Curso 2018/19 (FMed) Bioquímica-Biofísica -- Seminario 1 Curso 2018/19 (FMed) Bioquímica-Biofísica -- Seminario 1

SEMINARIO 1 Disoluciones
tampón, reguladoras, buffer, amortiguadoras
Tampones de pH fisiológicos. pH ≈ cte
Ÿ Recordatorio: ácidos/bases, Ka (y pKa). Pequeñas adiciones de ácido o base
Ÿ Grado de disociación y pH del medio
(ecuación de Henderson-Hasselbach). Ácido: en agua cede H+
Ÿ Disoluciones tampón.
Base: en agua acepta H+
Ÿ Principales tampones de pH fisiológicos en:
- fluido extracelular; HA H+ + A-
- plasma sanguíneo. ácido base conjugada

H+ (=protón) muy reactivo

João Meireles da Silva 1 2

Curso 2018/19 (FMed) Bioquímica-Biofísica – Tema 02 Curso 2018/19 (FMed) Bioquímica-Biofísica -- Seminario 1

Carácter ÁCIDO-BASE Ácido en agua

R no disociable H+ (=protón) muy reactivo
COOH COO — COO — H H H
+ +
H3N C H !" H3 N C H !" H2 N C H
A + O + A-
R Ka1 R Ka2 R
H O+
H H
A+ A± A–
H3O+ hidronio
pH bajos A 0
pH altos HA + H2O H3 O + + A -
[H+] alta pI [H+] baja ácido base conjugada

+1 -1
(Pero, para simplificar, no tendremos en cuenta H3O+)
Carga Neta
(diapo 3 en Semin 1) 51 4
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Ácidos/Bases Ácidos/Bases
HA H+ + A- HA H+ + A-
ácido base conjugada ácido base conjugada

[H+] [A-] Menor Ka

[H+] [A-] [A-]
Ka = [HA] menos disociado Ka = Ka = [H+]
más débil [HA] [HA]
Mayor pKa [A-]
pH = -log [H+] log Ka = log [H+] + log
menos disociado [HA]
pKa = -log Ka más débil [A-]
-log [H+] = -log Ka + log
[HA]
Ka = 10-3 M pKa = -log 10-3=-(-3) pKa =3
[A-]
pH = pKa + log Ecuación de
Ka = 10-6 M pKa = -log 10-6 pKa =6 [HA] HENDERSON - HASSELBALCH
5 6

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Ácidos/Bases pH = pKa - 1
[A-] [A-]
[A-] Ecuación de pKa - 1 = pKa + log - 1 = log
pH = pKa + log HENDERSON - HASSELBALCH
[HA] [HA]
[HA]
Relación entre el pH y 10-1 =
[A-] 1
=
[A-]
las concentraciones de A- y HA [HA] 10 [HA]

pH = pKa 1 [A-] 10 [HA]

pKa: pH al cual está disociado al 50%

[A-] [A-] [A-] 9 % disociadas A- y 91 % sin disociar HA

pKa = pKa + log
[HA]
0 = log
[HA]
1=
[HA]
[A-] = [HA]

50 % disociadas A- y 50% sin disociar HA

7 8
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pH = pKa - 2 Carácter ÁCIDO-BASE

[A-] [A-]
Leucina R no disociable
pKa - 2 = pKa + log - 2 = log
[HA] [HA] COOH COO — COO —
+ +
H3N C H !" H3 N C H !" H2 N C H
[A-] 1 [A-] 1 [A-] pKa1 pKa2
10-2 = = R R R
[HA] 100 [HA] 100 [HA] (2,4) (9,6)
A+ A± A–
100 % sin disociar HA 2,4 + 9,6
pH bajos pI =
2
=6
pH altos
pH ≤ pKa - 2 100% sin disociar 100% HA [H+] alta [H+] baja
pH ≥ pKa + 2 100% disociado 100% A-
9 (diapo 10 en Semin 1) (51)

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pI (Punto Isoeléctrico) Ácidos/Bases

= pH al cual la carga neta es cero
pH = pKa pKa = 6
pH < pI carga neta positiva
pH > pI carga neta negativa pH 6 50 % disociadas y 50% sin disociar

pKa (= –log Ka)

pH ≤ pKa - 2 Muchos H+
= pH al cual [A–] es igual a [HA] pH 0-4 100% sin disociar 100% HA

pH < pKa [HA] > [A–] pH ≥ pKa + 2 Pocos H+

pH > pKa [A–] > [HA] pH 8-14 100% disociado 100% A-
11 12
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Disoluciones Disoluciones
tampón, reguladoras, buffer, amortiguadoras tampón, reguladoras, buffer, amortiguadoras
pH ≈ cte Dador H+/aceptor de H+
[A-]o
Pequeñas adiciones de ácido o base ácido HA y base A- pH = pKa + log
concentraciones adecuadas [HA]o
Ácido: en agua cede H+ Capte H+ HA A- A- HA- HA
A-
Base: en agua acepta H+ Ceda H+ HA A- HA A HA
A- HA - HA A-A-
A- HA A A -
Dador H+/aceptor de H+ HA
HA A - HA A -
A-HA
ácido HA y HA HA A-HA
A -
A- A
base A- HA A- HA HA - A-
concentraciones adecuadas
13 14

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Disoluciones Disoluciones
tampón, reguladoras, buffer, amortiguadoras tampón, reguladoras, buffer, amortiguadoras
Dador H+/aceptor de H+ Dador H+/aceptor de H+
[A-] [A ]o -
ácido HA y base A- pH = pKa + log o ácido HA y base A- pH = pKa + log
concentraciones adecuadas [HA]o concentraciones adecuadas [HA]o

HA A- A- HA- HA Añadimos H+ = x HA A- A- HA- HA Añadimos OH- = x

A - A -
HA A- HA A HA A- + H+ HA HA A- HA A HA Quitar H+ = x
A HA - HA
- A A-
-
A- HA - HA A-A- HA A- + H+
A- HA A A- HA [A-] = [A-]o - x
A- HA A A- HA [A-] = [A-]o+ x
HA A- HA A A-HA HA A- HA A A-HA
- -
[HA] = [HA]o + x [HA] = [HA]o- x
HA HA [A-]o- x HA HA [A-]o+ x
A- HAA- A- A pH = pKa + log A- HAA- A- A pH = pKa + log
HA A- HA HA - A- [HA]o+ x HA A- HA HA - A- [HA]o- x
pH disminuye muy poco 15
pH aumenta muy poco 16
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Disoluciones Las disoluciones de aminoácidos tienen capacidad tampón

tampón, reguladoras, buffer, amortiguadoras R no disociable
Dador H+/aceptor de H+ -
[A ]o
ácido HA y base A- pH = pKa + log
concentraciones adecuadas [HA]o

HA A- A- HA- HA Tienen poder tamponante

A-
HA A- HA A HA Capacidad tampón en dos zonas:
A- HA - HA A-A- - pH alrededor de pK1; y
A- HA A A- HA concentración - pH alrededor de pK2
HA A- HA A A-HA Máxima pH = pKa
-

HA HA A-HA
A -
A- A 50% A- 50% HA
HA A- HA HA A - -
Curva de titulación de un aa (Gly)
Capacidad tampón pH = pKa ± 1 17 Feduchi et al (2015) Fig. 6-5 (diapo 18 en Semin 1) 55

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Tampones fisiológicos Escala de pH y pH de

Mantienen el pH de los fluidos biológicos en algunos fluidos fisiológicos
los límites adecuados Fluido pH
No únicos Jugo gástrico 1,5-3,0
generan [H+] respiración DesoxiHb + O2 OxiHb + H+ Orina 5,0-8,0
Procesos biológicos Saliva 6,4-7,0
consumen [H+] metabolismo Ciclo de Krebs Fluido intracelular 6,9-7,2
eritrocito 7,2
Cambio Cambio de Pérdida de la
Plasma sanguíneo 7,4±0,05
de pH conformación actividad biológica
Duración
Número de proteínas afectadas
Función proteínas

19 Mathews et al (2013) Tabla 2.16 (http://lope.unex.es/record=b1446989%7ES7*spi) 20

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El pH del plasma sanguíneo Tampones fisiológicos: Fluido intracelular

varía entre márgenes estrechos
HPO42-/H2PO4- Tampón Fosfato
Fluido pH Aceptor H+ Dador H+
Jugo gástrico 1,5-3,0
Orina 5,0-8,0 H2PO4- H+ + HPO42- pKa = 7
Saliva 6,4-7,0
Cantidad
Fluido intracelular 6,9-7,2 Aumenta H+ disminuye pH suficiente
eritrocito 7,2
H+ + HPO42- H2PO4-
Plasma sanguíneo 7,4±0,05

Disminuye H+ aumenta pH
muerte Acidosis 7,4 Alcalosis muerte
H2PO4- H+ + HPO42-
6,9 7,35 7,45 7,8
21 22

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Tampones fisiológicos: Fluido intracelular Tampones fisiológicos: Fluido intracelular

Proteínas Grupos ácido/base Proteínas Grupos ácido/base
Dador H+ Aceptor H+ Dador H+ Aceptor H+

NH3+ NH3+
NH2 pKa 7-9 NH2 pKa 7-9
+ H+ + H+

COOH COOH
COO- pKa 3-5 COO- pKa 3-5
+ H+ + H+
R
pH = pKa ± 1 R
pKa = 4 + H+
Tampón: de pH 3 a pH 5 R
R Grupo R His
23 24
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Tampones fisiológicos: Fluido intracelular Plasma sanguíneo pH 7,4 ± 0,05

HPO42-/H2PO4- Tampón Fosfato
Proteína Proteína
H2PO4- H+ + HPO42- pKa = 7

Poca cantidad

pKa 6-7

Grupo R His Grupo R His

Dador H+ Aceptor H+
25 26

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Tampones fisiológicos: Plasma sanguíneo Tampones fisiológicos: Plasma sanguíneo

HCO3-/CO2 Tampón bicarbonato HCO3-/CO2 Tampón bicarbonato
Alveólos HCO3- Aceptor H+ Alveólos HCO3- Aceptor H+
CO2 gas PULMONES CO2 gas PULMONES
CO2 Dador H+ CO2 Dador H+

CO2 disuelto [CO2] regulada cambios en la respiración CO2 disuelto [CO2] regulada cambios en la respiración
H2 O [HCO3-] regulada por los riñones H2 O [HCO3-] regulada por los riñones
H2CO3 H2CO3
Si [H+] pH Acidosis Si [H+] pH Alcalosis
+ sale
HCO3- H2CO3 CO2 d CO2 g CO2 g CO2 d H2CO3 HCO3-+H+
HCO3- + H+ HCO3- + H+
Dador H+
Enfisema
Acidosis Hiperventilación Alcalosis
Bronquitis crónica
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