Coeficientes volumétricos de transferencia de oxígeno ( k L

a ) en cultivos discontinuos con caldos no newtonianos

Abstracto

La transferencia de oxígeno en caldos de fermentación no newtonianos de Aspergillus awamori, durante los

cultivos discontinuos en los convencionales 10 l biorreactor ha sido investigado. Valores del coeficiente de
transferencia de oxígeno volumétrico (kLa), obtenidos a distintas velocidades del impulsor, flujo de aire las
tasas y las distintas concentraciones iniciales de sustrato se correlacionaron con variables operacionales,
parámetros geométricos del sistema y propiedades físicas de los caldos utilizando técnicas rigurosas para
obtener un conjunto de datos confiables y precisos. Un dispositivo experimental se construyó para mediciones
reológicas en línea, y la viscosidad dinámica aparente se determinó a partir de los reogramas de caldo. En Para
medir los requisitos de potencia, se desarrolló un medidor de torque y fluidos no newtonianos con
características reológicas similares a los caldos Aspergillusfermentados se utilizaron para obtener curvas de
referencia y correlaciones en el fermentador donde se realizaban los cultivos. El método de balance de gas y
un método dinámico modificado se utilizaron simultáneamente para determinar los valores de kLa. Los
métodos rigurosos así desarrollado permitió la evaluación adecuada de la transferencia de oxígeno en los
cultivos y también permitió buenos ajustes de cuatro diferentes tradicionales correlaciones para kLa a los
datos experimentales.

1. Introducción

Los caldos de fermentación que contienen células miceliales exhiben con frecuencia un comportamiento
reológico pseudoplástico no newtoniano, que se puede describir mediante el modelo de ley de potencias.

Este comportamiento ejerce un profundo efecto sobre el rendimiento del biorreactor, afectando el patrón de
mezcla, el requerimiento de potencia, el calor y los procesos de transferencia de masa [1]. El aumento en la
viscosidad aparente del caldo (μap) durante las fermentaciones aeróbicas puede ser parcialmente
compensado por incrementos en las condiciones de operación (N y Q), a fin de mantener valores de KLa
adecuados. Sin embargo, las altas velocidades del propulsor (N) conducen a la formación de zonas de alto
cizallamiento cerca de los impulsores, con el consiguiente daño físico a las células y una reducción en la
productividad del proceso [2]. Debido a la importancia del coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico
(kLa) en el rendimiento y la ampliación de biorreactores convencionales, la bibliografía que describe diversas
correlaciones para kLa en fluidos newtonianos es bastante extensa. Sin embargo, se debe tener especial
cuidado cuando se aplican estas correlaciones a sistemas no newtonianos que contienen electrolitos como
caldos de fermentación [3].

Se han propuesto dos tipos de correlaciones para la transferencia volumétrica de oxígeno coeficiente (kLa).
El primero no hace uso de ningún criterio dimensional. En estas correlaciones, kLa está relacionado con el
consumo de potencia gasificada por unidad de volumen de caldo (Pg / V) y la velocidad superficial del gas (vs),
como originalmente propuso Cooper et al. [4]
donde los valores de las constantes a1 y b1 pueden variar considerablemente, dependiendo de la geometría
del sistema, el rango de variables cubiertas y la metodología experimental utilizada. Aunque inicialmente se
desarrolló para fluidos muy distintos de los caldos de fermentación, este tipo de correlación se ha utilizado
ampliamente en los sistemas de fermentación [3,5-7]. En un trabajo más reciente, Montes et al. [8] valores
determinados de kLa en caldos de levadura (Trigonopsis variabilis) en amplios rangos de velocidades de
impulsor y velocidades de gas superficiales en tres diferentes biorreactores con chorro agitado
mecánicamente, burbujeadores y burbujeadores (2, 5 y 15 l) para considerar el efecto de la ampliación del
fermentador en kLa. Los datos experimentales se ajustaron utilizando la correlación propuesta por Cooper et
al. [4] y los valores para los parámetros a1, b1 y constante de proporcionalidad fueron 0.35, 0.41 y 3.2 × 10-3,
respectivamente. Debido al hecho de que la mayoría de los caldos de levadura se comportan como un fluido
ligeramente no coalescente, según los autores, la correlación mejoró la predicción de los valores de kLa con
respecto a otras correlaciones genéricas generalmente desarrolladas para fluidos fuertes coalescentes y no
coalescentes. Las formas extendidas de este primer tipo de relación se han propuesto en la literatura,
incorporando términos como la velocidad del impulsor (N) y la viscosidad aparente del fluido (μap). Por
ejemplo, Ryu y Humphrey [9] observaron la influencia de la viscosidad aparente del caldo (μap) en kLa en la
fermentación de la penicilina y propusieron la siguiente correlación:

donde nuevamente, las constantes a2, b2, c2 así como la constante de proporcionalidad, dependen de la
geometría del sistema. Más recientemente, Garc ıa-Ochoa y Gómez [10] utilizaron esta correlación para
ajustarse a los datos experimentales obtenidos en un reactor de tanque agitado de 20 l de volumen de trabajo.
La reología de las soluciones de goma xantana se describió tanto en términos de la ley de poder como de los
modelos de Casson. Los experimentos se realizaron considerando el efecto del número y tipo de agitadores
(paleta o turbina), el número de paletas de los agitadores y el tipo de burbujeador (anillo y disco) en el
coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa). De la misma manera, Gavrilescu et al. [1] han
evaluado el problema de la transferencia de oxígeno en caldos antibióticos producidos por nueve
microorganismos diferentes que pertenecen a los actinomicetos y los hongos. La siguiente ecuación para kLa
se estableció a partir de una amplia variedad de datos experimentales obtenidos en biorreactores de tanque
agitado de 20 y 100 m3:

Además, Shin et al. [11] verificaron que en cultivos de alta densidad celular de aerobios de crecimiento rápido
como E. coli recombinante donde la masa celular aumenta hasta más de 70 g / l, la disponibilidad de oxígeno
puede ser la limitación de velocidad del proceso de fermentación. De esta forma, se ha propuesto la siguiente
correlación para kLa que incorpora el efecto de la densidad celular (X) en la transferencia de oxígeno:

El segundo tipo de correlación para kLa se basa en el análisis dimensional. Este enfoque presenta ciertas
ventajas porque las correlaciones obtenidas para un sistema conocido se pueden usar para estimar kLa en
otros sistemas con diferentes dimensiones. Yagi y Yoshida [12] propusieron la siguiente correlación, válida
tanto para fluidos Newtonianos como no Newtonianos, para la turbina estándar de seis palas en configuración
estándar en un recipiente de 0,25 m de diámetro:

This correlation fitted to the experimental data in a reasonable extent, with maximum deviations of 30 and
80%, between experimental and calculated Sh∗ values, for Newtonian and non-Newtonian fluids, respectively.
In order to determine the combined effects of the variables, including operational conditions, liquid and gas
properties and geometry of the tank, Garc ́ıa-Ochoa and Gómez [10] employed a similar dimensionless
equation to fit the set of experimental data of kLa obtained in the same system under operational conditions
above specified. Li et al. [13] proposed a relationship among kLa, the impeller speed (N) and the apparent
viscosity (μap), for fermentation broths of Aureobasidium pullulans and Xanthomonas campestris in 100 l
fermentor, which correlated quite well the great variety of experimental data, as follows, respectively:

Zlokarnik [14] sugirió, también a través del análisis dimensional, una dependencia general de kLa en las
propiedades fisicoquímicas y las condiciones de operación, de la siguiente manera:

donde la variable adimensional Si *, no exactamente definida, está relacionada con el comportamiento de

oalescencia de las soluciones. Sin embargo, esta correlación presenta una característica que no se encuentra
en las otras ya que la variable Pgi representa la potencia gaseada consumo por impulsor, esta ecuación se
puede aplicar a sistemas con diferentes números de impulsores y, por lo tanto, con diferentes geometrías Esta
posibilidad fue verificada por Jurecic et al. [3], investigando culturas sumergidas de Bacillus lus licheniforms
para la producción de bacitracin en biorreactores 100 l y 67.5 m3 con dos y cuatro impulsores de turbina,
respectivamente. Aunque se han desarrollado varias correlaciones para diferentes sistemas, la mayoría de
ellos no son específicos de la fermentación caldo de caldo o, cuando se desarrolla para ese propósito, lo hacen
no determina todas las variables a lo largo del cultivo. La tensión superficial del líquido (σ), por ejemplo, se
considera ser constante durante todo el cultivo y, por lo tanto, por lo tanto, no se considera en las
correlaciones. También en el desarrollo de correlaciones kLa en cultivos involucrados microorganismos
filamentosos, se debe tener especial cuidado tomado al medir algunas variables, como el reológico
propiedades del caldo y el kLa en sí, cuando tradicional equipos y metodologías se utilizan. En trabajos
recientes, Badino Jr. et al. [15], así como Svihla et al. [16], verificado que el uso de reómetros bancarios
convencionales, como cilindro concéntrico, para determinar las propiedades reológicas de Las suspensiones
miceliales viscosas a menudo son insatisfactorias. El Los principales problemas son causados por el tamaño
del gránulo, generalmente de mismo orden de magnitud que el anillo, así como el diez la debilidad de la
suspensión para convertirse en heterogénea debido a asentamiento e interacción de partículas. Por lo tanto,
proponen el uso del reómetro de rotación provisto de un impulsor helicoidal para obtener datos reológicos
confiables y precisos para los filamentos caldos de fermentación Además, Olsvik y Kristiansen [17] concluyó
que la medición continua en línea de la reología del caldo permite el tratamiento uniforme de las muestras y
estadísticamente más medidas "correctas". El objetivo de este trabajo es investigar la influencia de
condiciones de funcionamiento en las propiedades reológicas de la Caldo fermentado y transferencia de
oxígeno durante el lote Cultivos de A. awamori en un fermentador a escala de laboratorio.Metodologías para
mediciones reológicas en línea y para determinar el consumo de energía y kLa tienen desarrollado para
obtener un conjunto de datos confiables y datos de tasa Cuatro correlaciones clásicas mencionadas
anteriormente (Ecuaciones (1), (2), (5) y (8)) para la transferencia volumétrica de oxígeno coeficiente (kLa),
incluidas las condiciones de funcionamiento, geo-arámetros métricos del sistema y propiedades físicas del
caldo (viscosidad aparente y también tensión superficial del caldo filtrado), ajustado a los valores
experimentales.

2. Materiales y métodos

2.1. Microorganismos y medios de cultivo

Una suspensión de esporas (2 × 107 esporas por mililitro) de A.

awamori NRRL 3112, almacenado en criotubos (20% de glicerol)

v / v) a -20 ° C, se utilizó a lo largo de este trabajo.

El medio de crecimiento estaba compuesto por (en g / l): azúcares reductores totales (TRS) de la harina de
yuca y analizado como glucosa, 20,0; extracto de levadura, 0.2; MgSO4 · 7H2O, 1.0; (NH4) 2SO4, 10.0;
Na2HPO4 · 12H2O, 7.56; KH2PO4, 7.0, pH 5.0. Se utilizaron dos medios de fermentación con diferentes
composiciones. El primero tenía la misma composición que el medio de crecimiento y el segundo tenía una
concentración inicial de TRS (S0) de 40.0 g / l, con la adición de antiespumante de silicona (0.08 ml / l) a ambos.

2.2. Equipo de fermentación y procedimiento de cultivo Se realizaron nueve lotes de cultivo a 35 ° C y pH 5.0
en un fermentador Microferm MF-14 de 10 l (New Brunswick) Sci. Co. Inc., EE. UU.) Provistos de cuatro
deflectores para favorecer la turbulencia y evitar la formación de vórtices. Para cada fermentación, las esporas
se germinaron inicialmente en cinco matraces Erlenmeyer de 1 l, cada uno conteniendo 200 ml de medio de
crecimiento.

Los matraces se inocularon con 1 ml de la suspensión de esporas de los criotubos y se inocularon en un

agitador rotatorio (New Brunswick Sci.) Durante 24 ha 35 ° C y 300 rpm. El contenido de los matraces se
transfirió al fermentador con 9 l de medio de fermentación, realizando un total de 10 l de caldo de
fermentación. Los cultivos se llevaron a cabo en diferentes condiciones operativas. Los rangos de velocidad
del impulsor (300 <N <700 rpm) y flujo de aire específico (0.2 <φair <1.0 vvm) se utilizan con frecuencia
durante los cultivos de hongos filamentosos en biorreactores de escala de laboratorio, para proporcionar una
mezcla adecuada y suministro de oxígeno a la Células. Los ensayos se designaron de la siguiente manera: E20-
7-3, E20-5-6, E20-7-9, E40-5-2, E40-5-6, E40-5-10, E40-7-2, E40 -7-6

y E40-7-10. La etiqueta E20-7-3, por ejemplo, especifica las siguientes condiciones experimentales: S0 = 20 g
/ l, N = 700 rpm y φair = 0.3 vvm, respectivamente. Las muestras fueron retirado cada 3 h para
determinaciones analíticas.

La concentración de oxígeno disuelto se midió con un electrodo galvánico esterilizable (Mettler-Toledo

InPro6000 Series), con un FEP de 0,0254 mm de grosor (etileno fluorado).

lene propileno) membrana. Las lecturas de las fracciones molares de oxígeno (YO2) y dióxido de carbono
(YCO2) en el gas de salida fueron proporcionadas por analizadores de gases producidos por Beckman Industrial
(modelo 755) y Fuji Electric (modelo IR-730), respectivamente. El aparato experimental se muestra en la Fig.
1.

2.3. Determinaciones analíticas y medición de la tensión superficial La concentración celular (X) se evaluó
como materia seca obtenida después de filtración al vacío y secado a 85 ° C durante 6 h. La concentración de
sustrato (S) se determinó como glucosa equivalente utilizando Glucosa Autoanalyser II (Bran-Luebbe),
después de que el polisacárido en la muestra se había convertido previamente en glucosa a través de una
hidrólisis enzimática [18].

La tensión superficial del líquido del caldo (σ) filtrado se midió con un tensiómetro de anillo Fisher Scientific
Co.

2.4. Propiedades reológicas

Se registraron mediciones reológicas continuas en línea cada 2 h de cultivo, utilizando el dispositivo

experimental construido y calibrado por Badino Jr. et al. [15] basado en los informes originales de Kemblowski
y Kristiansen [19]. Con el fin de determinar las curvas de flujo de los caldos de fermentación, se produjo un
impulsor giratorio de cinta helicoidal conectado a los reómetros de Brookfield, modelos LV-DVIII y RV-DVIII
(Brookfield Eng. Lab. Inc., EE. UU.), que midió el momento de torsión del impulsor (T) a diferentes velocidades
del impulsor de rotación (N). La velocidad de cizalladura promedio, γ av y la tensión de cizalladura promedio,
τ av, alrededor del impulsor se calcularon a partir de las ecuaciones de calibración, γ av = 28.91N y τ av =
10530T.
Para estas mediciones reológicas continuas en línea, el caldo de fermentación se bombeó del biorreactor a
través de un tubo de caucho de silicona y al interior del reómetro del impulsor mediante una bomba
peristáltica. La salida del eje del impulsor en el reómetro estaba provista de un sello laberíntico giratorio. Las
condiciones asépticas se aseguraron introduciendo aire estéril a través del tubo de vidrio al lado del cabezal
del vaso. El tiempo de residencia promedio en el circuito se fijó en 90 s, para permitir buenas mediciones, sin
causar la sedimentación de partículas o incluso perturbar el rendimiento del cultivo.

El modelo de ley de potencia (τav = Kγ nav) se ajustó a datos experimentales en línea y se estimaron las
propiedades reológicas, el índice de consistencia (K) y el índice de comportamiento de flujo (n).

2.5. El consumo de energía

Los consumos de energía no gasificados y gasificados se estimaron bajo las diferentes condiciones operativas
mencionadas anteriormente (N y Q), cada hora durante el cultivo, utilizando curvas de referencia tradicionales
y correlaciones para interpretar datos de un medidor de torque construido especialmente basado en
extensómetros planos de 120 # resistencia. El nuevo dispositivo se conectó al eje del agitador dentro del
fermentador, para evitar pérdidas por fricción en el sello mecánico. Para obtener las curvas de referencia y
las correlaciones, fluidos no newtonianos de características reológicas similares a los caldos de fermentación
fueron usado [20]. El consumo de potencia sin gas (P0) se obtuvo a través de un gráfico del número de
potencia (NP) en función del número de Reynolds modificado (Rem), tal como lo propusieron Metzner et al.
[21] para fluidos pseudoplásticos no newtonianos.

donde k = 11.4, bajo las condiciones consideradas. El consumo de potencia gasificada (Pg) se estimó a través
de una correlación tradicional, propuesta por Michel y Miller [22], obtenida para el sistema experimental
utilizado en cultivos:

2.6. Oxygen transfer

Global oxygen uptake rate (QO2X) as well as the volumetric oxygen transfer coefficient (kLa) were obtained
by both steady-state and dynamic methods. By the gas balancing method, QO2X was determined from an
oxygen mass balance in the gas phase by the following expression:

La tasa de flujo molar de entrada (n ̇in) se midió utilizando un medidor de caudal másico modelo 5811-N
(Brooks Instrument Division) y la tasa de flujo de gas molar de salida (n ̇out) se calculó a partir del balance de
masa de nitrógeno en la fase gaseosa por el siguiente ecuación:
El coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa) podría calcularse para la condición de estado
estacionario, a partir del balance de masa para oxígeno disuelto de la siguiente manera:

donde C es la concentración de oxígeno disuelto en el caldo en el estado estacionario dado por el electrodo
galvánico y C * es la concentración de saturación de oxígeno disuelto en el caldo estimada por el método
propuesto por Schumpe et al. [23]. El coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa) también se
evaluó a través de un método alternativo, basado en el método dinámico tradicional teniendo en cuenta la
sensibilidad del electrodo (ke) [24]. La sensibilidad del electrodo (ke) se define como el inverso del tiempo que
tarda el electrodo en alcanzar el 63.2% de su valor final cuando se expone a un cambio de paso en la
concentración de oxígeno. Después de cada cultivo, la sensibilidad del electrodo (ke) se determinó en ensayos
por triplicado utilizando solución de goma de xantano al 0,4% p / v a 35 ° C para simular el caldo de
fermentación.

3. Resultados y discusión

3.1. Comportamiento reológico de los caldos de fermentación Con la velocidad promedio de cizallamiento (γ
av) que oscila entre 0,96 y 72,27 s-1, todos los caldos de fermentación en diferentes tiempos de cultivo se
comportaron como fluidos pseudoplásticos no newtonianos. Se lograron buenos ajustes entre el modelo de
ley de potencia y los datos experimentales, lo que demuestra que el reológico en línea

la medición es una técnica consistente y confiable para cultivos miceliales. La Fig. 2 ilustra curvas de flujo
típicas (reogramas) obtenidas en diferentes momentos para la ejecución E40-7-6.

Se observaron cambios significativos en los parámetros reológicos, el índice de consistencia del fluido (K) y el
índice de comportamiento del flujo (n) como se representa en la figura 3 para la corrida E40-7-6.

las fermentaciones continuaron: K aumentó rápidamente mientras que disminuyó a valores entre 0.3 y 0.5.
Curiosamente, una característica añadida de la técnica en línea fue su capacidad para anticipar con precisión
el instante en que el medio de cultivo se agota de la fuente de carbono, especialmente cuando las mediciones
se toman con frecuencia. Como se puede observar en la Fig. 3, inmediatamente después de que la fuente de
carbono se agota (~27 h), el valor de K disminuye repentinamente, probablemente como consecuencia de la
fragmentación de las hifas y la lisis.
3.2. Características de la absorción de oxígeno y la transferencia de oxígeno En la Fig. 4 se muestran los perfiles
de curso de tiempo de la tasa específica de absorción de oxígeno (QO2) y de la concentración de oxígeno
disuelto (C) obtenidos durante un experimento con limitación de oxígeno (E40-5-2). se ejecuta, los valores
máximos de la tasa de absorción de oxígeno específico (Qmax O2) variaron de 2.8 a 4.5 mmol de O2 g-1 h-1.
Metwally et al. [25], así como Shuler

y Kargi [26], ambos cultivando cepas de Aspergillus niger, que utilizan glucosa como principal fuente de
carbono, encontraron valores de Qmax O2 en el rango de 3-4 mmol de O2 g-1 h-1, lo que concuerda muy bien
con los resultados actuales. Con respecto a las determinaciones kLa, el uso simultáneo de los dos métodos de
medición permitió determinaciones confiables de kLa en un amplio rango (60.1-768 h-1) mostrando que el
balance de gases y el método dinámico alternativo teniendo en cuenta el tiempo de respuesta del electrodo
ser utilizado de forma complementaria: mientras que el método de balance de gas proporciona mediciones
precisas principalmente después de que la concentración celular alcanza valores más altos, el método
dinámico alternativo es particularmente útil para evaluar kLa al comienzo de la fermentación, cuando las
diferencias en la composición de oxígeno Los gases de salida son bastante pequeños y los niveles de
concentración de oxígeno disuelto son muy altos, una situación en la que el balance de gas y otras
metodologías a menudo son inadecuadas. Sin embargo, los métodos dinámicos para las determinaciones de
kLa son útiles solo cuando la concentración de oxígeno disuelto es bastante superior al valor crítico (Ccrit);
para valores más bajos, el método de balance de gas sería más apropiado [24].

Se sabe que además de las condiciones de agitación (N) y aireación (Q), una variable que afecta negativamente
kLa es la viscosidad aparente del caldo (μap), porque ofrece resistencia a la transferencia de oxígeno de la fase
gaseosa a la fase líquida. Los valores de viscosidad aparente (μap) variaron entre 0.013 y 0.257 Pa s y el valor
máximo estimado de consumo de energía no gasificada (P0) fue 187 W. La fuerte influencia de la viscosidad
aparente del caldo (μap) sobre el coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa) durante el
experimento E40-5-10 se muestra en la Fig. 5. Se puede observar que kLa disminuyó de 381 a 124 h-1 cuando
μap aumentó de 0.013 a 0.257 Pa s en el intervalo de tiempo de 0 a 37 h de cultivo. Además, en la Fig. 5 se
representa el curso temporal de la tensión superficial relativa del caldo filtrado (σ / σ w), donde σ w =

7.04.10-2 N m-1 es la tensión superficial del agua a 35 ° C [27]. La tensión superficial relativa del caldo filtrado
presentó un comportamiento ascendente, variando de 0,897 a 0,943 para el mismo período de tiempo
considerado anteriormente. Tal variación es relativamente modesta y probablemente se deba al consumo de
los nutrientes disueltos del medio de cultivo original a medida que avanza la fermentación.

3.3. Correlaciones para kLa Como se mencionó anteriormente, se han utilizado cuatro correlaciones clásicas
para correlacionar el coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa) con las variables de operación
(N, Q y Pg), los parámetros geométricos del sistema (V y Di) y las propiedades físicas de los caldos (μap y σ),
según lo descrito por Cooper et al. [4], Ryu y Humphrey [9], Yagi y Yoshida [12] y Zlokarnik [14]. Las
correlaciones se ajustaron a los valores experimentales y los parámetros se estimaron a través del
procedimiento de Marquardt que utiliza la regresión no lineal de mínimos cuadrados [28]. El criterio para el
mejor ajuste y optimización de parámetros fue la suma de cuadrados de residuos (SSR). No se encontraron
problemas de convergencia en la regresión no lineal y todos los intervalos de confianza, calculados para el
95% de probabilidad, estuvieron por debajo del 25% de los valores estimados.

Las correlaciones ajustadas, junto con los respectivos coeficientes de correlación (R2) y el número de valores
experimentales utilizados en las regresiones, se presentan en la Tabla 1. Las Figs. 6-9 ilustran la calidad de los
ajustes. El uso simultáneo de los dos métodos, el balance de gases (GB) y el método dinámico (DM), permitió
que se obtuviera una gran cantidad de valores kLa como se discutió anteriormente, con la obtención de
valores similares. en las mismas condiciones de operación

Los datos en la Tabla 1, así como las figuras, muestran que se obtuvieron buenos ajustes para todas las
correlaciones, lo que indica que cualquiera de los modelos ajustados puede usarse para estimar, con buena
precisión, el coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa) en estos Cultivos. Sin embargo, también
se puede observar que cuanto más compleja es la correlación, también mejor es la calidad del ajuste (valores
más altos de R2). La correlación propuesta por Cooper et al. [4], por ejemplo, siendo menos complejo porque
solo considera los efectos del consumo de energía gaseada por el volumen unitario (Pg / V) y la velocidad
superficial del gas (vs) en kLa, ajustaron los datos menos que las correlaciones que consideran los efectos de
las propiedades físicas del caldo en kLa. A pesar de su simplicidad, la correlación propuesta por Ryu y
Humphrey [9] dio también un buen ajuste, prácticamente tan buena como las correlaciones más complejas
propuestas por Yagi y Yoshida [12] y por Zlokarnik [14] que necesitan el conocimiento de variables adicionales
de el caldo, como la viscosidad aparente (μap) y la tensión superficial (σ), para una aplicación conveniente.
Sin embargo, si tenemos la intención de utilizar una correlación kLa en el diseño o la ampliación de
biorreactores convencionales, es más conveniente utilizar correlaciones más complejas, como las propuestas
por Yagi y Yoshida [12] y por Zlokarnik [14], que relaciona variables adimensionales. Además, debe observarse
que los parámetros estimados por las regresiones son muy similares a los valores encontrados en la literatura.
Los parámetros de la correlación propuestos por Cooper et al. [4], a1 = 0.47 y b1 = 0.39, respectivamente,
están dentro de los rangos de valores mencionados por Kawase y Moo-Young [29] para sistemas no
newtonianos, que son 0.37 <a1 <0.80 y 0.20 <b1 <0.84. El valor obtenido para la constante c2 de la correlación
propuesta por Ryu y Humphrey [9] (c2 = -0.12) es muy diferente de la obtenida en el trabajo original (c2 = -
0.86). Sin embargo, debe señalarse que los caldos estudiados tienen diferentes propiedades fisicoquímicas y
la discrepancia puede deberse al hecho de que se han utilizado diferentes ecuaciones para calcular las
viscosidades aparentes (μap) de los medios de fermentación: mientras que el modelo de ley de potencia ha
sido utilizado en este trabajo para describir el comportamiento no newtoniano de los caldos de fermentación
de Aspergillus, Ryu y Humphrey [9] emplearon el modelo de plástico de Bingham. Sin embargo, como se
esperaba, ambos valores para la constante c2 fueron coherentemente negativos, lo que indica una
proporcionalidad inversa entre kLa y μap. Los valores obtenidos para los parámetros de la correlación de Yagi
y Yoshida [12] no pudieron compararse con los valores encontrados en la literatura, debido a que no se ha
encontrado ningún trabajo publicado que aplique esta correlación a los caldos de fermentación no
newtonianos. Los los parámetros obtenidos de la correlación de Zlokarnik [14], presentaron valores similares
a los obtenidos por Jurecic et al. [3], empleando caldos de fermentación no-newtonianos de B. licheniformis
en escalas piloto e industriales (a3 = 0.35, b3 = -0.30 y c3 = -0.50). Además, debe enfatizarse que aunque
muchas correlaciones para kLa incluyen términos adimensionales, en la literatura investigada no se han
publicado trabajos encontró que las medidas actuales de parámetros tales como la tensión superficial del
filtrado (σ) durante el cultivo.

4. Conclusiones

El objetivo principal de este trabajo fue investigar la influencia de las condiciones de operación sobre las
propiedades reológicas del caldo y sobre la transferencia de oxígeno durante los cultivos discontinuos de A.
awamori en un fermentador a escala de laboratorio. Se han utilizado cuatro correlaciones clásicas encontradas
en la literatura, que relacionan el coeficiente de transferencia de oxígeno volumétrico (kLa) con las variables
operacionales del proceso (N, Q y Pg) y los parámetros geométricos del sistema. En particular, en algunas de
estas correlaciones, kLa también se correlaciona con las propiedades físicas del caldo (viscosidad aparente y
tensión superficial del líquido), que dependen del tiempo durante el proceso de fermentación.

Se obtuvieron buenos ajustes para todas las correlaciones probadas, considerando los datos experimentales
obtenidos con el cultivo de Aspergillus en condiciones operativas bastante distintas, observando que el ajuste
fue incluso mejor para las correlaciones más complejas, que tienen en cuenta las propiedades físicas del caldo.
Sin embargo, es obvio que la utilización de tales correlaciones significa la necesidad de determinaciones
analíticas más complejas, lo que no siempre es posible.

Finalmente, cabe señalar que los buenos ajustes obtenidos son consecuencia de la calidad y precisión de los
valores experimentales generados, que son el resultado de metodologías cuidadosamente elaboradas
implementadas en los cultivos.