Rosco Diagnostica

Diatabs™- Instrucciones para uso

Revisión: DBV0008A
Fecha de publicación: 01.10.2003
Idioma: Español

Diatabs™
Para la identificación bacteriana

Fabricante
ROSCO Diagnostica A/S, Taastrupgaardsvej 30, DK-2630 Taastrup, Dinamarca, www.rosco.dk

Uso previsto
En procedimientos cualitativos para la detección in vitro de propiedades microbianas en la identificación de
microorganismos. Diatabs se utiliza en los ensayos de identificación en forma de tabletas individuales.

Principios del procedimiento

Diatabs está disponible en dos modalidades: Diatabs para utilizar en placas de agar y Diatabs para disolver en líquido.
La mayoría de las Diatabs permiten una ejecución rápida del ensayo utilizando reacciones enzimáticas cromogénicas y
ensayos convencionales modificados. Las Diatabs para placas de agar detectan los patrones de sensibilidad naturales o
los requisitos de factores de crecimiento. Tras la incubación, se examinan las placas y se mide el diámetro de las zonas
de inhibición alrededor de la tableta comprimido para su interpretación con la tabla de zonas (sensibles/resistentes) de
cada tableta. Los Diatabs para líquido están basados en las propiedades enzimáticas de los microorganismos detectados
mediante diferentes sistemas de indicador. 1

Para más información sobre las Diatabs de identificación bacteriana, consulte la Guía de usuario Diatabs 2 en
www.rosco.dk.

Instrucciones de conservación

1) A la recepción del producto consulte el símbolo de temperatura que figura en la etiqueta. Las Diatabs con un
símbolo en la etiqueta de 2 °C - 8 °C deben conservarse en frigorífico y las Diatabs con un símbolo de 25 °C como
temperatura máxima deben conservarse a temperatura ambiente.
2) Si las Diatabs se conservan en el frigorífico, deberá dejarse que los viales alcancen la temperatura ambiente
(durante 30 - 60 minutos) antes de proceder a su apertura para evitar así la formación de condensación en los
mismos.
3) Las Diatabs deben conservarse en los viales bien protegidos de la luz directa y de una humedad elevada. Si se
suministra con material absorbente de la humedad (cápsula desecante), este deberá conservarse en el vial.

La fecha de caducidad de los viales sólo es válida si se conservan los viales cerrados a la temperatura prescrita.

Reactivos
Los Diatabs son tabletas de 6 ó 9 mm que se suministran en viales de 15, 25 ó 50 unidades. Las tabletas de 9 mm llevan
impresos en ambas caras un código único de 5 caracteres. Las tabletas de 6 mm para su uso en agar presentan un código
de color mientras que los Diatabs para disolver en líquido no llevan código. El usuario deberá registrar el contenido del
tubo de ensayo cuando utilice más de una Diatabs.

Precauciones
Respetar las instrucciones para uso. Ninguno de las tabletas están previstas para uso en ensayos de sensibilidad. El
rendimiento de las Diatabs depende no sólo del tipo específico de Diatabs sino también del inóculo y del tiempo de
incubación utilizados así como de la interpretación del diámetro de la zona o del cambio de color. Los productos
deberán ser manejados exclusivamente por técnicos que dispongan de la formación adecuada. Utilizar unas pinzas para
manejar las Diatabs.
Deberán tomarse precauciones frente a los riesgos microbiológicos esterilizando adecuadamente las tabletas, los
recipientes, los medios y los tubos de ensayo tras su uso. Los productos Diatabs, tubo y las placas de agar con posibles
patógenos se eliminan como residuos microbiológicos.

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Muestras
Las muestras deben recogerse y manejarse de acuerdo con las directrices recomendadas y, además, deben ser un cultivo
puro totalmente típico de la especie que se desea identificar.

Procedimiento
Materiales suministrados: Diatabs del tipo indicado en la etiqueta del envase.

Materiales necesarios pero no suministrados: Medios de cultivo, tubos de ensayo, reactivos, medios de control de
calidad y equipos de laboratorio necesarios para realizar la identificación (p. ej., ansas para inoculación, bastoncitos de
algodón, pipetas y recipientes para recogida).

I. Diatabs en agar
Para la identificación puede ser útil la sensibilidad de los microorganismos aislados en muestras clínicas frente a
agentes antimicrobianos o de otro tipo. Los microorganismos se pueden identificar y diferenciar midiendo el diámetro
de la zona tras el cultivo con un inóculo estandarizado aplicado a un agar específico.

I.1. Preparación del inóculo

Suspender varias colonias morfológicamente similares de una placa de agar cultivada durante 18-24 h (no selectiva) en
4-5 ml de solución de NaCl al 0,9 % para obtener una turbidez similar a la del patrón McFarland 0,5.

I.2. Inoculación
Al cabo de 15 minutos, introducir un bastoncito de algodón estéril en la suspensión ajustada y eliminar el resto de
inóculo del bastoncito presionando firmemente contra el interior del tubo. Al cabo de 15 minutos utilizar los bastoncitos
para inocular el agar especificado en la Tabla 1. Inocular la superficie seca de la placa de agar pasando el bastoncito por
toda la superficie. Dejar secar la superficie durante 3-5 minutos y como máximo 15 minutos antes de aplicar las Diatabs
en la superficie del agar.

I.3. Incubación y lectura de las placas

Transcurridos 15 minutos, colocar el agar hacia arriba e incubar las placas según la especie (aerobios, anaerobios o en
CO2 al 5-10% ) de acuerdo con la Tabla 1. Examinar las placas tras incubar durante toda la noche, salvo que se indique
lo contrario en la Tabla 1.
Medir los diámetros de las zonas de inhibición completa observadas mediante inspección visual. Las zonas se miden
con una precisión de un milímetro.

RESULTADOS:
Comparar el diámetro de zona registrado con los de la Tabla 1. Los resultados para una muestra específica se registran
como Sensible (S) o Resistente (R) de acuerdo con las zonas de interpretación. Utilizar la Tabla 1 para realizar una
identificación preliminar de la cepa bacteriana.

II. Diatabs para líquidos

II.1. Preparación del inóculo

El microorganismo que se desea analizar debe tener entre 18 y 24 horas y ser un cultivo puro. Los aislados de
crecimiento lento pueden analizarse con un cultivo de 48 horas.

Preparar en un tubo una suspensión fuerte (como mínimo patrón McFarland 4) del microorganismo analizado en 0,25
ml de solución salina. Puede inocularse una batería de Diatabs con un mismo inóculo.

II.2. Inoculación
Añadir una Diatabs al tubo. Algunas Diatabs requieren, además, la adición al tubo de 3 gotas de aceite de parafina
estéril (especificado en la Tabla 2).

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II.3. Incubación y lectura de los tubos

Cerrar el tubo e incubar a 35-37 °C durante 4 horas, durante la noche o según lo especificado en la Tabla 2.
Tras la incubación observar el viraje de color. En algunas Diatabs es necesario añadir un reactivo antes de leer el color y
algunas Diatabs pueden presentar dos reacciones.
Tras la interpretación del color de la primera reacción, añadir un reactivo y leer el nuevo color (especificado en la Tabla
2).

RESULTADOS:
Los Diatabs para líquido se clasifican según la reacción de color. En la Tabla 2 se muestran las reacciones de color para
las cepas negativas y positivas. Anotar la puntuación en un formulario adecuado.

III. Diatabs para otros procedimientos

Oxidasa
Colocar un papel de filtro grueso en una placa de Petri vacía y colocar la tableta de Diatabs sobre ella. Añadir una gota
de solución salina sobre la parte superior del comprimido, esperar 60 segundos y añadir otra gota de solución salina
sobre dicha parte superior. Cuando el papel de filtro esté húmedo, frotar la colonia sobre el papel de filtro húmedo
aprox. a 3-8 mm del borde del comprimido utilizando un ansa de plástico. Realizar la lectura al cabo de 2 minutos.
Pueden analizarse varios aislados con la misma Diatabs y el mismo papel de filtro.

Factores X, V y X+V
Para diferenciar Haemophilus spp. se utilizan tabletas con el factor de crecimiento X (hemina), con el factor V (NAD) o
con ambos factores (X+V). Los tres comprimidos se colocan en el agar, los del factor X y el factor V separados entre sí
2 cm y el del factor X+V más alejado de ellos. Utilizar únicamente un medio libre de los dos factores de crecimiento (p.
ej., agar TSA).
Incubar por la noche a 35-37 °C durante 18-24 horas y observar si existe o no crecimiento en las proximidades de la
tableta. Si el microorganismo sólo requiere el factor X, crecerá solamente en las proximidades de las tabletas de factor
X y X + V; si el microorganismo sólo requiere el factor V, crecerá solamente en las proximidades de las tabletas de
factor V y X + V y si requiere ambos factores X y V, crecerá solamente en las proximidades de las tabletas de factor X
+ V.1

CONTROL INTERNO DE CALIDAD

Para monitorizar el rendimiento de los comprimidos deberá utilizarse un procedimiento de control de calidad con cepas
ATCC o cepas positivas o negativas conocidas. El control de calidad deberá realizarse de acuerdo con los
procedimientos de control de calidad de laboratorio reconocidos. En las Tablas se presentan las reacciones de color
negativas y positivas así como las cepas sensibles o resistentes que indican el correcto rendimiento de todo el
procedimiento. Si se observan resultados de calidad aberrantes, no deberán registrarse los resultados.

LIMITACIONES DEL MÉTODO

1. Deberán utilizarse cultivos puros de microorganismos ya que una población microbiana mixta daría lugar a
resultados aberrantes.
2. El uso de Diatabs para la identificación de microorganismos y la interpretación de los resultados requiere la
presencia de un técnico experto en métodos microbiológicos generales que sepa manejar de forma razonable
conocimientos, experiencias, información sobre muestras así como otros procedimientos pertinentes antes de
establecer la identidad del aislado.
3. Los resultados de ensayos adicionales pueden afectar al resultado de la identificación final.
4. Las tabletas no están previstas para su uso en procedimientos de ensayo de sensibilidad.
5. La exactitud de las Diatabs está basada en las propiedades microbianas in vitro conocidas para especies
bacterianas específicas clínicamente relevantes1. Si se observan resultados atípicos o incoherentes se recomienda
repetir el ensayo. Un resultado imprevisto debe ser notificado, pudiéndose enviar los aislados a laboratorios de
referencia para su posterior análisis.

REFERENCIAS:
1) Murray P.R. et al. 2003. Manual of Clinical Microbiology, 8th ed., ASM, Washington DC.
2) Diatabs User's Guide 5th ed. 2000. www.rosco.dk

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Tabla 1. Interpretación de los resultados de Diatabs (en agar)

Revisión: DBV0009F
Fecha de publicación: 30.11.2006
Idioma: Español

DIATABS Ø Procedi- Interpretación Cepa CC

(Principios activos por Código* Zona Sensible Zona Resistente Sensible Resistente
mm miento
tableta) mm mm
Bacitracin low 0.4 U 6 BaL Standard I > 15 Estreptococos beta- < 14 Otros estreptococos S. pyogenes ATCC 12344 S. bovis ATCC 15351
en agar de hemolíticos Grupo A
sangre TSA
Boronic Acid 250 µg 9 BORON Detección de AmpC Beta-lactamasas mediadas por plásmidos.
(Research use only)
Brilliant Green 100 µg 6 BrG Standard II ≥ 10 Bacteroides spp. < 10 Fusobacterium spp. B. fragilis ATCC 25285 F. necrogenes ATCC 25556

C-390 40 µg 9 C-390 Standard I ≥ 12 Otros Pseudomonas Ninguna P. aeruginosa S. maltophilia ATCC 13637 P. aeruginosa ATCC 27853
spp. y no zona
fermentadoras
Colistin 10 µg 9 Co.10 Standard II ≥ 10 P. ej., Fusobacterium Ninguna P.ej. grupo B. fragilis d E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923
d
(Colistin sulphate) spp. zona
Cloxacillin 500 µg 9 CL500 Detección de AmpC Beta-lactamasas mediadas por plásmidos.
(Research use only)
Cycloheximide 15 µg 9 CYC15 Standard I en ≥ 25 C. glabrata < 25 C. albicans C. albicans ATCC 64548 C. krusei ATCC 6258
(Cycloheximide < 0.02 %) agar Shadomy C. krusei C. pseudotropicalis
modificado C. lusitaniae
Deferoxamine 250 µg 9 DEFRX Standard I a ≥ 16 S. epidermidis ≤ 14 Otros estafilococos S. epidermidis ATCC 12228 S. aureus ATCC 25923
(Deferoxamine mesylate) S. hominis
S. lutrae
Factor V 6 Ver texto H. influenzae:
(b-Nicotinamide adenine Se requieren ambos factores X y V.
dinucleotide sodium 175 µg) Crecimiento alrededor del factor X+V y entre el factor X y el
Factor X 6 factor V. H. influenzae ATCC 49247
(Hemin chloride 260 µg) H. parainfluenzae: H. parainfluenzae ATCC 7901
Factor X + V 6 Sólo se requiere el factor V.
Crecimiento alrededor del factor V y del factor X+V.
Metronidazole 5 µg 9 MTR.5 Standard II ≥ 15 Bacterias anaerobias Ninguna Bacterias aerobias y B. fragilis ATCC 25285 E. coli ATCC 25922
zona microaerofílicas
Metronidazole 50 µg 9 MTR50 Standard III ≥ 12 Gardnerella vaginalis < 12 Lactobacilos G. vaginalis ATCC 14018 E. coli ATCC 25922
Corinebacterias

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DIATABS Ø Procedi- Interpretación Cepa CC
(Principios activos por Código* Zona Sensible Zona Resistente Sensible Resistente
mm miento
tableta) mm mm
O/129 150 µg 9 O/129 Standard b ≥ 16 Vibrio spp. < 16 Aeromonas Kocuria rhizophila ATCC 9341 E. coli ATCC 25922
(2,4-Diamino-6,7-diisopropyl- Plesiomonas Enterobacteriaceae
pteridine phosphate salt)
Optochin 10 µg 6 OPT Standard ≥ 18 (CO2) S. pneumoniae < 16 (CO2) Otros estreptococos S. pneumoniae ATCC 49619 S. bovis ATCC 15351
(Ethylhydrocuprein HCl) TSA con no hemolíticos
5 % sangre. ≥ 20 (aerob) < 18 (aerob)
Incubado +/-
CO2
Oxgall 1000 µg 6 OXG Standard II >9 P.ej. Porphyromonas Ninguna P. ej. grupo S. aureus ATCC 25923 B. fragilis ATCC 25285
(Oxgall) spp. d zona Bacteroides fragilisd

Ps. aeruginosa Screen 80 µg 9 PSAE Standard I c ≥ 18 Otras Pseudomonas ≤ 14 P. aeruginosa E. coli ATCC 25922 P. aeruginosa ATCC 27853
(1,10 Phenanthroline) spp., no fermentadoras
y Enterobacteriaceae
S.P.S. 1000 µg 6 SPS Standard III ≥ 10 Gardnerella vaginalis G. vaginalis ATCC 14018 Kocuria rhizophila ATCC 9341
(Sodium polyanethol sulfonate)
Tellur 500 µg 6 TEL Standard I > 15 Estreptococos y la < 12 E. faecalis S. bovis ATCC 15351 E. faecalis ATCC 29212
(Potassium tellurite) mayoría de
enterococos

* El código en negrita figura impreso en los comprimidos.

Procedimiento:
Standard I: El ensayo se realiza con un inóculo equivalente a McFarland 0,5 en agar Mueller Hinton incubado aeróbicamente a 35-37 °C durante la noche si en la tabla no se especifica el agar
o las condiciones de incubación.
Standard II: El ensayo se realiza con un inóculo equivalente a McFarland 0,5 en FAA+sangre incubados aeróbicamente a 35-37 °C durante 24-48 horas si en la tabla no se especifica el agar o
las condiciones de incubación.
Standard III: El ensayo se realiza con un inóculo equivalente a McFarland 0,5 en agar Mueller Hinton + sangre incubado a 35-37 °C con CO2 al 5-10 % durante la noche si en la tabla no se
especifica el agar o las condiciones de incubación.

a) Medir en la zona las colonias de tamaño normal y descartar las colonias semiinhibidas. No utilizar agar con sangre.
b) Utilizar medio básico de agar-sangre (Oxoid) con NaCl al 0,5%. Incubar durante 24 horas. La resistencia adquirida frente al trimetoprim también lo será frente a O/129.
c) Medir únicamente la zona clara.
d) Puede utilizarse para separar los principales grupos de bacterias anaerobias habituales.

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Tabla 2. Interpretación de los resultados de Diatabs (en líquido)

DIATABS Procedi- Tiempo de Interpretación Control de calidad
(Principios activos por tableta)
Código miento incubación Positivo Negativo Positivo Negativo
Acetamide Hydrolysis ACM Standard (4 h) Rojo Amarillo, naranja P. aeruginosa ATCC 27853 E. coli ATCC 25922
(Acetamide 1.5 mg) o durante la noche
Adonitol ADO Standard 4h Amarillo, Rojo, K. pneumoniae ATCC 13883 E. coli ATCC 25922
(Adonitol 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Alkaline Phosphatase Alk P Standard 4h Amarillo Incoloro, E. coli ATCC 25922 S. haemolyticus ATCC 29970
(p-Nitrophenyl-Phosphate 0.1 mg) intenso amarillo claro
Alpha-Fucosidase α-FUC Standard 4h Amarillo Incoloro B. fragilis ATCC 25285 E. coli ATCC 25922
(p-Nitrophenyl-α-L-Fucosidase 0.2 mg) o durante la noche
Alpha-Galactosidase α-GAL Standard 4h Amarillo Incoloro E. coli ATCC 25922 P. aeruginosa ATCC 27853
(p-Nitrophenyl- α-D-Galactopyranoside 0.3 mg) o durante la noche
Alpha-Glucosidase α-GLU Standard 4h Amarillo Incoloro S. maltophilia ATCC 13637 P. aeruginosa ATCC 27853
(p-Nitrophenyl-α-D-Glucopyranoside 0.3 mg) o durante la noche
Alpha-Mannosidase α-MAN Standard 4h Amarillo Incoloro L. monocytogenes ATCC 19115 E. coli ATCC 25922
(p-Nitrophenyl-α-Mannopyranoside 0.3 mg) o durante la noche
Arginine Dihydrolase ADH Standard+oil 4h Rojo Amarillo P. aeruginosa ATCC 27853 K. pneumoniae ATCC 13883
(L-Arginine HCl 3 mg) o durante la noche
Beta-Fucosidase ß-FUC Standard 4h Amarillo Incoloro S. intermedius ATCC 27335 E. coli ATCC 25922
(p-Nitrophenyl-ß-L-Fusosidase 0.2 mg) o durante la noche
Beta-Glucosidase β-GLU Standard 4h Amarillo Incoloro K. pneumoniae ATCC 13883 Morganella morganii ATCC 25830
(p-Nitrophenyl-ß-D-Glucopyranoside 0.3 mg) o durante la noche
Beta-Glucuronidase (PGUA) PGUA Standard 4h Amarillo Incoloro E. coli ATCC 25922 K. pneumoniae ATCC 13883
(p-Nitrophenyl- ß -D glucuronic acid 0.3 mg) o durante la noche
Beta-Lactamase (Acido) Standard 15-20 min. Amarillo Violeta S. aureus ATCC 29213 S. aureus ATCC 25923
(Penicillinprocaine 4 mg, Penicillin G sodium 4 mg) y hasta 4 h (o marronáceo)
Beta-N-Acetylglucosaminidase β-NAG Standard 4h Amarillo Incoloro P. aeruginosa ATCC 27853 S. aureus ATCC 25923
(p-Nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucosaminide 0.2 mg) o durante la noche intenso
Beta-Xylosidase β-XYL Standard 4h Amarillo Incoloro K. pneumoniae ATCC 13883 E. coli ATCC 25922
(p-Nitrophenyl ß-D-xylopyranoside 0.3 mg) o durante la noche
Bile Esculin BE Standard 4h Negro, gris Incoloro, E. faecalis ATCC 29212 S. pneumoniae ATCC 49619
(Esculin 2 mg, Oxgall 9 mg) o durante la noche gris claro
Citrate CIT Standard 18-24 h Rojo Amarillo, naranja P. aeruginosa ATCC 27853 Proteus vulgaris ATCC 13315
(Citrate 2 mg)

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DIATABS Procedi- Tiempo de Interpretación Control de calidad
(Principios activos por tableta)
Código miento incubación Positivo Negativo Positivo Negativo
d-Xylose XYL Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Morganella morganii ATCC 25830
(d-Xylose 2 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Esculin Hydrolysis ESC Standard 4 h (o hasta 24 h) Negro, gris Incoloro, K. pneumoniae ATCC 13883 E. coli ATCC 25922
(Esculin 2 mg) gris claro
Gamma-Glutamyl Aminopeptidase γ-GLU Standard+I 4ho Naranja rojizo Amarillo P. aeruginosa ATCC 27853 E. coli ATCC 25922
(Gamma-Glutamyl-β-Naphthylamide 0.2 mg) Durante la noche Rojo Amarillo, naranja
Glucose GLU Standard 4h Amarillo, Rojo, P. aeruginosa ATCC 27853 A. lwoffii ATCC 9957
(D-Glucose monohydrate 2 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Hippurate Hydrolysis HIP Standard+IV 4h Fucsia oscuro, Incoloro, S. agalactiae ATCC 12386 S. pyogenes ATCC 12344
(Hippuric acid Sodium-salt 3 mg) azul amarillo claro
Indoxyl Acetate IAC Standard 4h Sedimento Sobrenadante Campylobacter jejuni ATCC 33291 E. faecalis ATCC 51299
(Indoxyl acetate 5 mg) o durante la noche azul, verde sin color, ligera-
mente coloreado
Inulin INU Standard 4h Amarillo, Rojo, S. mutans ATCC 25175 E. coli ATCC 25922
(Inulin 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Lactose LAC Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Proteus vulgaris ATCC 13315
(Lactose monohydrate 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
l-Arabinose ARA Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923
(L-Arabinose 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
LDC/Indole LDC/ Standard+oil 3-4 h (o hasta 24 h) Azul, violeta Amarillo, verde, E. coli ATCC 25922 Proteus vulgaris ATCC 13315
(L-Lysine 3 mg, L-Tryptophane 0.7 mg) Leer en gris (LDC pos., IND pos.) (LDC neg., IND pos.)
primer lugar
IND LDC y Rojo Amarillo K. pneumoniae ATCC 13883
después +IIa (LDC pos., IND neg.)
Leucine Aminopeptidase LAP Standard+I 4ho Naranja rojizo Amarillo S. bovis ATCC 15351 Aerococcus viridans ATCC 700406
(L-Leucine-β-naphthylamide-HCL 20 µg) Durante la noche Rojo Amarillo, naranja
l-Rhamnose RHAM Standard 4h Amarillo, Rojo, K. pneumoniae ATCC 13883 Proteus vulgaris ATCC 13315
(L-Rhamnose 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Lysine Decarboxylase (LDC) LDC Standard+oil 4h Azul, violeta Amarillo, verde, K. pneumoniae ATCC 13883 Enterobacter cloacae ATCC 13047
(L-Lysine 3 mg) o hasta 24 h Violeta fuerte gris, azul claro
Maltose MAL Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Morganella morganii ATCC 25830
(Maltose monohydrate 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado

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DIATABS Procedi- Tiempo de Interpretación Control de calidad
(Principios activos por tableta)
Código miento incubación Positivo Negativo Positivo Negativo
Mannitol MAN Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Proteus vulgaris ATCC 13315
(D-Mannitol 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Mannose MSE Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Proteus vulgaris ATCC 13315
(D-Mannose 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Melibiose MEL Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Proteus vulgaris ATCC 13315
(D-Melibiose 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Nitrate Reduction NO3 Standard+V 4h Rojo, rosa Incoloro, E. coli ATCC 25922 S. saprophyticus ATCC 15305
(Sodium Molybdate 40 µg, Potassium nitrate 4 mg) o durante la noche rosa claro
ONPG (Beta-Galactosidase) ONPG Standard 4h Amarillo Incoloro E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923
(o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside 0.4 mg) o durante la noche
ONPG/PYR ONPG/ Standard 3-4 h (para no Amarillo Incoloro Proteus vulgaris ATCC 13315
(o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside 0.4 mg, Leer en fermentadoras 18- S. haemolyticus ATCC 29970 (ONPG neg., PYR neg.)
L-pyrrolidonyl-ß-naphthylamide 0.2 mg) primer lugar 24 h) (ONPG neg., PYR pos.)
PYR ONPG y Rojo Amarillo, naranja
después +1
Ornithine Decarboxylase (ODC) ODC Standard+oil 4h Azul, violeta Amarillo, verde, E. coli ATCC 25922 K. pneumoniae ATCC 13883
(L-Ornithine HCl 3 mg) o hasta 24 h Violeta fuerte gris, azul claro
Oxidase OXI Ver texto Realizar la lectura Azul, fucsia Sin cambio de P. aeruginosa ATCC 27853 E. coli ATCC 25922
(Tetramethyl-p-Phenylenediamine 0.7 mg) al cabo de 2 color
minutos.
PGUA/Indole PGUA/ Standard 3-4 h (o hasta 24 h) Amarillo Incoloro E. coli ATCC 25922 Enterobacter cloacae ATCC 13047
(p-Nitrophenyl-β-D-Glucoronic acid 0.4 mg, Leer en (PGUA pos., IND pos.) (PGUA neg., IND neg.)
L-Tryptophane 1 mg) primer lugar
IND PGUA y Rojo Amarillo Proteus vulgaris ATCC 13315
después +IIa (PGUA neg., IND pos.)
Porphyrin (d-Ala) ALA Standard+IIb 4-6 h (o hasta 24 h) Rojo, rosa en Incoloro H. parainfluenzae ATCC 7901 H. influenzae ATCC 49247
(d-Aminolevulinic acid 0.1 mg) la fase acuosa fase acuosa
inferior
Proline Aminopeptidase PRO Standard+I 4ho Naranja rojizo Amarillo P. aeruginosa ATCC 27853 Cl. perfringens ATCC 12917
(L-proline ß-Naphthylamide-HCl 80 µg) Durante la noche Rojo Amarillo, naranja
Pyrazinamidase PZA Standard a 4h Naranja, rojo Incoloro, E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923
(Pyrazinamide 0.9 mg) o durante la noche amarillo claro
Pyrrolidonyl Aminopeptidase PYR Standard+I 4ho Naranja rojizo Amarillo Enterobacter cloacae ATCC 13047 E. coli ATCC 25922
(L-Pyrrolidonyl-ß-Naphthylamide 0.2 mg) Durante la noche Rojo Amarillo, naranja
Raffinose RAF Standard 4h Amarillo, Rojo, Enterobacter cloacae ATCC 13047 E. coli ATCC 25922
(D-Raffinose pentahydrate 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado

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DIATABS Procedi- Tiempo de Interpretación Control de calidad
(Principios activos por tableta)
Código miento incubación Positivo Negativo Positivo Negativo
Sorbitol SOR Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Proteus vulgaris ATCC 13315
(D-Sorbitol 2mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Sucrose SUC Standard 4h Amarillo, Rojo, Enterobacter cloacae ATCC 13047 Morganella morganii ATCC 25830
(Saccharose 3 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
TDA or Indole: Indole IND Standard+IIa 4 h Rojo Amarillo Proteus vulgaris ATCC 13315 K. pneumoniae ATCC 13883
(L-Tryptophane 1 mg) o durante la noche (fucsia, rosa)
color de la
capa
superficial
TDA or Indole: TDA TDA Standard+III 4h Marrón, rojo Amarillo, naranja Proteus vulgaris ATCC 13315 K. pneumoniae ATCC 13883
(L-Tryptophane 1 mg) o durante la noche
Tetrathionate Reductase TTR Standard 4h Amarillo Naranja rojizo Proteus vulgaris ATCC 13315 E. coli ATCC 25922
(Tetrathionate 2 mg) o durante la noche
Trehalose TRE Standard 4h Amarillo, Rojo, E. coli ATCC 25922 Morganella morganii ATCC 25830
(D-Trehalose dihydrate 2 mg) o durante la noche amarillo rojo anaranjado
anaranjado
Tributyrin TRIB Standard 4h Amarillo, Rojo P. aeruginosa ATCC 27853 E. coli ATCC 25922
(Tributyrin 2 mg) o durante la noche amarillo
anaranjado
Trypsin TRYP Standard+I 4ho Naranja rojizo Amarillo S. maltophilia ATCC 13637 E. coli ATCC 25922
(Na-Benzoyl-DL-Arginine-ß-Naphthylamide 0.2 mg) Durante la noche Rojo Amarillo, naranja
Urease URE Standard 4h Rojo/fucsia b Amarillo, naranja Proteus vulgaris ATCC 13315 E. coli ATCC 25922
(Urea 8 mg) o durante la noche
Urease/Indole URE/ Standard 4h Rojo, fucsia Amarillo Morganella morganii ATCC E. coli ATCC 25922
(Urea 4 mg, L-Tryptophane 1 mg) Leer en o durante la noche 25830 (URE pos., IND pos.) (URE neg., IND pos.)
primer lugar K. pneumoniae ATCC 13883
URE y (URE pos., IND neg.)
IND después Rojo Amarillo, naranja
+IIa
Urease/TDA URE/ Standard 4h Rojo, fucsia Amarillo Proteus vulgaris ATCC 13315 E. coli ATCC 25922
(Urea 4 mg, L-Tryptophane 1 µg) Leer en o durante la noche (URE pos., TDA pos.) (URE neg., TDA neg.)
primer lugar K. pneumoniae ATCC 13883
URE y (URE pos., TDA neg.)
TDA después +III Rojo, marrón Amarillo, naranja
Voges-Proskauer VP Standard+VI 4h Rojo, rosa Incoloro (sin Enterobacter cloacae ATCC 13047 E. coli ATCC 25922
(Sodium Pyruvate 2 mg, Creatine 0.1mg) cambio de color)

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Rosco Diagnostica
Procedimiento:
Standard: Preparar en un tubo una suspensión bacteriana (como mínimo McFarland 4) de una placa incubada durante la noche en 0,25 ml de solución salina. Añadir una Diatabs, cerrar el
tubo e incubar a 35-37 °C.
Standard+oil: Preparar en un tubo una suspensión bacteriana (como mínimo McFarland 4) de una placa incubada durante la noche en 0,25 ml de solución salina. Añadir una Diatabs y 3 gotas de
aceite de parafina, cerrar el tubo e incubar a 35-37 °C.

a) Preparar la suspensión bacteriana en agua destilada. Después de la incubación añadir una gota de solución de sulfato ferroso de amonio al 5% w / v en agua purificada (recién preparada y
almacenada a -20ºC ). Para Corinebacterias utilizar el inóculo McFarland 8.
b) En caso de incubación durante la noche solamente el rojo fuerte o el fucsia fuerte son positivos.

Reactivos que deben añadirse tras la incubación:

I. Añadir 3 gotas de reactivo de aminopeptidasa (Rosco #92231) y leer la reacción de color a los 5 min.
IIa. Añadir 3 gotas de reactivo de Kovacs (Rosco #92031), agitar y leer la reacción de color de la capa superficial a los 3 min.
IIb. Añadir 4 gotas de reactivo de Kovacs (Rosco #92031), agitar y esperar 10 min.
III. Añadir 2 gotas de solución de cloruro férrico al 10% y leer la reacción de color a los 5 min.
IV. Añadir 5 gotas de solución de ninhidrina al 3,5% (Rosco #91731), cerrar el tubo y volver a incubar durante 10 min. Leer a los 5 min.
V. Añadir 1 gota de N,N-dimetil-α-naftilamina y 1 gota de solución sulfanílica. Leer a los 2 min.
VI. Añadir 2 gotas de solución de alfa-naftol (5% en etanol) y a continuación 1 gota de KOH al 40% y agitar.

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