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2003
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MANUAL DE BIOLOGIA CRIMINALISTICA
I .- INDICE
II .- INTRODUCCION
IV .- SANGRE
IV.1 - Introducción.
IV.2 - Antecedentes históricos.
IV.3 - Fundamentos teóricos.
IV.3.1 - Afectaciones hemostáticas que se producen en la sangre.
IV.3.2 - Antígenos.
IV.3.3 - Anticuerpos.
IV.3.4 - Reacciones antígeno anticuerpo.
IV.4 - Investigación en sangre seca.
IV.5 - Investigaciones analíticas.
IV.5.1- Investigación de la presencia.
IV.5.2 - Investigación de la especie.
IV.5.3 - Diagnóstico individual.
- Establecimiento de aglutinógenos por absorción cuantitativa.
- Determinación de aglutininas por Lattes.
- Determinación de aglutininas por centrifugación.
- Reacción de aglutinación mixta.
- Reacción de Adsorción-Elución.
- Tipaje de las muestras de sangre líquida.
- Otras determinaciones en sangre seca.
IV.6 - Perspectivas.
IV.7 - Referencias bibliográficas.
IV.8 – Anexos.
V.- SEMEN
V.1- Introducción.
V.2 - Características de la esperma.
V.3 - Composición del plasma seminal.
V.4 - Investigaciones analíticas.
V.5 - Referencias bibliográficas.
V. 6 – Anexos.
VI. 1- Introducción.
VI.2 - Fundamentos teóricos.
VI.3 - Determinación del sexo.
VI.4 - Secreciones femeninas.
- Células vaginales.
- Células menstruales.
VI.5 - Secreción salival.
VI.6 - Investigaciones analíticas.
VI.7 - Secreciones nasales.
VI.8 - Productos excretados por el organismo.
VI.8.1- Orina.
VI.8.2 - Sudor.
VI.8..3 - Heces fecales.
VI. 9 - Referencias bibliográficas.
VI.10 – Anexos.
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VII.- TEJIDOS
VII.1- Introducción.
VII.2 - Antecedentes históricos.
VII.3- Fundamentos teóricos.
VII.4 - Investigaciones analíticas.
VII.5 - Referencias bibliográficas.
VIII.- ADN
VIII.1- Introducción.
VIII.2 - Antecedentes históricos.
VIII.3 - Fundamentos teóricos.
VIII.4 - Investigaciones analíticas.
- Obtención de ADN.
- Técnicas para la detección de los polimorfismos de ADN.
- Valoración de los resultados.
- Ejemplos de aplicación.
VIII.5 - Perspectivas.
VIII.6 - Referencias bibliográficas.
VIII.7 – Anexos.
IX.- PELOS
IX.1- Introducción.
IX.2 - Antecedentes históricos.
IX.3 - Fundamentos teóricos.
IX.3.1- Morfología e histología.
IX.3.2 - Estructura del pelo.
IX.3.3 - Composición química.
IX.3.4 - Incorporación de los elementos traza en el pelo.
IX 3.5 - Colección y preparación de las muestras.
IX.3.6 - Técnicas descriptivas.
IX.4 - Investigaciones analíticas.
IX.4.1- Métodos analíticos empleados.
- Microscopía óptica.
- Microscopía electrónica de barrido.
- Análisis elemental.
- Espectrometría de Absorción Atómica.
- Otras investigaciones.
IX.5 - Perspectivas.
IX.6 - Referencias bibliográficas.
IX.7 – Anexos.
X.- BOTANICA
X.1- Introducción.
X.2 - Antecedentes históricos.
X.3 - Fundamentos teóricos.
X.4 - Investigaciones analíticas.
X.5 - Perspectivas.
X.6 - Referencias bibliográficas.
X.7 – Anexos.
XI.- FIBRAS
XI.1- Introducción.
XI.2 - Antecedentes históricos.
XI.3 - Fundamentos teóricos.
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XI.4 - Investigaciones analíticas.
XI.5 - Perspectivas.
XI.6 - Referencias bibliográficas.
XI.7 – Anexos.
XII.1.- Introducción.
XII.2.- Generalidades.
XII.3.- Estudio macroscópico elemental de los huesos. Desarrollo.
XII.4.- Composición química y propiedades físicas.
XII.5.- Características diferenciantes de las especies de interés.
XII.6.- Bibliografía consultada.
XIV.1 - Introducción.
XIV.2 - Tipos de Riesgos en el laboratorio.
- Riesgo Físico.
- Riesgo Químico.
- Riesgo Biológico.
- Riesgo Humano.
XIV.3 - Bioseguridad.
- Definición.
- Principios.
- Organización.
XIV.4 – Funciones de la Comisión de Bioseguridad.
XIV.5 – Medidas de Bioseguridad.
XIV.6 – Bibliografía.
XV.- ANEXOS.
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II.- INTRODUCCION
Desde la creación de esta especialidad en Cuba, y con mayor resultado después del
triunfo de la Revolución, el empeño de sus especialistas ha sido investigar cada elemento
biológico y dar una respuesta que permita la identificación individual del elemento en
relación con las muestras que se analizan, esta identificación, llega a ser categórica en
las determinaciones del ADN.
Ejemplos que ilustran lo hasta aquí expresado, constituyen los estudios hematológicos en
las Ciencias Médicas, en estas se realizan las investigaciones con la sangre líquida, en
óptimas condiciones de conservación y suficiente cantidad. Sin embargo las huellas
hemáticas generalmente se ocupan secas y el tiempo de su hallazgo puede ser reciente o
no, sometidas a los efectos de temperatura, humedad, acción del soporte, etc. Estas
condiciones desfavorables inciden en las propiedades de las biomoléculas, de ahí la
necesidad de aplicar métodos especiales para la investigación de estas huellas que
permitan detectar propiedades más estables.
Los pelos son elementos biológicos propios de los animales y del hombre, su
investigación criminalística reviste gran importancia, ya que aportan elementos que
permiten vincular al autor con los posibles participantes. A partir del estudio de sus
propiedades bioquímicas y morfológicas, que constituye una peculiaridad de la Ciencia
Criminalística. En Dermatología Humana y Veterinaria, se estudian los pelos con otros
fines, sin embargo el estudio morfológico y comparativo en los pelos humanos que realiza
La Criminalística es un elemento importante para definir la relación entre el lugar del
hecho, víctima y victimario.
Así, pudiéramos mencionar muchos ejemplos que ilustran el trabajo específico que
abarca La Biología Criminalística, pero en los capítulos contenidos en este Manual,
explicaremos detalladamente las características de cada huella biológica, los
fundamentos teóricos de los métodos de investigación, así como los resultados que
hemos sido capaces de alcanzar en nuestro país entre otros. Abordamos también los
antecedentes históricos de la especialidad, aspecto que hasta el momento no había sido
escrito.
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OBJETIVOS.
Nuestra intención con esta obra, es plasmar esas experiencias, resumir con ejemplos
ilustrativos el desarrollo que ha alcanzado esta especialidad de la Criminalística, tanto el
trabajo en el lugar del hecho como en el laboratorio de las huellas y muestras biológicas.
Desde el punto de vista docente, consideramos que también será un buen recurso para la
formación de las generaciones venideras, que aunque como ciencia continuará su
desarrollo, servirá como base de los conocimientos adquiridos en esta época que nos ha
tocado vivir y la anterior a la nuestra.
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III.- ANTECEDENTES HISTORICOS.
El G.N.I. como tal, resultaba una especie de copia de la organización implantada en los
Estados Unidos por el FBI del Departamento de Justicia norteamericano para la lucha
contra el crimen organizado.
Así el FBI poseía el “Homicide Squard”, formado por pelotones o equipos entrenados
para la investigación de los homicidios, estos detectives recibían el nombre de “G-Merr”.
En la Cuba de entonces el G.N.I. contaba con el llamado Buró de Homicidios, cuyos
detectives tenían igual función en el territorio de Cuba. El FBI poseía un selecto grupo de
peritos en sus laboratorios. El G.N.I, desde 1927 creó sus laboratorios y registros de
delincuentes, etc. con fines análogos a los de sus colegas norteamericanos.
Para estos casos el G.N.I. poseía un móvil denominado “Investigadora No. 1”, dotado de
un laboratorio portátil. Con este equipo formado por detectives y peritos se llevaban a
cabo todas las investigaciones en el lugar del suceso. La organización de este “aparato”
era muy singular en cuanto a la subordinación.
Volviendo a los inicios del G.N.I., encontramos que las actividades del mismo fueron
reglamentadas en 1927 mediante el Decreto Presidencial No. 1348, de fecha 5 de Agosto
de 1927, firmado por el General Gerardo Machado y Morales. Dos años después de la
caída de Machado este Decreto fue ratificado mediante una resolución ministerial del
entonces Secretario de Gobernación Dr. Max A. Smith, en la cual el Gabinete mantenía la
dirección técnica del Buró de Homicidos y operaba la guardia operativa con los agentes
del Buró y los peritos del Laboratorio.
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con el técnico Gabriel González Figueras. El trabajo de la especialidad consistía
fundamentalmente en el análisis de las huellas hemáticas.
En las instalaciones del antiguo Laboratorio del SIM situado en Ave. 31 y Calle 114
(Hospital Militar Carlos J. Finlay), quedaron organizado el servicio de los diversos
laboratorios del Laboratorio Central de Criminalística.
La preparación técnica del primer grupo de peritos del LCC, se realizó en la URSS a
fines de 1962, y entre ellos, por la especialidad de Biología, participó el técnico González
Figueras por un período de 8 meses.
Esta colaboración con otras instituciones científicas del país, no puede circunscribirse a la
primera etapa de desarrollo de la especialidad, sino que se ha mantenido hasta nuestros
días. Vale destacar que el desarrollo científico técnico alcanzado por importantes
instituciones entre ellas, las que conforman el Polo Científico de nuestro país, han
contribuido de forma muy notable a los resultados alcanzados, materializándose esta
colaboración mediante convenios de trabajo con estos centros.
Entre las personalidades ilustres de nuestro país que contribuyeron en la primera etapa
de desarrollo de nuestra especialidad podemos citar al destacado Ingeniero Julián Acuña
Galé, botánico que trabajó hasta su muerte con el Dr. Juan Tomás Roig y Mesa, Dr.
Antonio Palacín, (bacteriólogo), Dr. Manuel Rivero de la Calle (antropólogo), Dra. Rosa
Elena Simeón, Dr. Carlos González, Ing. Alejandro Cabello y otros que harían
interminable la relación.
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Casos relevantes como la identificación de los restos óseos de combatientes caídos en la
invasión de mercenaria de Girón mediante la Antropología y la Superposición Cráneo-
Fotográfica, también aplicada en diferentes casos de muertes violentas.
A partir del año 1976 se recibió asesoramiento técnico procedente de países del antiguo
campo socialista, consistente en un adiestramiento en la técnica de electroforesis por
parte de un especialista de la RDA, un perito nuestro completó su formación en el
Instituto de Criminalística de la RDA y posteriormente se realizaron visitas de intercambio
a Bulgaria, Polonia y la URSS. En 1985 se recibió el asesoramiento de una especialista
del Instituto de Criminalística de Hungría de la especialidad de Hematología Forense y de
otro especialista de la RDA en microfibras textiles.
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Esta producción se realizó primeramente en colaboración con el Centro Nacional de
Parasitología y posteriormente se constituyó un centro de producción en la provincia de
Holguín, el cual abastece a todo el país de este importante renglón.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
2.- “El Buró de Homicidios”. Castellanos Israel. Ed. Mp. P. Fernández y Cia. S en C.
Habana, 1954.
3.- “Bajo el mando del General Benitez”. Compilación de los reporteros policiales Esteban
Yanis Pupel, del Periódico Información. Manuel Alburquenque de “Pueblo” y Manuel de
Jesús Hernández de “Luz”. Ed. Única, Habana 1943.
4.- Entrevistas a Erundino Videla, ex jefe de la Policía Secreta Nacional, en 1948- 50 por
Carlos Grenet Orbe.
5.- Entrevistas al Dr. Manuel Ramírez Nodarse, 1996-1998 por Carlos Grenet Orbe.
6.- Entrevista al Dr. José Antonio Díaz Padrón, Director del Laboratorio de Química Legal,
por Carlos Grenet, 1980.
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IV.- SANGRE
IV.1- INTRODUCCION
En los mamíferos como grupo animal más desarrollado, la sangre constituye el fluido
extracelular vital que además de mantener su función trófica esencial, adquiere otras
tales como la regulación del volumen del organismo, el transporte de gases, defensa del
organismo así como en los mecanismos de Hemostasia y Coagulación.
Como fluido, la sangre está compuesta por una parte líquida el plasma y elementos
formes (eritrocitos, leucocitos y plaquetas).
El plasma constituye entre el 55 y 60% del volumen total de la sangre que en el hombre
es de aproximadamente 79 ml/kg de peso corporal y está compuesto por proteínas,
aminoácidos libres, lípidos e iones y otros elementos disueltos en un volumen de 80 %
de agua.
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La investigación de sangre como la generalidad de las pericias biológicas y en particular
de fluidos y secreciones, persigue el objetivo de establecer la presencia de tejido
sanguíneo, diagnosticar sus características específicas y correlacionar las propiedades
bioquímicas e inmunológicas del mismo con las víctimas y/o sospechosos a fin de
establecer un rango de coincidencia que permita unido a las restantes evidencias
obtenidas, probar la relación de la sangre con los elementos indubitados objetos de
estudio.
El diagnóstico en Criminalística, debe realizarse en condiciones que difieren de la rutina
clínica, considerando que se trata del análisis de máculas hemáticas en las que se ha
depositado el estroma eritrocitario y los componentes plasmáticos, los que producto
de la desecación y de otros efectos ambientales, sufren distintos procesos de
transformación y descomposición que son necesarios conocer y estudiar con el objetivo
de dirigir la marcha analítica de investigación y ofrecer una respuesta veraz en las
pericias biológicas que se realicen.
En los primeros años del Siglo XX, seguidores del notable médico italiano César
Lombroso, tratando de demostrar sus teorías sobre la existencia de un “delincuente nato”,
realizaron estudios con diez personas confesas por crímenes o detenidos in fraganti,
haciendo énfasis en los elementos biológicos que lo diferenciaban de los no criminales,
pretendieron demostrar mediante diferencias de viscosidad, fluidez y otras propiedades
físicas de la sangre, la presencia de características individuales que debían agruparse en
un cierto número para considerar válida la existencia de criminales de nacimiento.
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A partir del descubrimiento de Landsteiner hasta la fecha, el número de sistema
isoantigénicos en los eritrocitos humanos, es superior a 20, incluyendo más de 80
antígenos. El suero de la sangre humana, se ha demostrado que contiene cerca de 40
antígenos, mientras que los sistemas de isoantígenos localizados en los leucocitos,
abarcan más de 30, muchos de estos sistemas sanguíneos, han ido incluyéndose
paulatinamente en las investigaciones criminalísticas de individualidad.
Que se trató de conocer el mecanismo del delito por el examen hematoscópico, auxiliado
del diagnóstico individual de las manchas de sangre obtenidas de distintos lugares en el
escenario del crimen, no habiéndose podido lograr dicho propósito por hallarse incluidos
en el mismo grupo sanguíneo o sea el grupo O, dos de los occisos.
El sistema de órganos y de células que reaccionan contra las sustancias ajenas, recibió el
nombre de sistema inmune del organismo.
Las sustancias que intervienen en estos procesos son los antígenos y anticuerpos cuya
definición elemental abordaremos más adelante. Estas en general son proteínas que
presentan diversas formas dentro de la especie y aún dentro de los individuos. Según
Ford, polimorfismo genético es la aparición en un mismo locus de 2 ó más alelos
de un gen o sea la variabilidad de expresión de un carácter dado, en propiedades
tales que no sean atribuibles a la mutación.
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Por otra parte, el cuerpo de la mayoría de los mamíferos, consta de 10 12-1013células
genotípicamente idénticas una a la otra, cada una de ellas naturalmente, está sometida al
riesgo de mutación. En las grandes poblaciones celulares, estas mutaciones no
constituyen un riesgo de supervivencia aunque si son reflejos individuales detectables en
los estudios genéticos. En criminalística pudieran también utilizarse estas mutaciones
como expresiones de individualidad para la identificación.
Los mecanismos de coagulación y fibrinolisis que en los seres vivos interactúan para
mantener el equilibrio hemostático, al cesar las funciones vitales, sufren un importante
desequilibrio que se manifiesta en el predominio de la actividad fibrinolítica y en una
transformación gradual de los componentes del flujo sanguíneo, produciéndose lo que se
conoce como “descoagulación postmortem”.
Desde el punto de vista médico-legal, se aplican diversas técnicas para realizar este
diagnóstico, sin embargo se reportan muchas otras más exactas por razón del estudio
electroforético mediante el estudio de los productos de degradación del fibrinógeno que
guardan una relación muy estrecha con el tiempo de muerte.
IV.3.2 ANTIGENOS
En una forma general, se puede definir el ANTIGENO como una sustancia que
introducida parentalmente en un individuo, es capaz de estimular la producción de un
ANTICUERPO, el cual reaccionará con el antígeno que lo estimuló. Generalmente un
anticuerpo producido por un determinado antígeno, reacciona sólo frente a este y no con
otro. Sin embargo, puede ocurrir que dos antígenos posean ciertos grupos químicos en
común y que un anticuerpo producido por uno de ellos, pueda reaccionar en un
determinado grado frente al otro. Esta aparente dualidad específica, se conoce con el
nombre de Reacción cruzada.
Existen cuatro conceptos que caracterizan la sustancia como antígeno: carácter ajeno,
carácter antigénico, especificidad e inmunogenético.
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Especificidad: Son aquellas propiedades que diferencian un antígeno del otro y están
condicionadas por la secuencia de los aminoácidos que forman la cadena polipeptídica,
en particular en su sitio activo o EPITOPO.
Los antígenos de grupo sanguíneo, son sustancias que están situadas en depresiones
que existen en la superficie de los glóbulos rojos y su naturaleza química aunque aún no
establecida, se asocia a polisacáridos y aminoácidos. Estos antígenos, no están situados
a un mismo nivel en la superficie del hematíe, siendo posible que algunos estén alojados
más profundamente que otros, de ahí su carácter antigénico y su estabilidad ante efectos
negativos.
1.- Antígeno heterófilo: Están repartidos en la naturaleza y por lo tanto sin ninguna
especificidad para la especie humana.
2.- Antígenos de especie: Se encuentran sólo en los glóbulos rojos humanos, aunque
son comunes a todas las personas.
3.- Antígenos específicos: Son propios de los eritrocitos humanos, aunque no están
presentes en todas las personas. Estos son los característicos de los grupos sanguíneos.
Artamonov L.T, Preserova (9) y otros, han abordado los efectos desnaturalizantes de las
condiciones externas tales como temperatura, luz U.V, humedad que afectan
decisivamente a los sistemas antigénicos menos estables.
Sistema ABO.
Sistema MNS.
Sistema Rh.
Sistema Kell.
Sistema Lutheran.
Sistema HLA (leucocitos).
Los anticuerpos son proteínas que se refieren a una u otra clase de Inmunoglobulinas
cuya síntesis se estimula después de la entrada parenteral del antígeno. Los anticuerpos
o aglutininas poseen la capacidad de interreaccionar específicamente con el antígeno lo
cual es debido a los dominios presentes en cada molécula de anticuerpo. Los dominios
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son un conjunto de aminoácidos que provocan una estructura de convergencia de la
zona CDR (zonas de reconocimiento complementario) lo que posibilita el acople
específico con el sitio activo del antígeno.
Los anticuerpos constituyen por ende uno de los factores específicos de la inmunidad.
Se conocen cinco clases de Inmunoglobulinas: IgA, IgM, IgG, IgD e IgE. La cantidad
total de inmuoglobulinas en la sangre constituye cerca del 2,5 % (residuo seco), es decir
más de 1/3 de las proteínas plasmáticas como se expresa en la tabla siguiente:
La unión de los linfocitos con las células mielómicas, se realizan con ayuda de
polietilglicol.
Isoanticuerpos: Reaccionan con los glóbulos rojos de ciertas personas. Son los
anticuerpos de los grupos sanguíneos.
Según su aparición pueden dividirse entre los que aparecen sin que se haya producido
una inmunización o estímulo antigénico a los que se denominan anticuerpos naturales y
tienen como característica principal la de actuar “in vitro” a temperaturas menores de las
del cuerpo humano; entre estas se encuentran las aglutininas anti A y anti B del sistema
AB0, MNS, P y otro grupo de anticuerpos inmunes cuya óptima reacción ocurre a la
temperatura del cuerpo humano, ejemplo sistema Rh.
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Atendiendo al medio en que reaccionan se clasifican en completas e incompletas. Las
aglutininas que reaccionan con el glóbulo rojo en cualquier medio de dilución (salino o
coloidal) son las aglutininas completas bivalentes o salinas. Por el contrario las que no
son capaces de reaccionar en medio salino se les denomina monovalentes, incompletas,
albuminoideas, etc. Las aglutininas naturales del sistema AB0 son del tipo completo.
Las reacciones de la interacción específica de los anticuerpos séricos con los antígenos
contra los cuales están dirigidas son fenómenos de superficie que no altera la estructura
primaria de las moléculas involucradas y tienen como característica:
1.- Especificidad: El anticuerpo puede fijarse únicamente con el antígeno del cual
procede. Este concepto se aplica a la detección de todos los sistemas de grupo
sanguíneo ya que las reacciones pueden ocurrir in vivo o in vitro mediante la Adsorción.
Es el denominado principio “llave-cerradura” (Anexo No.4).
Aglutinación
Precipitación
La actividad de los antígenos de la célula roja varía con el tiempo, estas variaciones están
condicionadas por las condiciones ambientales a que estuvieran expuestas las máculas,
pudiendo en los casos severos, llevar a la inactivación de las propiedades. Por lo
general, cuando se produce un secado rápido, se retienen por mayor tiempo las
propiedades inmunológicas.
Por otra parte los efectos ambientales fundamentalmente el medio húmedo, facilitan el
crecimiento de microoorganismos que actúan como contaminantes, llegando a producirse
durante el diagnóstico de la agrupación falsas aglutinaciones por expresión predominante
del antígeno de los microorganismos (Maza y colaboradores, 1995).
Atendiendo a que en las condiciones de la sangre seca, los hematíes están destruidos y
no es posible visualizar las reacciones antígeno-anticuerpo por el fenómeno de
aglutinación, es necesario aplicar métodos indirectos.
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En sangre seca, al realizar los estudios de individualidad, debe preveerse en lo posible
tomar áreas maculadas, próximas a la zona de mayor intensidad (costras), desechando
de ser posibles éstas al considerar que durante el proceso de secado, tienden a quedar
hacia las áreas exteriores de la mácula, los componentes del plasma, concentrándose en
el centro de ésta, los estromas eritrocitarios atendiendo a su mayor densidad.
Por otra parte, al trabajar en sangre seca, vale mencionar que para ofrecer una respuesta
pericial, cualquiera sea la determinación que se realice, constituyen requisitos
indispensables el trabajo con controles y obtener un resultado sin término de dudas, para
lo cual deberán realizarse cuantas repeticiones sean necesarias, siendo lo anterior un
aspecto inviolable según establecen las buenas prácticas de laboratorio.
1.- PROYECCION: Cuando la sangre sale proyectada con cierta fuerza, bien
describiendo una curva parabólica o en caída libre.
3.- CONTACTO: Cualquier objeto ensangrentado, al contactar con un receptor, deja una
impresión, en los casos de mayor concentración se le denomina IMPREGNACION.
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1.- Posibilidad de Orientación
2.- Certeza.
Las reacciones de posibilidad son aquellas orientadoras, presuntivas, muy sensibles que
indican la probable existencia de sangre. En esta gama de pruebas las hay físicas como
la iluminación con UV que produce una fluorescencia inespecífica para todos los
compuestos orgánicos, basadas en la generación de color u organolépticas (olor, color,
impregnación) cuyo resultado negativo es categórico ya que existen otras sustancias que
pueden tener similar comportamiento.
El principio básico del método de Adler o Bencidina acética el más usado como
orientación, reside en la propiedad de la hemoglobina como otras peroxidasas de unirse
reversiblemente con el oxígeno en reacciones REDOX, en función del pH del medio. La
unión de la Hemoglobina con el oxígeno, responde a:
Por otra parte existen métodos basados en la absorción atendiendo a las propiedades
que tienen las sustancias de absorber luz a determinada longitud de onda, es la conocida
reacción de Takayama. Se utilizan también la Cromatografía en placa fina basada en el
Rf característico de la sangre.
Comprende el conjunto de marcadores genéticos que una vez tipificados en las muestras
de víctimas y sospechosos y reconocido en las máculas hemáticas, permiten establecer o
no la relación entre ellos.
1ra.- La mácula coincide con los sistemas de grupos o marcadores analizados lo que
conlleva a una conclusión pericial de correspondencia en la que deben especificarse los
marcadores para los que hay coincidencia.
Además de los sistemas o antígenos de grupo ya citados (ABO, MNS, Rh, Lewis, etc.)
que constituyen la etapa inicial en el diagnóstico individual, se analizan atendiendo a sus
polimorfismos sistemas proteicos como:
Se presenta a continuación una breve reseña de los principios que sustentan los métodos
empleados en el diagnóstico de individualidad mediante los estudios de los grupos
sanguíneos en particular del Sistema ABO.
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Establecimiento de aglutinógenos en manchas de sangre por el Método de
Absorción-Cuantitativa. (1981).
Durante la realización de estos métodos debe considerarse que existe un grado desigual
de estabilidad entre las aglutininas beta y alfa siendo mayor en las primeras así como la
posible influencia de fenómenos no específicos que producen aglutinaciones fácilmente
reversibles por ligeros toques en la preparación.
Para la interpretación de los resultados se deben considerar los casos de los grupos O y
AB que portan ambas o no portan aglutininas respectivamente.
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A.- Método directo: Basado en la propiedad de eritrocitos y sueros homólogos de
aglutinarse cuando se enfrentan. Es válido para la detección de los antígenos de los
sistemas ABO, MNS y Rh.
B.- Reacción Cruzada o Método de Schiff: En sangres bien conservada, donde es
posible la decantación de los elementos formes del plasma, se investigan por
separado ambos componentes enfrentando el plasma a antígenos conocidos y los
eritrocitos a la batería de antisueros conocidos, produciéndose reacciones de
aglutinación ante los reconocimientos antígeno-anticuerpo homólogos.
Otras determinaciones.
IV.6 PERSPECTIVAS.
1.- Giblett (E.R)- Genetics Markers in human blood. Oxford, Londres, 1975.
2.- Landsteiner Karl (1900). Citado de Hematología Clínica. Ed. Rev., 1972.
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3.- Weiner (R.R) et Sangre (E). Blood group in man. Edimb., 1975.
4.- Levine (T) et al. Citado de Hematología Clínica. Ed. Rev., 1972.
7.- Cavallisforza M. Ford F. The distribution of the human blood groups. N.Y. Esh., 1935.
REFERENCIAS GENERALES.
V.1 INTRODUCCION
Los delitos sexuales presentan en sí los más variados aspectos de la alteración de las
relaciones sexuales; violación de los menores, violación valiéndose del estado indefenso
o utilizando la fuerza física, acciones depravadas, abusos deshonestos, estrupo, etc.
En todos los casos de delitos sexuales una de las pruebas fundamentales son las huellas
de líquido seminal.
La importancia consiste no solo en su identificación, sino que al igual que el resto de las
secreciones del organismo humano, posee las propiedades de grupo, por lo que es
posible determinar el grupo sanguíneo en él, pudiendo establecer una relación entre el
semen y el individuo a investigar.
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Como semen o líquido espermático cuando se obtiene directamente del sujeto para
una investigación de fertilidad.
El estudio del líquido espermático bajo cualquiera de estas formas, resulta de interés para
la criminalística relacionado con los delitos sexuales.
Entre las huellas que pueden resultar de la comisión de un delito contra la libertad sexual
figuran las manchas de esperma sobre las ropas, sobre el propio sujeto o sobre la
víctima, constituyendo así una prueba de la mayor importancia.
Además la presencia de esperma en la vagina puede ser el único dato para establecer el
diagnóstico de la cópula en una mujer ya desflorada.
Por otra parte el abuso deshonesto se materializa en la relación de actos libidinosos, cuya
ejecución quedaría automáticamente demostrada por la presencia del líquido espermático
sobre la víctima, siempre que las circunstancias del caso no merecieran una tipificación
de mayor gravedad, como violación en grado de tentativa.
El esperma es un líquido filante, de color opalino, que tiende a amarillo verdoso cuando
pasa el tiempo y de olor típico.
El líquido espermático contiene unos 100 millones de células por cm 3. El esperma es muy
característico desde el punto de vista morfológico, el espermatozoide es tan peculiar
entre todas las células que cuando se ha visto uno al microscopio, no se olvida jamás.
Bioquímicas:
Glúcidos.- fructuosa, ribosa, inositol y sorbitol.
Compuestos nitrogenados., gran concentración de aminoácidos libres, aminas
(espermina, colina y etanolamina) y ergotionina.
Antigénicas:
Albúmina, dos o tres -globulinas (una de ellas es una fosfatasa ácida y otra una
glicoproteína), dos -globulinas (una de ellas es una siderofilina) y una -globulina.
De los 8 antígenos descritos en el plasma seminal, cuatro son específicos del mismo, es
decir, tienen especificidad del órgano.
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Enzimáticas:
Fibrinolisina, aminoxidasa, fosfatasa ácida, fosfatasa alcalina y 5-nucleotidasa.
Lípidos:
Lecitinas y ácidos grasos (prostaglandinas).
Minerales:
Cinc y calcio.
Sobre la piel, cuando se deseca, adopta el aspecto de una película fina, como de
pegamento, que clásicamente se compara a un “rastro de caracol”. Estas manchas
deben buscarse tanto en la víctima como en el sospechoso, a nivel de zonas típicas:
Pubis, cara interna de los muslos y labios mayores. Los pelos impregnados tienen un
aspecto como engomado.
Sobre tejidos absorbentes forma unas manchas típicas, con una característica tiesura,
como si el tejido estuviera almidonado. Si la mancha es reciente tiene un olor típico.
La morfología de las manchas es irregular, con unos contornos bien delimitados, que
han justificado su comparación con “cartas geográficas”. Adquieren rigidez como si
estuviera apergaminado o almidonado y los bordes son generalmente más oscuros.
Si se debe a una eyaculación se produce una gran zona manchada con su típico
aspecto en mapa.
Si se debe a una limpieza del meato o al enjugamiento del miembro, la mancha no
tiene ese aspecto típico.
Las prendas sospechosas deben ser examinadas a la luz ultravioleta de Wood. Las
manchas de esperma dan una fluorescencia blanco-amarillenta, que va ganando amarillo
con el tiempo. El examen de fluorescencia permite diferenciarlas de las manchas debidas
a otros productos, como orina (fluorescencia celeste), pus, moco o secreción vaginal. Se
trata de una prueba de gran valor de orientación y localización.
Marcha analítica para el diagnóstico de las manchas de esperma (Anexo No. 9).
VI.1 INTRODUCCION
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Muchos siglos después, gracias a la invención de las lentes de aumento, se descubrió
que detrás de esa estructura macroscópica existe todo un mundo de dimensiones
microscópicas.
Por lo tanto, la célula es una unidad morfológica y fisiológica en la estructura de los seres
vivos, así como el átomo lo es en la estructura química.
En las huellas de sangre pudiéramos con esto no solo llegar a concluir el grupo por
determinado sistema, sino que con las investigaciones citológicas, puede determinarse si
la sangre es de origen vaginal, nasal, bucal o de alguna otra parte del cuerpo humano.
Constituye también objeto de estudio de esta rama, la determinación del sexo en
diferentes elementos biológicos.
En un delito sexual es de suma importancia el hallazgo tanto de las células espermáticas
en las prendas de vestir de la mujer, como células vaginales en las prendas interiores del
hombre.
En la sangre seca, sólo con una porción de 0,5 cm 2, es posible la realización de esta
investigación que se basa en técnicas de tinción y observación al microscopio de
fluorescencia para la detección de la cromatina Y, la que se presenta en los neutrófilos y
eosinófilos como una semiluna tanto en la membrana del núcleo como en su superficie.
En el caso de pelos arrancados (con envoltura vaginal), es posible la detección del sexo
en estas células de la raíz, realizando el proceso de extracción a partir de ellas. En este
caso en el que no es posible una mezcla de sexo, con sólo 5 células investigadas y
observando en tres de ellas la cromatina Y y en ninguna la cromatina X, se trata de un
pelo procedente de un hombre.
Actualmente se emplea la técnica de ADN para determinar el sexo (Ver Capítulo VIII).
28
VI. 4 SECRECIONES FEMENINAS
Secreciones vaginales.
Secreciones menstruales.
Secreciones vaginales:
El órgano genital femenino está recubierto de células epiteliales que contienen gran
cantidad de glucógeno, el que junto con el almidón constituyen los polisacáridos de
reserva más importantes.
El contenido de glucógeno en las mujeres varía de acuerdo con la edad, estando ausente
en la edad de la infancia, la pubertad y la menopausia. Se observa en abundancia a partir
del período de pubertad y durante el embarazo.
Células basales: son las más pequeñas, con un núcleo relativamente grande en
correspondencia con el diámetro de la célula, se colorea intensamente con
Hematoxilina, no siendo posible la observación de la cromatina.
Células superficiales: son las más maduras del epitelio, con un núcleo pequeño y
abundan durante la etapa de la pubertad y anterior a esta.
Secreciones menstruales:
Las células endometriales son células agrupadas, con poco citoplasma y de núcleo
grande en relación con el citoplasma. Las células se superponen, por lo que es difícil
definir el citoplasma de una y otra.
29
Investigar una huella de sangre en la zona vaginal pudiendo estar mezclada con
secreción vaginal o con semen.
INVESTIGACIONES ANALITICAS.
Marcha analítica para el diagnóstico de las secreciones femeninas. (Anexo No. 10).
La cavidad bucal está cubierta por la mucosa y esta está formada por varias capas de
tejido epitelial y conjuntivo.
La saliva es un líquido alcalino claro, algo viscoso, secretado por las glándulas salivales.
Contiene agua, mucina, albúmina, tialina, globulina, leucocitos, restos epiteliales,
carbonatos y fosfatos alcalinos, sulfucianato de potasio y algunas toxinas. Sirve para
humedecer y ablandar los alimentos, facilitando de este modo la masticación de los
mismos, por el fermento tialino que convierte el almidón en ázucar.
Las principales glándulas salivales son las parótidas, submaxilares y sublinguales; existe
además un gran número de glándulas bucales pequeñas, constituidas fundamentalmente
por células epiteliales que no contienen glucógeno.
Las células intermedias que conforman este epitelio son relativamente mayores que las
existentes en las secreciones vaginales.
La saliva por lo general, se investiga en las colillas de los cigarros y tabacos y en algunos
casos en los sobres de correo y máculas.
La saliva por ser una secreción, pertenece al mismo grupo (en los individuos secretores)
que el semen, secreciones vaginales y la sangre en un individuo.
30
Para determinar la presencia de saliva en una mácula, se investiga la presencia de la
amilasa a través de los reactivos de Almidón y Lugol, obteniéndose como resultado una
reacción colorimétrica.
INVESTIGACION ANALITICA.
Marcha analítica para el diagnóstico de las manchas de saliva (Anexo No. 11).
Región respiratoria.
Región olfatoria.
Estas están cubiertas de mucosas. La mucosa respiratoria está constituida por varias
capas de epitelio que a su vez está formada por células cilíndricas y epidérmicas.
Las células cilíndricas tienen un núcleo grande, con citoplasma de forma ovalada, aunque
también alargada en forma de cono, aparecen generalmente agrupadas, no presentan
glucógeno en el citoplasma.
INVESTIGACION ANALITICA.
Marcha analítica para el diagnóstico de las manchas de secreción nasal. (Anexo No. 12).
VI.7.1 ORINA
La orina como excreción humana puede encontrarse en el sitio del suceso en forma
líquida si las condiciones son adecuadas, o en formas de máculas sobre diferentes
soportes.
VI.7.2 SUDOR
31
El sudor constituye otra forma de eliminación no solo del agua sino también de diversas
sales. Contiene aproximadamente el 0.4% de NaCl, sustancias orgánicas en pequeñas
cantidades y aminoácidos (4).
La serina esta contenida no solo en el sudor, sino también en la sangre. Sin embargo la
cantidad en el sudor es considerablemente mayor. La reacción de la serina, en la
metodología y técnica conocida de la investigación prácticamente es específica y útil para
fines jurídicos - médicos.
Es una reacción sensible de gran especificidad, se puede trabajar con máculas hasta de
hasta 4 meses con sólo aumentar unos miligramos del material a investigar.
Entre los elementos que componen las heces fecales se encuentran los pigmentos
biliares: estercobilina (estercobilinógeno) y la bilirrubina, los cuales son eliminados
normalmente en cantidades variables que van desde simples trazas hasta niveles
apreciables, resultando muy raras las muestras de heces fecales con ausencia de estos
pigmentos.
VII. TEJIDOS
VII.1 INTRODUCCION
32
Se llama tejido a cada uno de los diversos agregados de elementos celulares,
entrelazados o adheridos entre sí, que forman las partes sólidas de los cuerpos
organizados como son el tejido adiposo, conjuntivo, muscular, óseo, entre otros.
Dentro de los delitos más frecuentes de la Biología Criminalística en Cuba están las
relacionadas con los hurtos y/o HSIGM. Solamente se contaba con técnicas
inmunológicas y de contrainmunoelectroforesis con el fin de determinar la especie animal
en maculaciones hemáticas sobre pruebas materiales y tejido muscular, así como el
marcador genético de hemoglobina por técnicas electroforéticas para las máculas y
tejidos pero además para el tejido se debe tener en cuenta los caracteres bioquímicos
genéticos de las especies y las posibilidades de detectar sus variantes polimórficas por
medio de técnicas electroforéticas, la aplicación de estas determinaciones nos permite
detectar varios sistemas proteicos simultáneamente. Estos son hemoglobina, albúmina,
postalbúmina, transferrina y postransferrina.
Las determinaciones que nos permiten el diagnóstico específico (especie) en los tejidos
se basan en las reacciones antígeno anticuerpo descritas en el capítulo de SANGRE.
Los caracteres bioquímicos (entendido en una manera amplia) tales como grupo
sanguíneo, proteínas de transporte, enzimas y otros son polimórficas al menos en
algunas especies. Entre los más estudiados se destacan la hemoglobina, proteína
conjugada la cual contiene cuatro grupos hemo y globina, dada su función en la
transportación de oxígeno. Las transferrinas, proteínas encargadas del transporte de
hierro de los sitios de adsorción del intestino. La albúmina que es de gran importancia
fisiológica con varias funciones en el organismo (3).
Esta técnica tiene como objetivo la utilización de un método capaz de estudiar cinco
sistemas polimórficos en un sólo sistema en Gel de Poliacrilamida con el consiguiente
ahorro de tiempo, materiales y muestras así como lo simple de su aplicación.
Hoy en día en Cuba no sólo se trabaja el tejido muscular de los animales aunque sí es la
mayoría por la cantidad de delitos de HSIGM, sino que es posible individualizar a
personas a través de técnicas donde es posible detectar su agrupación al igual que en la
sangre, saliva y semen.
Esto nos permite individualizar a través del tejido muscular a personas por la técnica
establecida para el ADN ya que en tejido animal resulta extremadamente costoso.
3.- Grahne Bo, et al. Horizontal Poliacrylamid Gradient Gel Electroforesis for the
Simultaneus Phenotyping of Transferriny, Posttransferrin, Albumina and Postalbumina in
the Blood Plasma of Gattle Anim Blood Grps. Biochem. Genetic. 8: 127-137. (1977).
34
VIII. ADN
VIII.1 INTRODUCCION
Los avances en el campo de la Biología Molecular en los últimos años, han proporcionado
los medios para lograr el análisis individual de los genes, entre ellos el conocimiento de la
genética de bacterias y las enzimas de restricción que dieron lugar al desarrollo de la
tecnología del ADN recombinante, lo que hizo posible el aislamiento de cantidades útiles
de genes individuales. Otros descubrimientos importantes fueron el desarrollo de los
métodos de secuenciación, la síntesis de oligonucleótidos y el descubrimiento más
importante: la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (2).
El método de análisis de ADN, se utilizó por primera vez en el campo forense en 1985, en
el Reino Unido y se aplicó en los Estados Unidos en 1986 por laboratorios comerciales y en
1988 por el FBI. Estos laboratorios demostraron la potencialidad de esta técnica en el
campo forense, comprobando que las muestra forenses contenían cantidad de ADN
suficiente para ser analizada y que este permanecía tan estable que permitía ser tipado o
caracterizado.
Durante esta etapa fue posible materializar este trabajo gracias a la colaboración de
diferentes instituciones como el Hospital Hermanos Ameijeiras, Centro de Ingeniería
Genética y Biotecnología y Laboratorio de Investigaciones de la Defensa Civil.
El ADN es la sustancia activa de los genes y porta todos los mensajes codificados de la
herencia en todas las células vivas: animales, plantas, bacterias y otros microorganismos.
En el humano, la información portada por el ADN aparece en todas las células que tienen
núcleo incluyendo los leucocitos de la sangre, células espermáticas, células que rodean la
raíz del pelo, la saliva y los tejidos incluyendo el tejido óseo (5).
Existen cuatro tipos de bases en el ADN: dos son del tipo pirimidínicas con un solo anillo: la
timina (T) y la citosina (C). Las otras dos son del tipo púricas y poseen dos anillos: la
adenina (A) y la guanina (G).
Las cuatro bases se agrupan en combinaciones de tres nucleótidos para codificar diferentes
aminoácidos y constituir los bloques constitutivos de las proteínas. Un gen, que es la
unidad básica de la herencia es una secuencia de alrededor de 1000 a 2 millones de
nucleótidos. Se estima que el genoma humano contiene unos 50 000 a 100 000 genes. El
número total de un set de 23 cromosomas (genoma haploide) se estima en los 3 billones
(3).
Las variaciones de la secuencia de bases en las partes que codifican proteínas da lugar al
polimorfismo de las proteínas (diferentes variantes de una misma proteína con determinada
36
función biológica) o en la aparición de enfermedades de origen genético como la fibrosis
quística y fenilcetonuria, sin embargo las zonas del genoma más útiles para los forenses lo
constituyen las regiones no codificantes del ADN.
Cada uno de estos nucleótidos se une a otros tres: dos de ellos están en el mismo eje,
conformándose una cadena lineal, mientras que el tercero pertenece a otra cadena
dispuesta paralelamente, formando un dúplex o doble hélice, adoptando una estructura
tridimensional que se conoce como del tipo B que es la más frecuente, presenta como
características generales el enrollamiento a la derecha de las cadenas, las dos cadenas son
antiparalelas y están envueltas una con la otra, de tal forma que no se pueden separar sin
desenrollar la hélice, las bases están ubicadas en el interior de la hélice mientras que las
cadenas fosfato y el azúcar están en la periferia (3).
Cada base unida a la base correspondiente en la otra cadena forma un plano casi
perpendicular al eje de la hélice y sólo se pueden acomodar o parear en dos formas A con
T y G con C y viceversa. La geometría de estos pares de bases se denomina pares de
Watson y Crick.
Ambos pares de bases son intercambiables pudiendo ser reemplazadas unas por otras en
la doble hélice sin alterar las posiciones del azúcar y el fosfato. Cualquier otro tipo de
asociación entre las bases distorsiona la doble hélice, por lo que se refiere como una
propiedad la característica de que una cadena es complementaria a la otra, de tal forma
que si un segmento de cadena tiene la siguiente secuencia: AGTCGCTGAC la
complementaria será TCAGCGACTG (Anexo No. 14).
Se han encontrado otras estructuras de la molécula de ADN que son las conformaciones Z
y A pero son menos frecuentes y se han reportado que algunos segmentos de ADN de tipo
“B” adopte otras conformaciones como un mecanismo de interrupción de la regulación de la
expresión genética. Estas conformaciones se diferencias en la forma que adopta la doble
hélice, el número de pases por vuelta y otras características estructurales (1).
Las moléculas de ADN son muy grandes y de un elevadísimo peso molecular, de forma
extremadamente alargada, lo que la hace muy susceptible de sufrir daños mecánicos por
manipulación.
Las moléculas de ADN adoptan una estructura de superenrollamiento que puede ser
positivo o negativo y la adopción de una u otra forma depende de las funciones que en ese
momento realice la molécula, el superenrollamiento negativo o desenrollamiento prepara la
molécula para la replicación, recombinación y transcripción, mientras que el positivo
compacta la molécula de forma muy eficiente, aunque dificulta la separación de las hebras.
37
El genoma eucariótico posee un elevado grado de organización estructural, aunque
contienen un exceso de ADN comparado con la cantidad que pudiera esperarse para
codificar proteínas (1).
Moderadamente repetitivo.
Altamente repetitivo.
El ADN moderadamente repetitivo está formado por secuencias que están presentes en
350 copias en cada genoma.
Los minisatélites o VNTR (Variable Number of Tandem Repeat) presentan una longitud
de menos de 20 pares de bases, mientras que los microsatélites o STR (Short Tandem
Repeat) presentan de 2 a 4 pares de bases (4). La alta informatividad de estas regiones
las hacen muy útiles para fines identificativos, tanto para las pruebas de paternidad como
para lograr el diagnóstico de la individualidad genética.
Según los reportes bibliográficos más recientes, se está trabajando en lograr la uniformidad
de los marcadores que se utilizan en cada laboratorio forense, y en muchos laboratorios se
han ido incorporando los microsatélites o STR, ya que al tener la longitud del segmento que
se repite más pequeña, facilita aún más el análisis del ADN muy degradado y no interfieren
en la determinación algunos contaminantes que sí lo hacen en el análisis de los
minisatélites. Por otra parte requieren menos cantidad de ADN para el análisis (4,6,7).
El ADN reúne determinadas características que lo hacen útil para la investigación forense
que son las siguientes (3):
3.- Debido a que se encuentra presente en todos los núcleos celulares es posible comparar
el ADN obtenido de un material biológico y compararlo con otros, ejemplo manchas de
sangre, muestras de sangre líquida, huesos, tejidos, raíz del pelo, ya que el ADN obtenido
de todas estas fuentes presenta la misma expresión.
38
4.- Las largas cadenas de ADN, compuestas por decenas de miles de pares de bases,
presentan regiones en las cuales los pares de bases se repiten de una forma secuencial y
determinada, específicas en longitud y localización para cada persona. El polimorfismo está
dado por el número de veces en que esa secuencia específica se repite. Por ello el ADN se
considera como una "huella dactilar molecular" o "huella dactilar genética" específica para
cada individuo, excepto para los gemelos univitelinos que presentan la misma estructura de
ADN.
El ADN puede ser extraído de cualquier tipo de material biológico: leucocitos, semen, raíz
capilar, tejidos o huesos.
De acuerdo al material de que se trate se utilizan diferentes técnicas, de ellas las más
usadas son las siguientes:
Debido a que el ADN se encuentra dentro del núcleo de las células, es posible, en caso de
exudados vaginales y máculas de semen en los que hay presente una mezcla de células
vaginales y espermáticas, realizar una lisis diferencial, primeramente del material femenino
en el cual no se lisan los espermatozoides, separándose éstos por centrifugación, y
posteriormente el ADN que contiene las células espermáticas es lisado mediante la acción
de una proteasa y un agente reductor. Este proceso permite obtener simultáneamente ADN
procedente de la víctima y del autor del hecho con una sola muestra (10).
Cuando se trata de tejidos óseo se procede a pulverizar los mismos con nitrógeno líquido y
se realiza primero un proceso de descalcificación por tratamiento con EDTA, posterior
digestión con Proteinasa K y precipitación de las proteínas con solventes orgánicos. En este
tipo de muestras es necesario concentrar y dializar mediante tubos especiales
denominados Centricon, que permiten purificar los ADNs obtenidos (11, 12).
Para los tejidos se puede utilizar un proceso similar al de los huesos y también se emplea
un método que utiliza CTAB en la digestión.
Se pueden utilizar para estos fines la técnica de Southern, que consiste en digerir el ADN
obtenido con enzimas de restricción, su separación en un gel de electroforesis y
posteriormente se transfieren los fragmentos de ADN digeridos a un soporte sólido
(membrana de nitrocelulosa).
Este filtro es hibridado con una sonda previamente marcada con sustancias radioactivas,
las que se unirán a los fragmentos de ADN correspondientes de acuerdo a la
complementariedad de las bases. Finalmente se coloca el filtro con una placa de Rayos X
39
en un proceso de autorradiografía y se obtiene un patrón de bandas. Esta técnica tiene la
desventaja de requerir gran cantidad de ADN, utiliza sustancias radioactivas y largo tiempo
de ejecución. Esta técnica fue la primera que se aplicó y aún continúa aplicándose en
muchos laboratorios (3).
Para poder amplificar un pequeño segmento de ADN es necesario contar con los siguientes
elementos:
Este proceso ocurre por cambios sucesivos de temperatura que permiten, primero la
separación de las cadenas, segundo: unión de los "primers" a la secuencia complementaria
en la región de interés y tercero incorporación de nucleótidos libres por medio de la enzima
Taq DNA Polimerasa. A cada uno de estos pasos se les denomina ciclos y se producen
unas 30 ó 35 veces.
Para el caso de los microsatélites los productos amplificados se detectan por electroforesis
en acrilamida desnaturalizante y tinción con plata. En los geles se aplican los Ladders de
alelos que son una mezcla de los posibles alelos que pueden encontrarse y permiten tipar
o identificar los alelos presentes en cada una de las muestras estudiadas (6).
El trabajo con kits comerciales facilita el trabajo del laboratorio, pues además de garantizar
la calidad se han desarrollado los sistemas denominados Multiplex, (6) que permiten
estudiar varios marcadores de manera simultánea, disminuyendo notablemente los tiempos
de análisis (Anexo No. 16).
El análisis del ADN con fines de estudiar la individualidad genética se logra mediante el
análisis de regiones altamente polimórficas.
En estudios recientes se reporta el análisis del ADN mitocondrial, que está contenido dentro
de las mitocondrias y tiene una altísima estabilidad, presenta también regiones
hipervariables, altamente polimórficas que los hacen útiles para fines identificativos en
muestras muy antiguas, lo que permite su aplicación en estudios de restos óseos con fines
40
antropológicos o históricos. En este caso se compara la secuencia de los fragmentos
amplificados con el de la madre o cualquier descendiente por la vía materna, por lo que
este análisis no se aplica para estudios de relación filial.
En el caso del ADN mitocondrial tiene la ventaja de que el número de copias es mucho
mayor que el ADN nuclear, del cual está presente una copia por célula. En el caso del ADN
mitocondrial se emplea como parámetro de descarte y no identificativo.
VIII.5 PERSPECTIVAS
Para poder determinar la individualidad genética, resulta imprescindible contar con una
base de datos, o sea la frecuencia alélica de cada uno de los marcadores en nuestra
población lo que permitirá dar una respuesta de correspondencia entre los genotipos
detectados en las muestras investigadas y la probabilidad de que se encuentre un individuo
con similares características en la población.
El futuro de esta técnica, que ya está siendo instituido por países altamente desarrollados
como Inglaterra, E.U y otros, es la creación de un Banco de ADN, consistente en los datos
del tipaje de determinados individuos (población penal) lo que ha permitido el
esclarecimiento de casos archivados en los laboratorios.
2.- Kobilinsky, 1990, “Systematic Studies on Parameters Influencing the Performance of the
Polymerase Chain Reaction, J. Clin. Chem. Biochem/Vol. 28, No. 1
4.- 1993, DNA Recomendations - statement by the DNA Commission of the International
Society for Forensic Haemogenetics concerning the National Academy of Sciences Report
on DNA Technology in Forensic Science in the USA, International Journal Legal Medicine
41
5.- National Research Council, 1992, “DNA Technology in Forensic Science”.
7.- Gill et al. 1994, “Report of the European DNA profiling group (EDNAP) towards
standardisation of short tandem repeat. Forensic Science International, 65, 51-59.
10.- Robertson et al., 1995, “Forensic applications of a rapid, sensitive and precise
multiplex analysis of the four short tandem repeat loci HUMvWF31/A, HUMTH01,
HUMF13A01 and HUMFES/FPS, Electrophoresis, 1995 16, 1568-1576.
11.- Mitchell M. et al., 1993, “Mitochondrial DNA Sequence Analysis of Human Skeletal
Remains: Identification of Remains from The Vietnam”, JFSCA; Vol 38, No. 3, PP 542-553.
12.- Gill et al, 1994, “Identification of the remains of the Romanov family by DNA analysis”,
Nature Genetics Vol 6, Feb 1994.
42
IX. PELOS
IX.1 INTRODUCCION
En el campo de las Ciencias Forenses el estudio del cabello tiene un interés identificativo
y toxicológico. Desde el punto de vista toxicológico se ha producido un incremento en su
uso como material de biopsia dada la facilidad de obtención de esta muestra y su gran
durabilidad, permitiendo además realizar estudios en cadáveres aún transcurridos varios
años del fallecimiento (1). El cabello como muestra con fines identificativos tiene gran
valor ya que esta es una huella frecuentemente hallada en la escena donde se ha
cometido un crimen, siendo en muchos casos el único elemento para inculpar o excluir a
un sospechoso.
En el campo de la medicina forense podemos referir que muchos patólogos han utilizado
el análisis de esta muestra para establecer la causa de la muerte en restos de cadáveres
descompuestos o momificados, sobre todo si ésta se ha producido por la ingestión de
modo accidental o premeditado de tóxicos metálicos tales como el arsénico, el talio, el
mercurio o el plomo, dada la característica de los mismos de acumularse en el cabello sin
sufrir variaciones aún transcurridos varios años de la muerte (9).
En la practica forense desde hace unos años se ha comenzado a aplicar el estudio del
ADN en la individualización de las huellas biológicas mediante la utilización de técnicas
como la de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) lográndose establecer el origen
de la sangre, las secreciones, etc. (12).
Para el análisis de los cabellos cualquiera que sea el objetivo, se requiere de un riguroso
proceso de colección y preparación de las muestras antes de ser sometidas a los análisis
para evitar llegar a resultados que conlleven a interpretaciones equivocadas (1).
43
Uno de los aspectos más importantes en la identificación forense de los pelos lo
constituye el hecho de poder obtener la mayor información en una muestra tan
insignificante como un pelo o fragmento de pelo, por lo que el uso en su análisis de
microtécnicas de alta sensibilidad adquiere una importancia primordial.
En el estudio químico del cabello se utilizan diversas técnicas de análisis tales como la
espectrometría de absorción atómica, la activación neutrónica, la emisión de rayos X con
protones inducidos (PIXE), estas técnicas permiten la cuantificación de metales y
recientemente se ha introducido el uso de la cromatografía gaseosa y los métodos de RIA
para la detección de drogas (13,14,15).
Así mismo técnicas microanalíticas como la espectrometría de fluorescencia de rayos X y
el micro PIXE permiten establecer la concentración y la distribución de los elementos
traza tanto longitudinalmente como transversalmente en un simple pelo, lográndose
además distinguir el origen exógeno o endógeno de los elementos químicos detectados
(16,17).
Los primeros reportes en Cuba sobre la utilización del cabello con fines identificativos
data de los años 1,700 (21), aunque estos estudios estaban solo limitados a los aspectos
macroscopicos del pelo, color, forma, etc. Posteriormente estos estudios se fueron
ampliando hacia el análisis de los aspectos microscópicos de interés en esta muestra
(22).
Independientemente del interés con que sea sometido a análisis el pelo existe un aspecto
fundamental y es el relacionado con la interpretación de los hallazgos obtenidos, tanto a
través de su estudio morfológico, químico o serológico.
Desde los años 1800 existen publicaciones donde se refiere la importancia del análisis de
los pelos con fines forenses. En el libro "El siglo de la investigación criminal" se cita
como la primera investigación forense del cabello la realizada en el año 1847 durante la
investigación de un hecho de asesinato y donde fueron hallados pelos en el arma
utilizada lo que permitió probar la culpabilidad del autor.
Desde hace muchos años ha sido demostrada la importancia del estudio del cabello no
solo como huella con fines identificativos sino como para la orientación en el diagnóstico
de las intoxicaciones producidas por talio, dada las deformaciones que este metal
produce en el extremo radicular del pelo (9,23,24).
Una de las primeras investigaciones utilizando el cabello como material de biopsia con
fines forenses fue la realizada en los pelos de Napoleón y donde se hallaron
concentraciones elevadas de arsénico, lo que reforzaba la hipótesis de envenenamiento
utilizando este metal (25).
En Cuba el uso del cabello con un interés identificativo de los años 1780 en este periodo
los esclavistas necesitados de identificar a sus esclavos crearon un sistema en que
uno de los rasgos a valorar era el cabello de acuerdo a sus características macroscópicas
fundamentalmente el color (21).
En el año 1933 el doctor Israel Castellanos publica el primer artículo en Cuba titulado "El
pelo en técnica policial" pero el trabajo que se realizaba en los laboratorios de Medicina
Legal y la policía estaban dirigidos hacia el estudio identificativo de la sangre y la
determinación de tóxicos en vísceras y fluidos biológicos.
44
En el año 1949 el mismo autor presenta en el Primer Congreso Americano de Medicina
Legal un artículo titulado "Microscopía en la Investigación Criminal" donde se refiere la
importancia del estudio de fibras, polvo, proyectiles y cartuchos en la investigación de
hechos criminales. En este artículo la técnica utilizada en el análisis de las fibras era la
microscopía óptica lo que limitaba el estudio en aquel entonces solo a los aspectos
morfológicos estableciéndose en el caso de los pelos la especie y algunos rasgos de
semejanzas con determinado individuo a través del color y la forma.
Algunos trabajos relacionados con el estudio del diámetro del cabello en poblaciones de
interés forense fueron realizados en Cuba en el año 1974 por García N. y Grenet C. con
vistas a lograr establecer parámetros que permitieran llegar a su individualización no
obstante los resultados obtenidos brindaron muy pocas posibilidades en este sentido.
Sobre el uso del cabello con fines toxicológicos no obstante referir la literatura
especializada sus posibilidades en el diagnóstico de las intoxicaciones con arsénico
(26) y en las intoxicaciones con talio (9) en Cuba no se conocen referencias de su uso
con estos fines hasta el año 1983 en el diagnóstico de casos de muerte por
envenenamiento accidental con sulfato de talio (15).
Desde el año 1963 hasta la década del 80 en Cuba el estudio de los pelos con fines
identificativos estaba referido solo a su estudio al microscopio óptico a fin de establecer
características morfológicas tales como el color, el diámetro, la forma, la estructura de la
médula y de la cutícula, la forma y características de los extremos radicular y periférico y
el estudio comparativo en el caso de los pelos humanos, siguiendo lo establecido
internacionalmente en los textos de Medicina Legal (27,28).
En nuestro país el estudio del cabello a través de las técnicas anteriormente referidas
data de los años 80, aplicándose mayormente en los pelos humanos, lográndose en
muchos casos establecer la individualidad y en otros lograr llegar hasta diferenciación de
grupo.
En el estudio criminalístico de los pelos resulta de gran importancia para poder interpretar
los resultados obtenidos tanto desde el punto de vista identificativo o toxicológico conocer
de modo general algunos aspectos importantes relacionados con su morfología,
histología, estructura y composición química.
Fase anágena en la cual tiene lugar la actividad de crecimiento del pelo en ella ocurren
cambios que reproducen a los que sufre el folículo durante la morfogénesis original en la
piel del feto. En el primer estadio de esta fase las células de la papila dérmica aumentan
de tamaño y se incrementa la síntesis de RNA y las células germinales del saco sufren
una intensa actividad mitótica.
En el segundo estadio la parte inferior del folículo crece hacia abajo englobando a la
papila dérmica y ya en el tercer estadio el folículo alcanza su máxima longitud y las
45
células de la matriz originan el cono de la vaina interna de la raíz. En el cuarto estadio los
melanocitos desarrollan las dendritas y comienza a formarse la melanina quedando el
pelo dentro de la vaina interna de la raíz. En el quinto estadio la punta del pelo emerge
del cono de la vaina interna de la raíz y en su sexto estadio aparece el pelo en la
superficie cutanéa iniciándose la segunda fase de crecimiento del pelo o Fase catágena.
Existe una cápsula de células parcialmente queratinizadas que se une a las células no
queratinizadas de la base del saco y se inicia entonces la fase telogéna del pelo.
Fase telógena es la fase de reposo del ciclo piloso. En esta fase el pelo tiene forma de
maza con su bulbo relativamente despigmentado el cual se halla unido al saco mediante
uniones intercelulares y permaneciendo en el interior del folículo hasta que se produce
el desarrollo de un nuevo pelo es decir cuando ese folículo entra de nuevo
espontáneamente en la fase anágena o es inducido a ella cuando el pelo es arrancado
prematuramente.
La duración de cada una de estas fases viene determinada por factores genéticos y
oscila entre 2 y 5 años. El crecimiento diario del pelo varía según la región del cuerpo de
que se trate. Por el examen al microscopio óptico se puede determinar si el pelo está en
la fase anágena, catágena o telógena (31).
El índice de crecimiento del pelo en el hombre es de 0,35 mm por día a nivel del vértex y
en las sienes y ligeramente mayor en esas mismas áreas en las mujeres.
Los pelos están cubiertos por una capa fina denominada epicutícula de un grosor
aproximado de 25 micras la cual no es visible al microscopio. La cutícula del pelo
humano esta formada por 6 ó 10 capas de células cada una de 0,2 a 0,5 micras de
espesor. El extremo proximal del pelo esta envuelto por una capa de material cuticular de
una micra de espesor. Estas capas varían de acuerdo al grosor del pelo. Las células
que forman la cutícula se superponen como las tejas de un tejado apuntando el extremo
libre hacia la punta del pelo (35) (Anexos No. 17 y 18).
46
La corteza es la mayor de las capas del pelo y esta protegida por la cutícula, esta capa
contribuye a establecer las propiedades mecánicas del mismo. Sus células están muy
próximas entre sí y orientadas según el eje del pelo y su diámetro oscila entre 3 y 6
micras siendo su principal estructura las macrofibrillas entre las cuales hay gránulos de
melanina (36, 37).
La médula es la parte central del tallo piloso que en el hombre puede presentarse de
forma continua, discontinua o inexistente. La continua puede ser emparrillada o simple y
la discontinua fragmentada o en escalera.
Como señalábamos anteriormente el principal componente del pelo son las proteínas y
entre ellas se destaca la queratina la cual se halla en las células corticales. Esta
queratina es insoluble y resistente a las enzimas proteolíticas y para que se produzca
su solubilización es necesario que se rompan los puentes disulfuro mediante reacciones
de oxidación y reducción (38).
El pelo contiene un buen número de aminoácidos cuyas cantidades varían por influencia
de factores genéticos, humedad, dieta, tratamientos cosméticos y métodos analíticos y
de extracción utilizados para su detección. Se plantea que la cantidad de cístina en el
pelo también varía con el sexo el color del pelo y la zona del cuerpo de donde proviene.
Los oligoelementos presentes en el pelo pueden tener diversa procedencia ya sea por un
origen exógeno u endógeno. En los oligoelementos de carácter endógeno tiene gran
importancia la matriz del pelo, la papila dérmica, las glándulas sebáceas ecrinas y
apocrinas y la epidermis superficial (33).
La mayoría de los oligoelementos presentes en el pelo son de origen exógeno ya sea por
contaminación externa debido a tratamientos aplicados en el pelo. Algunos autores
plantean que la secuencia de aparición de estos oligoelementos y su cantidad son tan
particulares en un individuo como su propia huella dactilar por lo que puede constituir un
rasgo para su individualidad. Entre estos oligoelementos se encuentran el arsénico, el
plomo, el calcio, el fósforo, el zinc y el potasio. Algunos de ellos por la forma y cantidad
pueden estar relacionados con envenenamientos como ocurre con el talio el arsénico y
el plomo (40).
47
6.- Mediante preparaciones cosméticas o farmacéuticas aplicadas en la cabeza o en otras
partes del cuerpo.
Existen otras fuentes de incorporación de estos elementos entre las que están el sudor, la
contaminación ambiental y los tratamientos cosméticos (41).
Algunos metales se combinan con los grupos sulfidrilos que forman la proteína del folículo
lo que explica las concentraciones de estos elementos en el pelo y que son mayores que
los detectados en otros tejidos o fluidos del cuerpo. En el caso del plomo existe una
rápida disponibilidad del pelo por tomarlo, de ahí que este sea usado como un tejido
indicador a su exposición. No obstante el pelo puede ser utilizado para medir
exposiciones a otros metales como el arsénico el mercurio y el talio (42).
La cutícula puede ser dañada por varias influencias externas produciéndose una gradual
erosión de las capas que la forman, estas influencias pueden ser químicas o mecánicas
(33). El elemento inicialmente distribuido en la periferia del pelo puede ser concentrado
en la cutícula y absorbido hacia su interior. Esto indica la necesidad de una interpretación
cuidadosa del origen de algunos elementos hallados en el pelo los cuales pueden estar
distribuidos en la periferia del mismo.
Hay investigadores que plantean que los pelos de región del pubis y de las axilas están
mas protegidos de la contaminación externa que los pelos de la cabeza, no obstante en
estudios realizados se encontraron mayores concentraciones de plomo en los pelos de
las axilas que en los de la cabeza señalándose que esto podía deberse a que los pelos
de otras regiones del cuerpo tienen diferente rango de crecimiento siendo la fase
anágena más larga en los pelos de la cabeza, estos pelos además no reciben los mismos
tratamientos y por otra parte los pelos de las axilas y del pubis son más afectados por las
secreciones de las glándulas apocrinas (46).
La composición del pelo es alterada por tratamientos como los tintes las decoloraciones
el ondulado del cabello. Esta puede ser la causa de la presencia de muchos elementos
en el pelo y que incluso pueden afectar la absorción de los mismos para otras sustancias
(47,48).
En los análisis de composición química del pelo la colección de las muestras y el uso de
agentes limpiadores para eliminar la contaminación garantizan la precisión de los
resultados (49,50).
48
Los aspectos señalados anteriormente deben ser valorados cuidadosamente durante
el análisis del pelo para diferentes fines brindándole una especial atención a los
métodos de colección preparación y análisis de las muestras así mismo consideramos
importante la aplicación de métodos analíticos que nos permitan diferenciar de ser
posible el origen exógeno o endógeno de los elementos químicos hallados.
Debe considerarse este aspecto dentro de las investigaciones forenses en dos partes una
la relacionada con su valor como muestra con fines toxicológicos y la otra a su interés
identificativo.
Aún dentro de una misma zona de muestreo y en la misma persona se han reportado
variaciones con respecto a la concentración de los elementos químicos. Esto se explica
debido a que no todo el pelo de un mismo lugar se encuentra en la misma fase de
crecimiento y sus velocidades de crecimiento no son homogéneas, aspecto que fue
referido en el epígrafe 1 de este capítulo.
Los pelos de la cabeza han sido seleccionados por la mayoría de los investigadores para
utilizarlos como muestra en el análisis de metales debido a que estos pelos están en
contacto directo con el medio ambiente, tienen un crecimiento más estable y la mayoría
se encuentran en la misma fase de crecimiento (anágena) y en la cual muchos
investigadores coinciden en que se produce la mayor incorporación de los elementos
traza en el pelo.
La región por excelencia propuesta y utilizada por muchos investigadores como zona
ideal para el muestreo es la región occipital de la cabeza y en especial el vertéx
posterior debido a que el número de elementos en fase de crecimiento es mas constante
(alrededor del 85 %) al igual que su velocidad de crecimiento (0,3 - 0,4 mm/día) siendo
menos afectada por el sexo y la edad del donante (52).
Si los estudios que queremos realizar en el cabello están relacionados con cambios en su
morfología como ocurre en las enfermedades del cabello y en algunas patologías o
simplemente para el análisis identificativo del pelo con fines forenses entonces la
selección de la zona del muestreo depende de los elementos que queremos observar.
49
En cuanto a la conservación de las muestras de pelos para su análisis químico parece ser
un consenso entre investigadores el uso de viales plásticos o sobres de polietileno esto
evita la maculación posterior de los pelos luego de realizados los muestreos (54).
Luego de la colección de las muestras de pelos uno de los pasos más importantes lo
constituye el lavado de las mismas el cual se realiza con el fin de remover todas aquellas
suciedades tales como grasa, sudor y contaminantes químicos que se encuentran
adheridos sobre todo en la cutícula del pelo.
Cuando lo que estamos investigando es un pelo levantado como huella, antes de aplicar
este lavado debe valorarse macro y microscópicamente cada una de las sustancias o
suciedades adheridas, ya que pueden tener valor para la investigación.
Utilizando el microscopio óptico podemos obtener una imagen del pelo donde
observaremos los cambios o daños que puedan presentarse en su morfología así como
en su color, forma de la médula, raíz y tipo de pigmento. El microscopio óptico tiene una
profundidad de foco pequeña por lo que en algunos casos estos estudios son muy
limitados.
50
El estudio microscópico de pelos de individuos con enfermedades del cabello como la
tricotilosis, los distintos tipos de alopecia y la tricorrexis nodosa, se han aplicado con éxito
en las investigaciones forenses del cabello con fines identificativos (30).
Existe una metodología de trabajo que regula los pasos a seguir en el análisis de los
pelos tanto con fines identificativos como toxicológicos, por lo que nos referiremos a
continuación de modo muy general sobre este aspecto.
MICROSCOPIA OPTICA
La microscopía óptica por luz trasmitida, permite el estudio de las estructuras internas de
la muestra, aunque este estudio presenta como habíamos referido anteriormente
limitaciones por la poca profundidad de foco, no obstante la aplicación de esta técnica es
insustituible para la determinación del color, forma de los extremos radicular y periférico,
sustancias extrañas adheridas al pelo, forma y distribución de los pigmentos, etc.
51
Los microscopios ópticos tienen una resolución de 2000 A mientras que en el microscopio
electrónico es de 20 A, de ahí que su uso sea importante para el estudio de la morfología
y de los daños que pueden presentarse en el pelo. Así mismo puede observarse
detalladamente la cutícula del pelo estableciendo la región de procedencia y otros datos
de interés.
La preparación de la muestra requiere cuidados, debido a que esta debe ser conductora
de la corriente, por lo que en algunos casos debe emplearse un recubrimiento con
vapores metálicos.
ANALISIS ELEMENTAL
Igualmente los pelos constituyen un reservorio de diferentes metales que pueden causar
estados tóxicos en el hombre por ingestión premeditada o accidental o simplemente por
exposiciones a escapes de industrias u otras fuentes.
Para los análisis anteriores deben prepararse convenientemente las muestras de pelos y
los pelos obtenidos como huella. Existe un método sencillo que no requiere de
preparaciones especiales y consiste en la formación de un poste compacto utilizando
cinta adhesiva, luego de colocados los pelos sobre la cinta se procede a torcer la cinta
sobre sí misma, luego de confeccionado el poste se procede a cortar rodajas finas con
una cuchilla, pudiendo apreciarse los cortes transversales de los pelos. Para realizar
estos cortes, el poste debe ser sometido a una temperatura entre 15 y 21 C y utilizar una
cuchilla previamente limpiada con acetona para evitar maculaciones de las superficies
transversales de los pelos.
Luego de realizados los cortes, las muestras son preparadas de igual modo que los
fragmentos de pelos y analizadas combinadamente a través de las técnicas de
microscopia electrónica de barrido y microanalisis de rayos X. Las secciones analizadas
de los pelos deben corresponder a las zonas donde existan las alteraciones morfológicas.
Para realizar los análisis químicos se utilizan aumentos de 100 X, pudiéndose realizar el
estudio de la distribución radial del elemento en el pelo. Para los análisis se seleccionan
cuatro puntos, uno en la cutícula, dos intermedios y el cuarto en el centro del pelo y que
disten entre sí una tercera parte del radio de cada pelo.
52
Es un método de alta sensibilidad para el análisis cuantitativo de elementos químicos,
basado en la absorción de energía radiante por átomos no combinados químicamente y
en la correlación cuantitativa entre esta absorción y la concentración de iones
originalmente presentes en la muestra.
En estos análisis son utilizadas las técnicas con llama, sin llama (horno de grafito) y por
generador de hidruros, este último utilizado en el análisis de arsénico y selenio. La
aplicación de la atomización electrotérmica sin llama, ha producido un gran vuelco en la
utilización de este método en el análisis de muestras sólidas, ya que disminuye los
riesgos en los procesos de preparación de las muestras sólidas.
Los limites de detección de los elementos por esta técnica están en el orden por debajo
de los picogramos. La determinación de muchos elementos tales como el arsénico, el
plomo, el antimonio, el mercurio, el manganeso, el molibdeno depende de los limites
requeridos y de la influencia de la matriz.
Dentro del campo de la investigación forense del pelo no es posible pasar por alto las
determinaciones que se realizan mediante el estudio de diferentes marcadores genéticos
como el ADN (en los pelos arrancados se puede analizar el ADN nuclear), el grupo
sanguíneo y el estudio de diferentes tipos de proteínas.
IX.5 PERSPECTIVAS
1.- Ampliación de la determinación de ADN en los pelos caídos que están desprovistos de
la envoltura vaginal así como de los pelos partidos a través de las técnicas de ADN
mitocondrial.
2.- Ampliación del estudio de las enfermedades del cabello en la identificación de los
pelos humanos.
4.- Continuar el estudio de la composición química de los pelos con fines identificativos.
53
IX.6 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
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57
X. BOTANICA
X.1 INTRODUCCION
El reino vegetal abarca desde un pequeño organismo compuesto por una célula, hasta un
árbol gigantesco. La Botánica es la ciencia que estudia las plantas y se divide en
distintas ramas: comprende la Botánica General y la Botánica Especial y esta última se
subdivide en Botánica Sistemática y Taxonomía Botánica (1). La Sistemática Moderna
no sólo se fundamenta en la morfología externa de los vegetales, sino que estudia
además la constitución anatómica de éstos.
Para evitar confusión y llegar a la verdadera identidad de una planta, se denominaron con
nombres científicos, ya que los nombres vulgares o populares son adjudicados de formas
58
diferentes de acuerdo a la región, de forma tal que una misma planta es denominada de
varias formas, tanto en el país como en el exterior, por ejemplo la planta Nerium
oleander se conoce como adelfa o rosa francesa.
El nombre científico es válido universalmente y está formado con palabras del Latín o
latinizadas. Consta de dos palabras, la primera es el nombre del género y la segunda es
el nombre de la especie y puede existir sólo en combinación con el del género. Los
sinónimos son otros nombres científicos dados por diferentes botánicos que descubrían
una planta sin conocer que ya había sido descrita con anterioridad, lo que se ha
producido debido a la alta de comunicación entre los botánicos en épocas pasadas.
Después del nombre científico se escribe la inicial o el nombre completo del autor, por
ejemplo Hippomane mancinella L. que corresponde a Linné y en caso de haber sido
descrita por dos o más autores estos se señalan de la siguiente forma: Caesalpinia
pulcherrima (L) Sw.
Las huellas vegetales que con mayor frecuencia hemos investigado durante todos estos
años han sido hojas y madera. Hemos demostrado que con las características internas de
las hojas y la madera, se pueden identificar pequeños fragmentos de las mismas.
También hemos incursionado en la determinación de los granos de polen en muestras de
suelo
59
embargo la dosis empleada o partes de la propia planta contienen sustancias
perjudiciales al Hombre y animales domésticos.
Dada la importancia que reviste hoy en día ese conocimiento de plantas perjudiciales, por
el uso masivo en nuestro país de la Medicina Verde y el incremento de una alimentación
vegetariana, en el año 1993, participamos en la elaboración de un libro “Plantas Tóxicas
Cubanas” (3) cuyo objetivo principal era contar con un material de esta índole en nuestro
país, actualizado con la experiencia cubana en los últimos diez años dada por sus
autores, entre ellos la experiencia criminalística. En este libro se reportaron plantas que
hasta el momento se desconocían sus efectos y cuando fueron investigadas tanto
morfológica como fitoquímicamente se demostró que contenían principios activos de
efectos narcóticos.
Huella vegetal: Es todo material vegetal, ya sea una planta completa, órgano o
fragmento vegetal que está relacionado con un hecho delictivo y brinde una
determinada información de acuerdo con su interrelación con el medio -
participantes.
Microhuellas vegetales: Son aquellas pequeñas partes del vegetal como esporas
y granos de polen, pelos o tricomas, fibras vegetales, microorganismos (algas,
hongos, etc.), pequeños indicios, poco visibles o no visibles a simple vista, que
impiden que sean borrados por el autor.
Las huellas vegetales pueden aparecer en diferentes delitos aunque éste haya
ocurrido o no en un lugar abierto. En los hechos que con mayor frecuencia podemos
hallar huellas vegetales son: delitos contra la vida y la salud, Hurto y Sacrificio Ilegal de
Ganado Mayor, delitos sexuales, Robo con Fuerza entre otros.
Las plantas en su propagación dependen del clima, agua y suelo. Es por ello que en
cada región habitan determinadas especies de plantas que se diferencian de otras
asociaciones vegetales. Por esto a través de las huellas vegetales podemos identificar
determinada región.
Las microhuellas vegetales que no son fáciles a simple vista de reconocer son
factibles de permanecer en los elementos de un delito ya que no son borrados por el
autor.
Las huellas vegetales aparecen con frecuencia en objetos o sobre otras huellas, por
ejemplo en el polvo, huellas de suelo, trazológicas, sangre, etc. y sobre los objetos
como prendas de vestir e instrumentos.
En Cuba antes del triunfo de la Revolución, se reporta un caso de Robo con Fuerza que
ocurrió en 1948, donde las huellas papilares de la autora estaban empasteladas por la
presencia de harina de trigo y residuos de pescado, lo que permitió establecer que la
criada de la casa era quién había robado las joyas.
No es común contar para este tipo de investigación con un órgano completo o con los
requisitos que exige normalmente la Taxonomía, sino por el contrario restos o fragmentos
vegetales.
Partiendo del concepto de huellas según el doctor Rafael Hernández de la Torre (5):
“todo elemento que en un momento determinado puede generar la realización de
61
peritajes, por ejemplo: manchas de sangre, fragmentos de vidrio, etc.".
Por esta razón de acuerdo con este concepto se impone la necesidad de clasificar una
huella vegetal no solamente con los métodos generales establecidos en la Taxonomía,
sino con métodos propios enriquecidos con el desarrollo de la Ciencia y la Técnica.
La investigación de huellas vegetales se realiza con los métodos anatómicos con fines
sistemáticos de la Botánica. Nuestro trabajo lo separamos en dos grandes divisiones:
Espermoteca.
Herbario.
Preparaciones fijas del tejido vegetal (epidermis foliar, madera y polen).
En nuestro trabajo, estas huellas no son muy fáciles de distinguir pues aparecen
generalmente en el suelo y además de realizar la técnica que requiere su observación
62
microscópica, se necesita aún más especialización para su separación y aislamiento de la
tierra. Los registros criminalísticos juegan un importante papel en este tipo de microhuella,
pues se confeccionan aislados y nos permiten discernir su clasificación.
Las preparaciones fijas de madera, comprenden los tres cortes que se realizan de la
misma, esto nos facilita una comparación con la huella vegetal maderable, que en
dependencia de sus dimensiones se podrá clasificar familia, género o especie a que
pertenece.
Las microhuellas foliares, en los casos que lo permitan sus dimensiones, se ampliarán las
técnicas que posteriormente se describen en este trabajo. Los registros criminalísticos de
este especimen vegetal, contribuyen a su determinación, pues se confeccionan siguiendo
el principio de las especies de interés criminalístico.
De acuerdo con el tipo de suceso, no sólo se compara la huella con los registros
criminalísticos, sino con las muestras vegetales ocupadas en el lugar del hecho. Esto
significa que en esta investigación de huellas vegetales existen dos tipos de estudios
comparativos: la primera mencionada se refiere a la comparación con fines identificativos
entre la huella y los especímenes vegetales previamente clasificados. La segunda es
establecer la relación (semejanzas o diferencias) entre la huella y las muestras de
vegetación ocupadas en el lugar del hecho.
Para ello se procede de cada una de las muestras a recortar una pequeña porción foliar,
montadas por la superficie adaxial y abaxial. Posteriormente se cubren con una capa de
oro de 80 a 100 Aº.
1b.- Para la realización de los estudios de las células epidérmicas se hace necesario la
separación por métodos físicos o químicos de la cutícula foliar, donde queden impresas
las características de las células epidérmicas, complejos estomáticos, tricomas o pelos. El
análisis cuticular se hace tomando en consideración aquellos caracteres estables que no
son influenciados por los factores ecológicos donde habita la planta.
63
Maceración:
La maceración del tejido foliar se puede realizar a través del método de Franklin
(1945),que consiste en tomar una porción de 0,5 a 1 cm 2 de la parte central de la hoja,
sumergirla en una solución de peróxido de hidrógeno y ácido acético en una relación de
1:1 a temperatura que oscila entre 70 y 80 C durante dos horas aproximadamente.
También se puede utilizar el ácido nítrico al 50% diluido con agua destilada. Con estos
reactivos, si la hoja está fresca, se puede lograr la separación de la cutícula en adaxial y
abaxial en menos tiempo, que oscila desde 15min.hasta una hora.
Por lo general, la huella vegetal no reúne las condiciones ideales. Para superar esas
condiciones, una de las variantes que podemos aplicar es sumergir el fragmento vegetal
en agua sometida al calor hasta que ebulla un tiempo alrededor de 15 minutos, de esta
forma logramos la turgencia del tejido, se extiende sobre un papel y secándola
medianamente realizamos a continuación el proceso de maceración.
2a.- Los fragmentos foliares de las Poaceae requieren para su estudio realizar el corte
transversal, pues sus características fundamentales no estriban sólo en la epidermis sino
en el tejido vascular y los otros tejidos que componen el mesófilo de la hoja.
Se observaron en las especies estudiadas, caracteres histológicos que varían entre los
diferentes géneros, tanto valores cualitativos como los cuantitativos. Se fijaron una serie
de parámetros de esos caracteres como son: forma y número de las células buliformes,
64
forma y cantidad de los haces conductores, presencia y disposición de los tejidos
esclerénquima, parénquima, presencia de espinas, pelos y papilas, etc. (Anexo No. 25).
Es factible también realizar a las microhuellas los cortes a mano alzada con hojas de
bisturí.
3a.- En las maderas se distinguen dos grandes grupos de acuerdo a la división de las
plantas: Gimnospermas (No Porosas, Anexo No. 26) y Angiospermas (Porosas, Anexo
No. 27). Por sus características internas se pueden clasificar por géneros e incluso hasta
especies.
GIMNOSPERMAS
Estas pueden tener sus paredes más o menos engrosadas y cubiertas con puntuaciones
o punteaduras areoladas. Ocasionalmente en algunos géneros se observan
engrosamientos de la pared alrededor de las puntuaciones, éstas se denominan
crásulas.
En algunos géneros como en Pinus los radios medulares además de estar constituidos
por las células parenquimatosas, presentan las traqueidas radiales.
65
Los diferentes géneros de las Gimnospermas son posibles de identificar a través del tipo
de puntuación que existe en los denominados campos de cruce.
Se entiende en Anatomía por campo de cruce el rectángulo formado por las paredes de
una célula de los radios y los de una traqueida axial, en sección radial. De esta forma se
pueden distinguir 5 tipos de puntuaciones en los campos de cruce:
Fenestriforme.
Pinoide.
Piceoide.
Cupresoide.
Taxodioide.
Los dos primeros caracterizan al género Pinus. Existen además otros caracteres que
tienen valor diagnóstico en la identificación como es la presencia de canales resiníferos
tangenciales y verticales.
El parénquima axial es otro carácter que nos sirve en la identificación, estando presente
en algunos géneros y ausentes en otros como en Pinus.
ANGIOSPERMAS
Estos vasos están constituidos por un gran número de células a los cuales se les
denomina elementos o miembros de los vasos. Como primera característica de éstos,
encontramos que presentan orificios en sus extremos. Estos orificios se denominan
platinas de perforación, que pueden ser:
Simples.
Escaliriformes.
Foraminados.
En forma de ned.
El estado del conocimiento actual ha reflejado hasta el momento que el tipo más
abundante en las especies tropicales es la distribución difusa.
66
Apotraquial: cuando no está en contacto directo con los poros. Este tipo se subdivide
en:
Difuso.
En bandas.
Agrupado.
Terminal.
Escaleriforme.
Paratraquial: cuando está en contacto directo con los poros y se subdivide en:
Vasicéntrico.
Aliforme.
Confluente.
En bandas.
Unilateral.
Escaso.
Otros elementos a considerar en las maderas, son los denominados radios medulares.
Estos están constituidos por células parenquimatosas, las cuales pueden ser de dos
tipos: procumbentes: más largas que altas y erectas o cuadradas: más altas que largas o
de iguales dimensiones.
Por último el elemento más abundante pero menos complejo desde el punto de vista
anatómico es la fibra, cuya función principal es la de sostén es decir mecánica. Estos se
clasifican en dos tipos fundamentales: fibrotraqueidas y libriformes.
Como hemos plasmado aquí existe una gama amplia de caracteres y muchos autores
han demostrado que el estudio de la anatomía de la madera permite una certera
clasificación hasta especie de la misma (8).
A través de estos veinte años hemos trabajado numerosos casos dando respuesta hasta
el nivel de clasificación que nos ha permitido la huella maderable. Consideramos que es
importante profundizar en este estudio para obtener incluso una base de datos por este
método de las huellas de madera.
Para el estudio de la epidermis foliar, que fue objeto de tesis de doctorado, se consultó
con los métodos de clasificación de Metcalfe y Chalk y de David L. Dilcher (9) en el
caso de las dicotiledóneas y de la Dra. Evangelina Sánchez para las monocotiledóneas.
67
Con las características cualitativas hemos podido diferenciar los distintos géneros y
especies. Realizamos las mediciones microscópicas a través del sistema computarizado
MADIP, de los distintos elementos anatómicos, (abertura estomática, área de las células
epidérmicas, longitud de los pelos, etc.) cuyos resultados no fueron significativos ya que
no aportaron diferencias entre las mismas. Debemos señalar que nuestro estudio se
basó en especies de distintos géneros en su mayoría y de distintas familias.
Consideramos que pueden ser útiles estas mediciones o valores cuantitativos cuando se
realiza un estudio entre géneros y especies.
X.5 PERSPECTIVAS
Consideramos que en el futuro se debe realizar el estudio florístico de cada región del
país, lo que permitirá en la Botánica Criminalística tener una información detallada de la
Flora en las mismas, incluyendo las singularidades como el endemismo y la distribución
fitogeográfica por zonas de interés criminalístico.
68
Con una mayor divulgación y uso de la Botánica Criminalística, se ampliarán las
posibilidades de respuestas e investigación pericial para el esclarecimiento de los
diferentes delitos en nuestro país.
1.- Font Quer P., 1975. “Diccionario de Botánica” . Editorial Labor, S. A. Barcelona.
2.- Hall D., 1988. “ Contribution of the Forensic Botanist in Crime Scene Investigations”.
The Prosecutor Vol. 22, No.1 Summer.
3.- Tablada R, Hilario A., Quesada N., “ Plantas Tóxicas Cubanas”. ( Libro en Prensa).
5.- Hernández R., 1988 “ La Ciencia Criminalística” . Ed Cap. San Luis, Managua,
Nicaragua.
6.- Sánchez E., 1979. “Anatomía foliar de las especies y variedades argentinas de los
géneros Tridens Roem et. Shult y Erioneuron Nash”. Revista Darwiniana, Vol. 22 No. 1-3
Set.
7.- Metcalfe C. R. and Chalk , 1950. “Systematic Anatomy of the leaf and Stem”. Anatomy
of Dicotyledons Secnd Edition, Vol I Oxford Science Publications.
8.- Vales M. 1986. “Anatomía de Maderas de Cuba I”. Acta Botánica Hungárica 32 (1-4)
pp. 231-245.
9.- Dilcher D. 1974, “Approaches to the identification of Angiosperm Leaf Remains”. The
Botanical Review, Vol 40. January- March.
10.- Tablada R., Pérez A., Villalón I, Pérez Baluja O. 1996. “Esclarecimientos de hechos
delictivos utilizando estudios microscópicos de especies herbáceas”. UH, Premio aplicado
de mayor aporte a la defensa.
11.- Catasús Guerra, 1997. “ Las gramíneas (Poaceae) de Cuba I.” Fonquería XLVI,
Madrid.
69
XI. FIBRAS TEXTILES
XI.1 INTRODUCCION
Las fibras y microfibras textiles han sido objeto de investigación y han constituido huellas
y microhuellas relevantes en numerosos casos en la Historia de la Criminalística Cubana
y extranjera.
La experiencia recibida de esta investigación en los países del ex-campo socialista, fue
estimulante, pues una de las microhuellas que mayor porciento tenía de ocupación eran
precisamente las microfibras con un 15%, (en la URSS en la década del 80); por encima
a este valor se encontraban las microhuellas de sangre y secreciones humanas con un 25
% y por debajo, los pelos con un 10 % (1).
En la ex-RDA, trabajaban arduamente también este tipo de microhuella con muy buenos
resultados, conjuntamente con el resto de las microhuellas biológicas o de otro tipo cuya
búsqueda se realizaba dentro de un sistema de trabajo criminalístico generalizado por
todo el país (2).
El valor de las fibras y microfibras textiles, en un delito es mayor cuando se cuenta con
las muestras pertenecientes a los participantes del hecho para su estudio comparativo,
aunque sin ellas se puede emitir un resultado diagnóstico de la presencia de las mismas y
por sus características presumir la posible prenda de vestir que portaba el sospechoso.
Por la composición de las fibras, que pueden ser de origen natural o sintéticas, su
investigación se realiza en el laboratorio de Biología y otra parte en el laboratorio de
Química.
Este tipo de peritaje desde sus inicios hasta la fecha ha tenido una evolución paulatina
de acuerdo con los avances de la Ciencia Criminalística y de la Ciencia y la Técnica en
nuestro país, reflejado en las respuestas periciales que se han obtenido en los múltiples
casos que se han esclarecido a través de las fibras o microfibras textiles.
En el trabajo criminalístico el término más común empleado para denominar este tipo de
peritaje es la fibra textil.
Fibra textil: Son compuestos macromoleculares con propiedades físicas tales como
resistencia, flexibilidad y elasticidad.
Por su origen y composición química se dividen fundamentalmente en (10):
Vegetal: Se extraen fibras de las distintas partes que componen un vegetal, o sea
de las semillas o fruto (algodón, de coco y Kapoc), del tallo (lino, cáñamo, yute,
ramio, kenaf) y de las hojas (abacá, henequén, sisal o agave) (5) (Anexo No. 28).
Animal: Lana, pelos de camello, Mohair, conejo, seda (Anexo No. 29).
71
Polímeros naturales artificiales: que comprenden las celulósicas (rayón viscosa,
rayón acetato, y rayón cobre o cuproamoniacales) y de origen proteico (de caseína
de leche, de zeína de maíz, y de soya de frijol) (Anexo No. 31).
Polímeros sintéticos: pueden ser las que se obtienen de las heterocadenas o sea
producto formado por policondensación de resinas, carbono, azufre, etc. Ejemplo de
fibras de este tipo son: poliéster, policarbonadas, policarbamidas, poliamidas. Otro
tipo de polímero sintético son las cadenas carbonadas: Policlorovinilo, poliacrilonitrilo,
polietileno, polipropileno (7) (Anexo No. 32).
Estirada.
Rizada.
Encorvada
Ramificada.
No pretendemos describir todas las propiedades que poseen todas las fibras, pues en la
actualidad existe mucha literatura al respecto de cada una de los tipos de fibras, si hemos
expuesto algunos conceptos esenciales y básicos para nuestro trabajo.
Hilaza: No es más que el hilo de un tejido textil. Se produce por medio de la torsión de
fibras, que con anterioridad se escogen con determinadas características y homogéneas
en todas sus propiedades.
La investigación de las fibras textiles, tiene como aspecto primario, la preservación del
lugar del hecho, pues esto evita la destrucción de las verdaderas huellas o contaminación
con material ajeno al suceso.
72
El trabajo de la búsqueda de estas huellas o microhuellas se debe seguir con un orden
lógico de acuerdo con las características del caso; un levantamiento indiscriminado de
este tipo de huellas en vez de ayudar al esclarecimiento del hecho, lo obstaculiza. Para
proceder al levantamiento de estos elementos, es menester además contar con una
iluminación adecuada, en nuestro país, el levantamiento de microfibras textiles, se realiza
por medio de cinta adhesiva transparente la que se mantiene aislada de posible
contaminación fundamentalmente con elementos textiles.
XI.5 PERSPECTIVAS
3.- Tablada R., Massola N., Rivera M. 1986. “Metodología para la investigación
criminalística de las fibras textiles y de los objetos confeccionados con ellas”. LCC,
MININT.
5.- Richardson W., Preston M. 1968. “Identificación de Fibras textiles.” Editorial Blume,
Madrid.
6.- Kochin D., Plasksin S., 1981. “Acabado de los tejidos planos de algodón”. Editorial
Científico-Técnica, C. Habana.
8.- Estévez E., Velazco O. 1996. “La Microscopía de Fluorescencia aplicada al estudio de
las fibras textiles”. XI Fórum de Ciencia y Técnica, LPC Camagüey.
9.- Herrera J., González F. 1996. “Investigación Criminalística por medio de las
microhuellas en el lugar del Suceso”. LPC MEIJ.
10.- James Robertson, 1992. Forensic Examination of Fibres. Simon and S. Group, New.
York.
73
Otras referencias consultadas.
1.- Griene, Mc. And Griffin, R. Is it a modacrilyc fibre ?. Science and Justice. Journal of
the Forensic Science Society.Vol. 39. No. 3. 1999.
2.- Faber, N, Jeaps, M and Maljaars, S. Determining the optimal sample size in Forensic
casework with the application ti fibers. Science and Justice. Journal of the Forensic
Science Society. Vol. 39. No. 2. 1999.
3.- Cho. L, and et al. A new method for fiber comparison using polarized Infrared
Microspectrocopy. Science and Justice. Journal of the Forensic Science Society. Vol. 44.
No. 2. 1999.
4.- Cho. L, and et al. Forensic classification of polyester fiber by Infrared Dichroic Radio
Pattern reconigtion. Journal of the Forensic Science Society. Vol. 44. No. 2. 1999.
5.- Was-Gubala, J and Salermo, R. The biogradation of the fabric of soldiers’ uniforms.
Science and Justice. Journal of the Forensic Science Society. Vol. 40. No. 1. 2000.
Aún cuando constituye como referíamos una tarea priorizada, el delito de Hurto y
Sacrificio Ilegal de Ganado Mayor, presenta complejidades que pasan por la situación
económica del país hasta la inexistencia de condiciones adecuadas en muchas áreas
para la protección del ganado, esta situación tiene su reflejo directo en el trabajo
investigativo, en el bajo por ciento de esclarecimiento, sirva de ejemplo a lo anterior que
en el año 1999, se obtuvo en todo el país, sólo un 39% de esclarecimiento aún cuando se
intensificó y direccionó el trabajo de todos los involucrados en tal propósito.
Consideramos que la investigación de restos óseos animales, que son el resultado final
de la ejecución del acto delictivo, pudiera generalizarse como método de trabajo, toda vez
que no sólo permite determinar con absoluta certeza la especie del animal afectado sino
que brinda aportes relacionados con la edad del animal, la fecha aproximada de
ocurrencia de los hechos, el modus operandi y la causa de la muerte. Establecer un
método de trabajo homogéneo, que permita a los menos avezados especialistas obtener
esta información a través del estudio de los restos óseos hallados, constituye el objetivo
fundamental del presente trabajo, realizando su énfasis en las especies Bos taurus
(vacuno) y Equs equs (equino)
Por otra parte la realización de este estudio llama la atención sobre el hecho necesario
de ampliar la gama de evidencias y por ende de investigaciones periciales a fin de que el
aporte de la ciencia Criminalística sea cada vez mayor y de más calidad.
74
XII.2.- GENERALIDADES.
Es importante precisar que existe un patrón anatómico entre los vertebrados superiores
(aves, mamíferos), que permite ubicar cada uno de sus componentes óseos y por ende
establecer su ubicación taxonómica.
El esqueleto puede dividirse en tres grandes zonas.
Esqueleto axil.............. Comprende la columna vertebral, costillas, esternón y
cráneo.
Esqueleto apendicular.... Está constituido por los huesos de los miembros.
Esqueleto esplácnico...... Diferentes huesos desarrollados en parénquima.
Según la edad, el número de huesos del esqueleto varía debido a la fusión durante el
crecimiento de elementos óseos que están separados en el animal joven, incluso en
adultos de la misma especie, se producen variaciones, por ejemplo en todos los
mamíferos domésticos, varía considerablemente el número de vértebras coccígeas.
A pesar de la anterior clasificación, debe resaltarse que algunos huesos, por ejemplo las
costillas, no están provistos de caracteres diferenciales típicos y otros pueden
enmarcarse en varias clasificaciones, a este conjunto de huesos se les denomina huesos
irregulares.
Los huesos constan principalmente de tejido óseo, pero considerados como órganos,
presentan además una membrana envolvente llamada periostio, la médula ósea, los
vasos y los nervios.
En los huesos largos típicos, la porción más gruesa, corresponde al punto medio de la
díafisis o la proximidad del mismo y la más delgada a las extremidades, es el tallo o
cuerpo del hueso se ahueca para formar la cavidad medular.
En los huesos largos, se desarrollan tres puntos primarios de osificación, uno que
aparece primero para la diáfisis y otro para cada epífisis o extremidad.
Los huesos constan de materia orgánica e inorgánica, su peso está dado por la cantidad
de materia orgánica. La ausencia de calcio o descalcificación, torna al hueso blando y
maleable.
SUSTANCIA %
Gelatina (materia orgánica) 33,3
Fosfato de cal 57,35
Carbonato de cal 3,85
Fosfato de Magnesia 2,05
Carbonato y cloruro sódico 3,45
Fresco el hueso es blanco amarillento, con el paso del tiempo, descubierto de tejido
blando, se torna blanco, su resistencia media a la tensión es considerablemente superior
al roble. Con el enterramiento, se produce un proceso gradual de calcificación del hueso
en función del suelo, a partir de un intercambio de sustancias minerales, esto puede
apreciarse en la textura y color del hueso.
XII.5.- CARACTERÍSTICAS DIFERENCIANTES DE LAS ESPECIES DE INTERES
A.- CRANEO
El cráneo del caballo, tiene en conjunto la forma de una pirámide de cuatro lados y base
posterior, destacan en el mismo, la prolongación de los huesos nasales, la ausencia de
apófisis córneas.
Las ramas mandibulares se fusionan entre el segundo y tercer mes del nacimiento, en la
mandíbula, hay seis (6) alveolos para los incisivos y dos para los caninos en los machos,
en las yeguas, no existen caninos o son muy pequeños. La fórmula de los dientes
permanentes de la especie es:
2(I 3/3, C 1/21, P 3 ó 4/3, M 3/3) 36 ó 38
Los incisivos de los equinos, a diferencia de todos los mamíferos, presentan en la corona
una invaginación profunda llamada infundíbulo.
El cráneo es más piramidal, más corto y en cierto modo más ancho, generalmente
cuadrangular, con una mayor extensión del seno frontal que le confiere la mayor anchura.
En los machos, son evidentes las apófisis córneas y en las hembras están presentes
aunque rudimentarias.
76
Las dos mitades de la mandíbula, no se fusionan ni aún en edades avanzadas, por lo que
existe una sínfisis.
En el antebrazo, conformado por los huesos Radio-Cúbito, de destaca el mayor largo del
radio, mientras que el cúbito tiene menor desarrollo, en adultos ambos huesos están
parcialmente fusionados.
En los huesos de la mano, aunque existen diferencias, no se señalan por ser necesrio
una identificación inequívoca de cada uno de los huesos que la conforman.
La Escápula tiene forma de triángulo más ancho con base superior, la espina es muy
prominente y se prolonga por fuera del cuerpo del hueso para formar el acromion. El
agujero nutricio se ubica hacia el borde posterior de la espina.
Los huesos Radio-Cúbito que conforman el antebrazo, tienen como carcterística distintiva
que el Radio es más corto y ancho y el Cúbito, tiene mayor desarrollo. En los animales
adultos ambos huesos están completamente fusionados.
77
C.- EXTREMIDAD PELVIANA
Un aspecto que marca las diferencias sexuales en ambas especies, es la relación de los
diámetros del hueso coxal entre hembras y machos, tanto el diámetro transverso( ancho)
como el diámetro conjugado( largo), que es significativamente mayor en las hembras a
partir de su función en la actividad reproductiva.
En el Cinturón Pelviano, destaca la forma oblicua de los huesos iliacos con relación al
plano horizontal, lo que le confiere una forma triangular, así como su gran tamaño
El Fémur o hueso del muslo, es el más voluminosos de los huesos largos, parece como
arrollado sobre sí, con un cuerpo cilíndrico, con gran cabeza y fosa supracondoilea muy
profunda.
En la tibia y el peroné, huesos de la pierna, , se destaca la gran reducción del peroné que
se presenta como una espina unido al cuerpo de la tibia.
ESPECIE: Bos taurus (vacuno).
En el Cinturón Pelviano, los huesos iliacos son casi paralelos entre sí y por lo tanto son
menos oblicuos con relación al plano horizontal, son relativamente pequeños, el isquion
es muy voluminoso.
El Fémur o hueso del muslo, tiene un cuerpo relativamente pequeño, que es cilíndrico en
el centro y prismático en la porción distal fosa supracondoilea poco profunda., la cabeza
es más pequeña que en el caballo.
La tibia se parece mucho a la del caballo pero es más corta, el cuerpo es claramente
encorvado y el peroné consta sólo de las dos extremidades, la cabeza está fusionada con
el cóndilo de la tibia, la extremidad distal, permanece separada y forma el maleolo lateral.
J.Daniels Grossman . Osteología. Rev. Dpto de Morfología Univc. Cailif, 34, 1989.
78
XIII. INVESTIGACIONES ESPECIALES.
Dentro del trabajo criminalístico biológico, están otras investigaciones que no se realizan
comúnmente en nuestro laboratorio, ya que la frecuencia de esos casos es muy inferior y
nuestra política ha sido apoyarnos en otras instituciones y especialistas del Estado para
dar respuestas a los mismos.
Desde hace más de dos décadas en que surge la Criminalística Especial y con ella, el
aporte íntegro de diversas ciencias, las investigaciones biológicas, han ampliado su
capacidad de respuesta apoyadas en investigaciones aplicadas a diversas ramas de las
Ciencias Biológicas como son:
En particular los análisis microbiológicos de todo tipo de sustancias que sean de interés
criminalístico o de otro organismo competente que solicite nuestro servicio conllevan
determinadas condiciones materiales, que por lo expuesto anteriormente no contamos
con un laboratorio de ese tipo, por tanto se realizan en otros Centros y nuestros
especialistas, además de velar por el desarrollo del trabajo, se encargan de la
interpretación de los mismos.
79
La Biología es una ciencia muy amplia, que abarca el estudio de los tres reinos de vida:
animal, vegetal y humana. La Criminalística está relacionada con los tres reinos. En
determinados casos se ha requerido la identificación de un insecto por lo que se ha
consultado con un especialista de esta rama de la Biología. De igual manera ha sucedido
con la identificación de determinada ave y es precisamente un ornitólogo quien por su
especialización nos ha ayudado a solucionar ese peritaje. Para dar respuesta a todo tipo
de material biológico, se necesitarían un gran número de personal en nuestra Institución
con la colaboración de determinados especialistas que realizan otras investigaciones en
otros centros, contribuyen a solucionar nuestras problemáticas.
A partir del hallazgo de un resto óseo de un menor en una zona abierta, las
investigaciones biológicas permitieron establecer con un grupo multidisciplinario, la
edad exacta del menor, aspecto que permitió posteriormente conocer y establecer un
hecho accidental (Villa Clara, 1974).
Fue necesario establecer desde el punto de vista biológico, a partir del análisis de la
sucesión ecológica, el tiempo de sumersión de elementos bélicos en aguas dulces,
lográndose a partir de este análisis, establecer con un error mínimo, la fecha del
hecho, aspecto vital para el esclarecimiento de una actividad enemiga (1994).
Para establecer la causa de muerte de seis (6) niños en la Provincia de Pinar del Río,
los especialistas de Biología Legal, realizaron determinaciones de capacidad
respiratoria, concentración de oxígeno y otras, cuyo resultado posibilitó aseverar la
hipótesis de una muerte accidental (1996).
81
La identificación de hojas enrolladas como cigarrillos, a través de métodos anátomo-
morfológicos, procedentes del exterior, correspondiente a la planta Heteropteris
laurifolia L. (Yagué) detectándose en la misma principios activos con efectos
narcóticos coincidentes con la literatura revisada.
Como resultado del trabajo investigativo de estos y otros hechos, se han aportado un
conjunto de medidas técnicas que permiten la profilaxis futura, en las investigaciones
criminalísticas biológicas.
XIV.- BIOSEGURIDAD
XIV.1 INTRODUCCION
82
En los laboratorios biológicos se realizan trabajos muy diferentes que implican gran
número de riesgos de diversa índole para el trabajador, el personal cercano al mismo y
para la comunidad en su conjunto.
En general, las causas que provocan un determinado daño no obedecen a un solo factor,
sino a la interacción de varios factores y para evitarlos existe una serie de medidas que
previenen o limitan los accidentes y otros riesgos relativos al trabajo del laboratorio.
Es importante considerar, además, que todas las huellas y evidencias relacionadas con el
hecho investigado, proceden de personas de las cuales se desconocen sus antecedentes
de salud.
La ocupación de los elementos en la escena del crimen, también resulta riesgosa para el
investigador que entra en contacto con objetos filosos o cortantes, explosivos, o
materiales potencialmente infecciosos. Una vez ocupados los elementos deben ser
embalados y trasladados a los laboratorios de Criminalística para la investigación, donde
el perito a cargo está expuesto a riesgo de daño o infección .
El lugar del suceso presenta riesgos potenciales para el personal. Una comprensión y
apreciación de los riesgos potenciales más las adecuadas precauciones de seguridad
disminuirán esos riesgos.
RIESGO QUE IMPLICA EL TRABAJO CON AGENTES PATÓGENOS DE LA SANGRE
Y OTROS MATERIALES POTENCIALMENTE INFECCIOSOS.
83
reconocidos como una amenaza potencial a la salud de los trabajadores que están
expuestos a estos materiales.
La inoculación parenteral accidental con agujas y otros objetos filosos ha sido la principal
causa de contaminación con los agentes patógenos de la sangre. Se plantea que los
daños ocasionados con agujas y otros objetos filosos han provocado enfermedades por
más de 20 agentes infecciosos.
Entre los patógenos de la sangre más importantes y que con mayor frecuencia pueden
ser transmitidos por esta vía, se encuentran los Virus de la Hepatitis B y C (VHB y VHC)
y el Virus de Inmunodeficiencia Adquirida (VIH), aunque no son exclusivos.
De acuerdo a esta norma, tanto la sangre como los fluidos corporales son considerados
potencialmente infecciosos, por lo que para el manejo con los mismos deben ser
observadas las Precauciones Universales, que refieren que la sangre y otros fluidos
corporales deben ser trabajados como si se conociera que están infectados por los
patógenos de la sangre y otros materiales potencialmente infecciosos.
84
Especialistas del Centro de Control de Enfermedades (CDC) de Estados Unidos, centro
de reconocido prestigio en la prevención de enfermedades, plantean que “Riesgo”
implica la probabilidad de que ocurra un daño, lesión o enfermedad. En el contexto de los
laboratorios microbiológicos y biomédicos, la evaluación del riesgo se concentra primero
en la prevención de la infección en el laboratorio. Cuando se trate de actividades de
laboratorio que involucren materiales infecciosos, la determinación del riesgo representa
un ejercicio crítico y productivo. Ayuda a asignar los Niveles de Bioseguridad
(Instalaciones, equipos y prácticas) que reducen al mínimo el riesgo de exposición del
trabajador o del ambiente a un agente determinado.
Los agentes físicos, químicos y biológicos se cuentan entre los que más fecuentemente
someten al individuo a riesgos potenciales y reales. El hombre, con su conducta y
organización laboral, puede constituir también una condición riesgosa.
RIESGO FISICO
Los agentes físicos, mecánicos, térmicos, eléctricos, radiantes y otros, pueden provocar
un daño considerable o mortal para el ser humano.
RIESGO QUIMICO
RIESGO BIOLOGICO
RIESGO HUMANO
XIV.3 BIOSEGURIDAD
85
al máximo los efectos que se puedan presentar y eliminar rápidamente sus posibles
consecuencias en caso de contaminación, efectos adversos, escapes o perdidas.
ORGANIZACIÓN DE LA BIOSEGURIDAD.
Resulta necesario que exista una organización que facilite la aplicación de las medidas
apropiadas que garanticen la seguridad del personal de los laboratorios y de los que le
rodean.
Debe enfatizarse que los dos aspectos más importantes para garantizar la seguridad en
un laboratorio son: la observancia estricta de las normas técnicas y de seguridad de
este y el entrenamiento adecuado de los trabajadores.
El nivel de información, de sensibilidad y de acción que se logre entre todos aquellos que
de una u otra forma tienen que ver con el trabajo en los laboratorios biológicos,
determinará el éxito en la implementación de las medidas de seguridad y su eficiencia en
la prevención y limitación de los efectos perjudiciales.
1.- Hay que preveer espacio suficiente para aplicar con toda seguridad los métodos de
laboratorio.
2.- Las superficies (suelos, paredes) deberán estar pulidas, facilitando el lavado y la
desinfección en caso de necesidad.
3.- Preveer espacios en locales contiguos sólo para almacenar con seguridad, solventes,
sustancias inflamables y otros reactivos.
4.- Las superficies de las mesas de trabajo serán impermeables al agua y resistentes a la
acción de los desinfectantes.
5.- Debe existir una iluminación suficiente para toda clase de actividades, evitando los
reflejos molestos.
6.- Fuera del local de trabajo deben existir locales para guardar la ropa de calle y los
objetos personales, así como para beber, comer y fumar.
7.- Las puertas y ventanas estarán adecuadamente protegidas contra actos vandálicos y
las puertas deben permanecer selladas al concluir la jornada laboral.
9.- Prever espacio en locales contiguos solo para almacenar con seguridad, solventes,
sustancias inflamables, gases comprimidos y otros reactivos.
10.- Los laboratorios deberán estar provistos de sistemas de alarmas contra incendios,
así como se instalarán extintores de incendio.
11.- En las puertas del laboratorio debe figurar la señal de peligro biológico y otras que
identifiquen condiciones especiales o prohibiciones.
3.- Realizar la comprobación de los conocimientos de los trabajadores una vez al año.
5.- Coordinar con el centro asistencial lo relacionado con la asistencia médica del
personal.
8.- Otras funciones que surjan durante el desarrollo del trabajo relacionadas con la
preservación del medio exterior y el personal que labora en los laboratorios.
Bacterias.
Leptospira interrogans.
Brucella spp.
Treponema pallidum.
Mycobacterium tuberculosis.
Neisseria gonorrhoeae.
Neisseria meningitidis.
Mycoplasma pneumoniae.
Salmonella typhi.
Salmonella spp.
Shiguella spp.
Staphilococcus aureus.
Streptococcus pyogenes.
Legionella pneumofila.
Virus.
Virus de la Hepatitis B (VHB).
Virus de la Hepatitis C (VHC).
Virus de la Hepatitis D (VHD).
Virus de la Hepatitis G (VHG).
Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH).
Virus de la Rabia.
Virus del Herpes Simple 1 y 2.
88
Hongos.
Histoplasma capsulatum.
Candida albicans.
Aspergillus fumigatus.
Cryptococcus neoformans.
Parásitos.
Sarcoptes scabiei.
Trichomonas vaginalis.
Otros aparecen en el lugar donde ocurre el hecho delictivo y que puede constituir su
hábitat natural como en el caso de algunos hongos o formando parte de las prendas de
vestir y otros objetos ocupados a las víctimas y/o sospechosos, como son los parásitos
(Sarcoptes scabiei).
Todos los agentes biológicos caracterizados pertenecen al Grupo de Riesgo II, excepto
Brucella spp y Mycobacterium tuberculosis, que se clasifican dentro del Grupo de Riesgo
III.
Además de los agentes antes mencionados, debemos referirnos a los agentes de Guerra
Biológica, los cuales han sido clasificados en tres categorías A, B y C (Agents Listing,
CDC, E.U.) atendiendo a la capacidad de diseminación o transmisión, patogenicidad,
mortalidad, entre otros aspectos. En este caso sólo haremos referencia a los agentes de
la categoría A, que constituyen los más peligrosos:
Bacillus anthracis.
Clostridium botulinum.
Yersinia pestis.
Francisella tularensis.
Variola major.
Teniendo en cuenta que los microorganismos que pueden estar presentes en las
muestras, huellas y evidencias trabajadas en el laboratorio y los que pueden aparecer en
el lugar del hecho, pertenecen al Grupo de Riesgo II en su mayoría, los laboratorios de
Criminalística deben cumplir con los requisitos de un Laboratorio de Nivel de
Bioseguridad II.
89
4. No se permitirá la presencia de animales o plantas dentro de los locales de riesgo
que no tengan ningún vínculo con los trabajos que se realizan.
5. Durante el trabajo tiene que mantenerse cerrada la puerta del laboratorio.
6. Sólo tendrá acceso a las áreas de trabajo el personal que labora en las mismas, al
cual se le informará de los posibles riesgos.
7. No se permite la entrada de niños al laboratorio.
8. No se permitirá a las mujeres embarazadas trabajar con agentes biológicos y
químicos que puedan causarle riesgos al feto.
9. Para el trabajo de laboratorio es imprescindible el uso de las batas sanitarias, por lo
que para el resto de las actividades se vestirá el uniforme.
10. Utilizar guantes en todos los trabajos que entrañen contacto con sangre o material
potencialmente infeccioso.
11. El trabajo en el lugar del suceso, se llevará a cabo con la vestimenta adecuada
(trajes de protección, espejuelos, zapatillas, nasobuco y guantes quirúrgicos) en
caso que se requiera. En el resto de los casos se usarán las batas sanitarias y los
guantes.
12. Queda prohibido ir a almorzar al comedor con la ropa de laboratorio.
13. Dentro del área del laboratorio, se prohíbe fumar, beber, ingerir o guardar
alimentos o aplicar cosméticos, ni llevarse las manos a la boca, cara, oídos y ojos.
14. No se permitirá pipetear con la boca.
15. Lavarse las manos y aplicación de antisépticos cada vez que vaya a salir del
laboratorio y después de haber manipulado material infeccioso.
16. Todos los accidentes de trabajo, serán comunicados inmediatamente al Jefe de
laboratorio y al Responsable por la seguridad biológica.
17. Los medios y reactivos necesarios serán solicitados en el pedido mensual.
18. Las muestras, huellas y evidencias ocupadas en el lugar del hecho y a las víctimas
y/o sospechosos, serán embaladas correctamente. Las huellas y evidencias que se
encuentren húmedas se pondrán a secar a temperatura ambiente y luego se
embalarán.
19. En el caso de muestras, huellas y evidencias con alto riesgo de contaminación se
embalarán en dobles contenedores (nylon) y se rotularán como material de alto
riesgo (enfermedades tales como SIDA, Hepatitis, Sífilis, Gonorrea, etc.).
20. Las muestras de sangre se rotularán al igual que las huellas y evidencias indicando
en el rótulo si el donante es portador de alguna enfermedad y se embalarán en
sobres de papel o nylon.
21. Las muestras, huellas y evidencias se examinarán sobre las mesas o mesetas de
trabajo.
22. El personal de la OCDP, exigirá a los instructores que las muestras y muestras,
huellas y evidencias se reciban correctamente embaladas y en buen estado de
conservación (secas a Temperatura Ambiente).
23. Una vez terminada la descripción y trabajo con las muestras, huellas y evidencias,
se procederá a limpiar el instrumental utilizado (tijeras, pinzas, etc.) con Etanol al 70
%.
24. Se mantendrán sobre la mesa de trabajo frascos con Etanol al 70 %, en el que se
verterán las puntas plásticas y tubos Eppendorff utilizados.
25. Otros materiales como placas de porcelana, portaobjetos, tubos, etc., se verterán
sobre un recipiente, que se colocará en el área del fregadero del local de
Descripción de las muestras, huellas y evidencias y al final de la jornada de trabajo,
se llevarán para el local de fregado.
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26. En todos los casos los materiales deben permanecer 24 horas en Etanol al 70 %,
antes de proceder a su fregado.
27. Las superficies de trabajo se descontaminarán al menos una vez al día y en todos
los casos de derramamiento de material infeccioso.
28. Preparar un sobre de nailon o caja, donde se viertan los materiales biológicos de
desecho. Estos materiales serán incinerados y nunca se verterán en los cestos de
basura normales.
29. La cra. Auxiliar de Laboratorio procederá al fregado de los materiales con guantes
de goma.
30. Los desechos líquidos serán tratados en la autoclave antes de ser depuestos.
31. Mantener limpios los locales de trabajo, retirando de estos todo objeto y/o material
que no tengan relación con la investigación.
32. Se establecerá un programa de lucha contra insectos y roedores.
XIV.6 BIBLIOGRAFÍA.
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Biohazards and Infection Control”. 2001.
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