinar la ecuación de la recta

X
∑ ¿2
¿
¿
M=
∑ X 2−¿
∑ X ×∑ Y
∑ X− n
¿
(2,6)(2,327)
1,6742−
5
M=
(2,6)2
1,885−
5
M= 0,8708

B=
∑ Y −m( ∑ X )
n n
2,327 2,6
B= −0.86671( )
5 5
B= 0,0126

Por lo tanto:
Y= 0,8708x + 0,0126

 Determinación de concentración de fosfatos

Y −0,0126
X=
0,8708
 0,875−0,0126
X=
0,8708

X= 0.9904 ppm

7.3 Resultados Obtenidos

 Grafica de Absorbancia vs Concentración

Grafica A vs C
1

0.9
f(x) = 0.87x + 0.01
0.8 R² = 1
0.7
Absorbancia

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2

Concentración ppm

Concentración de fosfatos en la muestra 0.9904

(ppm)
Pendiente de la recta 0,8708

Intercepto con el eje Y 0,0126

Coeficiente de determinación 0,9992

Tabla3. Resultados obtenidos

8. Análisis de Resultados
 Los datos iniciales de concentración y absorbancia son los que me representan los puntos en la
gráfica A vs C el primer par de puntos es de 0,1 y 0,097 donde se logra observar que no difieren
mucho en su valor por lo que se realizó un buen trabajo, al igual que los 2 par de puntos
siguientes de 0,25 y 0,223 con 0,5 y 0,461, se puede ver que tampoco existe un gran diferencia
entre estos valores pero en los dos siguientes (0,75 y 0,671) y (1, 0.875) ya se logra ver una
diferencia y esto se debe a una posible mala preparación de los reactivos, se pasa algo del tiempo
 adecuado, al momento de agregar las sustancias antes de colocarlas en completa oscuridad no se
lo hizo de la mejor manera. De todas formas, los puntos no presentan una gran dispersión prueba
de ello es el valor de R² = 0,9992, este valor es el coeficiente de determinación y debe oscilar
entre 0 y 1, por lo tanto, el valor obtenido en la práctica está en el rango permitido. La
mg
concentración de fosfatos en la muestra es de 0.9904 ppm o 0.9904 y según la normativa
L
legal ecuatoriana esta cantidad de fosfatos en agua es permitida y si es apta para el consumo
humano, es decir no posee un alto grado de contaminación

9. Observaciones
 Se noto que al agregar el indicador de fenolftaleína no cambio de color por lo tanto no se realiza
la digestión ácida.
 Al momento de agregar cloruro estañoso a la mezcla de 0,1 ppm se noto un color celeste y al
instante de agitar se intensifico ese color.
 El color celeste se fue tonado mas oscuro a medida que se utilizaban muestras con una mayor
concentración, a su vez que su absorbancia.
 Se apago la luz porque el compuesto se degrada o auto descompone en presencia de luz

10. Recomendaciones
 Apagar los ventiladores al momento de pesar las sustancias las cuales se utilizarán en la
preparación de reactivos.
 Tener a la mano un reloj o un cronometro ya que será de suma importancia tomar el tiempo en
esta práctica.
 Apagar las luces y en lo posible evitar la exposición a luz ya que las sustancias, específicamente
al momento de añadir el cloruro estañoso, que se utilizan en la práctica se auto descomponen.
 Verificar que todos los equipos estén calibrados o en buenas condiciones.

11. Conclusiones
 Se logro determinar la cantidad de fosfatos en una muestra de agua con la ayuda de la
espectrofotometría.
mg
 La cantidad de fosfatos presentes en esta muestra de agua fue 0,9904 , este dato permitió
L
verificar si la muestra estaba contaminada o no.
 Se obtuvo la ecuación de la recta de la gráfica A vs C por medio del método de mínimos
cuadrados, y con la ayuda de este proceso de obtuvo la concentración de fosfatos, a su vez se
verifico que los datos obtenidos en la practica no estaban tan dispersos.

12. Bibliografía
Gary, C. (2009). Química Analítica . México, D.F.: McGRAW-HILL/INTERAMERICANA EDITORES,
S. A. DE C. V. .
Harris, D. C. (1992). Análisis Químico Cunatitativo . México, D.F.: Grupo Editorial Iberoamérica.
Medina, A., & Cañada, M. J. (2009). Experimentación en Química Analítica . Ayuda a la enseñanza SL.
Skoog, D. A. (2014). Fundamentos de química analítica. Novena edición. México, D.F: Cengage
Learning.