UNIVERSIDAD CATOLICA DE SANTA MARIA

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

MICROBIOLOGIA GENERAL

A: M.V.Z. ELOISA ZUÑIGA

DE: JEZLI SOLIS VERA

ASUNTO: PRACTICA #3 “PREPARACION Y ESTERILIZACION DE MEDIOS

DE CULTIVO”
TITULO: PREPARACION Y ESTERILIZACION DE MEDIOS DE CULTIVO

OBJETIVOS:

OBJETIVOS GENERALES:

Que el estudiante conozca la finalidad e importancia de los medios de cultivo, así como la
esterilidad y distribución de los mismos.
OBJETIVOS ESPECIFICOS

Que el estudiante conozca la importancia de la determinación de los cálculos del pesaje de

los medios de cultivo.
Conozca la importancia del manipuleo y taraje de las balanzas antes de pesar los medios de
cultivo.
Que conozca la importancia de la preparación, toma de pH, acondicionamiento, chequeo de
la esterilidad y distribución de los medios de cultivo a ser utilizados.

INTRODUCCION:

Con excepción de algunos pocos microorganismos fastidiosos, la gran mayoría de los

microorganismos patógenos pueden ser cultivados en el laboratorio en medios especiales.

Un buen medio de cultivo debe contener los nutrientes esenciales de la concentración

adecuada para una determinada cantidad de agua destilada, debe hallarse libre de sustancias
inhibidoras del crecimiento microbiano y debe tener una consistencia determinada.
Además, debe tener un pH apropiado que permita el metabolismo adecuado de los
microorganismos deseados, y debe ser estéril por supuesto.

Para conseguir el desarrollo artificial de los microorganismos en el laboratorio, resulta

esencial conocer la forma de preparación correcta de los medios de cultivo. Cuando se trata
de la reconstrucción de medos de cultivo deshidratados, tener presente que las indicaciones
para preparación en la generalidad de los casos vienen en la etiqueta adherida al frasco,
donde se indica entre otras cosas importantes, la cantidad (sustancias) de medio a pesar y
rehidratar en mil ml de agua destilada.
MATERIALES Y EQUIPOS

Materiales:

 Medios de cultivo, según requerimiento de la siguiente practica

 Beakers
 Matraces
 Probetas
 Placas de Petri
 Tubos de ensayo
 Papel graff
 Tijeras
 Mechero

Equipos de laboratorio:

 Balanza de platillo
 Autoclave
 Horno de esterilización
 Estufa de inoculacion
PROCEDIMIENTO:

PROCESO DE PREPARACION DE MEDIOS

1. Disponer de todo el material a ser utilizado para esta actividad
2. Realizar el cálculo de las cantidades de medio y de agua destilada para la
preparación. Aplicando el conocimiento de una regla de tres simple se puede
preparar de forma adecuada cualquier medio.
3. Mezclar el medio y el agua destilada en un frasco o beakers y hacerlo disolver
calentando el mechero hasta que disuelva completamente.
4. Verificar y ajustar el pH del medio disuelto según la indicación de la etiqueta del
frasco.
5. La verificación del pH se puede hacer de varias maneras: usando papel tornasol
especial con escala decimal y fraccional que permite una lectura rápida, o en forma
más precisa con potenciómetro.
6. El pH de los medios se ajusta a lo requerido mediante el uso de la solución de ácido
clorhídrico de sodio decinormal.
7. Acondicionamiento de los depósitos que contienen los medios preparados para su
respectiva esterilización.
 PROCESO DE ESTERILIZACION DE LOS MEDIOS
1. Se usa para ello y para la gran mayoría de medio de cultivo la autoclave, la cual
produce una adecuada esterilización a 121 C°, 15 iba de presión y durante un
tiempo de 15 a 30 minutos.
2. También se puede utilizar los equipos de filtración, dependiendo ello del tipo de
medio de cultivo y de la finalidad del mismo

PROCESO DE PLAQUEO Y ENTUBADO

1. Una vez autoclave el medio, estos se deja enfriar hasta unos 38° y luego se procede
a plaquear y entubar bajo el ambiente de esterilidad de un mechero, colocando una
cantidad de placas o tubos de acuerdo con el propósito del medio y del tipo de
microorganismo.
2. Si se trata de medio solidos se deja que estos solidifiquen al medio ambiente por un
corto tiempo.
 PROCESO DE CHEQUEO DE ESTERILIDAD
1. Los medios preparados sólidos, semisólidos o líquidos se colocan en incubadoras
por 18 a 24 horas a 37° para verificar su completa esterilidad.
2. Luego de la verificación de esterilidad, los medios estériles pueden ser utilizados
inmediatamente o guardados en refrigeración para posterior utilización. Los medios
que resulten contaminados serán descartados.
RESULTADOS

Estas actividades se repetirán constantemente a través de todo el curso, por lo que el

alumno deberá aprender bien y evitar errores en oportunidades posteriores.

DISCUSION

a. Establezca la importancia de la preparación de los medios de cultivo en el

laboratorio de microbiología.

En microbiología se emplea medios de cultivos por la simple razón que los

organismos a estudiar necesitan una fuente de energía, para vivir y así desarrollarse,
por tal motivo, la preparación de los medios de cultivos varían ya que deben de
prepararse según las necesidades nutricionales del organismo, esto es fundamental
para su estudios.

b. Establezca la importancia de una completa disolución de los medios antes de

verificar y ajustar su pH.

Para que no exista error al medir el pH para evitar ajustarlo cuando no sea necesario

c. Establezca la forma de ajustar el pH de los medios de cultivo de acuerdo a lo

establecido en la etiqueta del frasco.

El pH de los medios se ajusta a lo requerido mediante el uso de la solución de ácido

clorhídrico de sodio decinormal

d. Establezca que se debe hacer con los medios preparados antes de la esterilización
en autoclave.

Se debe acondicionar para su respectiva esterilización

e. Establezca porque se debe enfriar los medios antes de ser plaqueados y

entubados.

f. Establezca porque se hace necesario un proceso de chequeo de esterilidad de los

medios de cultivo.

Se realiza este paso para comprobar su completa esterilidad.

g. Establezca porque es importante contar con todo el material a la mano antes de

empezar a preparar los medios de cultivo