LABORATORIO N° 1

Profesora Verónica Abasto Córdova

Biología – 2° Medio

Nombre : ____________________________________ Revisión

Curso : ______________
Fecha : ______________

EXTRACCIÓN DE ADN
El ADN es una molécula de longitud gigantesca que está presente en cada célula viva. Es la encargada de transmitir de
generación en generación las instrucciones necesarias para formar un organismo, y controla todas las actividades de las células
durante el tiempo de vida del organismo.

Probablemente pensabas que sólo los científicos podían extraer y purificar ADN, pero en realidad es un procedimiento
sencillo. El procedimiento implica primero romper las células y permitir que se libere su contenido en un buffer, una solución en
donde el ADN se va a disolver. En este punto, el buffer contiene el ADN, pero también una mezcla de ARN, proteínas y
carbohidratos entre otras cosas. Agregando detergente y sal de cocina, y luego alcohol, el ADN va a precipitar y podremos verlo
a simple vista.

MATERIAL

 Fruta a elección (de preferencia blanda de lo contrario deberás agregar a los materiales una minipimer)
 Unas cucharadas de sal de mesa
 50 ml de detergente líquido
 Unas cucharadas de bicarbonato de sodio
 250 ml de alcohol
 Gasa estéril
 Tijera
 Bolsa hermética

PROCEDIMIENTO

1. Preparación del buffer: solución que no tiende a cambiar su acidez a lo largo del experimento, manteniendo el sistema
químicamente estable.
En un vaso precipitado agregar 120 ml de agua destilada. Luego agregar 1/2 cucharadita al ras de sal de mesa, 1 cucharadita
bien colmada de bicarbonato de sodio y 5 cucharadita de detergente líquido. El ADN se degrada rápidamente, por lo tanto,
para reducir la velocidad a la cual se degrada, enfriemos el buffer colocando el vaso en el freezer.
El detergente cumple dos tareas al mismo tiempo: rompe las paredes celulares y ayuda a romper las proteínas para que no
precipiten junto con el ADN.

2. Prepración de la fruta: en una bolsa hermética agregar trocitos de la fruta escogida como fuente de ADN (Frutilla, plátano o
cualquier otra fruta fácil de moler); agrega un chorrito de agua destilada, cerrar la bolsa y mezcla bien, presionando la bolsa,
tratando de dejar una papilla. De esta forma se romper las células (en términos biológicos: “lisar”).

3. Agregar buffer frío a fruta. Usar aproximadamente el doble del volumen que se tiene de vegetal triturado. No tiene que
quedar muy diluido o no tendremos suficiente cantidad de ADN. A continuación, volver a mezclar tratando de evitar que se
forme mucha espuma.

4. Filtrar. Pasar el “licuado” a través de un filtro de papel o con gasas, recibiendo el líquido en un vaso precipitado limpio que
se encuentra en un recipiente con hielo, para mantenerlo bien frío. Unas enzimas que se llaman nucleasas podrían atacar
nuestro ADN y degradarlo.

5. Precipitación del ADN. La solución que pasó a través del filtro contiene una mezcla de fragmentos de ADN y otras moléculas.
Colocar una cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.
Para precipitar el ADN, necesitamos agregar alcohol bien frío, del freezer. Utilizar una pipeta para depositar cuidadosamente
un volumen doble de alcohol frío por las paredes del tubo con la solución ADN. El alcohol, por ser menos denso que el buffer,
quedará en la superficie del recipiente. Dejar reposar por un par de minutos. En la interfase entre los dos líquidos se verá una
sustancia gelatinosa y blanquecina. Esa sustancia es el ADN.