Test de Barfoed

En un tubo de ensaye adicionar 0.50 mL de una disolución 0.5% de azúcar

correspondiente y 1.5 mL de reactivo de Barfoed

-Calentar en un baño de agua en ebullición hasta que la reacción ocurra. Observar y

cuantificar el tiempo requerido para la aparición de un precipitado rojizo o cambio de
coloración para cada tubo

-Al tubo de sacarosa adicionar 2 gotas de HCl concentrado calentar unos minutos a
ebullición. Observe y discuta sus resultados.

Sirve para distinguir monosacáridos reductores de disacáridos reductores,

basándose en la velocidad de reacción; en los monosacáridos la formación del óxido
cuproso es más rápido que en los disacáridos. Los monosacáridos reaccionan en
menos de 15 minutos, por su parte los disacáridos requieren de más de 15 minutos.

La reacción consiste en utilizar acetato cúprico y ácido acético en solución ácida con
lo que los monosacáridos son capaces de reducir al cobre de manera más rápida y
en condiciones menos drásticas.

Por supuesto que al tener la solución un pH ácido resulta necesario controlar
rigurosamente el tiempo de reacción, pues si éste se prolongara se produciría la
hidrólisis ácida del enlace glucosídico con la consiguiente liberación del carbono
anomérico y la aparición de nuevos grupos reductores que falsearían el resultado.

Prueba de Benedict

En un tubo de ensayo Colocar 1 mL de reactivo de Benedict y 3 gotas de disolución

de carbohidrato.

Calentar a ebullición Dejar enfriar a temperatura ambiente. Un resultado positivo se

considera por la aparición de un precipitado rojizo- naranja.

La prueba de Benedict es una de las reacciones de oxidación,que ayuda al

reconocimiento de azúcares reductores (compuestos que presentan su OH
anomérico libre). En la reacción de Benedict, se puede reducir el Cu2+ (color azul, en
un medio alcalino), el ión cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de
reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar a su forma de Cu+ (precipitado
rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O)) que precipita de la solución
alcalina con un color rojo-naranja, a este precipitado se lo considera como la
evidencia de que existe un azúcar reductor.

El reactivo de Benedict está compuesto por:

 -Sulfato cúprico.

-Citrato de sodio.

-Carbonato anhidro de sodio.

Test de Seliwanoff

-En un tubo de ensaye adicionar 0.5 mL de una disolución 0.5% de azúcar 1.5 mL de
reactivo de Seliwanoff

Las cetosas reaccionan rápidamente deshidratándose para dar furfural el cual se

condensa con el resorcinol para dar un compuesto aromático de color rojo cereza

Un calentamiento prolongado favorece la hidrólisis y transposiciones ocasionando
que otros carbohidratos den positiva la reacción (falsos positivos). Observe.

Test de Bial

-En un tubo de ensaye colocar 0.1 mL de una disolución al 0.5 % del azúcar y

1.5 mL del reactivo de Bial. Calentar en un baño de agua lapso máximo de 1- 3
minutos.

-Colocar el tubo en baño María por lapso de 2-3 minutos. Observe.

Es una reacción coloreada específica para pentosas y ciertos ácidos urónicos que se
descomponen al calentarse con ácidos fuertes formando pentosas. Bajo condiciones
cuidadosamente controladas de temperatura, tiempo y concentración de HCl, las
pentosas son rápidamente convertidas a furfural, mientras que el hidroximetilfurfural
se genera a partir de las hexosas presentes. En presencia del ion férrico (Fe+3) y
orcinol (5- metil resorcinol), el furfural se condensa rápidamente para producir un
complejo de color verde al calentar.

Hidrólisis del almidón

-En un matraz Erlenmeyer de 125 mL. Colocar 1 barra para agitación magnética, 0.6
gramos de almidón soluble, 5 mL de agua a temperatura ambiente 40 mL de agua en
ebullición, agitación hasta que esté totalmente solubilizado.

-Tomar 1 mL de la solución cada 5min y colocarlo en un tubo de ensayo (dos tubos a

la vez hasta tener 24 tubos), a la mitad de los tubos 2 gotas de disolución de yodo-
yoduro (prueba de Lugol: coloca el tubo en un baño de hielo unos minutos).
-Agregar 0.5 mL de disolución de almidón y observe la coloración

realizar la prueba de Benedict a la otra mitad, observe.

el almidón deberá estar completamente disuelto ya que el complejo almidón-iodo es

soluble en caliente

Se toman muestras según un tiempo definido para ver el avance de la reacción de
hidrolisis del almidón

La prueba de yodo es usada para determinar la presencia o alteración de almidón u

otros polisacáridos una solución de yodo- diyodo disuelto en una solución acuosa de
yoduro de potasio que reacciona con almidón produciendo un color púrpura. La
prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro
a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol.

La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de
estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las
moléculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es
de estructura ramificada, con con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho
más cortas y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.

La prueba de benedict tiene el mismo fundamento que el descrito anteriormente.

el almidón deberá estar completamente disuelto ya que el complejo almidón-iodo es

soluble en caliente

Se toman muestras según un tiempo definido para ver el avance de la reacción de
hidrolisis del almidón

La prueba de yodo es usada para determinar la presencia o alteración de almidón u

otros polisacáridos una solución de yodo- diyodo disuelto en una solución acuosa de
yoduro de potasio que reacciona con almidón produciendo un color púrpura. La
prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro
a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol.

La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de
estructura lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las
moléculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es
de estructura ramificada, con con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho
más cortas y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color
intermedio entre anaranjado o amarillo.

La prueba de benedict tiene el mismo fundamento que el descrito anteriormente.