MICROSCOPÍA

TEORÍA CELULAR
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN CELULAR

•CÉLULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

•ESTRUCTURAS COMUNES Y DIFERENCIALES
DE LAS CÉLULAS
•EL CITOSOL
•ESTRUCTURA COLOIDAL Y CARACTERÍSTICA
•LA TENSIÓN SUPERFICIAL
• MOTORES CELULARES
 QUÉ ES UNA CÉLULA?
 Pasaron muchos años hasta lograr el descubrimiento
de la existencia de las células y su estructura

 Los antiguos sabían que espejos curvos y esferas de

cristal llenas de agua aumentaban el tamaño de las
imágenes

 Siglo XVII: inicio de uso de lentes

1609 - Galileo: Uso de telescopio con fines astronómicos

Comienzan a utilizarse instrumentos para aumentar la

visión……
Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular
 Zacharias JANSSEN
~ 1500 Diseñó el primer microscopio
s. XVII Inicio de la Citología

Anton van Leeuwenhoek

1632 - 1723

- Crea el primer microscopio

óptico simple ~270X aumento
- PADRE DE LA MICROSCOPÍA
~1670’s descubre pequeños organismos.
Denominó “animáculos” ~protistas, describe
espermatozoides
Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular
Robert HOOK
1635 - 1703

- El “padre de la microscopía”
- Libro Micrographia

- Microscopio compuesto de
baja resolución

- Atribuyó el
témino
de CÉLULA (latín
cella = espacio
vacío)

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular

 MICROSCOPIA:
(griego) “para ver lo pequeño”
Micron = pequeño Skopein = ver, mirar

Existían 2 tipos de microscopios:

SENCILLOS : lente montada

COMPUESTOS: combinación de lentes

Diferentes longitudes de
onda de la luz
….Newton

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular

 Robert Brown 1831
- Presencia de núcleo en las células de las
plantas
- Describe el contenido celular como
PROTOPLASMA
- Descubre que el interior celular es la parte
viva de la célula

-El concepto de célula se transformó en:

MASA DE PROTOPLASMA LIMITDADA EN EL

ESPACIO POR UNA MEMBRANA CELULAR QUE
POSEE UN NÚCLEO

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular

Matthias Schleiden 1804 - 1881
- Botánico alemán
- Descrubre que todas las PLANTAS (tejidos)
estaban hechas de células nucleadas
- Publica su trabajo”Contributions to Phytogenesis” 1838
- Contribuye a la creación de la Teoría Celular

Theodor Schwann 1810 - 1882

- Zoológo alemán
- Descubre que todos los ANIMALES estaban hechos
de células
- Contribuye a la creación de la Teoría celular
Publicación ”Microscopic Researches on the Conformity in Structure
and Growth Between Animals and Plants” 1839
Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular
Rudolph Virchow
1821- 1902

- Patólogo Alemán

- Conocido como ‘PADRE DE LA PATOLOGÍA”

- Descubre que todas las células vivas

provenían a partir de otras células vivas

- Aplica la teoría celular en la medicina

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular

 Teoría Celular
1. Todas las cosas están hechas por células.
2. Las células son la unidad básica de la
estructura y función de las cosas con vida.
3. Las células vivas provienen sólo a partir
de otras células vivas.

Surgen diversas preguntas del origen de la vida:

 Cómo surge la vida?
 Cómo se reproducen las especies de generación en
generación?
 Existe la Generación Espontánea
Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular
Teoría Celular
Siglo XVIII, a consecuencia del desarrollo de lentes
ópticas y su aplicación en la microscopía es que
surge….

CÉLULA: cella (latín) = espacio vacío

observó que la caparazón del corcho estaba formada por
muchas diminutas cavidades, muy semejantes a los poros de
una esponja, y les dio el nombre de células

Leeuwenhoek descubrió células libres, obs una organización

dentro de ellas, sobretodo en núcleo de eritroc.

Schleiden observaciones en tejidos vegetales

Schwann observaciones en tejidos animales

LOS LLEVÓ A POSTULAR LA TEORÍA CELULAR (de manera más definida)

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular
1855Virchow :
-todas las células se originan en células pre-existentes,
estableciéndose una división celular como el fenómeno central en la
reproducción de los organimos

1880Flemming
1880Demuestra que las células aseguran la continuidad entre una
generación y otra por medio del mecanismo de MITOSIS

1890 Waldeyer

-Demuestra que las células aseguran la continuidad entre una

generación y otra por medio de la exacta división de los
CROMOSOMAS

Antes de finalizar el siglo XIX, se estableció que:

-los gametos se forman por división reduccional o MEIOSIS
Para mantener homogéneo el número de cromososmas generac

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular

 TIPOS DE MICROSCOPIOS
ÓPTICO
ELECTRÓNICO
SCANEO (SCANNING PROBE)

Microscopía , Teoría Celular, Estructura Y Función Celular

Los microscopios fueron perfeccionándose…
1820 Lister (inglés) diseñó microscopio acromátrico
(elimina los anillos de color)
- Descubrió glóbulos rojos

Con el transcurso de los años, los adelantos en microscopía han

permitido:

- aumentar el PODER DE RESOLUCIÓN

(con la mejora de la calidad de lentes)

- aumentar el PODER DE MAGNIFICACIÓN

- contrarrestar la transparencia de las células

aumentando el CONTRASTE de las estructuras celulares

Limitante: LONGITUD DE ONDA DE LA LUZ

1930
Aumento en 1000
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO veces la magnificación
 MICROSCOPÍA ÓPTICA
Apertura Numérica
AN = n (sen α)

n = índice de refracción del medio

α = seno del ángulo de apertura

PODER DE RESOLUCIÓN
-Es la capacidad del instrumento para dar imágenes distintas
de puntos situados muy cerca uno del otro en el objeto
-Depende de la λ y del a AN del objetivo

LÍMITE DE RESOLUCIÓN:
- Es la distancia mínima que debe existir entre dos puntos
para que puedan ser discriminados como tales

L.R. = (0,61 λ) / AN
 MICROSCOPÍA ÓPTICA DE CONTRASTE DE FASES
-Es una técnica de microscopía de
iluminación. Inventada en 1930 (F.
Zernike)
• Permite observar células sin colorear
•Útil para estudio de células vivas…
PQ?

Acaro- Introduce cambios de fase o retrasos en las

radiaciones que atraviesan las estructuras
biológicas transparentes, debido a los distintos
índices de refracción que poseen

DIVERSOS TONOS DE GRIS, dependen de:

-Espesor del material
-Diferencias en el ÍNDICE DE REFRACCIÓN del
material y del medio
•Las partes oscuras de la imagen corresponden a las porciones densas del
espécimen; las partes claras de la imagen corresponden a porciones menos densas
 MICROSCOPÍA ÓPTICA DE FLUORESCENCIA
 Utilizado para estudio de propiedades
de sustancias orgánicas e inorgánicas
 Utiliza la FLUORESCENCIA

 La muestra es marcada con una

molécula fluorescente llamada
FLUORÓFORO (proteína fluoresc GFP,
DAPU, YFP…)

 Cada fluoróforo tiene un espectro de

absorción y uno de emisión particular

 La energía absobida se puede liberar

como fluoresc o fosforescencia
VENTAJAS DE LA MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA:

• Ubicar proteínas utilizando anticuerpos dirigidos (contra una

proteína) en relación a otras proteínas o estructuras.

Identificación del organelas

Mitocondrias
Rodhamina SYTO-13

Identificación del ADN

• Se utilizan agentes intercalantes: DAPI, EtBr, etc.
• Estudiar mitosis, ciclo celular, apoptosis.
• Ubicar genes o secuencias particulares utilizando
sondas fluorescentes específicas.
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
VENTAJA PRINCIPAL: Surge en 1930

•Aumento de 1000 veces en la magnificación del

objeto observado

•La longitud de onda es menor

(λ = 0,005 nm para electrones)
•Mayor capacidad de resolución, mejor definición

•Permite conocer directamente la ultraestructura

biológica

FUNDAMENTO:
-Utiliza la propiedad que tienen los haces de electrones de ser desviados por un
campo electrostático o electromagnético, en la misma forma que un rayo de luz es
refractado al atravesar un lente
-Un filamento o CÁTODO en un tubo al vacío, si es calentado, emite un haz de
electrones que sigue una trayectoria recta
 Dos tipos básicos:
M. DE TRANSMISIÓN (MET) M. DE BARRIDO (MEB)

•Proyecta • Escanea la
electrones a superficie del
través de una objeto
fina capa de
la muestra
Paramecium

•Se produce • Produce una

una imagen en imagen que
2 dimensiones aparente 3D

Ovulo
 Versión moderna de la TEORÍA
CELULAR:
1. Las células constituyen las unidades morfológicas
y fisiológicas de todos los organismos vivientes

2. Las propiedades de un organismos dado

dependen de las de sus células individuales

3. Las células se originan únicamente en otras

células de su continuidad se mantiene a través
de su material genético

4. La unidad más pequeña de la vida es la célula.

• Células se presentan en una variedad de formas y tamaños

• A mediados del siglo XIX

• CHATTON & STANIERY van NIEL:
• propusieron que todas las formas vivas podrían ser divididos en
dos categorías celulares fundamentales

Dos tipos de células con diferencias estructurales

Carecía de nucleo celular Poseía nucleo celular separado

separado del citoplasma por del citoplasma por una
membrana estructura membranosa

PROCARIOTES EUCARIOTES

Bacterias Animales Plantas

 ORGANIZACIÓN CELULAR EN PROCARIONTES
Y EUCARIONTES
TIPO PROCARIOTES EUCARIOTRES
Bacterias, algas azules, Protozoarios, otras
micoplasmas algas, metazoarios,
cél vegetales.
Tamaño celular 0.2 – 2 um diámetro 10-100 um diámetro
División Amitosis, fisión binaria Mitosis
Celular
Reproducción No meiosis, transferencia Meiosis
sexual de fragmentos de DNA
(Conjugación)
Envoltura ausente Presente
nuclear
ADN desnudo Combinado con
proteínas
Cromosomas Único circular Múltiples
 TIPO PROCARIOTES EUCARIOTES
Citoplasma No citoesqueleto Citoesqueleto presente
Organelos con Ninguno Numerosos: mitoc, RE,
mb cloroplastos (plantas),
lisosomas, núcleo, etc
Ribosomas 70S (50S + 30S) 80S (60S + 40S)
Endomembrana ausentes Presentes
s
Mitocondrias Ausentes / Enzimas Presentes
respiratorias y
fotosintéticas en mb
plasm
Cloroplastos ausentes Presentes en cél veg
Pared ceular Presente constituida por Celulósica en cél veg
Mureína
Exocitosis y ausente Presente
endocitosis
Citoesqueleto ausente Presente , complejo
 CITOPLASMA
• Es el espacio entre mbs celular y nuclear
• Carece de compartimentos intracelulares
• Está compuesto por ~80% de agua

• Formado por:
• CITOESQUELETO
• MORFOPLASMA
• CITOSOL

• La parte líquida denominada CITOSOL

• Presenta: Ribosomas, Nucleoide, Plásmidos
 a. CITOSOL
• Es la MATRIZ INTRACELULAR COLOIDAL

• Formada por:
• parte líquida, 85% es agua aprox.
• contiene monómeros (aa, ac nucleicos,
glucosa. Ribosas, etc)
• SALES
• ENZIMAS de glucólisis, fermentación ATP
• POLÍMEROS: proteínas, polisacáridos
a. CITOSOL - coloides

• FUNCIONES:
1. Reacciones metabólicas:
a. Glucolisis.
b. Síntesis de ATP a nivel de
sustrato.
c. Hidrólisis de grasas.
d. Fermentación láctica.
e. Gluconeogénesis.
f. Biosíntesis de ácidos grasos.
2. Síntesis de proteínas
(ribosomas).
 a. CITOSOL - coloides
 COLOIDES: es la Característica básica de las
disoluciones verdaderas es son sistemas
monofásicos cuyos solutos están presentes como
moléculas o iones con un diámetro inferior a 1 nm.

 Las disoluciones coloidales son

sistemas dispersos con dos fases:

 SOL ACUOSO:
 Fase dispersa, discontinua: el
coloide
 Fase dispersante, continua: es el
agua
 a. CITOSOL - coloides
 Un soluto –llamado SOL:
cuando sus partículas dispersas tienen
diámetros superiores a 1 nm pero inferiores
a 200 nm.
 Los coloides pueden también formar un
GEL:
en la que el coloide forma una fase
continua.
EJM:
Plasma es un SOL que pasa a GEL cuando
coagula y la red de fibrina forma una fase
continua
 Un coloide en solución tiene una
determinada TENSIÓN SUPERFICIAL que
tiende a aglutinar las partículas coloidales.

 Los factores que evitan la aglutinación son

:
 la hidratación debida a la afinidad por
el disolvente (hidrofilia) y

 la carga eléctrica. Por ejemplo, las

proteínas plasmáticas son aniones al pH
fisiológico.
 b. CITOESQUELETO
MICROTÚBULOS:
-Están en la matriz citoplasmática
-Son citoesqueleto dinámico y esponjoso
-Sirve de armazon para las proteínas
solubles, enzimas y ribosomas
Interviene en el mantenimiento de la forma
celular

-Son estructuras tubulares finas y rígidas de

25nm de diametro
-Compuestas por 13 filamentos individuales
-Proteína: TUBULINA

-Pueden cambiar rápidamente por un proceso de

polimerización o despolimerización de las
subunidades de tubulina
 b. CITOESQUELETO
MICROFILAMENTOS:
- Se encuentran entre las estructuras más
pequeñas
- Son delgados de 4 – 6 nm
- Formados principalmente por ACTINA

- Pueden estar vinculados con la MIOSINA

y otras proteinas relacionadas con
procesos de contracción

- Acciones no musculares de motilidad

celular intervienen: ACTINA Y MIOSINA

FILAMENTOS INTERMEDIO:
-De tamaño intermedio 10 nm
-Contienen diversas proteinas fibrosas
-Cumplen un papel mecánico
 Microvellocidades Intestinales: presentan elemento
estructural: MICROFILAMENTOS (unidos hacia su
extremo terminal)

 Microfilamentos: están asociados con movimientos

celulares

 Filamentos Intermediarios: son la característica

estructural que proporciona a las células de la
habilidad de withstand abrasion. Ayuda a mantener
a las células juntas. (i.e. Keratin loops that pass
through desmosomes, thus tightly connecting
adjacent cells are what kind of cytoskeletal
element?)

 La relación entre ACTINA y MIOSINA:

La porción globular de miosina tiene un sitio de unión
altamente específico para la Actina
El citoesqueleto actúa como una pista donde las
células pueden mover organelas, cromosomas y otras
cosas. Algunos ejemplos son:

• Movimiento de vesículas entre organelas y la

superficie celular

• flujos citoplasmáticos

• Movimiento de vesículas de pigmento para

coloración protectora

• Descarga del contenido de vesículas para

regulación del agua en los protozoos

• División celular--citocinesis

• Movimiento de cromosomas durante la mitosis y la

meiosis
 CÉLULAS
PROCARIÓTICAS
Desde el punto de vista evolutivo se considera que son antecesores
de los eucariontes

Son menos complejas que las Cel Eucariotas

-No presentan NUCLEO = envoltura nuclear

-El cromosoma procariotico ocupa un espacio

dentro de la célula denominado NUCLEOIDE, y
se halla en contacto directo con el resto del
protoplasma

-Presentan algunas organelas, pero no todas

METABOLISMO:
- Pueden ser autótrofos (bacterias y algas azules fotosintéticas) o
heterótrofos (bacterias)
Locomoción
Pueden presentar algunos tipos de apéndices:

FLAGELOS:
•Órgano de locomoción. Filamentos helicoidales extracelulares
•Movimientos rotatorios
•Presente en bacterias Gram (+) y (-)
•Generalmente en bacilos

PILI (Latín = Cabellos)

-Apéndices filiformes, proyección de ~9 – 10 nm de diám.
-Permite la transferencia de ADN a otra bacteria

FIMBRIAE ( Latin = Flecos)

- Generalmente en bacterias Gram(-), también en Gram (+)
- Son cortos que le permiten fijarse a diversos tipos de
superficies de sus huéspedes
- Importante para la colinización durante procesos infecciosos
CITOPLASMA

NUCLEOIDE
Almacena y transmite el material genético o AND
Coordina la síntesis de proteínas, regula actividades celulares

CROMOSOMA
• Material genético de la bacteria
• Molécula de DNA circular desnudo de doble cadena helicoidal
superenrollada
• Unido a membrana plasmática
• Longitud aprox.: 1mm
• Contiene ~3500 genes

PLÁSMIDOS:
- Muchas bacterias presentan un AND circular extracromosómico
- Capacidad de replicación autónoma
- Tasmaño: 2Kb – 500 kb
- Clasificación por el tipo de información: Factores de Fertilidad,
Factores de Resistencia, Factores Colicinógenos (sust que matan a
las bacterias, se hacen inmunes)
 RIBOSOMAS
• Rodeando al DNA se encuentran 20,000 a 30,000 partículas de
25 nm de diámetro llamados RIBOSOMAS
• Están compuestas por RNA y proteínas
• Son el sitio de síntesis de proteínas.
• Formados por subunidad grande y pequeña formado
POLIRRIBOSOMAS
 CÉLULAS
EUCARIÓTICAS
 CÉLULAS EUCARIÓTICAS
 Significa “núcleo verdadero”

 CÉLULAS MÁS COMPLEJAS CON PRESENCIA DE NÚCLEO Y

MUCHAS ORGANELAS

 Poseen un núcleo verdadero con una complicada envoltura

nuclear, a través del cual se tienen los intercambios
nucleocitoplasmáticos

 Probablemente aparecieronn hace mil millones de años

 Membrana celular - Núcleo - Citoplasma

 A pesar de sus diferencias con procariotes, hay semejanzas

en su organización molecular y en su función.
 Así por ejemplo, todos utilizan el mismo código genético y una
maquinaria similar para la síntesis de proteínas
MEMBRANA CELULAR

-Estructura que separa el contenido de la célula del medio

externo
-Es una película delgada 6 – 10 nm de espesor
-Formada por bicapa lipídica continua con proteínas intercaladas
o adheridas a ambas superficies
-Numerosas invaginaciones
FUNCIÓN:

• Controla de forma selectiva el paso de

sustancias de entrada y salida de la
célula
• Presenta sitios de RECEPTORES de
unión a hormonas específicas
VEGETALES: PARED CELULAR:
celulosa, lignina. Túneles de plasmodesmos
ANIMALES: MB CELULAR:
glucoproteínas, glucolip, polisacaridos
CITOPLASMA

Microtúbulos
Organiodes microtubulares
CITOESQUELETO Microfilamentos
Filam intermediarios

SISTEMA DE Envoltura nuclear

R Endoplasmático
ENDOMEMBRANAS
CITOPLASMA Complejo de Golgi

ORGANOIDES DE Mitocondrias
MEMBRANAS Cloroplastos
Lisosomas
Peroxisomas
Endomembranas
RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO:
- Constituye la mayor parte del sistema de
endomembranas

- Compuesto por túbulos y sacos aplanados

- Superficie externa es rugosa o granular : cubierta

por RIBOSOMAS que sintetisas proteinas q
llegan a la luz del retículo
- RE liso se continua con el rugoso: interviene en el
transporte de productos dentro de sus cavidades

FUNCIÓN
- Forma un sistema extensivo de transporte
-Sitio de síntesis de proteínas (E.Rugoso)
-Almacena y transporte de materiales - Secreción
Endomembranas
APARATO DE GOLGI
- Es una parte diferenciada del sistema de
endomembranas
- Está formado por DICTIOSOMAS
- Son pilas de sacos aplanados y vesículas
- Forma vesículas o gránulos secretores
- Son liberados de la célula por exocitosis

Función:

•Interviene en el procesamiento y
empaquetamiento de los productos de secreción
que pasan por el R.E.
•RE y Golgi participan en la formación de
lisosomas y peroxisomas
•Producción de enzimas digestivas
•Transporte y almacén de lípidos
Endomembranas

ENVOLTURA NUCLEAR:

- Formados por sacos aplanados o

cisternas, por dos membranas

- Se unen en los poros que permiten

la transferencia de materiales
entre el núcleo y citoplasma

- Mb externa cubierta por

RIBOSOMAS
Organelas
MITOCONDRIAS
Están en casi todas las células eucarióticas en forma de estructuras
cilíndricas de menos de 1 um de diámetro

Poseen una doble membrana

-Interna: plegada en crestas que subdividen la
cámara interna
-Externa: cubierta por prolongaciones relacionadas
con la fosforilación como parte del proceso de
respiración

-En la MATRIZ: muchas enzimas solubles import en ciclo de Krebs,

el primer paso de uso aeróbico de la energia de los nutrientes

FUNCIÓN:
-Lugar de la Respiración aeróbica (Ciclo de Krebs)
-Lugar de producción de energía ATP
-# de mitocondrias refleja la actividad metabólica de la célula
-Grandes cantidades de mitocondrias encontradas en músculo
Organelas

LISOSOMAS
Pequeñas vacuolas formadas por pequeños cuerpos Golgi
Contienen enzimas hidrolíticas

FUNCIÓN:
 Digestión dentro de la célula
 Enzimas que se liberan para digestión fuera de la
célula – Exocitosis
 Autolisis (ruptura celular en muerte celular)

PEROXISOMAS
Vesículas ~100 – 500 nm de diámetro
Presentes en todo el citoplasma
Contenido enzimas oxidantes: Catalasa, peroxidasa,
oxidasas
FUNCIÓN: Detoxificación celular
Oxidaciones celulares
Hidrólisis de ácidos grasos
Organelas

RIBOSOMAS
•Pequeñas estructuras encontradas en gran número
•Se pueden unir al RE o estar en el citoplasma libres
•Diámetro : 20 -25 nm en eucariotes
•Formado por 2 subunidades

Función:
Síntesis de proteínas

En el R.E.R. En mb nuclear En Citosol