UNIVERSIDAD NACIONAL SAN LUIS GONZAGA DE ICA

FACULTAD DE AGRONOMÍA
FITOPATOLOGÍA GENERAL

Introducción
El presente informe tiene por objeto la determinación de las bacterias presentes en frutos
de naranja, así como también se estimará mediante la literatura y la práctica poder
identificar correctamente cada una de sus estructuras, observando así sus características
morfológicas, sus colores, etc.

Si bien es cierto como ya sea mencionado hay bacterias que se encuentran también en
estructuras que no poseen vida es por ello que la muestra tomada tiene que tener partes
de sus tejidos sanos.

Sin más pre ambulo en el siguiente informe se dará a conocer en forma detallada las
estructuras que presentan las bacterias perteneciente o resultantes de la pudrición de los
frutos de naranja.

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JOSE ANTONIO ANTEZANA SULLCA V – ‘A’
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Objetivos

✓ Determinar qué tipo de bacteria afecta a los frutos del naranjo.

✓ Determinar la forma de la bacteria que está presente.

✓ Determinar e identificar los colores de la bacteria.

✓ Ver los daños que produce dicha bacteria en la producción.

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Xanthomonas campestri Pv citri

Xhanthomona campestri pv citri es una bacteria Gram negativa, con forma de bastón (1.5-
2.0 x 0.5-0.75 μm) y presenta un solo flagelo polar; es una bacteria aeróbica obligada, las
colonias crecen en medio de cultivo agar y glucosa, con consistencia mucoide de color
amarillo cremoso debido al pigmento xantomonadina que producen.
Conocido también como: Cancro de los cítricos, cancro bacteriano de los cítricos,
bacteriosis del limonero, cancro cítrico, cancrosis de los cítricos, cancrosis asiática.
La temperatura máxima de crecimiento es de 35-39 °C, siendo la óptima de 28-30 °C.
Poseen metabolismo oxidativo de la glucosa, catalasa positiva, Kovacs oxidasa negativa o
débil, reducción de nitratos negativa, no utiliza asparagina como fuente de carbono y
nitrógeno simultáneamente, realizan hidrólisis de almidón y caseína, Tween 80 y aesculina
con reacción positiva. La gelatina y pectatos son licuados por la bacteria, requiere de
metionina o cisteína para desarrollarse y el crecimiento es inhibido por 0.02 % de cloruro
de trifeniltetrazolium (Goto, 1990).
Las variantes de la bacteria son diferenciadas utilizando manitol. Los aislamientos del grupo
B y C, comparten características con el grupo A y son diferenciados por el metabolismo a
ciertos carbohidratos. La caracterización molecular del género Xanthomonas puede
realizarse por diferentes técnicas como hibridación DNA-DNA: huella genética, perfil de
ácidos grasos, electroforesis en geles de poliacrilamida.

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Ciclo biológico y cómo afecta a la planta

La bacteria ingresa a los diferentes órganos de la planta directamente a través de las
aberturas naturales (estomas, lenticelas, hidatodos, etc.) o heridas de tejidos susceptibles.
En hojas, el período de susceptibilidad a la infección es relativamente corto, entre los 14 y
28 días después de iniciado el desarrollo de brotes y se infectan mucho menos a medida
que maduran. Los frutos son susceptibles los primeros 90 días desde cuaje, un período
mucho mayor que el de las hojas.

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Sobrevivencia, dispersión y multiplicación

La bacteria sobrevive en lesiones ubicadas en brotes vegetativos, las cuales conforman la
principal fuente de inóculo para ciclos de cultivo de años posteriores. Existen reportes de
infecciones latentes sobre brotes infectados a finales del otoño previo a la dormancia de los
árboles. La bacteria invernante causa nuevas infecciones a la llegada de la primavera, que
generan grandes cantidades de bacterias que son dispersadas por diferentes medios. La
bacteria también puede sobrevivir largos períodos de tiempo en la corteza de los troncos y
ramas laterales es diseminada por el agua libre presente en la superficie del follaje, que al
gotear salpica nuevos brotes. La concentración de la bacteria en agua depende de la edad
de la lesión y varía entre 100-1000 millones de células bacterianas por gota. Las tormentas
ocasionadas por huracanes incrementan gravemente la dispersión de la enfermedad,
debido a que los vientos causan heridas en hojas y ramas de los árboles. La bacteria se
desplaza a distancias mayores a 100 m en las gotas pequeñas y así causa infecciones en
árboles vecinos. El riego por aspersión favorece el desarrollo de la enfermedad, debido al
salpique de agua que puede contener la bacteria. El desarrollo de epidemias en huertos de
cítricos es de ocurrencia esporádica. Sin embargo, la bacteria puede encontrarse en los
huertos de manera latente en concentraciones no detectables, y cuando las condiciones
son favorables, nuevamente surgen rebrotes de la enfermedad. Durante las estaciones de
primavera y verano cuando ocurren las lluvias y los vientos superan los 8 m/s, se favorece
la dispersión de la enfermedad. El período crítico durante el cual pueden ocurrir infecciones
en la cascara de frutos es durante los primeros 90 días posteriores al amarre Las
infecciones ocurren principalmente, a través de los estomas y aberturas naturales. La
presencia del minador de la hoja Phyllocnistis citrella Stainton (Lepideoptera: Gracillariidae)
puede favorecer el incremento de la incidencia y severidad de la enfermedad A pesar de
que el minador no es un insecto vector, los hábitos del insecto generan nuevos puntos de
entrada para la bacteria El insecto prefiere los brotes tiernos y recién emergidos, que
resultan altamente susceptibles y la bacteria prospera adecuadamente en las minas
originadas por la larva.

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Síntomas
- Síntomas en hojas
Las hojas de los cítricos son susceptibles a la enfermedad durante la primera mitad de
la fase de expansión. La infección puede abarcar todo el grosor de la hoja y atravesar
el haz y envés. Las lesiones en el haz se observan generalmente más aplanadas y
hundidas (Figura A); mientras que en el envés se aprecian en forma de pequeñas
ampollas cuando la lesión es joven (Figura B), o como pequeños volcanes (bordes
salientes y centro hundido) cuando la lesión es más avanzada (Figura D). Las lesiones
jóvenes presentan un halo amarillo y bordes húmedos, los cuales desaparecen al
aumentar la edad de la lesión. Las lesiones miden aproximadamente de 2- 10 mm,
aunque en condiciones favorables pueden coalescer y afectar superficies mayores
(Figura C).

Figura A Figura B

Figura C Figura D

Las lesiones en una misma hoja tienden a mantener un tamaño similar debido a que
las infecciones pueden derivarse de un solo ciclo de infección. En lesiones maduras el
tejido muerto corchoso puede desprenderse dejando huecos en las hojas. Cuando la
infección ocurre a través de los estomas, las lesiones suelen estar ubicadas de forma
individual.

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- Síntomas en ramas, tallos y troncos

Los síntomas en etapas iniciales se observan como lesiones elevadas, corchosas,
errumpentes y con márgenes húmedos; con el tiempo los márgenes adquieren
apariencia aceitosa. En especies y cultivares susceptibles puede ocurrir muerte
descendente de ramas que han sido infectadas severamente

- Síntomas en frutos
se manifiestan como lesiones elevadas, corchosas, errumpentes, con bordes
húmedos y margen clorótico, que tienden a desaparecer al aumentar la edad de la
lesión. Las lesiones pueden profundizar hasta 1 mm en la cáscara, pero sin afectar
la parte comestible. Los frutos jóvenes son más susceptibles y puede ocurrir más de
un ciclo de infección, ya que el período de susceptibilidad abarca de 90-120 días
después de la caída de los pétalos. Los frutos afectados son inservibles para
comercialización debido al daño estético y restricciones cuarentenarias en mercados
internacionales.

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Taxonomía

TAXONOMÍA

Reino Bacteria

Phylum Proteobacteria

Clase Gamma Proteobacteria

Orden Xanthomonadales

Familia Xanthomonadaceae

Genero Xanthomonas

Especie Xanthomonas citri

Nombre común Xhanthomona campestri pv

citri

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Materiales y métodos
Recolección de la muestra

Al examinar el fruto del naranja enfermo se observó que la bacteria que invadió los fruto fue
la bacteria Xanthomonas campestri Pv citri que se caracteriza por causar podredumbre
blanda, cancro y emitir olores desagradables.

✓ Recolección del fruto para confirmar en laboratorio.

✓ Diversos niveles de desarrollo y pudrición de la enfermedad.
✓ Frutos con tejidos muertas no son buenos ejemplos.
✓ Se debe colocar la muestra en papel humedecido y dentro de una plástica con sumo
cuidado.
✓ Procurar que este en un ambiente fresco para que se pueda mantener hasta ser
llevado a laboratorio.
✓ Llevar tan pronto sea posible a laboratorio.

Fruto enferma Fruto sano

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Procedimiento

En esta práctica de identificación de bacterias se escogió una naranja lo primero a realizar

fue la selección de muestra en donde la naranja escogida tenía una zona podrida
Una vez ya escogida nuestra muestra se prosiguió a pasar la muestra a nuestro medio de
cultivo en PDA para eso la realización del PDA se realizó de la siguiente manera:
La papa blanca se lava y se cortan (sin ser pelados), luego en la balanza se procederá a
medir el peso de la dextrosa, el agar y las papas blancas.
Una vez obtenida ya esta solución se procederá a colocarlo en la autoclave para su
esterilización a una temperatura de 121 ° C y 15lb.por un lapso de tiempo de 15 minutos
Después de haber preparado las placas Petri con el agar agua se procederá a lo colocación
de nuestra muestra en la placa Petri
El traslado de la muestra a la placa Petri consistirá en sacar pequeños trozos de la zona de
putrefacción de la naranja y depositarlo con mucho cuidado a la placa Petri que contiene el
medio de cultivo PDA, una vez realizada esta acción se procederá a guardar nuestra
muestra ya colocada en placa Petri en un recipiente con las condiciones adecuadas, ya que
la muestra estará dentro de 2 días aproximadamente para poder aislar las bacterias
Luego de haber trascurrido los 2 días se observó una mucosidad amarillenta en la zona
donde se cultivó la bacteria y se procederá a su aislamiento de esta para poder observar e
identificar la bacteria en el microscopio electrónico.
La mucosidad se lleva al porta objeto y se le hace la tinción de Gram, el cual usamos azul
de metileno, se cubre con el cubre objeto y se lleva al microscopio electrónico.

Placa Petri, medio de cultivo PDA, bacteria Xanthomonas campestri Pv citri

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Resultado
Los resultados obtenidos luego de haber realizado la práctica experimental fue que la
bacteria que invadió el fue la bacteria Xanthomonas campestri Pv citri, caracterizada por
causar cancro y podredumbre blanda.
Finalmente, después de revisar y observar las estructuras de las bacterias en el microscopio
se observó su forma, el cual tiene forma de bastón. y luego de revisar literatura en diferentes
fuentes se llegó a tomar esta decisión debido a que las características mostradas en las
imágenes coindicen con las imágenes que se muestran en las fuentes de internet
consultadas.

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Discusiones
✓ Debemos aprender a diferenciar las distintas clases de bacterias.

✓ Las bacterias tienen una alta tasa de multiplicación cada 20 minutos se reproduce.

conclusión
✓ En el fruto de la naranja que se encontraba en proceso inicial de pudrición se halló
finalmente bacterias.

✓ El color de las bacterias que resultaron es de un color amarillamiento.

✓ La forma de la estructura de las bacterias es de bastoncitos rectos.

✓ La bacteria fue identificada como (Xanthomonas campestri Pv citri) ya que Penetra

por heridas, provocando generalmente podredumbres blandas y cancro.

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Bibliografía
Disponible en:

✓ http://www.fitopalogia/sinavimo.gov.ar/plaga/xanthomonas-campestris-Vp-citri

Disponible en:

✓ http://WWW.TECNICOAGRICOLA.ES/XANTHOMONASENCITRICOs2ahUKEwjZ48rxe3bAU
BvVMKHd5RBsgQFjAAegQIABAB&usg=AOvVaw3YQlEUwRKLTiXchEPyYf0S

Disponible en:

✓ http://tesis/gipcitricos.ivia.es/area/fito/bacterias-principales/citris/xanthomonas-
campestris-Vp-citri

Disponible en:

✓ https://www.google.com.pe/url?sa=t&source=web&rct=j&url=https://dialnet.unirioja.
es/descarga/articulo/2916267.pdf&ved=2ahUKEwjZ48rxe3bAhUBvVMKHd5RBsgQ
FjAAegQIABAB&usg=AOvVaw3YQlEUwRKLTiXchEPyYf0S

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