Carrera de Ingeniería Geográfica y del Medio Ambiente

Control y Contaminación de Aguas

Nombre: Sisa Guamán Fecha: 2017-05-23
Tema: Práctica de determinación de la Demanda Biológica de Oxígeno

1. Objetivo General
Describir el procedimiento para la determinación de la Demanda Biológica de Oxígeno
(DBO).

2. Aplicación
Método aplicable para aguas limpias y residuales.

3. Fundamento del método

La materia orgánica constituye aproximadamente el 75% de los sólidos en suspensión y el
40% de los sólidos disueltos en un efluente líquido de composición media, en la Tabla 1 se
muestra la composición de las aguas residuales.
Tabla 1. Distribución de las impurezas en aguas residuales domésticas
Solutos 50% Orgánico 20%
Mineral 30%
Coloides 10% Orgánico 8%
Mineral 2%
Insolubles no 20% Orgánico 15%
sedimentables Mineral 5%
Insolubles sedimentables 20% Orgánico 15%
Mineral 5%

Los principales grupos de sustancias orgánicas presentes en el agua residual son proteínas
(40 -60%), hidratos de carbono (25 – 50%) y grasas y aceites (10%).
Otro compuesto orgánico con importante presencia en el agua residual es la urea. No
obstante, debido a la velocidad del proceso de descomposición de la urea, raramente está
presente en aguas residuales que no sean muy reciente, junto con estas sustancias el agua
residual puede contener pequeñas cantidades de gran número de moléculas orgánicas
sintéticas como agentes tensoactivos, contaminantes orgánicos prioritarios, compuestos
orgánicos volátiles y los pesticidas de uso agrícola.
Por otro lado, dado el incremento en la síntesis de moléculas orgánicas, el número de ellas
presentes en las aguas residuales va en aumento cada año.
Los métodos de medición del contenido de orgánicos más utilizados en la actualidad son:

 Demanda Biológica de Oxígeno (DBO)

 Demanda Química de Oxígeno (DQO)

1
  Carbono Orgánico Total (COT).
Demanda biológica de oxígeno (DBO)
La DBO mide la cantidad de oxígeno necesaria para que los microorganismos aerobios
presentes en un agua oxiden la materia orgánica biodegradable. Se mide en mg O2/L.
Para determinar la DBO se incuba una muestra a una dilución apropiada de la misma,
durante un tiempo dado y una temperatura determinada. Esta muestra se inocula
previamente con un cultivo microbiano, aunque este paso se puede obviar si existen
evidencias de que el residual trae consigo microorganismos.
Por ejemplo, en el caso de que un compuesto como la glucosa requiere de 6 moléculas de
oxígeno para su conversión completa a 𝐶𝑂2 y agua.
𝐶6 𝐻12 + 6𝑂2 → 6𝐶𝑂2 + 6𝐻2 𝑂
𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝑜𝑥í𝑔𝑒𝑛𝑜 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑜 192 𝑔
𝐷𝐵𝑂 = = = 2.67
𝑔𝑟𝑎𝑚𝑜𝑠 𝑑𝑒 𝑐𝑎𝑟𝑏ó𝑛 𝑜𝑥𝑖𝑑𝑎𝑑𝑜 72 𝑔
La DBO real es menor a la teórica debido a la incorporación de algo de carbón en las nuevas
células bacteriales.
Cuando la descomposición de los nutrientes de una muestra es tan completa como se pueda
obtener aeróbicamente, el oxígeno disuelto así consumido es la DBO total o última.
Sin embargo, alguna materia orgánica puede quedar, la que no es afectada por procesos
aeróbicos, pero que se descomponen anaeróbicamente como la celulosa.
La DBO de un agua residual en donde estén de por sí los microorganismos presentes en la
muestra no requiere que se le siembre microorganismos y su cálculo se puede hacer a través
de:
𝐷1 − 𝐷2
𝐷𝐵𝑂 =
𝑃
𝑚𝑔
D1=oxígeno disuelto inicial de la muestra de agua residual,
𝑙
𝑚𝑔
D2=oxígeno disuelto de la muestra de agua residual después de 5 días a 20°C, 𝑙

P=fracción residual de la muestra de agua residual usada.

𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑒 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑟𝑒𝑠𝑖𝑑𝑢𝑎𝑙 (𝑚𝑙)
𝑃=
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑓𝑟𝑎𝑠𝑐𝑜 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝐷𝐵𝑂 (𝑚𝑙)
Si la prueba se realiza inoculando un cultivo microbiano:
(𝐷1 − 𝐷2 ) − (𝐵1 − 𝐵2 )𝑓
𝐷𝐵𝑂 =
𝑃
D1 = oxígeno disuelto de la muestra diluída inmediatamente después de la preparación en
𝑚𝑔
𝑙
.
𝑚𝑔
D2 = oxígeno disuelto después de 5 días de incubación, 𝑙

P = fracción decimal volumétrica de la muestra usada.

2
 𝑚𝑔
B1 = oxígeno disuelto en el inóculo control antes de la incubación
𝑙

B2 = oxígeno disuelto en el inóculo control después de la incubación, mg/l

f = proporción de inóculo en la muestra a inóculo en las botellas control o blanco.
%𝑖𝑛ó𝑐. 𝑒𝑛𝐷1
𝑓=
%𝑖𝑛𝑜𝑐. 𝑒𝑛𝐵1
Si las muestras en las cuales se va a determinar el DBO están lejos del laboratorio el oxígeno
necesita ser fijado en ellas en el mismo sitio de determinación (se añade 1ml de 𝑀𝑛𝑆𝑂4 y
1ml de KI).
La cantidad de sustancias nutrientes descompuestas en la prueba y, por tanto, la cantidad
de oxígeno disuelto consumido, depende de la temperatura y duración de la incubación. La
descomposición de una muestra residual fácilmente biodegradable podría durar varias
semanas, de manera que, para propósitos prácticos se usa un período normal de incubación
más corto, en el que tenga lugar una proporción razonablemente alta de la descomposición
total posible.
Estas condiciones generalmente son: 5 días a 20°𝐶, y se suponen dichas condiciones si no
se especifican otras. No obstante, no existe razón alguna para que no se puedan usar otros
períodos y otras temperaturas, siempre que se especifiquen claramente junto con los
resultados.
El proceso de descomposición se realiza en dos etapas: en la primera, se produce la
descomposición de los compuestos carbonáceos, cuya descomposición finaliza después de
tres semanas a 20°𝐶.
En la segunda fase, son los nutrientes nitrogenados los que se oxidan primero; comienza
después de 10 - 12 días cuando el nitrógeno amoniacal se transforma en nitritos y nitratos,
aumentando el gasto de oxígeno.
Las sustancias orgánicas que contienen nitrógeno en las aguas residuales se encuentran
primordialmente en estado insoluble y se remueven por sedimentos en forma de
sedimentos primarios y secundarios. Debido a lo señalado para medir la contaminación
orgánica de las aguas residuales en estado coloidal y en disolución como de las sustancias
no sedimentables e insolubles, se utiliza la DBO correspondiente a la primera fase.

La DBO de las aguas residuales domésticas se rigen por determinadas reglas y procesos a
20°𝐶; cada día se consume 20,6% de la DBO residual (no consumida).
En el primer día se consumirá el 20,6% del valor total de la DBO20 (la oxidación
bioquímica de las aguas residuales domésticas se desarrolla en 20 días), en el segundo día
se consumirá 20,6% del valor residual, esto es:
100% − 20.6% = 79.4% 𝑜 0.206 × 79.4 = 16.3% para los 5 días 68.4% y para los 20
días el 99%.
𝐷𝐵𝑂20 = 1.462 𝐷𝐵𝑂5 𝑜 𝐷𝐵𝑂5 = 0.684 𝐷𝐵𝑂20

CINÉTICA DE LA DBO:

3
Si se asume una reacción cinética de primer orden

𝑑𝐿 𝐿 𝑡
∫ = − 𝑘1 𝑑𝑡 ∫ 𝑝
𝐿 𝐿𝑜 0

L= material carbonáceo oxidable remanente en el tiempo t.

k= constante de la tasa de oxidación, 𝑑í𝑎−1

La solución de la ecuación es:

𝑑𝐿 𝐿 𝑡
∫ = − 𝑘1 𝑑𝑡 ∫ 𝑝
𝐿 𝐿𝑜 0

𝑙
ln = −𝑘1 𝑡
𝑙𝑜
𝐿 = 𝐿𝑜 𝑒 −𝑘1 𝑡

𝐿 = 𝐿𝑜10−𝑘𝑡
Lo= cantidad inicial de material carbonáceo.
𝑘 = 2.303 𝐾
El oxígeno consumido en la estabilización del material orgánico es:
𝑌 = 𝐿𝑜 − 𝐿 = 𝐷𝐵𝑂

𝑌 = 𝐿𝑜 − 𝐿𝑜𝑒 −𝑘𝑡 = 𝐿𝑜(1 − 𝑒 −𝑘𝑡 )

𝑌5 = 𝐶𝐷𝐵𝑂5 = 𝐿𝑜(1 − 𝑒 −5𝑘 )

Lo=DBO último

Los compuestos simples tales como azúcares y almidones son utilizados fácilmente por los
microorganismos y tienen una taza k alta, mientras que los compuestos tales como los
fenoles son difíciles de asimilar y tienen valores k bajos.

4. Materiales y Equipos
Se enumera a continuación los equipos y el material necesarios:
4.1 Equipos
 Incubadora
 Balanza analítica. Rango 0-110g. Resolución 0.0001g
 Estufa

4.2 Material
 Botellas Winckler de 300 mL.
 Probeta de 50 mL.
 Buretas de 50 mLEscriba aquí la ecuación.
 Pipetas automáticas de 1 mL
 Vasos de precipitación de 10 mL
 Agitador
 Balones aforados de 10 mL

4
  Vasos de precipitación de 250 mL
 Vasos de precipitación de 500 mL
 Termómetro

5. Reactivos
Se enumeran a continuación los reactivos necesarios para la realización de este
procedimiento: Solución Buffer de Fosfato: Disolver 42.5 g de 𝐾𝐻2 𝑃𝑂4 o 54.3 g
de 𝐾𝐻2 𝑃𝑂4 en agua destilada. Ajustar el pH a 7.2 con 𝑁𝑎𝑂𝐻 al 30% y diluir a 1 L
Solución Cloruro de Calcio: Disolver 27.5 g de 𝐶𝑎𝐶𝑙2 en agua destilada y diluir a 1 L.
Solución Sulfato de Magnesio: Disolver 22.5 g 𝑑𝑒 𝑀𝑔𝑆𝑂4 ∙ 7𝐻2 𝑂 en agua destilada y aforar
a 1 L. Solución Cloruro Férrico: Disolver 0.25 g de 𝐹𝑒𝐶𝑙3 ∙ 6𝐻2 0 en agua destilada y aforar
a 1 L. Solución Sulfato Manganeso: Disolver 364 g 𝑀𝑛𝑆𝑂4 ∙ 𝐻2𝑂 en agua destilada, filtrar
y diluir a 1 L. Solución de Álcali-Yoduro-Acido: Para muestra saturada o menos que la
muestra saturada, disolver 500 g hidróxido de sodio (𝑁𝑎𝑂𝐻) y 150 g KI en agua destilada y
diluir a 1 L. Añadir 10 g de Azida de Sodio (𝑁𝑎𝑁3 ) disueltos en 40 mL de agua destilada.
Precaución: el 𝑁𝑎𝑂𝐻 concentrado es muy corrosivo para la piel. Usar guantes y lavar
inmediatamente las zonas afectadas.
Ácido sulfúrico, 𝑯𝟐 𝑺𝑶𝟒 , concentrado.
Solución de almidón: Disolver 2 g almidón soluble (grado de laboratorio) y 0.2 g ácido
salicílico como un conservante, en 100 mL de agua destilada caliente.
Titulante estándar de Tiosulfato de Sodio: disolver 6.205 g de 𝑁𝑎2 𝑆2 𝑂3 ∙ 5𝐻2 0 en agua
destilada. Añadir 0.4 g de 𝑁𝑎𝑂𝐻 y diluir a 1 litro.

6. Procedimiento
6.1 Preparación del agua de dilución
 Medir un volumen determinado de agua destilada y oxigenarla durante 24 horas.
 Añadir en el agua destilada los nutrientes (solución de cloruro de calcio, solución de
sulfato de magnesio, solución de cloruro férrico) y la solución buffer de fosfato. Por
cada L de agua destilada se añade 1 mL de cada nutriente y 1mL de la solución buffer.
6.2 Dilución de las muestras:
 De acuerdo a la concentración de las soluciones diluidas a preparar, se toma una
alícuota de muestra necesario y se coloca en la botella Winkler (Tabla 2.
Volúmenes de alícuotas recomendados).
 Se llena totalmente la botella Winkler mencionada con el agua de dilución y se
agita para homogenizar.
 Se preparan al menos tres soluciones diluidas por muestra a analizar.
Tabla 2. Alícuotas de muestra para determinación de DBO

Alícuota de muestra para Intervalo de valores de 𝐷𝐵𝑂5

botella de 300 mL (mL) esperados (mg/L)
12000-42000
0.05
0.1 6000-21000
0.2 3000-10500
0.5 1200-4200
1 600-2100

5
 2 300-1050
5 120-420
10 60-210
20 30-105
6.3 Incubación de la muestra
 Las soluciones diluidas preparadas se colocan en la incubadora a 20°C ±1°C, durante
5 días.
 Se prepara un blanco (agua de dilución) en una botella Winkler y se incuba con las
soluciones diluidas de la muestra a 20°C ±1°C, durante 5 días.
 Se procede a determinar el oxígeno disuelto de las soluciones incubadas y del
blanco.
6.4 Determinación de Oxígeno disuelto
 A la muestra añadir por debajo de la superficie 1 mL de sulfato manganoso (𝑀𝑛𝑆𝑂4 )
con una pipeta, y 1 mL del reactivo de álcali-yoduro-ácido, agitar vigorosamente
después de cada adición y eliminar el sobrante.
 Cuando el precipitado se ha asentado suficientemente (1/3 botella), destapamos el
frasco y agregamos 1 mL de ácido sulfúrico concentrado. Tapamos y agitamos hasta
que el precipitado se disuelva.
 Titule un volumen correspondiente a 200 mL de, la muestra original. Titule con la
solución 0,025M de 𝑁𝑎2 𝑆2 𝑂3 a un color amarillo pálido.
 Añadir unas gotas de solución de almidón y continuar la titulación hasta la primera
desaparición del color azul.

7. Cálculos y Expresión de los Resultados

7.1 Calculo de Oxígeno Disuelto
𝑚𝑔
1 mL de 𝑁𝑎2 𝑆2 𝑂3 = 1 𝐿 de oxígeno disuelto

En la siguiente Tabla 3. Cálculo de Oxígeno Disuelto, se presentan la cantidad de 𝑂2

encontrados en las muestras llevadas a laboratorio
Tabla 3. Cálculo de Oxígeno Disuelto
Cálculo de Oxígeno Disuelto
Muestra 𝑁𝑎2 𝑆2 𝑂3 [𝑚𝑙] 𝑂2 [𝑚𝑔/𝐿]
Blanco 4.2 4.2
150/300 0 0
100/300 2.6 2.6
50/300 3.4 3.4

7.2 Cálculo de la DBO

𝑚𝑔 𝑂𝐷𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 − 𝑂𝐷𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐷𝐵𝑂 ( ) =
𝐿 𝑓
𝑂𝐷𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 = 𝑂𝑥í𝑔𝑒𝑛𝑜 𝑑𝑖𝑠𝑢𝑒𝑙𝑡𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 𝑎 𝑙𝑜𝑠 5 𝑑í𝑎𝑠 𝑑𝑒 𝑖𝑛𝑐𝑢𝑏𝑎𝑐𝑖ó𝑛
𝑂𝐷𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 𝑂𝑥í𝑔𝑒𝑛𝑜 𝑑𝑖𝑠𝑢𝑒𝑙𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑎 𝑙𝑜𝑠 5 𝑑í𝑎𝑠 𝑑𝑒 𝑖𝑛𝑐𝑢𝑏𝑎𝑐𝑖ó𝑛
𝑓 = 𝑓𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
A continuación, en la Tabla 4. Cálculo de DBO, se presentan los cálculos para cada uno de
las muestras realizadas en laboratorio

6
 Tabla 4. Calculo de DBO
Cálculo de DBO
Factor de OD DBO5
Muestra OD Blanco
dilución Muestra [mg/L]
150/300 0.50 0.00 8.40
100/300 0.33 4.20 2.60 4.80
50/300 0.17 3.40 4.80

8. Análisis de los Resultados

Analizar y comentar los resultados obtenidos, comparando con los límites permisibles del
TULAS según corresponda.
En la Tabla 5. Límite máximo permisible de DBO para el consumo humano se muestra el
valor máximo de DBO para el consumo humano tomado del Libro VI, Anexo 1. Normas
Recurso Agua.
Tabla 5. Límite máximo permisible de DBO para el consumo humano

Límites máximos permisibles para aguas de consumo humano y uso

doméstico, que únicamente requiere tratamiento convencional

Expresado
Parámetros Unidad Límite Máximo Permisible
como
Demanda
Bioquímica
DBO5 mg/L 2
de Oxígeno
(5 días)

 Todas las muestras se encuentran sobre el límite máximo permisible, el DBO es la

cantidad de oxígeno que la materia orgánica necesita para degradarse en 5 días, la
materia orgánica consumió más de 2 mg/L lo que significa que existe una cantidad
materia orgánica elevada ya que el DBO es alto.
 La muestra que posee el valor más alto es la de 150 ml de muestra río en 300 ml de
agua de dilución con 8.4 mg/L ya que al cabo de 5 días se comprobó que no contenía
oxígeno.
 Mientras que la muestra de 100 ml y 50 ml de muestra de río en 300 ml de agua de
dilución tienen el mismo valor de DBO5.
 Debido a que esta normativa especifica la cantidad de DBO máximo para el consumo
humano, según este parámetro esta agua con ninguna de sus muestras puede ser
consumida por el ser humano.

9. Referencias
9.1
Standard Methods for the examination of water and wastewater. Publication office
American Public Health Association. 1998

7
9.2
Texto Unificado Legislación Secundaria, norma de calidad ambiental y de descarga de
efluentes: recurso agua. de efluentes: recurso agua. Publicada por el Decreto ejecutivo No
3516

9.3
Castells, X. (2012). Valoración de residuos procedentes de grandes industrias. Madrid: Díaz
de Santos.

10. Cuestionario
 ¿Qué importancia tiene realizar un blanco en la determinación de la DBO5?
Es necesario determinar un blanco para tener un parámetro de donde partir, es decir el
blanco es la muestra que tendrá mayor cantidad de oxígeno al no tener materia orgánica
que se degrade en 5 días por lo que nos servirá como referencia para saber cuánto
oxígeno ha sido consumido en dicho tiempo.

 Mencionar diferentes industrias en las que por sus desechos de agua residual sea
necesario determinar DBO5
o Industria de la curtiembre
o Industrias agropecuarias, dentro de esta
 Industria de producción de aceites con residuos denominados
alpechín.
 Industria azucarera con su residuo vinaza.
 Industria de la producción de quesos.
 Industria cervecera
 Industria vinícola
 Mataderos
o Industria papelera
o Industria química (alcohol, ácido acético)
o Industria farmacéutica
(Castells, 2012)

 Buscar la reglamentación existente relacionada a las descargas de aguas residuales

con respecto a los valores de DBO5 y comparar los resultados obtenidos en esta
norma.
Según el Libro VI Anexo 1. Normas Recurso Agua, Tabla 11 en donde se mencionan los
límites de descarga al sistema de alcantarillado se menciona el siguiente parámetro (Ver
Tabla 6)

Límites de descarga al sistema de alcantarillado

Expresado
Parámetros Unidad Límite Máximo Permisible
como
Demanda
Bioquímica
DBO5 mg/L 250
de Oxígeno
(5 días)

8
 Según la norma ecuatoriana con respecto a los valores máximos de DBO en cuerpos de
agua, si estas muestras fueran descargadas con el valor de DBO obtenido, se encuentran
perfectamente dentro de los límites ya que los valores no superan los 10 mg/L, ya que
el máximo valor es de 8.4 mg/L de Demanda Bioquímica de Oxígeno.

 Realizar un diagrama de bloques para determinar la Demanda Bioquímica de

Oxígeno.

Sacar alícuotas de 100 ml,

Dejar con un aireador el agua Recolección de muestras del 150 ml y 50 ml del agua a
de dilución (agua destilada) agua a analizar en botellas analizar y diluirlas en botellas
durante 24 horas. winckler de 300 ml. wincler de 300 ml con agua de
dilución.

A las muestras diluidas añadir Se formará un precipitado Añadir 1 ml de con ácido

un 1 ml de sulfato café que indicará la precencia sulfurico agitar y titular con el
manganoso, posteriormente 1 de O2, dejar que precipite tiosulfato de sodio hasta
ml de álcali y dejar reposar. hasta las 3/4 del recipiente. obtener un amarillo paja.

Realizar el procedimiento
anteriormente descrito para
Colocar 2 gotas de almidón cada muestra, y aplicar la
El volumen utilizado de tio
hasta conseguir un azul oscuro fórmula para la obtención del
sulfato de sodio será la
y titular hasta obtener un DBO.
cantidad de OD en mg/L
celeste claro. 𝑚𝑔 𝑂𝐷𝐵𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 − 𝑂𝐷𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐷𝐵𝑂 =
𝐿 𝑓

Ilustración 1. Procedimiento de la obtención del DBO