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2017
UNIVERSIDAD PRIVADA ARZOBISPO LOAYZA
INDICE
Introducción………………………………………………………………………………4
Laboratorio……………………………………………………...................5-12
Amortiguadoras………………….………………………………… 13-16
Anexos…………………………………………………………………………….…….27
BIOQUIMICA 2
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BIOQUIMICA 3
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INTRODUCCION
En esta guia de laboratorio, pretende que los estudiantes tomen contacto con el
laboratorio de bioquímica y para cada procedimiento se aplique el reglamento y las
normas generales de bioseguridad. Se le describirá el material de laboratorio y se hará
especial hincapié en la importancia del correcto uso de las unidades de masa, volumen y
concentración, así como del cuidado, correcta utilización y limpieza del material utilizado
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PRACTICA 1
BIOSEGURIDAD Y RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS
1-INTRODUCCIÓN:
El Laboratorio de Química es un lugar donde se desarrollan las prácticas elegidas por el docente
para confirmar y reafirmar los conocimientos teóricos impartidos en el aula.
Por lo tanto el estudiante deberá acatar el reglamento del Laboratorio y estar atento a las
explicaciones del docente.
Cada una de las reacciones efectuadas debe dominarse no sólo en la parte práctica, sino en el
conocimiento de sus productos finales, ya que con esto se pueden tomar decisiones para
conservar la limpieza del aire, el agua y el suelo, tratando de utilizar hasta donde sea posible,
procesos tecnológicos no contaminantes y en caso contrario dominar las técnicas adecuadas
para el manejo de residuos tóxicos peligrosos.
2-OBJETIVOS
Genera y registra datos e información a partir de la experiencia de cada instrumento utilizado en
las prácticas de Laboratorio.
Trabaja con cautela y normar el comportamiento en el Laboratorio por las exigencias de la
Seguridad personal y del grupo
Para reducir riesgos a la salud o a la integridad corporal, deben acatarse reglas de seguridad, por
lo general sencillas, cuando se realiza trabajo práctico de laboratorio. A menudo se dice que los
accidentes no ocurren por sí solos, ¡son provocados!. Las causas son generalmente por
ignorancia, por cansancio, por descuido, por uso de equipo y materiales defectuosos o
deteriorados, más aún por voluntad propia de tomar riesgos o por realizar bromas sin evaluar las
consecuencias de las mismas.
Para minimizar riesgos y prevenir accidentes es preciso conocer sus causas y estar alerta de
reconocer situaciones de riesgo susceptibles de desencadenar accidentes que no solo pueden
afectar al alumno, sino a todos los que trabajan en el laboratorio.
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EXPERIENCIA:
Desconocimiento de las formas de manejar las sustancias químicas (reactivos), los materiales
y el equipo con el que se trabaja.
Imprudencia en el manejo de equipo, reactivos y materiales.
Descuido o falta de precaución al efectuar las prácticas.
Portar bata de algodón (blanca) de talla apropiada con mangas largas y abotonadas durante
todo el tiempo que se trabaje en el laboratorio.
Portar lentes de seguridad para proporcionar protección en los ojos.
Mascarilla y guantes para evitar contaminarse con sustancias tóxicas.
Zapato de piso normal o tenis
MATERIAL DE VIDRIO
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Los pedazos de vidrio roto, particularmente los de pequeño tamaño nunca deben recogerse con
la mano. Debe usarse cepillo o recogedor y una aspiradora.
Conocer las propiedades físicas, químicas y toxicológicas de los reactivos químicos con los que
se va a trabajar.
Nunca deben tomarse alimentos ni tampoco se debe fumar en el laboratorio esto reduce el
riesgo de ingestión o inhalación accidental de las sustancias químicas.
No deben probarse sustancias químicas o disoluciones ni tampoco inhalar vapores sobre todo
si no se tiene información sobre las sustancias.
Es necesario limpiar inmediatamente cualquier sustancia tirada o líquido derramado. Los
ácidos y bases derramados deben neutralizarse con bicarbonato de sodio antes de limpiar el
área afectada. Para efectuar la limpieza deben usarse guantes de plástico.
La transferencia de líquidos que emiten vapores tóxicos o corrosivos como el HCl y HNO3 o
NH4OH deben efectuarse bajo la campana.
Las reacciones químicas que desprenden vapores o que involucran disolventes volátiles,
inflamables o tóxicas también deben realizarse bajo la campana.
La transferencia de volúmenes precisos de soluciones debe efectuarse con pipetas
volumétricas previstas de una perilla de succión o de una propipeta. Nunca debe pipetearse por
aspiración directa con la boca.
Las diluciones de ácidos concentrados siempre deben efectuarse añadiendo el ácido
concentrado al agua y nunca a la inversa.
Las soluciones que se preparan, siempre deben etiquetarse correctamente en el momento de
su preparación.
Antes de utilizar solventes inflamables (alcohol, éter, acetona, etc.) es preciso verificar que no
se encuentren mecheros encendidos en la cercanía.
En caso de que alguna sustancia química entre en contacto con la piel (manos, cara y sobre
todo con los ojos), debe lavarse la zona afectada con abundante agua durante 15 minutos por
lo menos.
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NaOH, KOH, NH4OH Los hidróxidos de Sodio y Potasio sólidos y las soluciones
concentradas de NH4OH pueden lesionar la piel y las
mucosas.
Na2O2, BaO2, H2O2 Los peróxidos de Sodio y Bario pueden causar incendio o
explosión al humedecerse en contacto con papel y materiales
orgánicos. El peróxido de Hidrógeno se descompone con
violencia en agua y oxígeno. En contacto con la piel puede
causar ampollas.
El peróxido de Hidrógeno o agua oxigenada que se emplea
como antiséptico es una solución muy diluida que no es
peligrosa si se manipula en forma adecuada.
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3-MATERIALES DE LABORATORIO
PIPETA: …………………………………….
TUBO DE ENSAYO: …………………………………….
VASO DE PRECIPITADOS: …………………………………….
ESPÁTULA: …………………………………….
MATRAZ ERLENMEYER: …………………………………….
PROBETA: …………………………………….
CAJA DE PETRI. …………………………………….
PIPETA. …………………………………….
4-PROCEDIMIENTO
Llegue a conclusiones generales en base a lo expuesto por cada uno de los equipos.
5-RESULATDOS
6-CUESTIONARIO
1.- Explica las medidas de bioseguridad en el laboratorio.
3.- Grafica o dibuja cada uno de los procedimientos utilizados en la práctica de laboratorio.
7- EVALUACIÓN
¿Mencione cuales son las reglas de Seguridad dentro de un laboratorio?
¿Cómo recomendarías que estas reglas fueran reconocidas y recordadas por las personas
que realizan trabajos incluyéndote a ti?
¿Cuál es tu opinión acerca del uso de ropa adecuada y protección a los ojos dentro del
laboratorio?
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PRACTICA 2
DETERMINACION DEL PH Y PREPARACION DE SOLUCIONES
AMORTIGUADORAS
1-INTRODUCCION
El pH: Los bioquímicos usan el pH para indicar de forma precisa la acidez o basicidad de una
sustancia. Normalmente oscila entre los valores de 0 (más ácido) y 14 (más básico).
INDICADOR DE pH: Los indicadores son colorantes orgánicos, que cambian de color según estén
en presencia de una sustancia ácida, o básica.
Figura 1. Escala de colores que toma el extracto de la col morada: en presencia de ácidos (1-6) y bases (8-14).
Los ácidos y bases son los dos tipos de sustancias más comunes en el laboratorio y en el mundo
Cotidiano. A finales del siglo XIX, Arrhenius formuló la primera definición:
ÁCIDO: Toda sustancia capaz de ceder protones (H+). BASE: Toda sustancia capaz de ceder oxhidrilos
(OH-).
En 1923 Brönsted-Lowry, propusieron una definición más amplia:
ÁCIDO: Toda sustancia capaz de ceder protones (H+).BASE: Toda sustancia capaz de aceptar protones
(H+).
Considerando que el agua, H2O es el solvente por excelencia y puede actuar como aceptor o dador de
H+. La reacción de autoionización correspondiente es: H2O + H2O H3O+ + OH –
Una manera de evaluar la acidez de una sustancia es por el conocimiento de la [H+], pero suelen ser
cantidades muy pequeñas y poco cómodas de manejar, una medida más práctica, es la basada en la
definición de pH del químico Danés Soren Sorensen en 1909, cuando realizaba un trabajo para el control
de calidad de la elaboración de la cerveza y es usada actualmente en todos los ámbitos de la Ciencia,
+
medicina e ingeniería. pH = -log [H ]
Se establece una escala de acidez o escala de pH, en base al producto iónico del H2O a 25 °C, (Kw= 1x
10-14 ), que varía en el intervalo 0 y 14. Soluciones ácidas tienen más H +, por ello pH< 7. Las
soluciones básicas tienen más OH-, el pH >7 y en las soluciones neutras [H+] = [OH-], pH = 7
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2-OBJETIVOS
3- MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta serológica 2mL y 5mL
4. Bagueta
5. Espátula
6. Beacker 250mL
7. Balanza analítica
8. Trípode
9. Rejilla de asbesto
10. Pinza de madera
Reactivos:
1. Sol. de NaOH 0,01M
2. Sol. de HCl 0,01M
3. Sol. de CH3COOH 0,01M
4. Sol. de NH4OH 0,1 M
5. Sol. de NH4Cl 0,1 M
4- PROCEDIMENTO
EXPERIMENTO 1: Determinación de pH de diferentes sustancias usando Papel
indicador:
a-Tomar una muestra de cada sustancia (Limón, Vinagre, Refresco-frutiño preparado, Leche,
Crema dental, Jugo de naranja, jugo de toronja, Agua expuesta al aire con 3 días de
anticipación, leche de magnesia, limpiador doméstico, clorox, champú, jabón líquido, agua
oxigenada, alcohol, crema de manos, perfume, desodorante, jabón de loza, jabón de tocador),
si es líquida con un gotero, si es sólida, humedecerla un poco con agua en un plato
desechable, usando la microespátula.
b-Tomar pedacitos de papel indicador (recortar con tijeras limpias y no tocar con los dedos ni
los guantes sucios ni húmedos) con las pinzas ó el depilador, y colocar sobre la muestra por
uno de los extremos el papel y registrar la coloración que arroja cada muestra, registrar datos
en una tabla. Compararlos con las tablas de pH llevadas a clase (laminadas)
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NaOH 0,01 M
HCl 0,01 M
CH3COOH 0,1 M
NH4OH 0,1 M
NH4Cl 0,1 M
5- RESULTADOS
Registrar los resultados en una tabla siguiente:
Vinagre
Refresco
Leche
Sailiva
Crema Dental
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6-CONCLUSIONES
7-CUESTIONARIO
1-Explique por qué es importante conocer el pH de las sustancias que utilizamos en
nuestro hogar.
2-Consulte otros tipos de indicadores y su rango de coloración en medio ácido y
básico y dibuje la escala para cada uno.
3-Realice las ecuaciones químicas para cada una de las experiencias realizadas
4-cuál es la importancia del sistema buffer en el organismo
8- REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
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PRÁCTICA N° 3
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
1-INTRODUCCION
Los carbohidratos, glúcidos o azúcares constituyen una de las más importantes clases de
moléculas constituyentes de los organismos. Los carbohidratos son los compuestos orgánicos
más abundantes de la biosfera y a su vez los más diversos. Normalmente se los encuentra en
las partes estructurales de los vegetales y también en los tejidos animales, como glucosa o
glucógeno. Estos sirven como fuente de energía para todas las actividades celulares vitales.
Son complejos terciarios en los cuales el hidrógeno y el oxígeno están en igual proporción que
el agua. Los más comunes son los sacáridos, los cuales se dividen también en monosacáridos
o azúcares simples, disacáridos y polisacáridos. Los carbohidratos son derivados aldehídicos o
cetónicos de alcoholes polioxidrilados y por lo tanto tienen las propiedades características de
esos grupos como son la formación de oxina e hidrazonas. Existen diferentes tipos de
reacciones químicas que sirven para determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos
(monosacáridos, disacáridos y polisacáridos)
La glucosa se usa mucho como alimento y como agente edulcorante, industrialmente se fabrica
en grandes cantidades por hidrólisis de almidón. La fórmula estructural de la sacarosa no tiene
grupos hidroxilos glucósidos libres, ni contiene grupo aldehídico libre ni potencial, ya que las
dos unidades de monosacáridos están unidos por los hidroxilos glucósidicos, ello trae como
consecuencia que la sacarosa no presente mutarrotación, no sea reductora y no forme
osazona.
2-OBJETIVOS
1. Realiza las reacciones de caracterización de azucares
2. Explica y describe químicamente las reacciones
3- MATERIALES Y EQUIPOS
MATERIALES
Tubos de ensayo (18) • Gradilla • Pinza para tubo de ensayo • Pipetas (3 de 1mL, 2 de 5mL)
• Vaso de precipitado (2 de 50mL) • Vidrio de reloj • Trípode • Mechero Bunsen o de alcohol
• Espátula • Agitador de vidrio • Rejilla con asbesto • Agua destilada
REACTIVOS
Reactivo de Fehling A y B • Reactivo De Lugol • Reactivo de Seliwanoff • Reactivo de
Molish • Reactivo de Bial • HCl concentrado y diluído • Bicarbonato. • Sacarosa (azúcar
común) • Fructosa (refresco) • Lactosa (leche) • Almidón (harina). • Galactosa, xilosa,
ribosa, maltosa.
4- PROCEDIMEINTO
.4.1. Experiencia: REACCIÓN DE FEHLING
Tomar la muestra que se quiera analizar (aproximadamente 3 mL) • Añadir 1 mL de
Fehling A y 1 mL de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo adquirirá un fuerte
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6- CONCLUSIONES:
Escribe tus conclusions sobre la práctica.
…………………………………………………………………………………………………
7- CUESTIONARIO
1-Por qué razón LOS CARBOHIDRATOS tienen diferentes resultados con los reactivos?
Explique.
2-¿Los polisacáridos y monosacáridos utilizan un mismo reactivo? ¿Qué cambios se observa
con cada una de éstas moléculas? Explique.
3-Explique las propiedades de cada uno de los reactivos utilizados en la práctica de
laboratorio.
4- Realice las ecuaciones químicas para cada una de las experiencias realizadas
5-Indique otros métodos cualitativos para identificación de glucosa y sacarosa
8-REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
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PRÁCTICA Nª 4
RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
1-INTRODUCION
Aminoácidos: En la estructura general de los aminoácidos se observa que tienen en
común un átomo de carbono central (alfa) al que están unidos covalentemente un
ácido carboxílico, un grupo amino y un átomo de hidrógeno. Además de ello, al átomo
de carbono alfa se une una cadena lateral, designada R, que es diferente para cada
uno de los 20 aminoácidos comunes.
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2- OBJETIVOS:
3- MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales:
1. Tubos de ensayo
2. Gradilla de metal
3. Pipeta 2mL y 5mL
4. Becker 250mL y 500mL
5. Espátula
6. Bagueta
Reactivos:
1. HCl Q.P
2. Hidróxido de sodio 40%, 10%
3. Sol. Sulfato de amonio 75%
4. Acetona
5. Sol. Albumina 1%
6. Sol. De ferrocinaruro de potasio
7. Fenilalanina Q.P
8. Tiroxina Q.P
9. Triptofano Q.P
10. Ácido sulfúrico Q.P
11. Rvo. De Biuret
12. Rvo. De ninhidrina
4- PROCEDIMIENTO
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B. Determinación de proteínas:
Reacción de Biuret:
5- RESULTADOS
Se determinó el análisis cualitativo de aminoácidos de la albúmina
6-CONCLUSIONES
7- CUESTIONARIO
1. Realice las ecuaciones químicas de cada una de las experiencias
2. Indique otras técnicas por las cuales se pueda identificar aminoácidos o proteínas
8-REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
1. Lock de Ugaz O. Investigación Fitoquímica: Métodos en el estudio de productos
Naturales
2. Dominínguez, X. A. Métodos de Investigación Fitoquímica. Editorial Limusa, México
D.F. 1973
3. Gibaja O. S. Guía para el análisis de los compuestos del carbono Lima – Perú 1977
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PRACTICA Nº 5
5.2. Competencia.
Determina colesterol en el suero sanguíneo. Concientiza el riesgo
que genera concentraciones elevadas de colesterol (ateroma) o bajas
(afección hepática o tiroidea).
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5.3.2. Reactivos.
5.3.3. Procedimiento.
a. En una gradilla disponer tres tubos de prueba de 13 x 100mm,
rotularlos
con P (problema), S (Standard) y B (blanco) luego proceder como
sigue
b. Reposo x 20 minutos.
REACTIVOS P S B
Agua destilada - - 10 ul
5.5. Cuestionario.
a. Describa como se realiza la biosíntesis del colesterol.
b. ¿Qué ocurre cuando el LDL-colesterol no es fagocitado?
c. Mencione cuatro métodos para la determinación de colesterol en
sangre, indicando ¿cuál? de ellos es el más exacto y por qué. y
¿Porqué?
d. Mencione lo requisitos indispensables que debe observar una
persona, para que su determinación de colesterol sea real.
e. Explicite la biosíntesis de colesterol a partir de la ingesta de
carbohidratos.
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PRACTICA Nº 6
5.2. Competencia.
Determina colesterol en el suero sanguíneo. Concientiza el riesgo que
genera concentraciones elevadas de colesterol (ateroma) o bajas (afección
hepática o tiroidea).
5.3.2. Reactivos.
Tampon fodfsto 0.1 M pH 6.5
Almidon 1%
HCl 0.5N
Agua destilada
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5.3.3. Procedimiento.
1 2 3
Colocar nuevamente los tubos en baño maría y sacar alícuotas de 0.5 mL. de cada
uno de los tubos
a los 5, 10, 15 y 20 minutos, y adicionarlos a los tubos previamente preparados que
contienen 2.0 mL
de ácido clorhídrico 0.05 N, de acuerdo al siguiente esquema:
Tubo N° 1 2 3
5.4. Resultados.
Se determinó la acción enzimática sobre el almidon
5.5. Cuestionario.
Describa como se realiza la hidrolisis del almidón mediante la enzima.
¿Qué ocurre cuando hay deficiencia de esta enzima?
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ANEXOS
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