Aislamiento de células del
cerebro (neuronas) de una rata de
laboratorio
Escuela profesional de Ing. Biotecnológica de UCSM.
RESUMEN
El cerebro se compone de una serie
de células, que pueden clasificarse
según su apariencia y Neurons for cultivation of rat brain
funcionamiento. Las células más
importantes y numerosas son las
células nerviosas son las neuronas.
Al aislar y cultivar las neuronas
individuales, los investigadores son
capaces de analizar las propiedades
relacionadas con el tráfico celular,
estructura celular y la localización
de la proteína individual, utilizando
una variedad de técnicas
bioquímicas.
Para el cultivo de neuronas se
utilizan células de cerebros de ratas
que son removidas y preparadas
como una simple suspensión. Las
células agregadas a los medios de
cultivo RPMI formarán una
estructura similar a la observada
en el cerebro in vivo durante un
período de 6 días
aproximadamente. El paso
siguiente al cultivo es el
reconocimiento de las células
crecidas en cultivo para esto se
utiliza la microscopía electrónica
ABSTRACT
The brain consists of a series of
cells, which can be classified
according to their appearance and
function. The most important and
numerous cells are nerve cells are
neurons. To isolate and grow
individual neurons, researchers are
able to analyze the properties
related to cell trafficking, cell
structure and location of individual
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protein using a variety of
biochemical techniques.
cells that are removed and prepared
as a simple suspension are used.
Added to the culture media will
form a cell similar to that observed
in the in vivo brain structure over a
period of about 6 days. The next
step is to culture the recognition of
cells grown in culture to this
electron microscopy is used.
Palabra clave: Medios de cultivo
RPMI.
ITRODUCCION
El cultivo celular es el proceso
mediante el que células, ya sean
células procariotas o eucariotas,
pueden cultivarse en condiciones
controladas. En la práctica el
término "cultivo celular" se usa
normalmente en referencia al
cultivo de células aisladas de
eucariotas pluricelulares,
especialmente células animales.
La complejidad de la
microarquitectura del cerebro,
compuesta por varios tipos de
células, cada con diferentes
procesos compactamente
relacionados, había hecho difícil el
aislamiento de células puras. El
primer esfuerzo en este sentido fue
hecho en 1.958 por Korey y
colaboradores, al aislar células de
la glia de la materia blanca del
cerebro. Sólo hasta 1967 se
desarrollaron los principales
procedimientos para el aislamiento
de células del cerebro.
Usando células en cultivo, las mezcló suave se sembró 250µl de
neuronas son capaces de mezcla más 5ml de medio
diferenciarse morfológicamente y aproximadamente se incubo
asemejarse a las células del tejido
original. Las células nerviosas RESULTADOS
(neuronas) son unas de las células
Control de crecimiento de las
más difíciles de cultivar debido a
células del cerebro de rata de
los grandes requerimientos de
laboratorio en una semana en el
sustratos que necesitan para su
medio de cultivo RPMI
desarrollo. Lo primero que
necesitan son recipientes de vidrio
o plástico muy bien tratados contra
la contaminación porque de lo
contrario esta clase de células no
sobrevive. Aún no ha sido
encontrada la excelente
proliferación de neuronas en
cultivos celulares.

MATERIALES Y METODOS

La práctica se realizó en Figura N°1: Neuronas en medio de cultivo RPMI

laboratorio de biología molecular en a los 7 días
la Universidad Católica de Santa
María, donde se nos fueron
proporcionados los siguientes
materiales: tubos de eppendor,
Medio de Cultivo RPMI, Antibióticos
Ampicilina,Suero Bovino Fetal al 10
%,colagensa, Kit de disección
estéril, alcohol 70%,placas Petri
para cultivo de células, Placas “six
well” para cultivo de células, micro
pipetas (10 µl,100µl y100 0µl)
estéril, cerebro de rata, hielo,
pipetas Pasteur, centrifuga y Figura N°2: Neuronas en medio de cultivo RPMI
a los 5 días
mechero busen .

Aislamiento de células
Para el aislamiento de células se
sacrificó una rata de laboratorio y
se extrajo su cerebro.
Se trituro el cerebro lo más que se
pudo y luego se lavó con suero ,la
suspensión obtenida para luego ser
llevada a la centrifuga ,después se
agregó 10 µl de colagenasa, se re
suspendió y se llevó otra vez a la
centrifuga a 1000 RPM durante
5min,luego se decantó y nos
quedamos con el pellet, luego se le
agrego 1ml de antibiótico se
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CONCLUSIONES
Los resultados obtenidos en el la
practica nos indican que el medio
RPMI no fue el adecuado para el
cultivo de neuronas ya que
murieron todas las células.
Los medios de cultivo para
neuronas debe ser es un medio
completo diseñado para el cultivo
de neuronas primarias “in vitro”.
Que debe contener de un medio
líquido estéril que contiene
aminoácidos esenciales y no-
esenciales, vitaminas, compuestos
orgánicos e inorgánicos, hormonas,
factores de crecimiento y minerales,
siendo un medio libre de suero. El
medio debe estar formulado
(cuantitativa y cualitativamente)
para generar un ambiente
nutricional adecuado para
promover la puesta en cultivo y el
mantenimiento de neuronas
primarias “in vitro”.

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