26/02/2014

CATEDRA DE BIOQUIMICA GENERAL Y BUCAL - FOUBA

Características generales

Cinética química

Nomenclatura

Centro activo

Cofactores

Factores que modifican la actividad enzimática

Cinética enzimática

Inhibidores enzimáticos

Las enzimas séricas en el diagnostico clínico

ESTRUCTURA DE LA TRIOSAFOSFATO ISOMERASA

eficiente enzima involucrada en la vía glucolítica. 2

La buena salud exige no sólo que se

produzcan reacciones químicas sino que
sucedan a
velocidades adecuadas
compatibles con la vida.

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en presencia de ENZIMAS ocurren a velocidades

compatibles con la vida

SON CATALIZADORES BIOLÓGICOS

=> Las enzimas aceleran
la velocidad de la reacción química 4

Estructura química:
•la mayoría son proteínas
•una minoría son moléculas de ARN
• Una enzima puede estar formada por:
- una sola cadena polipeptídica,
- por varias subunidades
- o formar parte de un complejo multienzimático
• Son indispensables para la vida
• Son eficaces catalizadores
5

Aceleran la velocidad de la reacción química

Disminuyen la energía de activación

No modifican el cambio neto de energía

No forman parte de los productos finales

No se desgastan en el proceso, son

reutilizables

Aceleran la llegada al equilibrio, pero no varía

su posición
6

2
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Velocidad de una reacción química se puede medir como:

a) Velocidad de formación de sus productos
b) Velocidad de consumo de sus reactivos

Vr = k Reactantes n

Número de 7
orden

Vr = k Reactantes n

velocidad de reacción = constante x [reactivos]n

donde “n” es el orden de la reacción

Si n = 0 ---
 reacción independiente de la
concentración de Rvos

Si n = 1 ---
 reacción de primer orden:
Vr = k. [A]

Si n = 2 ---
 reacción de segundo orden:
Vr = k. [A] [B] = k [A]2
8

En una reacción de primer orden

y en el estado de equilibrio químico

A ← B

las velocidades de reacciones directa e inversa

son exactamente iguales

k1 [A] = k -1 [B]

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las velocidades de reacciones directa e inversa

son exactamente iguales
10
k1 [A] = k -1 [B]

Es el valor mínimo de energía de colisión

necesaria para que ocurra la reacción

 Concentración de los reactivos

 Temperatura de reacción

 Concentración y/o área de superficie del catalizador

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Estado
activado

Ea

sustrato

Producto = CO2 + H2O

12

4
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Ea

Las enzimas disminuyen la energía de activación

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Ea

Ea

14

Las enzimas no modifican el cambio neto de energía

La variación de energía
libre de la reacción
(∆G= Gf-Gi) no se
modifica en presencia
del catalizador.

15

5
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Las enzimas no forman parte de los productos finales ni 16

se
desgastan en el proceso: SON REUTILIZABLES

... Además de las características

discutidas, hay otras que aumentan
su valor como catalizadores:
catalizadores:

Alta especificidad

Elevado poder catalítico

Alta eficiencia

No sufren modificaciones químicas durante la

catálisis

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Nomenclatura histórica

• Sistematización de la nomenclatura
(International enzime comission)

Clasificación: «Oxidorreductasas
« Transferasas
« Hidrolasas
« Liasas
« Isomerasas
« Ligasas 18

6
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Sólo algunos de los

resíduos aminoacídicos
actúan como grupos
catalíticos

7 residuos del centro catalítico del sitio activo

de la enzima fructosa 2,6 bifosfatasa
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Enzima

CENTRO ACTIVO

CENTRO CATALÍTICO

GRUPOS
CATALÍTICOS

21

7
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el sustrato debe tener una forma adecuada para

introducirse e interaccionar con el centro activo

Fischer Koshland 22
(1890) (1958)

SIMPLES: CONJUGADAS:

Estructura proteica
Estructura
proteica +
cofactor

23

(proteína inactiva)

INORGÁNICO Levemente unido

+ Ión metálico
Firmemente unido
( metaloproteínas)

COSUSTRATO
ORGÁNICO (Levemente unido,
unión no covalente)
Coenzima
(activa)
GRUPO
PROSTÉTICO
Firmemente unido24
(Unión covalente)

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25

Ejemplo de enzima conjugada

Piruvato carboxilasa

26

Algunas vitaminas funcionan como coenzimas y son

indispensables para la actividad de algunas enzimas

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9
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Temperatura

pH (ionización)

Concentración de sustrato

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Desnaturalizació
Desnaturalización o pé
pérdida del
29
estado ió
iónico de la enzima

30

10
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31

C
A
B

32

L. Michaelis y M. L. Menten (1913)

Teoría general acerca de acción y cinética enzimática

Leonor Michaelis Maud Menten 33

11
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L. Michaelis y M. L. Menten (1913)

Teoría general acerca de acción y cinética enzimática

34

Ecuación de velocidad para las reacciones catalizadas

por enzimas que actúan sólo sobre un sustrato

hipérbola

35

Proteasa del virus del SIDA36 y

el inhibidor ritonavir

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IRREVERSIBLES:
- el I se une a la E en forma covalente
- provoca un cambio permanente en su molécula
- pérdida definitiva de la actividad

REVERSIBLES:
- Competitiva:
 I y S tienen estructura similar

 Compiten por el sitio activo

 Se desplaza por aumento de [S]

- No competitiva:
 I puede unirse a E libre o al Complejo E-S

 Interfiere la acción de ambos

 No se desplaza por aumento de [S]

37

38
No puede ser tratada por Michaelis - Menten

39

13
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reversible

por aumento
de la [S]

40

Km ↑
Vmax cte

41

42

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Km cte
↓ Vmax

43

Múltiples procesos metabólicos celulares

relacionados entre sí

están controlados en forma precisa

MECANISMOS DE CONTROL
ESTRICTOS Y ADECUADOS
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REGULACIÓN A CORTO PLAZO: se modifica la

actividad enzimática

1. Regulación alostérica
2. Inhibición por producto final
3. Regulación por modificación covalente
4. Regulación por zimógenos

REGULACIÓN A LARGO PLAZO: se modifica la

cantidad de moléculas enzimáticas

5. Regulación genética 45

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MODULADORES:

- Positivos
- Negativos

NO SON MODIFICADOS
DURANTE LA REACCIÓN

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Cambios en la Cambios en la afinidad

conformación de la de la enzima por el S
47
enzima

48

16
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1
Inhibidores y activadores
alostéricos

1.0
Y Con (+ Activador)
modulador (+)

0.8
Actividad enzimática

(sinefectores
Sin efectores)
0.6

0.4
(+ Inhibidor)
Con modulador (-)

0.2

Concentración de Ss
0.0 49
0 2 4 6 8 10 12

Producto de
la vía

50

algún AMINOÁCIDO de la enzima

Unión covalente a algún grupo químico

ACTIVACIÓN O INACTIVACIÓN DE LA ENZIMA

grupo químico aa enzimáticos

más frecuente: intervientes:
grupo fosfato (P) Ser y Trh 51

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 Algunas enzimas se activan al unirse al

grupo PO4-3 y se inactivan si lo pierden:

Enzima A + Enzima A ~ P
(inactiva) (Activa)

 Otras se activan al perder el grupo PO4-3 y se

inactivan al ganarlo:

Enzima B ~ P Enzima B +
(inactiva) (activa)
52

Activación proteolítica del tripsinógeno

inactiva

activa 53

Control a nivel
del ADN

ADN ARN Proteínas

(enzimas)

Un metabolito impide o facilita la transcripción de

una enzima

disminuye la síntesis de la enzima

no se catalizará la reacción 54

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Enzimas presentes en el plasma

ENZIMAS PLASMÁTICAS ENZIMAS NO

FUNCIONALES o ESPECIFICAS FUNCIONALES

Ej. lipoproteinlipasa, Ej. amilasa pancreática,

seudocolinesterasa fosfatasa alcalina biliar,
proenzimas de la fosfatasa ácida
coagulación sanguínea, etc prostática, etc
55

56

19