UNIVERSIDAD EARTH

EFICIENCIA DE LOS MICROORGANISMOS EFICACES (EM) EN LA

ESTABILIZACIÓN DE LODOS SÉPTICOS PARA SU REUSO AGRÍCOLA

Marcos Tomás Fioravanti Basombrío

Natalia Vega Araya

Trabajo de Graduación presentado como requisito parcial para optar al título

de Ingeniero(a) Agrónomo(a) con el grado de Licenciatura

Guácimo, Costa Rica

Diciembre, 2003
 Trabajo de Graduación presentado como requisito parcial para optar al título de
Ingeniero(a) Agrónomo(a) con el grado de Licenciatura

Profesor Asesor Ing. Carlos Hernández H., Ph.D.

Profesor Coasesor Shuichi Okumoto, M.Sc.

Profesora Coasesora Jane Yeomans, Ph.D.

Decano Daniel Sherrard, Ph.D.

Candidato Marcos T. Fioravanti Basombrío

Candidata Natalia Vega Araya

Diciembre, 2003

ii
 DEDICATORIA

A mis padres, ellos son una de mis más importantes motivaciones y a quienes
siempre quiero mostrar con entusiasmo cada uno de mis resultados. De ellos nace
la oportunidad de toda esta etapa de mi formación que concluye con esta tesis.

A ellos y también a todos los que todavía creen en invertir su tiempo y

conocimiento para retrazar la entropía de un mundo donde todo está tan mal e
injustamente diseñado.

Marcos

A mis padres, por darme la educación, apoyo y comprensión que me han

permitido concluir exitosamente otra etapa más de mi vida.

A mi tía Carolina, por motivarme en el campo del adecuado manejo de nuestros

desechos más básicos.

Natalia

iii
 AGRADECIMIENTO

A Juanfran por que desinteresadamente estuvo dispuesto a “meter las manos en

la masa” con nosotros; fue fundamental en la etapa experimental.

A nuestros asesores por su tiempo y conocimientos.

Al personal de Ingeniería que nos apoyó y salvó en más de una ocasión.

Al personal del Laboratorio EARTH, pues también tuvieron que lidiar con los olores
y colores de nuestro experimento.

Marcos y Natalia

iv
 RESUMEN

En Costa Rica, los tanques sépticos son el sistema más común para el
manejo de las excretas humanas. En este sistema se utilizan grandes volúmenes
de agua para transportarlas hasta tanques en los que se da un proceso de
sedimentación primaria donde se acumulan sólidos mezclados con agua. Este
material, llamado lodos sépticos o biosólidos crudos, contiene, además de agua,
microorganismos patógenos, componentes sólidos putrescibles y gran cantidad de
nutrientes. En Costa Rica sólo un 4 % de los lodos sépticos se tratan antes de ser
descargados a ríos o mares. Ante esta insalubre situación y con el conocimiento
de que se han tomado medidas legales que obligan el tratamiento de los lodos, en
la Universidad EARTH surge la necesidad de encontrar un tratamiento efectivo,
fácil y factible que permita la segura disposición o reuso de este material.

Con el presente proyecto se inició la búsqueda de un tratamiento que

garantice la estabilización de los lodos; esto significa la eliminación de patógenos
y la reducción de su potencial putrescible, que es lo que causa mal olor. Para
cumplir con este objetivo, se utilizaron Microorganismos Eficaces (EM); estos son
una mezcla de microorganismos benéficos que crean un ambiente negativo para
patógenos y son efectivos degradadores de materia orgánica. Para determinar su
eficacia en la estabilización de los lodos se utilizaron dos tanques anaeróbicos con
1 m3 de lodos sépticos cada uno. A uno de ellos se le aplicó 10% (v/v) de EM
activado y el otro se dejó como Control. Se tomaron muestras del lodo inicial y se
muestreo cada dos semanas durante un mes, analizando características físicas,
químicas y biológicas de los biosólidos. Se hicieron dos repeticiones.

Los resultados revelaron una diferencia, desde la segunda semana, entre el

Control y el tratamiento con EM. Los principales indicadores que favorecen al
tratamiento con EM son: reducción casi total de coliformes totales y fecales,
cambio de un olor muy fuerte y putrefacto a un olor fuerte de fermentación,
reducción de la Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5), reducción del contenido
de nitratos, reducción del pH y de temperatura, mayor reducción de grasas y

v
aceites. Por otro lado, el Control presentó olor fuerte a putrefacción, aumento de
pH y DBO, aumento de coliformes totales, ausencia de reducción de nitratos, entre
otros. Estos resultados reflejan la eficacia del EM en la estabilización de biosólidos
crudos para su uso agrícola como abono, pero se recomienda continuar
investigando las dosis necesarias de EM y el efecto de los biosólidos en suelos
agrícolas.

Palabras clave: Lodos sépticos, Microorganismos Eficaces (EM), estabilización,

tratamiento biológico, coliformes fecales, agricultura.

Fioravanti, M; Vega, N. 2003. Eficiencia de Microorganismos Eficaces (EM) en la

estabilización de lodos sépticos para su reuso agrícola. Proyecto de
Graduación. Guácimo, Costa Rica, EARTH. 58 p.

vi
 ABSTRACT

In Costa Rica, the septic tank is the most common system used for the
management of domestic wastewater. In this type of system, large quantities of
water are used to transport the wastes to the tanks, where a primary sedimentation
process, and consequent accumulation of water mixed with solids, occur. This
mixture is called septage and contains water, bio-solids, pathogenic
microorganisms, and heavy metals. In Costa Rica, treatment is provided to only
4% of septage produced before it is discharged into rivers or other bodies of water.
Due to this unsanitary practice, and the legal problems that disposal companies
face, EARTH University is looking for an effective, easy, and feasible treatment
that allow the safe reuse or disposal of this material.

The present project is an initial investigation into an adequate treatment for

septage that would allow for its subsequent use on agricultural lands. The goal of
the treatment is to stabilize the biological and physical characteristics of the
septage, thus transforming it into a usable material. This stabilization ensures the
elimination of pathogenic agents and decomposition products that emanate
offensive odors. To accomplish this goal, the product Effective Microorganisms
(EM) was used. This product is a mixture of beneficial microorganisms that create
a negative environment for the pathogenic and odor producing agents. In the
investigation, duplicate samples of septage (1 m3) were incubated anaerobically for
one month. There were two treatments, 0 and 10% (v/v) EM. Sub-samples of the
septage were collected at zero, two and four weeks of incubation and were
analyzed for biological, chemical, and physical characteristics.

A difference between the two treatments was observed after two weeks of
incubation. When 10% EM was applied, there was a significant reduction in fecal
and total coliforms as compared to the 0% EM treatment, and the odor emanating
from the septage treated with 10% EM changed from a very strong putrefied odor
to a strong fermented odor. Other changes with this treatment included reductions
in Biochemical Oxygen Demand (BOD5) and nitrate concentration, as well as lower

vii
pH (acidification), lower temperature, and reduction in the oil/grease content, as
compared to the 0% EM treatment. These results show the effectiveness of EM in
the stabilization of septage. It is recommended that this line of investigation
continue to determine the exact concentration EM required for the stabilization, and
the effect of application of the digested septage to agricultural lands.

Key words: Septage, Effective Microorganisms (EM), stabilization, treatment,

agriculture, fecal coliforms.

Fioravanti, M; Vega, N. 2003. Eficiencia de Microorganismos Eficaces (EM) en la

estabilización de lodos sépticos para su reuso agrícola. Proyecto de
Graduación. Universidad EARTH, Guácimo, Costa Rica. 58 p.

viii
 TABLA DE CONTENIDO

Página
DEDICATORIA .......................................................................................................III
AGRADECIMIENTO .............................................................................................. IV
RESUMEN .............................................................................................................. V
ABSTRACT........................................................................................................... VII
1 INTRODUCCIÓN...............................................................................................1
2 OBJETIVOS ......................................................................................................4
2.1 GENERAL .................................................................................................4
2.2 ESPECÍFICOS ..........................................................................................4
3 REVISIÓN DE LITERATURA............................................................................5
3.1 AGUAS RESIDUALES ..............................................................................5
3.2 LODOS SÉPTICOS Ó BIOSÓLIDOS CRUDOS........................................6
3.2.1 Características físicas .................................................................7
3.2.2 Características químicas .............................................................8
3.2.3 Características biológicas..........................................................10
3.3 TRATAMIENTO DE LOS BIOSÓLIDOS CRUDOS .................................11
3.3.1 Estabilización biológica por digestión anaeróbica .....................13
3.4 MICROORGANISMOS EFICACES (EM) ................................................14
3.4.1 El EM en el tratamiento de los biosólidos crudos ......................15
3.5 REQUERIMIENTOS LEGALES...............................................................20
3.5.1 Reglamento de Reuso y Vertido de Aguas Residuales en
Costa Rica .................................................................................20
4 MATERIALES Y MÉTODOS ...........................................................................22
4.1 UBICACIÓN.............................................................................................22
4.2 ESTABLECIMIENTO DEL ESTUDIO ......................................................22
4.3 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS............................................................24
4.4 ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS ..............................................................25
5 RESULTADOS Y DISCUSIÓN........................................................................27
5.1 OLOR Y COLOR .....................................................................................27
5.2 PH, TEMPERATURA Y COLIFORMES...................................................29
5.3 NITRATOS, DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO Y FOSFATOS .....30
5.4 OTRAS VARIABLES ...............................................................................33
5.5 VALIDEZ RELATIVA DE LOS RESULTADOS ........................................36
6 CONCLUSIONES............................................................................................38

ix
7 RECOMENDACIONES ...................................................................................40
8 LITERATURA CITADA ...................................................................................41
9 ANEXOS .........................................................................................................44

x
 LISTA DE CUADROS

Cuadro ...........................................................................................................Página

Cuadro 1. Parámetros cuantificables de los biosólidos. ...........................................6

Cuadro 2. Porcentaje de sólidos totales en los biosólidos crudos............................8
Cuadro 3. Contenido de metales pesados en biosólidos y límite permitido............10
Cuadro 4. Diferentes tratamientos utilizados para los biosólidos. ..........................13
Cuadro 5. Microorganismos que ayudan a remover metales del agua. .................19
Cuadro 6. Límites permisibles para el reuso de aguas residuales. ........................21
Cuadro 7. Frecuencia de muestreo y parámetros analizados. ...............................24
Cuadro 8. Olor percibido en los respectivos tratamientos. .....................................27
Cuadro 9. Color observado en los respectivos tratamientos. .................................28
Cuadro 10. Contenido de Coliformes totales y fecales...........................................30
Cuadro 11. Contenido de grasas y aceites en los tratamientos. ............................35
Cuadro 12. Contenido de metales pesados en los tratamientos. ...........................36

xi
 LISTA DE FIGURAS

Figura Página

Figura 1. Estructura básica de un tanque séptico. ..................................................5

Figura 2. Proceso natural de oxidación desde la perspectiva de los flujos de
energía. ..................................................................................................15
Figura 3. Proceso del EM desde la perspectiva de los flujos de energía. .............16
Figura 4. Mecanismo en el tratamiento de aguas residuales con EM. ..................17
Figura 5. Foto de uno de los tanques utilizados en los tratamientos.....................23
Figura 6. Comparación de las muestras recolectadas. .........................................28
Figura 7. Temperatura y pH de los respectivos tratamientos. ...............................29
Figura 8. Contenido de nitratos y Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5 ).......31
Figura 9. Contenido de fosfatos. ...........................................................................33
Figura 10. Contenido de sólidos sedimentables y sólidos totales en los
tratamientos. ..........................................................................................34
Figura 11. Contenido de elementos nutricionales en los tratamientos. .................36
 LISTA DE ANEXOS

Anexo Página

Anexo 1. Datos crudos de los resultados obtenidos...............................................45

xiii
 1 INTRODUCCIÓN

Uno de los grandes problemas socio-ambientales que hoy enfrenta la

humanidad es la disposición final de sus desechos más esenciales: las excretas.
Cuando se construyeron nuestras ciudades y la tecnología nos fue ofreciendo
grandes edificios y comodidades, sin duda se pensó en casi todo para el
desarrollo humano. Sin embargo, en muy pocas situaciones se previó que los
desechos serían proporcionales.

Desde la perspectiva de un individuo las excretas significan tan sólo 1,4

litros diarios (0,15 litros fecales y 1,25 litros de orina) (Del Porto y Steinfeld, 1997).
Sin embargo, la situación es diferente desde una óptica colectiva, considerando
que mundialmente se generan alrededor de 8,4 mil millones de toneladas diarias.
Además, por el ineficiente sistema de inodoros hidráulicos, la gran mayoría de las
excretas se diluyen en 8 litros de agua cada vez que se tira la cadena, por lo tanto
se multiplica su volumen.

Por graves errores organizacionales y funcionales, nuestros desechos

biológicos o se van directamente a cuerpos de agua o se van acumulando en
grandes tanques sépticos para luego ser liberados en descargas de cientos de
toneladas, ya sea en ríos, pantanos o tierras baldías, sin tratar adecuadamente. Y,
por tener un alto contenido de microorganismos patógenos, minerales y excesivas
cantidades de biomasa orgánica, ya que no han pasado por ningún proceso de
estabilización y digestión adecuado, significan un impacto fatal al medio ambiente.
El ecosistema sufre desequilibrios muy pesados y colapsa no pudiendo digerir una
carga tan grande. Este desequilibrio causa eutrofización y, en consecuencia, se
crean fuentes potenciales para el desarrollo de enfermedades animales y
humanas.

El tratamiento de este volumen de desechos y su disposición final todavía

son aspectos problemáticos en muchos países. En Costa Rica, sólo un 4% de los
lodos sépticos recibe tratamiento, mientras que el resto se deposita directamente a

1
fuentes de agua o suelo. Por ello, y considerando el derecho a la salud y un
ambiente ecológicamente equilibrado de todo costarricense, la Sala Constitucional
emitió una orden al Ministerio de Salud y a la Municipalidad de San José en la que
exigió dar tratamiento a los lodos sépticos antes de descargarlos en cualquier
ecosistema (Villegas, 2002).

Siendo EARTH una Universidad líder en el desarrollo sostenible, resulta

importante investigar metodologías ambientalmente amigables para el manejo de
sus lodos sépticos. Más que por la posibilidad de que la orden emitida se extienda
a la municipalidad local, por la urgente y real necesidad de tomar conciencia y
actuar de manera inteligente, el Comité de Investigación de la Universidad inició
un proyecto para identificar un proceso eficiente de estabilización de los lodos
sépticos.

Ante la problemática de cómo disponer de nuestros desechos biológicos el

Comité le apuesta a una respuesta ecológica. Si se analiza más detalladamente el
contenido sólido de los lodos, surge una obvia solución para su manejo. Los 511
litros de excretas que genera al año cada persona contienen alrededor de 8,5 kg
de nitrógeno, 1 kg de fósforo y casi 2,2 kg de potasio. Estos nutrientes provienen
de los alimentos y productos que crecieron en el suelo, y es ahí a donde deben de
regresar. Deben de ser aprovechados en la agricultura, pues es mediante esta
misma actividad que se extraen; cumpliendo así lo que se conoce como el
“reciclaje de nutrientes” (Del Porto y Steinfeld, 1997).

A partir de 1997, la Universidad EARTH inició la investigación sobre el uso

de la tecnología de EM (Microorganismos Eficaces). Desde 1998 se está
produciendo abono orgánico fermentado “Bokashi” con las heces y las orinas de
ganado en la finca pecuaria integrada. Este abono está elaborado con la
aplicación de EM; resolviendo así problemas de malos olores y moscas al acelerar
los procesos de descomposición fermentativa.

La tecnología EM puede ser útil para el manejo de lodos sépticos, ya que

los microorganismos que ésta contiene facilitan la fermentación de materiales

2
orgánicos en forma líquida y sólida. Además, el EM tiene efectos antagonistas
ante patógenos como Salmonella typhimurium, Salmoneralla gallinarum, y
Salmonella enteritidis (Kabongo, 2002). Estos patógenos amenazan la salud y
generalmente están presentes en los lodos sépticos.

La investigación que a continuación se presenta, busca contribuir con una

alternativa eficiente para el proceso de biodegradación y estabilización de las
aguas residuales. Así, consecuentemente, posibilitar el aprovechamiento
saludable de los lodos sépticos en tierras agropecuarias, sin comprometer la salud
humana ni del medio ambiente. Para esto se determinará la eficiencia de los
“Microorganismos Eficaces” (EM) en la estabilización de los lodos sépticos,
identificando el tiempo necesario para garantizar la efectividad del proceso.

3
 2 OBJETIVOS

2.1 GENERAL
Identificar la eficiencia de EM (Microorganismos Eficaces) para la
estabilización de los lodos sépticos.

2.2 ESPECÍFICOS
Determinar el tiempo necesario para que los lodos sépticos alcancen
condiciones aceptables de sanidad para su aplicación en el campo.

Cuantificar las principales características físicas, químicas y biológicas de

los lodos sépticos para garantizar su seguridad en el uso agrícola.

Identificar diferencias entre el tratamiento con EM y el Control.

4
 3 REVISIÓN DE LITERATURA

3.1 AGUAS RESIDUALES

El Ministerio de Salud de Costa Rica (1997) define las aguas residuales
como aquellas que han recibido un uso y cuya calidad ha sido modificada por la
incorporación de agentes contaminantes. Generalmente se componen de 99,9 %
agua, 0,07 % materia orgánica (proteínas, carbohidratos y grasas) y 0,03 %
materia inorgánica (metales, sales y grava) (Spellman, 1997).

Estas aguas se dividen en residuales de tipo ordinario y de tipo especial.

Las de tipo ordinario son aquellas provenientes del uso doméstico (uso de
inodoros, duchas, lavaderos, lavado de ropa, fregaderos) y según Pérez y
Espigares (1999) contienen heces, orina, microorganismos y restos de productos
de limpieza. Mientras que las aguas de tipo especial son las que provienen de
otros usos (industriales). En Costa Rica, generalmente las aguas residuales
ordinarias se dirigen hacia tanques sépticos (Figura 1), donde empieza la
decantación de sólidos y la formación de los lodos sépticos.

Fuente: Wastewater and Plumping Control Program, 2003.

Figura 1. Estructura básica de un tanque séptico.

5
3.2 LODOS SÉPTICOS Ó BIOSÓLIDOS CRUDOS
Spellman (1997) define como biosólidos crudos al producto obtenido de la
primera decantación de las aguas residuales en los tanques sépticos, este
producto está formado por agua y sólidos sedimentables. Evanylo (1999)
menciona que la industria del manejo de desechos introdujo en los años 90’s el
término biosólidos como sustituto de los lodos crudos o lodos sépticos, ya que
este nuevo término tiene una connotación más positiva en la percepción de las
personas.

Los biosólidos son un material mucho más concentrado que las aguas
residuales. Según Gamrasni (1985), tienen un alto contenido de agua, partículas
sólidas decantables que contienen minerales inertes y materia orgánica
fermentable. También, al ser crudos, tienen la característica de ser
“biológicamente inestables”, por la alta cantidad de patógenos que contienen.

Es clave conocer las características de los biosólidos para determinar su

tratamiento y potencial uso. En el Cuadro 1 pueden observarse algunos los
parámetros cuantificables de los biosólidos.

Cuadro 1. Parámetros cuantificables de los biosólidos.

Físicas Químicas Biológicas

Temperatura Potencial hidrógeno pH Hongos

Olor Materia orgánica Bacterias

Demanda Bioquímica de
Color Virus
Oxígeno (DBO5)

Demanda Química de Oxígeno

Turbidez Protozoarios
(DQO)

Sólidos totales Grasas y Aceites Gusanos

Sólidos sedimentables Metales pesados Algas

Sólidos suspendidos Nutrientes

6
3.2.1 Características físicas
Temperatura: no se puede definir una temperatura general para los
biosólidos, ya que ésta varía con el clima. El dato de temperatura ayuda a definir
el tipo de microorganismos presentes según su rango de tolerancia térmica.
Spellman (1997) menciona que la temperatura también influye en la viscosidad de
los lodos.

Olor: el olor es desagradable puesto que este material contiene productos

fácilmente putrescibles y existe un inicio de descomposición (Gamrasni, 1985).
Bettiol y Camargo (2000) indican que durante el proceso de biodegradación se
produce gas sulfhídrico, amonio, aminas y diaminas; estos compuestos son los
principales responsables de los olores desagradables. Todavía no hay equipos
confiables que puedan clasificar el tipo y nivel de olores, por lo tanto la apreciación
de esta característica debe hacerse mediante el sentido del olfato del investigador.

Color: según Gamrasni (1985) y Pérez y Espigares (1999) el color varía

entre gris y pardo, pero puede pasar a negro debido a procesos anaeróbicos
descontrolados.

Turbidez: indica la cantidad de materias en suspensión que contienen los

cuerpo líquidos y afectan la penetración de luz en el medio acuático (Pérez y
Espigares, 1999). El nivel de turbidez puede medirse mediante turbidímetros
(ppm) o simplemente se puede apreciar a través del sentido de la vista. La
turbidez de los biosólidos crudos es pronunciada o muy alta (Grupo Hidro-
ecológico Nacional, 1999)

Sólidos suspendidos y sedimentables: los sólidos suspendidos son las

partículas con un tamaño superior a 1 µm de diámetro y la cantidad presente en
los lodos sépticos es de aproximadamente 120 mg/l (Ugarte et al., 2001). Los
sólidos sedimentables son la fracción de los sólidos suspendidos que se decantan
en el fondo de un cilindro de altura específica durante una hora (Pérez y
Espigares, 1999). El contenido de sólidos sedimentables de los biosólidos crudos
es de 0,2 mg/L a los 10 minutos y 2,2 mg/L a las 2 horas (Ugarte et al., 2001).

7
 Sólidos Totales: son la porción de materia sólida que contienen los
biosólidos. En el Cuadro 2 puede verse el porcentaje de sólidos totales que
poseen los biosólidos varía entre 0,1% y 8%.

Cuadro 2. Porcentaje de sólidos totales en los biosólidos crudos.

% de sólidos totales Fuente

0,1 Spellman, 1997

3–8 Gamrasni, 1985

0,6 – 7,1 King, 1986

3.2.2 Características químicas

Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5): representa la cantidad de
oxígeno que necesitan los microorganismos para degradar la materia orgánica
presente en el agua. Este parámetro es de mucha importancia ya que se relaciona
indirectamente con la cantidad de materia orgánica biodegradable presente en los
biosólidos (Pérez y Espigares, 1999). La DBO de los biosólidos crudos es muy
alta, varía entre 600 y 35.000 mg/L (Montangero y Strauss, 2000).

Demanda Química de Oxígeno (DQO): es la cantidad de oxígeno que se

requiere para oxidar la materia orgánica mediante un oxidante químico. Debido a
que los oxidantes químicos son más rápidos y fuertes que la oxidación biológica,
este parámetro siempre va a ser mayor que la DBO (Pérez y Espigares, 1999). En
el caso de los biosólidos, la DQO varía entre 1.700 y 45.000 mg/L (Ugarte et al.,
2001)

Potencial Hidrógeno (pH): es una característica determinante de los

biosólidos crudos, debido a que afecta la actividad biológica de las aguas (la
sobrevivencia de microorganismos patógenos), la solubilidad de sustancias, el
grado de corrosividad del material y el grado de toxicidad de algunas sustancias y
metales pesados (CWMI, 2003). Pérez y Espigares (1999) afirman que los

8
biosólidos crudos suelen tener un pH próximo al neutro; aunque de acuerdo a
CWMI (2003) el pH puede variar entre 4 y 12, dependiendo del origen del material.

Materia orgánica: Jenkins (1999) afirma que ésta constituye un 70% de los
sólidos totales presentes en los biosólidos. Los principales compuestos que se
pueden encontrar en ella son proteínas (40-60%), carbohidratos (25-50%) y
grasas y aceites (10%).

Nitrógeno: la urea, el amoníaco y las proteínas constituyen las principales

fuentes de nitrógeno en los biosólidos crudos. La urea y las proteínas son
fácilmente degradables por las bacterias que las transforman en amonio y a partir
de éste producen nitritos y nitratos (Pérez y Espigares,1999). El contenido de
nitrógeno total de este material en peso seco va de 5-7% (Jenkins, 1999) y de 2-7
% (King, 1986).

Fósforo: este nutriente compone entre un 0,2 – 4 % del material seco.

Jenkins (1999) y King (1986) afirman que está presente principalmente en forma
inorgánica en este tipo de material.

Potasio: El porcentaje de este nutriente en los biosólidos es bajo, varía de

O,2 a 2,5 % (Gamrasni, 1985; King,1986; Chicón, 2000). Su baja presencia se
debe a la solubilidad de este elemento, por lo que se mueve con las aguas
residuales, quedando muy poco en los lodos.

Metales pesados: son elementos traza que a determinados niveles pueden

ser de carácter tóxico para el suelo y para los seres humanos. Generalmente
están presentes en los biosólidos debido al uso doméstico de ciertas sustancias
de limpieza, vertidos clandestinos industriales, talleres y pequeñas industrias
urbanas (Chicón, 2000). Entre los metales pesados que pueden causar problemas
de toxicidad en la agricultura King (1986) menciona el cobre, níquel y zinc;
mientras que cualquier exceso de metal pesado puede causar problemas de salud
a los humanos (Cuadro 3).

9
 Cuadro 3. Contenido de metales pesados en biosólidos y límite permitido.

EEUU – King España - Límite máximo permitido en

(1986) Chicón (2000) biosólidos *

Metal ------------------------- mg/kg ------------------------ ---- mg/L ----

Cadmio 11 3,28 20 0,01

Cobre 475 250 1.000 0,2

Plomo 335 366 750 5

Níquel 37 125 300 0,2

Zinc 1.750 865 2.500 2

Cr 380 - - 0,1

*Fuente: Mujeriego, 1990.

3.2.3 Características biológicas

En los biosólidos crudos se pueden encontrar un sinnúmero de
microorganismos, muchos de ellos patógenos. Como explica Jenkins (1999) no
son los desechos humanos como tales los que permiten la proliferación de esta
gran cantidad de microorganismos patógenos; el problema real radica en la
disposición y acumulación de estos. Los microorganismos simplemente
aprovechan esta gran acumulación de materia orgánica para multiplicarse.

Bacterias: las bacterias son las que se encuentran en mayor número y

tienen mucha importancia, sobre todo por su relación con las enfermedades
(Jenkins, 1999). El grupo de bacterias coliformes es el indicador más utilizado para
determinar contaminación biológica en las aguas y lodos, debido a que este grupo
es el más persistente en el ambiente. Por lo tanto, Spellman (2002) afirma que si
hay alta cantidad de coliformes, es muy probable que existan otros patógenos
como los del género Salmonella; por lo tanto, de su ausencia o reducida presencia
se puede inferir que la calidad biológica del lodo o agua es buena. Otras razones
por las que los coliformes son el indicador predilecto es que no representan

10
peligros de salud para el analista, son fáciles de aislar y los resultados se obtienen
rápidamente (Spellman, 2002).

Protozoos: Dentro de estos se incluye al responsable de la de la Disentería

Amébica, Entamoeba histolytica, y miembros del grupo Hartmanella-Naegleria,
causante de Encefalitis. También se deben de considerar Balantidium coli y
Giardia lamblia que son causantes de diarrea comúnmente. Los protozoarios
encuentran en las aguas residuales un excelente medio para su desarrollo por el
gran contenido de humedad (Jenkins, 1999).

Virus: Existen más de 140 diferentes tipos de virus que podrían pasar a
través de las heces humanas. Algunos de estos son poliovirus, coxsackievirus
(causante de meningitis y miocarditis), echovirus (meningitis y enteritis), reovirus
(enteritis), adenovirus (enfermedades respiratorias), rotavirus (diarrea), infecciones
hepáticas (ictericia) y otros (Jenkins, 1999).

Gusanos: Un gran número de gusanos parasíticos transmiten sus huevos a

las heces humanas, generalmente del género Ascaris. Billones de huevos llegan a
las aguas negras constantemente y en estudios se ha probado que algunos
huevos pueden sobrevivir a procesos de digestión anaeróbica de hasta un año
(Jenkins, 1999).

3.3 TRATAMIENTO DE LOS BIOSÓLIDOS CRUDOS

Debido a las características físicas, químicas y biológicas de los biosólidos
crudos, éstos pueden causar alteraciones significativas en el medio ambiente si
son liberados a este sin un previo tratamiento. Generalmente los biosólidos
crudos, en ausencia de tanques y plantas de tratamiento, caen directamente en
cuerpos de agua. Los lodos en contacto con el agua causan varios problemas, uno
de ellos es la eutrofización causada por el alto contenido de materia orgánica y
nutrientes en los lodos. La eutrofización, definida por Pérez y Espigares (1999),
consiste en “un enriquecimiento excesivo de las aguas con sustancias nutritivas
que conducen a modificaciones sintomáticas del ecosistema”. Los efectos de esta

11
condición en el agua, mencionados por los mismos autores, son: disminución del
oxígeno disuelto (reducción de la vida acuática), aumento de turbidez, aumento
del grado de sedimentación, alteración de las características organolépticas (olor,
color). Estas alteraciones traen como consecuencias la disminución de la actividad
pesquera, perjuicios para la salud, debido a la concentración de nitratos y
compuestos orgánicos, entorpecimiento de los tratamientos de aguas para
consumo, modificación de la estética del paisaje (disminución de turismo).

Otro problema es que los biosólidos crudos o lodos sépticos no contienen

solamente sustancias nutritivas, también tienen metales pesados y patógenos que
pueden inhibir cualquier uso productivo del agua. Así como se inhibe el uso del
agua, puede suceder lo mismo con el uso del suelo, en el caso de que los lodos
crudos sean depositados sobre él. En 1995, la Environmental Protection Agency
(EPA) declaró que en Estados Unidos, cuatro de cada diez cuerpos de agua
estaban tan contaminados que sus aguas no se podía utilizar para ninguna
actividad (pesca, natación o cualquier actividad acuática). Los contaminantes más
comunes encontrados fueron bacterias patógenas, nitrógeno excesivo, metales
pesados, grasas y aceites; todos componentes comunes de los lodos sépticos
(Jenkins, 1999).

El tratamiento de los biosólidos crudos, según Pérez y Espigares (1999)

busca en general la eliminación de sólidos, reducción de la DBO5, la disminución
del número de microorganismos patógenos y la reducción de componentes
inorgánicos como el fósforo, nitrógeno, cloruros, etc. Pero estos objetivos van a
variar según su destino final. Existen distintos procesos para tratar los lodos
crudos, en el Cuadro 4 puede observarse las etapas y/o diferentes tratamientos
que pueden recibir las aguas negras para convertirse en material utilizable para
determinado propósito o para poder descartarse seguramente en cuerpos de
agua.

Para alcanzar el objetivo de este proyecto, que es estabilizar los lodos

sépticos para utilizarlos posteriormente en la agricultura, se utilizó el tratamiento

12
de digestión anaeróbica. Durante la digestión anaeróbica, se utilizaron también
mecanismos biológicos (Microorganismos Eficaces) para acelerar la estabilización.

Cuadro 4. Diferentes tratamientos utilizados para los biosólidos.

Tratamiento Definición Efecto en los lodos

Separación suave de agua
y sólidos mediante
Sedimentación
gravedad, flotación o
centrifugación.
Estabilización biológica a
Digestión (aeróbica y/o través de la conversión de
anaeróbica) materia orgánica a CO2,
agua y metano.
Estabilización mediante la
Estabilización alcalina adición de materiales
alcalinos (cal)
Proceso que causa la
coagulación de los sólidos
Acondicionamiento
para ayudar en el
desaguado.
Separación fuerte del agua
y los sólidos (filtros,
Desaguado
centrifugación, presión,
etc).
Estabilización biológica
Compostado aeróbica, termofílica en un
montículo
El calor termina de matar
Calentamiento patógenos y elimina de
humedad que queda.
Fuente: Adaptado de EPA (1984) citado por Evanylo (1999).
Concentra los sólidos
mediante la remoción de
agua.
Reduce contenido
biodegradable
(estabilización por
conversión a materiales
solubles y gas). Reduce
niveles de patógenos y mal
olor.
Aumenta el pH. Disminuye
actividad biológica. Reduce
nivel de patógenos,
controla la podredumbre y
el olor.
Facilita/mejora desaguado
de biosólidos. Incrementa
cantidad de sólidos secos.
Incrementa la
concentración de sólidos.
Disminuye la concentración
de N. Facilita el manejo.
Disminuye actividad
biológica, destruye
patógenos y transforma a
un material similar al
humus.
Desinfecta los lodos,
destruye patógenos, reduce
olores y la actividad
biológica.

3.3.1 Estabilización biológica por digestión anaeróbica

El objetivo específico de la estabilización de los biosólidos crudos es reducir
su contenido de microorganismos patogénicos e inhibir, o eliminar su potencial de
putrefacción, y consecuentemente su potencial de producción de olores. Bettiol y

13
Camargo (2000) definen el proceso de estabilización biológica como la
transformación de la parte más putrefacta de las aguas mediante la solubilización
y reducción de sustancias orgánicas complejas por la acción de microorganismos
en ausencia de oxígeno. Durante este proceso de digestión, las proteínas, lípidos,
carbohidratos y otras moléculas complejas son solubilizadas por hidrólisis,
enseguida estos productos son convertidos en ácidos orgánicos de cadenas
cortas como ácido láctico, acético y propíonico. Esta fase es conocida como
acidogénica. Después de ésta, los ácidos son convertidos en dióxido de carbono,
metano y otros gases. Una vez que los lodos han pasado por esta estabilización
sus características varían porque hay una elevación de los sólidos fijos, hay
pérdidas de nitrógeno y una reducción de los coliformes fecales.

3.4 MICROORGANISMOS EFICACES (EM)

El EM es un producto biológico descubierto en 1980 por el Doctor Teruo
Higa, profesor de la Universidad de Ryukyus, en Okinawa, Japón. Aunque en el
presente es aún poco conocido dentro de la cultura latinoamericana, el EM ha sido
investigado, desarrollado y utilizado en una gran cantidad de sistemas en más de
100 países alrededor del mundo (Eco Pure, 2003)

Gran parte del éxito del EM consiste en la filosofía por la que es impulsado.
Esta, según Higa (2002) está basada en la armonía y el equilibrio entre las
criaturas; siendo así el producto una coexistencia y cooperación ideal entre los
microorganismos que lo componen. Por la importancia de la actividad microbial en
la mayoría de procesos naturales y artificiales, EM Research Organization (EMRO)
ha ido creando una gran variedad de productos para la agricultura
(descomposición de materia orgánica, manejo de plagas), para el manejo de
desechos y de contaminantes (reciclaje, descontaminación aguas), para la
industria (motores) y hasta para la salud humana (antioxidantes, cosméticos).

Para el tratamiento de los lodos sépticos, en esta investigación se utilizó

EM1. Este es un cultivo mixto de microorganismos benéficos naturales, compuesto
principalmente por bacterias procesadoras del ácido láctico, levaduras y bacterias

14
fotosintéticas. Así, los microorganismos coexisten en un medio líquido y cuando
son introducidos en un ambiente natural, los efectos de sus beneficios individuales
son incrementados dentro de una dinámica sinergética o de competencia con
microorganismos patógenos según se requiera (Higa, 2002).

3.4.1 El EM en el tratamiento de los biosólidos crudos

Cuando se aplica EM en un ambiente determinado y sus microorganismos
fermentadores colonizan, se detiene el proceso de putrefacción, reemplazado por
una intensa fermentación. Al detenerse la putrefacción, se suprime la generación
de olores y muchos otros procesos ligados a la oxidación de materia orgánica
(Higa y Chinen, 1998) (Figuras 2 y 3).

Fuente: Adaptado de Higa y Chinen (1998).

Figura 2. Proceso natural de oxidación desde la perspectiva de los flujos de
energía.

15
 Fuente: Adaptado de Higa y Chinen (1998).

Figura 3. Proceso del EM desde la perspectiva de los flujos de energía.

Además, algunos microorganismos de EM, como bacterias ácido lácticas,

generan ácidos orgánicos como resultado de su metabolismo. Las sustancias
generadoras de olores son ligeramente alcalinas, por lo que son neutralizadas por
un medio ácido (Higa y Chinen, 1998).

El ciclo establecido por EM en el tratamiento de aguas residuales, a

diferencia de un proceso de putrefacción, se concreta mediante la interacción de
los diferentes tipos de microorganismos contenidos. Las bacterias fotosintéticas

16
aprovechan en su metabolismo los ácidos orgánicos, liberando ácido sulfúrico que
es aprovechado a su vez por bacterias reductoras de sulfatos. Estas últimas
liberan sacáridos que junto al resto de materia orgánica (ácidos grasos, glicerina y
amino ácidos), son degradados en el proceso de fermentación e hidrólisis inicial,
llevado a cabo por los microorganismos productores de ácidos orgánicos citados
anteriormente (Higa y Chinen, 1998). El efecto de EM en las aguas residuales que
explican Higa y Chinen (1998) en la Figura 4, cubre de manera completa los
objetivos que plantea un proceso de estabilización de biosólidos crudos.

BOD
CO2 (materia orgánica)

Hidrólisis
Microorganismos Ácidos grasos y
produciendo ácidos Sacáridos Glicerina Aminoácidos
orgánicos
Fermentación
produciendo ácidos
Ácidos orgánicos

Asimilación y descomposición de la Bacterias

materia orgánica por levaduras, fotosintéticas
actinomicetes y hongos filamentosos (rhodospirillaceae)
NH3
Ácido sulfúrico
Nitrificación
Bacterias
reductoras de NO2-
sulfato

Sacáridos
Se recicla Desnitrificación
Bacterias
fotosintéticas
CO2 NO3-
Fitoplancton
Desnitrificación
Zooplancton
Fuente: Adaptado de Higa y Chinen (1998).

Figura 4. Mecanismo en el tratamiento de aguas residuales con EM.

17
 En la Figura 4, las bacterias fotosintéticas se colocan como la clave para la
efectividad del tratamiento. Estas bacterias son anaeróbicas y para activarse
requieren de luz o alimento (ácidos orgánicos). En el EM estas bacterias
mantienen una relación sinérgica con las bacterias que son productoras de ácidos
orgánicos (levaduras y productoras de ácido láctico), a partir de sacáridos,
aminoácidos y grasas. Por lo tanto, estas dos clases de microorganismos
producen el alimento de las bacterias fotosintéticas, explicando así porque el EM
también funciona en medios donde no hay luz (Higa y Chinen, 1998).

Higa y Chinen (1998) explican que los antioxidantes secretados por ciertos
microorganismos, y el ambiente antioxidante que resulta, promueven la separación
de las fases líquida y sólida. La base de un proceso de depuración de aguas.
Como lo hacen en la producción de abonos orgánicos y en general en el manejo
de desechos orgánicos, los Microorganismos Eficaces tienen una acción
fundamental en la reducción y/o eliminación de sólidos contenidos en las aguas
negras.

Bellamy y Horsley (2002) reportan en sus resultados reducciones de hasta

un 83% en la acumulación de lodos en uno de los tanques de sedimentación de
una planta de tratamiento de aguas al incorporar la aplicación de EM.
Consecuentemente, reportan una disminución del DBO y un aumento del Oxígeno
Disuelto (OD) en los siguientes tanques del sistema depurador. Wididana (1994)
expone en sus resultados reducciones de hasta 80% del DQO en tan sólo 11 días.

En cuanto a las características biológicas de las aguas negras, los

Microorganismos Eficaces tienen un efecto indiscutible precisamente por su
calidad de “eficaces”. Su habilidad de acción y reproducción impide y/o limita el
desarrollo de otros microorganismos (algunos patógenos) por competencia.
Además, las condiciones antioxidantes antes explicadas, suprimen el desarrollo de
microorganismos patogénicos (Higa y Chinen, 1998).

Existen estudios donde se ha comprobado la inhibición de patógenos

importantes para la salud animal y humana mediante el tratamiento con EM. El

18
crecimiento de las bacterias Clostridium botulinum, Salmonella typhimurium,
Salmonella gallinarum y Salmonella enteritidis fue inhibido por la acción del EM a
los 10 días de tratamiento en un estudio en Sudáfrica en el Instituto Veterinario
Onderstepoort (Kabongo, 2002).

Además, los metales y en general químicos de la industria, podrían ser

afectados significativamente por el EM. Jenkins (1999), quien trabajó e investigó
sobre el compostaje de excretas humanas, afirma que los microorganismos tienen
la capacidad de degradar importantes tóxicos químicos a moléculas orgánicas,
benignas, más simples. Sustancias como la gasolina, aceite, diesel, grasa, PCB´s
(PolyChlorinated Biphenyls), remanentes de la gasificación de carbón, desechos
de refinería, insecticidas, herbicidas, TNT (TriNitroTolueno), entre otras, han
resultado parcial o totalmente descompuestas y/o transformadas en diferentes
experiencias descritas por Jenkins (1999). Muchos de los microorganismos
naturales presentes en el compost, son precisamente de los que contiene el EM.

Cuadro 5. Microorganismos que ayudan a remover metales del agua.

Microorganismos Metales

Zooglea ramigera Cobre

Saccharomyces cerevisieae Uranio

Trichoderma viride Cobre

Penicillium spinulosum Cobre, Cadmio, Zinc

Aspergillus Níger Cobre, Cadmio, Zinc

Chlorella vulgaris Oro, Zinc, Cobre, Mercurio

Rhizopus arrhizus Uranio

Fuente: Bitton (1994) citado por Jenkins (1999).

El tratamiento microbial de un compostaje amarra algunos metales como el

plomo y previene que sean absorbidos por plantas y animales; de esta manera se
impide la entrada de metales pesados en la cadena alimenticia. En el Cuadro 5 se

19
muestran algunos microorganismos que ayudan a remover metales del agua,
algunos de los cuales están contenidos en el EM como Saccharomyces, cuyos
metales afines se encuentran generalmente en aguas residuales (Jenkins, 1999).

3.5 REQUERIMIENTOS LEGALES

Ante los peligros de las descargas de biosólidos crudos se han establecido
una serie de normas para regular su vertido. Estas normas varían según el uso
que se le va a dar a los lodos, particularmente para su aprovechamiento agrícola
existen ciertos parámetros que se citan en los siguientes párrafos.

3.5.1 Reglamento de Reuso y Vertido de Aguas Residuales en Costa Rica

Este reglamento, decretado por el Presidente de la República y por los
Ministros de salud, energía y ambiente, rige desde junio de 1997. Tiene como
principales consideraciones la protección del recurso hídrico para salvaguardar la
salud del ser humano y del medio ambiente.

El Reglamento manifiesta en el Artículo 1 sus objetivos: “…la protección de

la salud pública y del ambiente, a través de una gestión ambientalmente adecuada
de las aguas residuales. Éste será aplicable en todo el territorio nacional para el
manejo de las aguas residuales, que independientemente de su origen sean
vertidas o reusadas”.

El Capítulo II establece los parámetros fisicoquímicos y bacteriológicos que

deberán ser analizados en las aguas residuales que se viertan en un cuerpo
receptor o alcantarillado sanitario. Así, el Artículo 14 contenido en este Capítulo
hace referencia a los parámetros que deberán analizarse en aguas residuales de
tipo ordinario: Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5,20), potencial hidrógeno
(pH), grasas y aceites (GyA), sólidos sedimentables (SSed), sólidos suspendidos
totales (SST) y coliformes fecales (CF). Los coliformes fecales sólo serán de
análisis obligatorio si las aguas residuales fueren vertidas en cuerpos de agua
utilizados para actividades recreativas de contacto primario.

20
 El Capítulo VI se refiere a la reutilización de las aguas residuales. El mismo
en el Artículo 32 manifiesta: “se permitirá el reuso de las aguas residuales cuando
se demuestre a satisfacción de la División de Saneamiento Ambiental del
Ministerio de Salud y del Ministerio de Ambiente y Energía, que éste no deteriorará
la calidad de las aguas superficiales y subterráneas.”

Finalmente, en el Artículo 36 menciona que toda agua residual, para su

reuso, deberá cumplir con las características fisicoquímicas y bacteriológicas
establecidas en la Tabla 9 del Apéndice del mismo Reglamento (Cuadro 6).

Cuadro 6. Límites permisibles para el reuso de aguas residuales.

Tipo de Reuso Parámetros

DBO5,20 (mg/l) Coliformes fecales

Urbano ≤ 40 < 100

Riego con acceso --- < 1000

restringido

Reuso agrícola en cultivos --- <100

de alimentos que no se
procesan comercialmente

Reuso agrícola en cultivos --- < 1000

de alimentos que se
procesan comercialmente

Reuso agrícola en cultivos --- < 1000

no alimenticios

Reuso recreativo ≤ 40 ≤ 1000

Reuso paisajístico ≤ 40 ---

Reuso en construcción --- ≤ 100

Fuente: Adaptado de la Tabla 9 del Apéndice del Reglamento de Reuso y Vertido de Aguas
Residuales del Ministerio de Salud de Costa Rica (1997).

21
 4 MATERIALES Y MÉTODOS

4.1 UBICACIÓN
El proyecto se instaló en el relleno sanitario de la Universidad EARTH,
situada en la región Atlántica de Costa Rica, específicamente en el cantón de
Guácimo dentro de la provincia de Limón. La zona donde se ubica la Universidad
esta entre los 32 y 107 msnm. Dentro del campus hay una estación meteorológica
a 10°12” 45’ Latitud Norte y 83°35”39’ Longitud Oeste. Esta estación reporta
promedios de los últimos 8 años para temperatura media anual de 24,3°C,
humedad relativa de 90,25% y precipitación de 3.209 mm.

4.2 ESTABLECIMIENTO DEL ESTUDIO

Con el objetivo de determinar el efecto de los Microorganismos Eficaces
(EM) en la estabilización de los lodos sépticos se decidió realizar dos tratamientos,
10% (v/v) y 0% de EM, de los cuales se hicieron dos repeticiones. Para realizar el
experimento se utilizaron dos tanques de 1,20 m de diámetro y 1,30 m de altura,
con capacidad de poco más de 1 m3. Entre ellos se dispuso una distancia de 2,5
m y se colocaron al lado del filtro de arena que desemboca en la laguna de
oxidación del relleno sanitario. Estos tanques tienen una tapa en la parte superior,
una válvula de salida para gases y una llave de tubería en la parte inferior del
tanque (Figura 5). La infraestructura del tanque, por lo tanto, proporciona
condiciones anaeróbicas.

Debido al tipo de material con que se trabajó, los autores se vacunaron

contra la Hepatitis B, previo a la instalación del experimento. Los tanques se
llenaron con lodos provenientes del tanque séptico, el cual tiene una capacidad de
100 m3 y recibe las aguas residuales del Comedor, la Cocina, oficinas del
comedor, Bodega y los edificios residenciales Surá y Gavilán. En estos edificios
viven aproximadamente 84 mujeres y 12 hombres. En la Cocina se preparan
alimentos para más de 500 personas en los tres tiempos y trabajan en ese sector
(bodega, oficinas, comedor, cocina) aproximadamente 25 personas. El material
contenido en el tanque recibe descargas diarias, por lo que se dice que son lodos

22
crudos. Diariamente a este tanque séptico se le adicionan 2,5 litros de EM
activado. La limpieza o vaciado del tanque séptico se realiza una vez al año.

Figura 5. Foto de uno de los tanques utilizados en los tratamientos.

En ambas repeticiones se utilizaron lodos del mismo tanque séptico, la

caracterización de estos puede encontrarse en la sección de Resultados,
Discusión y Anexos donde se identifican como Semana 0 (cero) o como Muestra
Inicial. Para la extracción de los lodos del tanque séptico, se utilizó una bomba que
succionó aproximadamente 2 m3 del fondo del tanque, para luego trasladarlos al
relleno sanitario donde se depositó, con una manguera, 1 m3 en el tanque del
tratamiento 0% EM y 0,9 m3 en el tanque del tratamiento 10% EM. Durante el
llenado del tanque del tratamiento 10% EM se fueron adicionando los recipientes
que contenían 0,1 m3 de EM activado, para completar el metro cúbico.

Una semana previa al llenado de los tanques se procedió a activar 100

litros de EM. Este proceso de activación consiste en mezclar en agua 5% de EM•1

23
y 5% de melaza (miel de caña). Una vez realizada la mezcla, ésta se mantuvo en
cinco recipientes plásticos de 20 litros de capacidad que fueron previamente
lavados con agua caliente. Estos recipientes brindaban condiciones anaeróbicas y
aisladas para garantizar la activación de los microorganismos deseados y evitar
contaminación con otro tipo de organismos.

Una vez terminadas las repeticiones, los lodos se succionaron con una
bomba y se depositaron en una zona enmalezada del banano orgánico que se
encuentra camino al relleno sanitario. Esta zona de banano no se está
cosechando actualmente.

4.3 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS

Los muestreos realizados en cada repetición se tomaron en la semana 0
(cero) antes de llenar los tanques, y a los 15 y 30 días después de aplicados los
tratamientos. Tanto para la instalación del experimento como para todos los
muestreos se utilizaron guantes, petos y mascarillas para evitar el contacto directo
con los lodos. En el Cuadro 7 puede observarse la frecuencia y los parámetros
analizados de cada muestreo.

Cuadro 7. Frecuencia de muestreo y parámetros analizados.

Parámetros Semana 0 Semana 2 Semana 2

Temperatura, olor, color, coliformes

totales y fecales, DBO5, sólidos
Sí Sí Sí
totales y sedimentables, nutrientes,
nitratos, fosfatos.

Grasas y aceites, metales pesados

Sí No Sí
(Cr, Pb, Cu, Ni, Zn)

En ambas repeticiones se tomó una muestra por tratamiento de 2,5 litros

(dos botellas plásticas de 1 litro y una de 500 mL, previamente lavadas con agua
caliente); y en los muestreos de semana 0 y 4 de cada repetición se tomaron 1,5

24
litros adicionales, los que se colocaron en una botella de vidrio oscuro (1litro) y en
una botella de plástico (500 mL). Estas últimas botellas fueron trasladadas a San
José por el encargado de muestreos del Centro de Investigación para la
Contaminación Ambiental (CICA), donde se realizaron los análisis de grasas y
aceites y metales pesados. Las otras muestras se trasladaron a temperatura
ambiente al Laboratorio de Suelos y Aguas de la Universidad EARTH, donde
fueron almacenadas a una temperatura de 4°C. Una vez terminada toda la
recolección de muestras se enviaron las diez botellas plásticas de 500 mL en una
hielera a las instalaciones de Laboratorio Biotrol en Tibás donde se hizo el análisis
de coliformes totales y fecales.

4.4 ANÁLISIS DE LAS MUESTRAS

Durante los muestreos, los autores midieron la temperatura de cada
tratamiento con un termómetro y determinaron el olor subjetivamente
clasificándolo por su intensidad (desde suave hasta muy fuerte) y característica
(putrefacción o fermentación). El color también fue determinado subjetivamente y
también tomaron fotos de las muestras para comparar efectivamente la diferencia
de color entre los tratamientos.

Los análisis de los parámetros DBO5, sólidos sedimentables y totales, pH,

materia orgánica, nutrientes, fosfatos y nitratos fueron realizados en el Laboratorio
de Suelos y Aguas de la Universidad EARTH y se utilizaron los métodos y/o
instrumentos que a continuación se citan:

- Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5): método del oxígeno disuelto

(Tchobanoglous y Burton, 1991).

- Materia orgánica: método de incineración (Tchobanoglous y Burton, 1991).

- Sólidos totales: método de incineración (Tchobanoglous y Burton, 1991).

- Sólidos sedimentables: método de gravimetría, utilizando el cono de Imhoff

(American Public Health Association, 1992).

25
- pH: se utilizó el pH-metro directamente en los lodos, sin dilución (American
Public Health Association, 1992).

- Nitratos: método de espectrofotometría (American Public Health Association,

1992).

- Fosfatos: método de colorimetría (Olsen y Sommers, 1982).

- Calcio, magnesio, potasio: método de incineración y extracción con HCl

(Tchobanoglous y Burton, 1991).

Debido a que no hay equipo disponible en los laboratorios de la

Universidad, los análisis de metales pesados y grasas y aceites fueron elaborados
por el Centro para la Investigación de Contaminación Ambiental (CICA). El método
de análisis utilizado para las grasas y aceites y para metales pesados fue el
determinado por Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater
(American Public Health Association, 1992)

Por último los análisis biológicos, conteo de coliformes fecales y totales,

fueron realizados por Laboratorio de Microbiología y Control de Calidad Industrial
Biotrol S.A., en donde utilizaron la metodología establecida por Standard Methods
for the Examination of Water and Wastewater (American Public Health
Association, 1992). Por razones logísticas y económicas, tanto los metales
pesados como las grasas y aceites, se analizaron solamente en la semana cero y
cuatro de cada repetición.

Para la interpretación de los análisis, se promediaron los resultados

obtenidos de las dos repeticiones. En la sección de Anexos pueden encontrarse
los datos crudos que se utilizaron para graficar los resultados.

26
 5 RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Los objetivos principales de un proceso de estabilización de biosólidos

crudos son la reducción del contenido de microorganismos patogénicos y la
eliminación del potencial de putrefacción y generación de olores. En estos tres
aspectos los resultados de este experimento fueron positivos.

5.1 OLOR Y COLOR

En el Cuadro 8 se muestran las diferencias que existieron en cuanto a la
evolución de los olores generados por los biosólidos de ambos tratamientos.
Aunque estos resultados son absolutamente subjetivos, representan uno de los
más importantes resultados. Los olores generados por la putrefacción son uno de
los principales impactos de la descarga de biosólidos crudos y fueron evaluados
precisamente de la manera en que se detectan.

En el caso del olor del tratamiento EM, cuando se caracteriza como “fuerte”
en las semanas 2 y 4, es muy diferente del olor “muy fuerte” que se cita en la
semana 0. Este olor presente en la semana 0 se refiere al olor fresco de los lodos;
olor característico que se detecta cerca de una alcantarilla de un tanque séptico.
En cambio los lodos que se trataron con EM, inmediatamente entraron en un
proceso de fermentación que se podía apreciar claramente en el olor. Este olor se
describe como “fuerte” ya que resultaba de la intensa fermentación que se estaba
dando.

Cuadro 8. Olor percibido en los respectivos tratamientos.

Semana 0 Semana 2 Semana 4 Comentario

Olor de materia
Control Muy fuerte Muy fuerte Muy fuerte
en pudrición

Olor de materia
EM Muy fuerte Fuerte Fuerte
fermentada

27
 El Control mantuvo ese olor “muy fuerte” desde la semana inicial (Semana
0). Tal olor era característico de un proceso de putrefacción y el color lo indicaba
así también. Wood et al. (2002), al referirse a los resultados observados en un
experimento con aguas residuales, explica que el color café rojizo (caramelo)
corresponde a colonias de bacterias fotosintéticas, ácido lácticas, algas y/o
levaduras. Por otro lado, el color gris oscuro, sumado además a una capa de
espuma superficial y a una gran cantidad de larvas de moscas, son signos de que
había putrefacción y consecuente mal olor en el Control (Figura 6).

Cuadro 9. Color observado en los respectivos tratamientos.

Semana 0 Semana 2 Semana 4

Control Café grisáceo Café grisáceo Café- Gris

EM Café grisáceo Café muy claro Caramelo

Foto izquierda: 2da semana de tratamiento. Foto derecha: 4ta semana de tratamiento; izquierda
Control, derecha EM.
Figura 6. Comparación de las muestras recolectadas.

28
5.2 PH, TEMPERATURA Y COLIFORMES
El proceso fermentativo que se interpreta de los olores y colores descritos
anteriormente, se puede afirmar que lo corroboran los resultados de temperatura y
pH. En la Figura 7 se observa que el tratamiento EM, además de mostrar
temperaturas inferiores, experimentó una baja de temperatura acelerada desde el
inicio del proceso. Aunque las diferencias no son importantes y este factor está
directamente influenciado por cuestiones climáticas del día en que se mide, la
evidencia de la intensa fermentación se confirma con los resultados del pH. De
hecho, en eso se basa la veracidad de este estudio; aunque no hay absoluta
seguridad de cada factor medido independientemente, por falta de repeticiones, en
conjunto muestran claramente una tendencia.

30 6,5
Temperatura pH

6,0
Temperatura (°C)

29
5,5
pH

5,0
28

Control 4,5 Control

EM EM
27 4,0
0 2 4 0 2 4
Tiempo (semanas)

Figura 7. Temperatura y pH de los respectivos tratamientos.

Integrando estos resultados en los objetivos de la estabilización, la

disminución del pH significa más que la simple confirmación de un proceso
fermentativo. La acidez tiene una importancia crucial en cuanto al combate de
microorganismos patogénicos. Atlas y Bartha (2002) citan un ejemplo importante:
Escherichia coli se desarrolla óptimamente con pH entre 6 y 7, y su mínimo es 4,4.
Tratándose de un coliforme fecal de serios estragos para los seres humanos, es
muy positivo que el pH del tratamiento EM haya bajado hasta 4,4 en promedio.

29
 En el Cuadro 10, los análisis de coliformes confirman lo anterior. En el
Control, el desarrollo de los Coliformes, tanto totales como fecales se vio
favorecido (aumentó considerablemente) por un pH ideal de 6,3 y temperaturas
mayores que aceleraron su metabolismo.

El tratamiento EM eliminó casi por completo las poblaciones de Coliformes

totales y fecales. Los requisitos legales exigen que la población de Coliformes
fecales en los lodos, sea menor a 100 o 1000 NMP/100mL, dependiendo del uso
que se vaya a dar (Ministerio de Salud de Costa Rica, 1997). De esta forma se
logró superar el único requisito legal para aprovechar los lodos sépticos en suelos
agrícolas costarricenses.

Además del pH, posiblemente otros factores de las condiciones generadas

por EM intervinieron en el desarrollo de los coliformes y otros patógenos. Higa y
Chinen (1998) explican la importancia de la fermentación con EM que suprime la
putrefacción. Afirman que la condición antioxidante resultante del metabolismo de
algunos de los microorganismos presentes en EM elimina la propagación de
microorganismos patogénicos (Figuras 3 y 4).

Cuadro 10. Contenido de Coliformes totales y fecales.

EM Control

_______________ ______________
Sem 0 Sem 2 Sem 4 Sem 2 Sem 4

--------------------------- NMP/100mL ------------------------

Coliformes
35000 ‹2 ‹2 232300 230120
totales

Coliformes
9800 ‹2 ‹2 56200 132
fecales

5.3 NITRATOS, DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO Y FOSFATOS

Es claro que el tratamiento con EM tuvo éxito en la reducción de nitratos,
que son considerados uno de los contaminantes del agua subterránea y superficial

30
(Sawyer et al., 2000). Además, esta reducción es un indicador de la estabilización
de lodos; Bettiol y Camargo (2000) afirman que en este proceso debe haber una
pérdida de nitrógeno, debido al consumo del mismo por parte de los
microorganismos (en su respiración; reducción desasimilatoria de NO3).

200 2000
Nitratos DBO5
Nitratos (mg L de lodo x 100)

DBO5 (mg L de lodo)

150 Control 1500 Control
EM EM

-1
100 1000
-1

50 500

0 0
0 2 4 0 2 4
Tiempo (semanas)
Figura 8. Contenido de nitratos y Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO5 ).

En las aguas residuales el nitrógeno inicialmente está en forma de

proteínas (nitrógeno orgánico) y amonio. Estos compuestos son un combustible
imprescindible para la actividad biológica que, durante la etapa del tanque séptico,
son transformados a nitratos y nitrógeno molecular, dependiendo del pH y de la
disponibilidad de oxígeno. Los biosólidos crudos por lo tanto poseen nitrógeno en
varias formas.

En el tanque séptico existen condiciones de limitada disponibilidad de

oxígeno donde la nitrificación es poca. Al descargar los lodos en los tanques del
experimento estos se oxigenaron, por lo que gran parte del amonio se empezó a
nitrificar. En el caso del Control, el proceso de nitrificación fue prolongado por la
estabilidad de las poblaciones de microorganismos. En el caso del tratamiento EM,
por la inoculación, existió una alta población microbiana que consumió el oxígeno
rápidamente. Lo anterior, más la liberación de antioxidantes y la rápida reducción
del pH, inhibió la nitrificación y se vio favorecida la reducción desasimilatoria de
nitratos, es decir, la formación de nitrógeno gaseoso N2 (desnitrificación). Atlas y
Bartha (2002) citan precisamente que la desnitrificación predomina en sedimentos

31
anóxicos acuáticos de pH bajo. En la Figura 4 expuesta en la Revisión de
Literatura, Higa y Chinen (1998) confirman el proceso de nitrificación y posterior
desnitrificación del nitrógeno orgánico al explicar la acción de EM sobre los lodos.

La variación del contenido de nitratos para el Control, pudo deberse a

errores experimentales y también puede simplemente simbolizar un posterior
proceso de desnitrificación, similar al del tratamiento EM, pero que se dio más
lentamente. Una vez que se consumió el oxígeno disponible, se empezó el
proceso de desnitrificación que se reflejó en la reducción de nitratos (Figura 8).
Vale aclarar que la evolución que se aprecia en los gráficos no es exacta para
identificar cuando se detiene o cambia un proceso, debido a que existió un periodo
de dos semanas entre cada muestreo. De esta forma, no se puede detectar en
qué momento exacto se detuvo la nitrificación y se inició la desnitrificación para
cualquiera de los dos tratamientos.

La DBO5 en este caso no resulta útil para determinar el contenido de

materia orgánica de los biosólidos; sin embargo, se pueden sacar conclusiones de
la comparación del DBO5 con los nitratos. Al pasar de un ambiente anaeróbico
(tanque) a un ambiente con mucha disponibilidad de oxígeno (recipiente de la
prueba de DBO5) se dio probablemente un intenso proceso de nitrificación que se
vio reflejado en una gran demanda de oxígeno. Por lo tanto, en la prueba de
DBO5, no es posible interpretar los valores como oxígeno que se demandaba para
la descomposición de materia orgánica, si no se utilizó inhibidores de bacterias
nitrificadoras en la prueba (Tchobanoglous y Burton, 1991).

Esta alta DBO5 no se dio igualmente en el caso del tratamiento con EM

debido a que el grado de nitrificación no fue el mismo; por ello, probablemente en
este caso sí se pueda afirmar que la DBO5 correspondía a la degradación de
materia orgánica. En el Control las bacterias nitrificadoras estaban más activas al
momento de la prueba de DBO5, pues venían de un proceso prolongado de
nitrificación. En el tratamiento EM, quizás las bacterias nitrificadoras ya tenían un

32
espacio muy largo de latencia que, sumado a la reducción del pH, provocó que se
inhibiera la nitrificación al momento de la prueba DBO5.

Los fosfatos en comparación con los nitratos, variaron muy poco. Esto
puede deberse a que los microorganismos no utilizan grandes cantidades de
fosfatos en su metabolismo; mientras que el nitrógeno además de ser uno de los
principales componentes de los aminoácidos, se utiliza como aceptor de
electrones en condiciones anóxicas (Atlas y Bartha, 2002).

8
Fosfatos
Fosfatos (mg L-1 de lodo)

2 Control
EM

0
0 2 4
Tiempo (semanas)

Figura 9. Contenido de fosfatos.

5.4 OTRAS VARIABLES

Los sólidos sedimentables disminuyeron después de dos semanas para los
dos tratamientos, sin embargo no hubo mayor diferencia entre ambos. A la cuarta
semana se observa en el gráfico que hubo un incremento, pero esto
probablemente no sea real, debido a una contaminación de las últimas muestras
que alteró los resultados. Considerando sólo las dos primeras semanas de
tratamiento, existió una tendencia a la reducción de los sólidos sedimentables
(Figura 10). Como lo explican Higa y Chinen (1998), el tratamiento EM se
caracteriza por la resultante formación de un medio antioxidante, el mismo que
promueve una separación líquido-sólida. A diferencia de los procesos oxidativos,

33
 con el EM hay una mejor y más rápida división y precipitación de los sólidos
sedimentables.

En el caso de los sólidos totales hubo una alta reducción las dos primeras
semanas, que se estabilizó y no varió para la cuarta semana (Figura 10). Los
resultados no se consideraron muy relevantes. Sawyer et al. (2000) menciona que
este parámetro se ideó originalmente para medir la concentración de materia
sólida presente en las aguas residuales, pero que la prueba de DBO5 evalúa de
manera mucho más exacta la concentración de estos materiales.

100 100
Sólidos Sedimentables Sólidos Totales
80 80
Sólidos sedimentables

(mg L-1 de lodo x 100)

(mg L-1 de lodo)

Sólidos totales

60 60

40 40

20 Control 20 Control
EM EM
0 0
0 2 4 0 2 4
Tiempo (semanas)

Figura 10. Contenido de sólidos sedimentables y sólidos totales en los

tratamientos.

El efecto sobre las grasas y aceites no mostró diferencias entre los dos
tratamientos (Cuadro 11). La diferencia en el contenido inicial entre ambas
repeticiones se debió al tratamiento con EM que reciben los lodos en los tanques
sépticos de donde fueron extraídos. Es probable que para el caso de la segunda
repetición, la inoculación haya sido más reciente, entonces disminuyeron las
cantidades iniciales de grasas y aceites (semana 0).

Ambos tratamientos muestran éxito en la degradación de grasas y aceites,

con reducciones mayores al 96% en la primera repetición y más de un 82% en la
segunda. Sin embargo, no se puede inferir que hubo mayor eficiencia por parte del
tratamiento EM. Normalmente se trata de reducir el contenido de grasas y aceites

34
mediante tratamientos secundarios (biológicos) en condiciones anaeróbicas
(Sawyer et al., 2000); en este caso los dos tratamientos utilizados contaban con
esas condiciones. En fin, la reducción que se logró es positiva y resulta de gran
importancia porque muchos compradores de biosólidos como fertilizante exigen
límites en el contenido de grasas y aceites (Sawyer et al., 2000).

Cuadro 11. Contenido de grasas y aceites en los tratamientos.

Porcentaje
Repetición Tratamientos Semana 0 Semana 4
reducido
---------------mg/L------------- %

Control 705 96
ra
1 15900
EM 345 98

Control 36 85
da
2 240
EM 43,5 82

El contenido nutricional para potasio, calcio, magnesio y fósforo mostró

mejores niveles de disponibilidad en el tratamiento EM (Figura 11). Comparado
con ciertos abonos orgánicos del mercado, el contenido es bueno, principalmente
en potasio (Jenkins, 1999). La disponibilidad y calidad de los elementos
nutricionales requeriría un mayor análisis considerando pH y otros factores
relacionados, sin embargo para los objetivos específicos del presente estudio no
es pertinente.

En el Cuadro 12 puede verse que después de ambos tratamientos (Control

y EM), los contenidos de metales pesados se mantuvieron. Con estos resultados,
se determinó que los lodos de la Universidad EARTH no contienen niveles
prohibitivos de metales pesados, por lo que no sería una limitante para su reuso
agrícola. Aunque la ley costarricense no considera el contenido de metales
pesados como un requisito para el reuso de los lodos sépticos, los resultados se
compararon con los límites máximos permitidos en España (Mujeriego,1990)
(Cuadro 3, Revisión de Literatura) y todos estuvieron por debajo.

35
 240

Concentración (mg L-1 de lodo)

Control EM
200 Semana 0
Semana 2
160 Semana 3

120

80

40

0
K Mg Ca P K Mg Ca P
Elementos nutricionales

Figura 11. Contenido de elementos nutricionales en los tratamientos.

Cuadro 12. Contenido de metales pesados en los tratamientos.

Semana 0 Semana 4

EM Control

---------------------------mg/L-----------------------------

Cadmio ‹ 0,013 ‹ 0,010 ‹ 0,010

Cobre ‹ 0,117 ‹ 0,12 ‹ 0,12

Níquel 0,0795 ±0,005 0,0085 ±0,003 ‹ 0,0055

Plomo ‹ 0,0079 ‹ 0,0063 ‹ 0,0063

Zinc 0,515 ± 0,045 0,84 ± 0,11 0,295 ± 0,05

5.5 VALIDEZ RELATIVA DE LOS RESULTADOS

Finalmente, es importante ubicar los resultados dentro de las limitaciones
que existieron; en algunos casos por los mismos objetivos del proyecto, en otros
por cuestiones de manejo y costos. Una de las grandes debilidades que presenta

36
esta investigación es la falta de repeticiones. Al trabajar con tanques de 1 m3 se
logró asemejar el estudio a las situaciones reales, donde se manejan grandes
volúmenes. Sin embargo, limitó a la vez el número de repeticiones que exigen las
bases estadísticas.

Lo anterior resulta en una dificultad al momento de analizar los datos, ya

que se hace más difícil la identificación de errores experimentales. Si bien por eso
el proyecto no cuenta con absoluta validez estadística, tampoco se puede afirmar
que los resultados obtenidos no sean válidos. Y estos ofrecerán información útil en
la medida en que cada lector los sepa interpretar y sepa considerar los respectivos
márgenes de error.

37
 6 CONCLUSIONES

El tratamiento con EM eliminó efectivamente más del 99% de los coliformes

totales y fecales a las dos semanas de tratamiento. Con esto se superó los límites
legales establecidos por la ley costarricense para el reuso agrícola de lodos
sépticos. Por otro lado, en la segunda semana el Control presentó un incremento
de los coliformes totales y fecales con respecto al inicial.

El tiempo necesario de estabilización con EM fue de dos semanas; esto

considerando los requisitos legales establecidos por la ley costarricense, ya que
sólo establecen límites para el contenido de coliformes fecales. De la misma
manera, de acuerdo con los resultados obtenidos para otras variables medidas
como DBO5, nitratos y sólidos sedimentables, no se justifican cuatro semanas de
tratamiento con EM. Sin embargo, no se puede afirmar absolutamente que no se
justifican más de dos semanas, pues no se analizaron muestras a la tercera
semana. Es posible que sean necesarias tres semanas o algún número intermedio
entre la segunda y cuarta semana. Sólo algunas variables (pH, temperatura,
contenido nutricional) mostraron evolución positiva después de la segunda
semana. Esto se debería decidir mediante un análisis de costo-beneficio de la
tercera semana de tratamiento.

EM fue un catalizador eficaz del proceso de estabilización que se pretendía.

Las condiciones ambientales generadas por EM en el tanque anaeróbico
generaron una efectiva remoción de elementos contaminantes presentes en los
lodos sépticos. La reducción de la DBO5 en los lodos tratados con EM indica la
fermentación intensa de la materia orgánica a las dos semanas. Esta fermentación
también se evidencia con el fuerte olor a alcoholes y ácidos, y el color café claro
característico de colonias de bacterias ácido-lácticas, algas y levaduras. Otro dato
indicador del proceso de fermentación fue la marcada reducción del pH y la
disminución acelerada de la temperatura al inicio del proceso. En conclusión, esta
intensa fermentación anaeróbica inhibió los procesos de putrefacción, en

38
consecuencia eliminó la producción de olores desagradables y también inhibió el
desarrollo de microorganismos patógenos.

En el Control no se generó un proceso de fermentación eficaz, lo cual se

puede afirmar porque desde la segunda semana presentó un olor muy fuerte a
putrefacción y un color negruzco característico de la misma. Además, hubo un
aumento del pH con respecto al inicial. El aumento del pH significó una amenaza
en la estabilización (y potencial reutilización) de los lodos debido a que favoreció,
entre otras cosas, el desarrollo de ciertos microorganismos y dificultó la
desnitrificación.

39
 7 RECOMENDACIONES

Siendo la principal debilidad de este estudio la falta de repeticiones y

validez estadística, la principal recomendación es que se experimente de manera
que se cubran éstas externalidades. La mejor forma sería llevar el experimento a
una escala menor, quizás al nivel de laboratorio; así, se podría multiplicar las
repeticiones considerablemente.

Ahora que ya se identificó la eficacia de EM en la estabilización de

volúmenes significativos de los lodos sépticos, parte de la continuidad de este
proyecto es el determinar la dosis ideal de este producto. También el llevar el
estudio al nivel de laboratorio favorecería este objetivo.

Se recomienda determinar con muestreos más frecuentes el tiempo ideal

de fermentación. En el presente estudio ya se identificó que la cuarta semana no
es necesaria, pero habría que determinar con datos más frecuentes si es
necesaria una tercera semana de tratamiento.

Por su calidad de preliminar, en este estudio se midieron gran cantidad de

variables que aumentaron mucho los costos. Es recomendable, en estudios
siguientes, la escrupulosa selección de las variables a medir, de manera que se
hagan muestreos más frecuentes, con más determinaciones, y que se obtengan
más datos a más bajo costo. Particularmente se recomienda la medición de olor,
color, DBO5, pH, temperatura, sólidos sedimentables, nitratos, amonio y contenido
de coliformes fecales.

Posterior a todas estas determinaciones, en cuanto a tiempos, dosis y

demás, será necesario identificar la eficacia agronómica de los lodos como abono.
Se recomienda continuar el proyecto experimentando con los lodos estabilizados
en diferentes cultivos, con distintas dosificaciones y comparar contra otro tipo de
abonos orgánicos y sintéticos.

40
 8 LITERATURA CITADA

American Public Health Association. 1992. Standard Methods for the Examination
of Water and Wastewater. 18a. edición, APHA.
Atlas, R; Bartha, R. 2002. Ecología microbiana y microbiología ambiental. Cuarta
edición. Pearson Educación S.A, Madrid, España. 696 p.
Bellamy, M; Horsley, B. 2002. Options for advanced on-site treatment. Proceeding
of 7th international conference of Kyusei Nature Farming (in press).
Bettiol, W; Camargo, O. 2000. Impacto ambiental del uso agrícola de lodos
sépticos. EMBRAPA Medio ambiente, Brasil. 312 p.
Chicón, L. 2000. Especiación de metales pesados en lodos de aguas residuales
de origen urbano y aplicación de lodos digeridos como mejoradores de
suelos. [En línea]. Disponible en:
http://usuarios.lycos.es/ambiental/lodos.html Consultado 20 julio, 2003.
CWMI (Cornell Waste Management Institute). 2003. The characteristics of
biosolids/sludge. [En línea]. Center for the Environment, New York, United
States. Disponible en:
http://www.cfe.cornell.edu/wmi/Sludge/Characteristics.pdf Consultado 20
julio, 2003
Del Porto, D; Steinfeld, C. 1997. The Composting Toilet System Book. Center for
Ecological Pollution Prevention, Massachusetts, United States.
Eco Pure. 2003. Countries using EM. En: Eco-Pure Magazine. EMRO. 10-11 p.
Evanylo, G. 1999. Agricultural land application of biosolids in Virginia: Production
and characteristics [En línea]. Virginia State University, United States.
Disponible en http://www.ext.vt.edu/pubs/compost/452-301/452-301.html.
Consultado 20 julio, 2003.
Gamrasni, M. 1985. Aprovechamiento agrícola de aguas negras urbanas. Limusa,
México. 143 p.
Grupo Hidro-ecológico Nacional (GHeN). 1999. Curso Evaluación rápida de la
calidad del agua. Módulo II. Republica Dominicana.
Higa, T. 1993. Una revolución para salvar la tierra. Traducido por Del Mar Riera.
EMRO, España. 332 p.
Higa, T; Chinen, N. 1998. EM treatments of odor, waste waster and environmental
problems. College of Agriculture, University of Ryukyus, Okinawa, Japan.
Kabongo, P. 2002. Testing of viability of know pathogens in Effective
Microorganisms (EM). Report EMROSA project. Onderstepoort Veterinary
Institute, South Africa. 2 p.

41
King, L.1986. Agricultural use of Municipal and industrial sludge in the Southern
United States. Southern Cooperative Series. North Carolina State
University, North Carolina, United States. 51 p.
Ministerio de Salud Pública. 1997. Decreto Ejecutivo– Reglamento de vertido y
reuso de aguas residuales [En línea]. Disponible en:
www.netsalud.sa.cr/ms/decretos/borrad2.htm. Consultado 14 julio, 2003.
Mujeriego, R. 1990. Manual practico de riego con agua residual municipal
regenerada. [En línea]. Ediciones Universidad Politécnica de Cataluña,
Barcelona, España. Disponible en: http://mie.esab.upc.es/arr/T27E.htm
Consultado 20 julio, 2003
Montangero, A; Strauss, M. 2000. Cuando los tanques sépticos están llenos- el
desafío del manejo y tratamiento de los lodos fecales. [En línea]. Disponible
en: http://www.sandec.ch/files/Manejo_lodos_fecales.pdf Consultado 18
julio, 2003
Olsen, R; Sommers, E. 1982. Phosphorus. In: Methods of Soil Analysis. Amerian
Society of Agronomy, Inc., Wisconsin. 403 – 430 p.
Pérez, J; Espigares, M. 1999. Estudio sanitario del agua. Segunda edición.
Universidad de Granada, España. 454 p.
Sawyer, C; McCarty, P; Parkin, G. 2000. Química para ingeniería ambiental.
Cuarta edición, McGraw-Hill. Bogotá, Colombia. 713 p.
Spellman, F. 1997. Dewatering Biosolids. Technomic Publishing Company, United
States of America. 275 p.
Spellman, F. 2002. Microbiology for water / wastewater operators. Technomic
Publishing Company, Inc. Lancaster, Pennsylvania
Tchobanoglous,G; Burton, L. 1991. Chapter 3: Wastewater characteristics. In:
Wastewater Engineering. Metcalf & Hedí, Inc. 2nd ed. Irwin/McGraw Hill,
MA. 47-119 p.
Ugarte, S; Fernández, J; Herrero, C; Denita, L. Arreghini, M. 2001. Parámetros de
diseño para el tratamiento biológico aerobio de efluentes de la industria
vitivinícola [En línea]. Grupo de Estudios para el Tratamiento de Aguas
Residuales (G.E.S.T.A.R.). Instituto de Medio Ambiente Facultad de
Ingeniería, Argentina. Disponible en:
http://mail.inenco.net/~asadedit/avermas/averma4/06-47.pdf Consultado 20
julio, 2003
Villegas, J. 2002. Ordenan tratar material fecal. La Nación, San José (C.R.);
Septiembre:14.

42
Wastewater and Plumping Control Program. 2003. Septic Tank. Department of
Human Services, Bureau of Health. Division of Health and Engineering.
Maine, USA. [En línea] Disponible en: www.state.me.us/dhs/eng/
plumb/images.htm Consultado 20 julio, 2003.
Wididana, G. 1994. Preliminary experiment on EM technology on wastewater
treatment. Proceeding of the third conference on Effective Microorganisms
(EM). Kyusei Nature Farming Center, Indonesia.
Wood, M; Higa, T; Farrelly, P; Simpson, B. 2002. EM projects in USA. Proceedings
of the 7th international conference of Kyusei Nature Farming (in press).

43
9 ANEXOS
Anexo 1. Datos crudos de los resultados obtenidos
Coliformes Sólido Sólido Grasas y
Temperatura DBO5 M.O. Nitratos Fosfatos
fecales s tot. s sed. Aceites
Muestras PH
NMP/100m
°C mg/L % (v/v) g/L mL/L mg/L mg/L mg/L
L

Inicial A 5,56 29 15000 1350 0,045 8,22 115,8 140 4,92 15900

EM A 2 5,34 27 2 510 0,05 1,85 89,5 10 3,93 x

Control A 2 6,16 27,5 2400 1180 0,02 1,29 10 739 2,62 x

EM A 4 4,28 27 2 585 0,06 2,29 100 47 3,19 345

Control A 4 6,13 27,5 23 2240 0,04 1,79 98 9625 3,12 705

Inicial B 6,01 30 4600 90 0,035 0,62 16,5 9025 3,62 240

EM B 2 4,36 29 2 378 0,02 0,78 1 362 3,32 x

Control B 2 6,19 30 110000 1698 0,04 2,32 50 31250 7,66 x

EM B 4 6,48 27,5 2 460 0,06 1,9 14 27 8,13 43

Control B 4 4,41 28 240 1315 0,03 0,6 76,5 179 8,12 36

x = no hay muestras

45