UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE ZOOTECNIA

Escuela profesional de zootecnia

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS PECUARIAS

COLORACIÓN GRAM

CURSO: Microbiologia Animal

DOCENTE: TAFUR ZEVALLOS, Lisandro

ALUMNO: FLORES VILCA, Flavio

TINGO MARIA
PERÚ
 I. INTRODUCCIÓN

Los microorganismos, concretamente las bacterias, pueden observarse

directamente al microscopio de campo claro. Sin embargo, debido al bajo

contraste entre las células y su entorno, estos procedimientos se utilizan

en ocasiones muy limitadas, como por ejemplo para la observación de la

movilidad bacteriana. Los microscopios de contraste de fases,

interferencia diferencial (DIC o la microscopía de Nomarski) y campo

oscuro permiten aumentar el contraste, empleándose para la observación

de vainas, filamentos u otras estructuras bacterianas.

La tinción es un método sencillo para incrementar el contraste entre la

célula y su entorno y por lo tanto contribuye a mejorar la imagen

observada. Las técnicas de tinción con diversos colorantes facilitan la

observación al aumentar notablemente el contraste.

Objetivo:

- Observar bacteria que se encuentran en el esputo.

 II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

Este método de baciloscopia de tipo cuantitativo se usa, para determinar

el grado de infección de una tuberculosis, las bacterias de bacilos se tiñen

de rojo ya que las fucsias tienden a adherirse a la pared bacteriana y la

separa de las gran positivas tiñéndolas de azul a morado, el número de

bacterias por muestra son 10, indicando en grado de infección.

2.1. Tinciones

Frontis sanguíneo Crytococcus neoformans

2.2. Características de la muestra

La muestra más adecuada para el diagnóstico de la tuberculosis

pulmonar es el esputo obtenido por expectoración espontánea, tras

un golpe de tos profunda. Estas muestras son generalmente de

consistencia espesa y mucoide, de color variable (desde

blanquecinas hasta verdosas) e incluso sanguinolentas.

 Las muestras de saliva, secreciones nasales o faríngeas NO son

muestras adecuadas para el diagnóstico de tuberculosis, aunque

pueden examinarse por la posibilidad de que hayan quedado

bacterias retenidas en esas zonas (boca, faringe) tras la tos.

Si el paciente no lograra expectorar, se puede recurrir a la

expectoración inducida que debe ser siempre supervisada por

personal médico.

- Aseguramiento o garantía de la calidad (AC): sistema concebido

para mejorar la confiabilidad y la eficacia de los servicios de

laboratorio de manera continua. Comprende el control interno de

la calidad (CI) y la evaluación externa de la calidad (EEC).

- BAAR: bacilos ácido alcohol resistentes.

- Control de calidad (CC): también llamado control interno de la

calidad. Comprende el control de todos los procesos a través de

los cuales el laboratorio realiza la microscopia, esto incluye la

verificación de los instrumentos y de los nuevos lotes de colorantes.

- Coloración de Ziehl Neelsen (ZN): método de coloración con

fucsina de Ziehl calentada hasta la eliminación de vapores,

decoloración con alcohol acido y luego contraste con azul de

metileno. Los BAAR aparecen rojos en un fondo azul.

- Error de cuantificación (EC): consiste en una diferencia entre el

supervisado y el supervisor de más de un grado en la lectura de un

frotis positivo. Este es un error menor que, generalmente, no tiene

ningún impacto en la toma de decisiones sobre el paciente.

- Error mayor: este tipo de error es considerado el más critico por el

alto impacto que tiene sobre la toma de decisiones en el paciente,

puede dar lugar a un diagnóstico erróneo y a un tratamiento

incorrecto. Estos errores pueden indicar graves deficiencias

técnicas e incluyen los elevados falsos positivos (EFP) y los

elevados falsos negativos (EFN).

- Error menor: en la práctica clínica, estos errores pueden tener un

impacto menor sobre la decisión a tomar respecto al paciente. Sin

embargo, para el propósito de evaluar la calidad de los resultados

del laboratorio, este tipo de error es considerado menos grave

debido a las limitaciones inherentes a la detección sistemática de

unos pocos BAAR que pueden estar distribuidos desigualmente a

lo largo del frotis. La frecuencia de errores menores puede indicar

eventuales deficiencias técnicas.

- Estrategia Sanitaria Nacional de Prevención y Control de

Tuberculosis (ESN-PCT): es el responsable del control de la

tuberculosis (prevención, diagnóstico y tratamiento).

- Evaluación externa de la calidad (EEC): consiste en la evaluación

de la preparación de los extendidos, la coloración, el examen

microscópico, registro e informe de los resultados. Para dar a

conocer el desempeño del laboratorio supervisado.

- Falso positivo elevado (FPE): un frotis negativo mal interpretado

como positivo 1+ a 3+. Se trata de un error mayor.

- Falso negativo elevado (FNE): un frotis positivo 1+ a 3+ que es

malinterpretado como negativo. Se trata de un error mayor.

- Falso positivo bajo (FPB): se trata de un frotis negativo

malinterpretado como un débil positivo (1 - 9 BAAR/100 campos).

Este tipo de error menor ocurre ocasionalmente aun en laboratorios

de alta calidad y con tasa de errores.

- Falso negativo bajo (FNB): se trata de un frotis positivo bajo (1 - 9

BAAR/100 campos) mal interpretado como negativo. Este tipo de

error menor ocurre ocasionalmente aun en laboratorios de alta

calidad y con tasa de errores.

 III. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. lugar y fecha

La práctica se llevó a cabo en el laboratorio de microbiología animal de la

Facultad de Zootecnia de la Universidad Nacional Agraria de la Selva el

día 27 de agosto.

3.2. .materiales

- Envase esterilizado

- Porta objeto

- Papel toalla

- Mechero de bunsen

3.2.1. Reactivo

- Ron de quemar

- Cristal violeta

- Lugol

- Alcohol acetona

- Safranina

3.2.2. Equipo

- Microscopio electrónico

3.2.3. Muestra

- Esputo
3.3. Procedimiento

- Desinfectarle lugar donde se va a trabajar los vidrios o bandejas

para

- Tomar una muestra del esputo, fijarlo al mechero.

- Colorear con cristal violeta por dos minutos.

- Lavar y echar lugol por dos minutos.

- Lavar y decolo real con alcohol acetona por un minuto.

- Lavar y contra teñir con safranina por dos minuto.

- Lavar y dejarlo secar.

- Observar al microscopio.
 IV. RESULTADOS

Se observa bacilos cortos los de color violeta son bacilos.

 V. CONCLUSIÓN

Se concluye, que si se pudo observar a las bacterias del esputo.

VI. BIBLIOGRAFÍA

- MILAGROS DE VISCARRONDO, SOFIA GUTIERRES DE

GAMBOA, 2001.Morfología y tinción de microorganismos.

- ISABEL DE SILONIZ, SUSANA SERRADO, ANA MARTIN,

COVADONGA VAZQUEZ. 2010. Técnicas básicas de

microbiología observación de bacterias.

- GUSTAVO A. DIAZ MARTIN. 2009. Fundamentos y técnicas de

análisis microbiológico

- Ministerio de salud. 2012Procedimientos para el control de calidad

externo de baciloscopia para el diagnóstico bacteriólogo de la

tuberculosis. [en línea] www.telemicroscopia.ehas.org>assets

- EHAS. 2012. Procesamiento de muestras respiratorias para

diagnóstico de tuberculosis. [En línea]

www.bvs.ins.gob.pez>cindoc>pub_ins