UNIVERSIDAD POLITECNICA DEL CENTRO

Ingeniería en Biotecnología - Microbiología Aplicada

Evidencia de conocimiento Unidad 1: Aislamiento de microorganismos de interés biotecnológico.
Cuatrimestre 5

Nombre alumno:____________________________________ Fecha:______________

I. Responde de acuerdo a lo que se solicite en la pregunta y favor de fundamentar su respuesta.

1. El metabolismo de los microorganismos puede ser versatil y con ello obtener productos
biotecnológicos aplicados a diferentes sectores productivos de una región. Hipoteticamente
propongan tres aplicaciones nuevas usando uno o varios microorganismos poli o extremófilos y
de que géneros microbianos podrían obtenerlas (explicar porque estos géneros). Para
desarrollar las aplicaciones hipotéticas, favor de tomar en cuenta el muestreo, las
reglamentación y NOM a seguir, forma de aislamiento de cepas, y factores que debe tomar en
cuenta in situ e in vitro para determinar el potencia biotecnológico
Se tomara muestra del rio tinto de Huelva el cual cuenta con un pH ácido de 1,7 y 2,5 y es investigado
por sus características de alta similitud con marte. Las muestras se recolectaran en los frascos de vidrio
de 250ml, neutro con tapón esmerilado o roscado, muy limpios y esterilizados en autoclave a 120ºC
durante treinta minutos o en horno de Pasteur a 180ºC durante dos horas, el tapón y el cuello del frasco
se protegerán con una cubierta de papel, papel de aluminio u otro similar. La muestra se tomará lo más
lejos posible de la orilla, procurando no remover el fondo y evitando los remansos o zonas de
estancamiento a 20cm, 30cm, y 1m de profundidad.
Para tomar una muestra del agua de un lago o de un río se sujetará el frasco por el fondo en posición
invertida, sumergiéndolo completamente y dándole la vuelta en sentido contrario a la corriente (río) o
desplazándolo horizontalmente en la dirección de la boca del frasco (lago) y se rotularan, una vez
tomada la muestra se conservara en oscuridad a una temperatura de 4ºC (±2ºC) no más de seis
horas NOM-014-SSA1-1993.
https://waste.ideal.es/riotinto.htm
se tendrá un medio solido especifico con agua del rio para que las muestras tengas las condiciones y
nutrientes esenciales el medio, se colocara en cajas Petri de 90mm x 15mm, para inocular se hacen
diluciones de 1x10-7 el estriado se llevara acaba en forma de pentágono cuidando que cada vez que
se estrié las colonias de microorganismos sean diferentes y se conservaran a una temperatura de de
20°C , se hara un screening para saber que colonias de microorganismos utilizar.
para obtener bacterias sulfato reducturas se utilizo el medio lacatato de sodio con la combinación de
agau del rio tinto huelvara ya que asi se evita la reducción de sulfuro los medios de cultivo fueron
realizados en tubos de ensaye con capacidad de 15 ml y se esterilizo a 120 °c por 30 minutos después
se inoculo 1 ml de la muestra la cual se hizo por triplicado logrando tener 12 cepas las cuales se
llevaron a incubación a 25°c por 20 días.
Se realizo una purificación en un medio distinto Posgate B en cajas Petri durante 15 dias se dejaron crecer
Al final las bacterias fueron sembrados nuevamente en medio solido tomando del medio postage B 0.1 ML se estrio por
cuadrantes a 25°c por 20 dias.
Cada microorganismo seleccionado se purificara en los medios en donde se inocularon. Se hara conteo
de células de cada cepa purificada y de interés para saber su crecimiento.luego se hara la identificación
de los dos grandes grupos de microorganismos , gram positivy gram negativos por el tinción de gram
Se realizaron puebas bioquímicas de catalasa, oxidasa, fermetacion de azucares, hidrolisis de la
gelatina y el análisis de ARNs 16s para la identificación de las bacteias.
1 aplicación Se harán pruebas para antibioticos

Enzimas Extracelulares

Para verificar la presencia de la enzima,se empleo el Kit para prueba Hidrogenasa de Caproco, el cual es un
indicadorde la actividad de organismos causantes de corrosión. La actividad de laHidrogenasa es establecida por el
desarrollo de un color azul en menos de 4 h.La intensidad del color es proporcional a la tasa en la cual la enzima toma
elhidrógeno, como se describe en el manual de Instrucciones Caproco, 1987.
Resultados de las pruebas realizadas se encontró que 12 de las 5 cepas eran producturas
de enzimas logrando ser específicamente del genero BSR( bacterias sulfato reducturas)
destaca por su potencial de aprovechar la energía de la luz y
de ácidos orgánicos durante el proceso denominado foto fermentación que produce
hidrógeno mediante la enzima nitrogenasa
la descripción morfológica de sus colonias teniendo en cuenta los siguientes parámetros: forma, superficie,
elevación, borde, tamaño, color, lustre, consistencia, entre otros.

Con estas bacterias se cree poder llevar a acabo la sisntesis de amoniaco a mayor escala por medio
de bacterias producturas hidrogeno ya que este es utilizado ampliamente en la industria agrícola y
sria una manera mas económica de obtener fertilizantes utilizando microorganismos, también se cre
con estas bacterias

Una vez crecidas las colonias que nos

i nteresan, se utili za un medio que
contenga el microorganismo que sea
susceptible de inhibirse su crecimiento
p or l o s ant i bi ót i cos qu e qu er a mo s
seleccionar: Gram +, Gram -, amplio
espectro,
2 aplicación