Reconocimiento de Proteínas,

Carbohidratos y Lípidos

Integrantes:
Claudia Seguiel Aguilar
Freiheit Schneider Valdivia
Lourdes Ubilla Maldonado
Richard Valenzuela Flores
Yasna Valenzuela Vergara

Profesor (a): José San Martin

Ayudantes: Jaime Martínez

Fecha: 7 y 14 Abril 2015

 II. Introducción

En los organismos se encuentran cuatro diferentes tipos de Moléculas Orgánicas

en gran cantidad: Carbohidratos, Lípidos, Proteínas y Nucleótidos. Todas estas moléculas
contienen carbono, hidrogeno y oxigeno. Además, las proteínas contienen nitrógeno y
azufre. (Roberto J. Castro, 1994). Las Proteínas y los Hidratos de Carbono son solubles
en agua, pero la mayoría de los lípidos no lo son, por lo que requieren un trabajo adicional
del organismo para procesarlos. Cada uno de estos macronutrientes tiene una función
especializada en nuestro organismo, por ejemplo: los carbohidratos destacan por prestar
energía inmediata y estructural a los seres vivos; Los lípidos podemos comentar sobre
sus funciones primordiales, tales como: de reserva energética, la estructural y la
reguladora; Y por último tenemos a las proteínas, no menos importantes que las dos
macromoléculas anteriores, las cuales determinan la forma y estructura de las células y
dirigen mayoritariamente casi todos los procesos.

El objetivo del práctico es reconocer la presencia de estos macronutrientes y que

reactivos se utilizan para la identificación de cada uno, existiendo diversas reacciones las
que nos llevaran al reconocimiento de moléculas orgánicas, al mismo tiempo se realizaran
las verificaciones de compuestos por medio del test de Biuret, lugol y fehling. Un proceso
para la realización de esto es la hidrolisis, la cual entendemos como una reacción química
entre una molécula de agua y alguna otra molécula, en la que la molécula de agua se
divide y sus átomos forman parte de otra especie química. Otro proceso que
apreciaremos, será la desnaturalización, la cual consta de la perdida de la estructura de
orden superior, quedando la cadena polipetidica reducida a un polímero estadístico sin
ninguna estructura tridimensional fija. Este proceso, es capaz de verse gracias al test de
biuret, esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya
que se debe a la presencia del enlace peptídico que se destruye al liberarse los
aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II). El Cu, en un medio
fuertemente alcalino que se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de
color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.
(Sanchez, 2011). Así mismo, tendremos la dicha de usar el reactivo de Fehling (se utiliza
como reactivo para la determinación de azúcares reductores) y la prueba del yodo ( es
una reacción química usada para determinar la presencia o alteración de almidón u
otros polisacáridos).

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 III. Materiales y métodos

Practico 1:

1.- TES DE BIURET

- Se debe agregar a un tubo de ensayo 2ml de albúmina de huevo y luego

adicionar 1ml de Biuret, en otro tubo de ensayo poner 2ml de de gelatina y añadir
1ml de Biuret.

2.-REACCIONES DE PRECIPITACIONES DE LAS PROTEÍNAS

a) efecto de los ácidos y álcalis fuertes

- En un tubo de ensayo se colocan 2ml de ácido nítrico, posteriormente se

agregan lentamente 2ml de albúmina de huevo con una pipeta, luego se bate el
contenido suavemente. En otro tubo de
ensayo se agregan 2 ml de ácido sulfúrico y con una pipeta se añaden 2 ml de
albúmina de huevo, se debe agitar cuidadosamente.
En el tubo de ensayo 3 se ponen 2 ml de ácido acético y posteriormente se
añaden 2 ml de albúmina de huevo y batir con precaución.

b) Efecto de Sales Metálicas

A dos tubos de ensayos se agregan 3 ml de albúmina de huevo

- Tubo 1: Se adicionan gradualmente 20 gotas de nitrato de plata al 1%.

- Tubo 2: Se agregan gradualmente 20 gotas de sulfato de cobre diluido al
1%.

Practico 2

Experiencia 1

En cuatro tubos de ensayo se agregan las siguientes soluciones:

- Tubo 1: Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de solución de glucosa al 20%,

agregar 2 gotas de solución de Fehling A y posteriormente 2 gotas de

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 Fehling B. Calentar con cuidado, flamendo el tubo hasta que ebulla.
Realizar el mismo procedimiento (en otros tubos de ensayo) con 2ml de
jugo de fruta, agua de arroz, ovoalbúmina y aceite.

Experiencia N°2

Reconocimiento de almidón

Test de lugol o del yodo

- Colocar 2 o 3 ml de solución de almidón en un tubo de ensayo, agregar una

gota de solución de yodo diluido. Calentar al tubo hasta la desaparición del
color, posteriormente enfriar bajo agua.
- En una capsula Petri colocar rebanadas delgadas de papas y agregar una
gota de lugol.
- En un tubo de ensayo colocar 2 ml de agua de arroz, y añadir una gota de
solución de yodo diluida.
- En un corte transversal de una semilla de castaña agregar algunas gotas de
lugol.
- En un tubo de ensayo agregar 2 ml ovoalbúmina diluida y posteriormente
añadir una gota de lugol diluido.

Reconocimiento de lípidos

Experiencia N°1

- En un tubo de ensayo colocar 2 ml de aceite y añadir 2 ml de agua

destilada. Repetir la experiencia cambiando el agua por éter.

Experiencia N°2

- Realizar un corte de nuez y agregar gotas de sudan.

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 IV. Resultados

Con los distintos procesos realizados en laboratorio para el reconocimiento de

proteínas, se obtuvieron los siguientes resultados:

 Test de Biuret

Tabla N°1: Test de Biuret en Albumina y Gelatina

Solución Color antes del Color después Observación

test del test
Albumina Amarillo pálido Violeta Presencia de Proteínas
Gelatina Amarillo muy Violeta intenso Presencia de Proteínas
pálido
Tabla N°1.- Se pudo contemplar presencia de proteínas en ambas soluciones en
el test de Biuret, pero en la Gelatina se observó mayor cantidad de proteínas que
la albumina, eso explica porque su color violeta era más intenso.

Imagen N°1: Test de Biuret en Albumina Y Gelatina

Imagen N°1.- Son dos compuestos que pasaron por el test de Biuret, en la
izquierda está la albumina (A+B), mientras, en el derecho esta la gelatina (G+B),
como se observa, ambos compuestos salieron positivos del test, por lo cual estos
presentaron proteínas.

 Reacciones de precipitación de las proteínas

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Tabla N°2: Efectos de los ácidos y álcalis fuertes

Mezcla Temperatura Sin Test de Biuret Con Test de

Biuret
Albumina + Ácido nítrico Caliente Amarillo fuerte Café amarillento
Albumina + Ácido sulfúrico Más caliente Café intenso Café oscuro
Albumina + Ácido acético Media Blanco Blanco azulado
Albumina + Hidróxido de Media Incoloro Violeta
sodio
Tabla N°2.- La albumina en los distintos ácidos, solo se produjo reacción
exergonica con los ácidos nítrico y sulfúrico, mientras, en el test de Biuret se
presentó una desnaturalización solo con el Hidróxido de sodio.

Imagen N°2: Efectos de los ácidos y álcalis fuertes antes y después del test de
Biuret.

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Imagen N°2.- Las imágenes de arriba son las mezclas de distintos ácidos que tuvo
la albumina, siendo Hidróxido de sodio, ácido acético, ácido sulfúrico y ácido
nítrico, de izquierda a derecha, produciendo una reacción exergonica los ácidos
nítrico y sulfúrico. Las imágenes de abajo son las mezclas sometidas por el test de
Biuret, como se puede observar es positivo solo en la mezcla de la albumina con
el hidróxido de sodio.

Tabla N°3: Efecto de sales metálicas

Mezcla Color Precipita

Albumina + Nitrato de plata diluido (1%) Blanco leche Si
Albumina + Sulfato de Cobre (1%) Celeste traslucido Si
Tabla N°3.- La albumina con ambas sales metálicas precipita.

 Reconocimiento de Carbohidratos

Tabla N°1: Test de Fehling

Solución Color Fehling A Fehling B Ebullición Explosión

Glucosa al Traslucido Traslucido Azul Naranjo No
10% oscuro
Jugo de fruta Amarillo Amarillo Amarillo Naranjo Si
pálido pálido, pero fuerte oscuro
más espeso
Agua de Blanco Blanco Azul Naranjo Si
arroz oscuro
Ovoalbúmina Blanco Blanco, pero Violeta Morado Si
espeso Oscuro
Aceite Amarillo Se forman Se forman Las burbujas No
traslucido dos burbujas se mueven
burbujas pequeñas
grandes

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Tabla N°1.- En las soluciones de Glucosa, Jugo de fruta y Agua de arroz, dieron
positivo en el test de Fehling, por lo cual solo en estas soluciones hay presencia
de carbohidratos.

Imagen N°3: Test de Fehling en distintos compuestos.

Imagen N°3.- Se aplicó a distintos compuestos el test de Fehling, al ser puestos en

el mechero se obtuvieron un color naranja oscuro como es el caso de Glucosa al
10%, Jugo de fruta y Agua de arroz, mientras el color morado oscuro de
Ovoalbúmina y solo se mueven las burbujas como el caso del aceite.

 Reconocimiento del almidón

Tabla N°2: Test de Lugol

Muestra Lugol Calor Frio

Almidón Rosado Transparente Azul
Papa Negro - -
Agua de arroz Negro - -
Castaño de india Negro - -
Ovoalbúmina Amarillo - -
transparente

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Tabla N°2.- En el almidón se obtuvo un color rosado que al aplicar calor, perdió su
color, pero al ser colocado en agua, toma un color azul, ya que el almidón y el
yodo se vuelven a unir. En el caso de la Papa, Agua de arroz y Castaño de india,
presenta una alta concentración de almidón. Mientras, la Ovoalbúmina tomo un
color distinto de las otras muestras, ya que no cuenta con presencia de almidón.

 Reconocimiento de Lípidos

Tabla N°3: Reconocimiento de lípidos en distintos alimentos

Mezclas Resultado Presencia de lípidos

Aceite + Agua No son solubles Si
Aceite + Acetona Son solubles Si
Corte de Nuez + SudanIII Color naranjo Si
Tabla N°3.- Las tres mezclas presentan presencia de lípidos, ya que este es
insoluble en agua, pero si en solventes orgánicos como la acetona. Mientras, en la
nuez se encontró lípidos más complejos.

V. Discusión

Por medio de distintos test se realizó la identificación de compuestos

orgánicos analizando los resultados que se dieron en los distintos experimentos,
donde en uno de ellos hubo presencia de proteínas, esto se debe a que el test de
Biuret como se mencionó anteriormente, este reconoce los enlaces peptídicos
dando una coloración violeta cuando hay presencia de proteínas, en la gelatina
hubo más presencia porque es un colágeno que se caracteriza por su gran
resistencia y está constituida por un conjunto de tres enlaces poli peptídicos
(Guzmán), habiendo una relación cualitativa. Cuando el Biuret reconoce proteínas
este cambia de color lo que significa que se desnaturaliza eso quiere decir que
pierde los enlaces peptídicos aumentando su viscosidad, disminuyendo su
solubilidad quedando la proteína solo con la estructura primaria. En el Caso de las
sales metálicas estas tienen carga neutra, son buenos conductores de
electricidad y solubles en agua, los agentes cambian a las proteínas dejando un
precipitado en los tubos de ensayo.

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 La reacción de Fehling se utiliza para reconocer azucares reductores. El
poder reductor que pueden presentar los azucares provienen de un grupo
carbonilo que puede ser oxidado. Los azucares reductores en medio alcalino son
capaces de reducir de color azul a rojo demostrando así la presencia de
carbohidratos solo en aquellos en donde el grupo carbonilo se oxida. (Vallejos,
2013). Los lípidos son Insolubles en agua lo que nos lleva a que el aceite con
agua no sean miscibles ya que se pueden ver las dos fases, caso contrario pasa
con el aceite y la acetona ya que son miscibles porque la acetona en un solvente
orgánico.

VI. Conclusión

En este práctico se llevaron a cabo distintos test de reconocimiento de

proteínas, carbohidratos, almidón, lípidos e identificación de aminoácidos, los
cuales poseían características cualitativas o cuantitativas, con el fin de verificar la
existencia de estos compuestos y/o moléculas orgánicas, de manera de poder
entender y experimentar de mejor forma las distintas reacciones que se producen
al realizar alguno de estos procedimientos. En general los cambios que se
observaron fueron principalmente de color, texturas y densidades, los cuales
varían dependiendo de distintos factores como la aplicación de calor o aplicación
de compuestos.

Las distintas mediciones y estudios de estos compuestos son un aporte a la

comprensión de la importancia que representa cada uno de estos compuestos en
la vida humana, animal y vegetal, ya que cada uno de ellos es un pilar
fundamental para la existencia o subsistencia de cualquiera de estos, debido a
que proporcionan aproximadamente el 90% del peso seco de la dieta, el 100% de
energía y participan en la formación de estructuras orgánicas. El cuerpo usa estas
unidades básicas para construir las sustancias necesarias para el crecimiento,
mantenimiento y la actividad física.

El organismo sintetiza algunos de estos componentes en el cuerpo, pero no

puede sintetizar los llamados aminoácidos esenciales, los cuales deben ser

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consumidos en la dieta, ya que resultan indispensables para los distintos procesos
químicos que se llevan a cabo en el organismo. Así también el cuerpo necesita
proteínas para mantener, reemplazar los tejidos, funcionar y crecer. Si se
consume más proteína de la que se necesita, estas son procesadas y
transformadas en energía.

VII. Bibliografía

Guzmán, D. P. (s.f.). El Colageno. Recuperado el 20 de Abril de 2015, de

http://www.oc.lm.ehu.es/Fundamentos/fundamentos/articulos/Art%C3%ADc
ulos/CL002.pdf

Roberto J. Castro, M. H. (1994). Actualizaciones en Biología. Buenos Aires:

Universitaria.

Sanchez, Y. (11 de Agosto de 2011). Reacción de Biuret . Recuperado el 2015 de

Abril de 20, de http://es.scribd.com/doc/62055042/Reaccion-de-
Biuret#scribd

Vallejos, M. P. (2013). Identificacion de Crabohidratos a traves de reactivos.

Recuperado el 19 de Abril de 2015, de
http://www.academia.edu/6347596/Identificaci%C3%B3n_de_Carbohidratos
_a_trav%C3%A9s_de_reactivos.

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