Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs es un ciclo metabólico cuyo alimentador es acetil-CoA que es uno de los
productos finales de la degradación de glúcidos, aminoácidos y lípidos. Este sustrato inicial
se degrada paso a paso en el ciclo quedando transformado en 2 CO2 con liberación de
energía que queda contenida en los cofactores reducidos (un FADH2 y 3 NADH) y también en
un GTP. Además, es una vía que se relaciona con muchos otros procesos anabólicos del
metabolismo de glúcidos, proteínas, ácidos nucleicos, porfirinas y lípidos. Por eso se
considera al igual que la glucólisis (degradación de la glucosa), una vía central del
metabolismo.

Podemos plantear como reacción global esquematizada del ciclo de Krebs:

En esta reacción general podemos ver cuál es el sustrato inicial, cuáles son sus productos
finales y los cofactores que participan.

Tipo de proceso del ciclo de Krebs

Es un proceso catabólico pues su alimentador, acetil-CoA (grupo acetilo -compuesto de 2

carbonos- unido a la CoA) se degradará y se formará 2 CO2, compuestos más pequeños, y
sus hidrógenos quedarán formando parte de los cofactores reducidos. Además se forma el
GTP, que contiene la misma cantidad de energía que el ATP. Todo lo anterior podemos verlo
en la reacción global anterior.

Localización del ciclo de Krebs

Este proceso se lleva a cabo en la matriz mitocondrial. Allí es donde se encuentran la

mayoría de las enzimas que participan en él. Además en la propia mitocondria es donde se
encuentran localizados los otros 2 procesos de la respiración celular que forman la cadena
respiratoria. En la cadena respiratoria se van a utilizar los cofactores reducidos formados por
el ciclo de Krebs. La localización mitocondrial de ambos procesos facilita con una máxima
eficiencia la función de ambos procesos, que es otro de los principios de la Bioquímica: el
principio de la máxima eficiencia.

En cuanto a su localización hística, se produce en todos los tejidos cuyas células tengan
mitocondrias. Por ello, el ciclo no se produce en los hematíes, que carecen de mitocondrias.

Visión general de las reacciones del ciclo de Krebs

Se compone de 8 reacciones y cada una de ellas está catalizada por enzimas. Escojamos
como primera reacción la entrada del acetil CoA (a) que se condensa con el ácido oxalacético
(b). Las reacciones de óxido-reducción son la 3; 4; 6 y 8 (Fig. 7.11). Otra reacción de
importancia es la 5 donde se forma GTP por una fosforilación a nivel de sustrato. Es una vía
cíclica porque el ácido oxalacético (b) que es el producto final de la última reacción, la 8,
vuelve a ser sustrato de la primera reacción. Este ciclo es globalmente irreversible, aunque
algunas de sus reacciones son reversibles (reacciones 2, 5, 6, 7 y 8). El grupo acetilo,
bicarbonatado, se oxida por pasos graduales en el ciclo de Krebs y como en cada vuelta del
ciclo se forman 2 CO2, se pudiera decir que el acetilo que está unido a la CoA se degrada en
cada vuelta del ciclo. Los otros productos de la vía son los cofactores reducidos (3NADH.H + y
1FADH2) y un GTP.
Fig.7.11.Las reacciones del ciclo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo de Krebs, a) acetil-coA,
b) ácido oxalacético,(c) ácido cítrico, d) cis aconítico, e) ácido isocítrico, f) ácido á ceto
glutámico, g) succinil coA, h) ácido succínico, i) ácido fumárico, j) ácido L-málico.

Origen del acetil-CoA

El acetil-CoA proviene del catabolismo de lípidos, aminoácidos y glúcidos; estos últimos

constituyen su fuente principal en el cerebro, pero en otros tejidos como el hígado y
músculo, son los ácidos grasos su fuente principal.

Reacciones del ciclo de Krebs

Primera reacción: enzima ácido cítrico sintasa.

Esta enzima cataliza la condensación entre el grupo acetilo del acetil-CoA y el ácido
oxaloacético. Este ácido debe unirse a la enzima antes que el acetilCoA, debido a esto tienen
que encontrarse a concentraciones adecuadas para que se lleve a cabo la primera reacción;
De esta forma se mantienen los niveles adecuados de los metabolitos del ciclo y se garantiza
la actividad del mismo. Además es una de las enzimas reguladoras del ciclo y su regulación
se trata más adelante en este capítulo.
Segunda reacción: enzima aconitasa

La aconitasa cataliza una isomerización del ácido cítrico en ácido isocítrico, pues como vemos
en la figura 7.11 el grupo hidroxilo cambia de posición.

Tercera reacción: enzima isocítrico deshidrogenasa

En esta reacción, el ácido isocítrico se oxida y descarboxila. La enzima es dependiente del

NAD+ que debe estar unido a la enzima para que ella pueda realizar su acción. Los productos
son el CO2 y el ácido alfa-ceto-glutárico. En esta reacción ocurre la formación del 1er cofactor
reducido, el NADH, como se observa a continuación. Esta es otra de las enzimas reguladoras
importante del ciclo de Krebs.

Cuarta reacción: enzima alfa-ceto-glutárico deshidrogenasa

La reacción está catalizada por un complejo multienzimático. Además de las 3 enzimas que
lo forman, requiere de 5 cofactores; el pirofosfato de tiamina (PPT), el ácido lipoico, la
coenzima A, el FAD y el NAD+. El ácido alfa-ceto-glutárico se descarboxila y se oxida
transformándose en succinil-CoA. En esta reacción ocurre la formación del 2do cofactor
reducido, el NADH. La reacción es irreversible.

Quinta reacción: enzima succinil-tioquinasa o succinil CoA sintetasa

Esta reacción es totalmente reversible y transfiere la energía contenida en el enlace tíoester

de la succinil-CoA al último enlace anhídrido fosfórico del GTP. El tercer fosfato del GTP
puede ser transferido al ADP y formar ATP. Esta es la única reacción del ciclo donde se forma
un compuesto con energía semejante al ATP, es una fosforilación a nivel de sustrato. El otro
producto de la reacción es el ácido succínico.

Sexta reacción: enzima succínico deshidrogenasa

La succínico deshidrogenasa no es una proteína simple, es una proteína compleja (la

proteína se encuentra unida a un grupo prostético), es una flavo proteína, cuyo grupo
prostético es el FAD. Es una proteína integral de la membrana interna de la mitocondria.
Participa en 2 procesos, en el ciclo de Krebs y lo relaciona con la cadena respiratoria.
Cataliza la oxidación del ácido succínico en ácido fumárico, mientras que se forma el 3er
cofactor reducido, el FADH2. La reacción es reversible.

Séptima reacción: enzima fumarasa

Una molécula de agua se introduce en el doble enlace y se forma el ácido málico. Esta
reacción es libremente reversible.

Octava reacción: enzima málico deshidrogenasa

Con esta reacción se completa el ciclo y su producto es el ácido oxalacético, iniciador del
ciclo. También es la última reacción de oxido-reducción que se produce; se forma el 3er
NADH. Constituye una reacción reversible, pero el equilibrio está desplazado hacia la
formación de del ácido málico. Sin embargo, la propia marcha del ciclo, o lo que es lo mismo,
el consumo del ácido oxalacético hace que esta reacción se desplace en el sentido de la
formación del ácido oxalacético.

Regulación del ciclo de Krebs

Varios tipos de mecanismos reguladores intervienen en el control de la velocidad del ciclo de

los ácidos tricarboxílicos. Estos son la disponibilidad de sustrato, la inhibición por producto o
inhibición feedback por intermediarios del propio ciclo. También, de gran importancia, está
presente la regulación por efectores alostéricos. Aun cuando todas las reacciones poseen
alguna regulación, las que fundamentalmente determinan la velocidad de ciclo de Krebs son
las reacciones catalizadas por las enzimas cítrico sintasa e isocítrico deshidrogenasa.
Regulación de la cítrico sintasa

Esta regulación ocurre por el mecanismo de disponibilidad se sustrato. Un metabolito

importante que regula la actividad de la cítrico sintasa es uno de sus sustratos, el ácido
oxalacético. Esta enzima normalmente trabaja a concentraciones no saturantes de sus
sustratos, por lo que su actividad varía en dependencia de los cambios de concentración de
estos. Es indispensable la unión del ácido oxalacético en el centro activo de la enzima para
que pueda unirse el acetil CoA y llevarse a cabo la reacción. Si las concentraciones del ácido
oxalacético son pobres esta primera reacción del ciclo ocurre deficientemente.

Regulación de la isocítrico deshidrogenasa

Está regulada por la disponibilidad de NAD+ e inhibida por su producto final, el NADH.

También tiene regulación alostérica por el ADP (su efector alostérico positivo) y el ATP (su
efector alostérico negativo). Las concentraciones de ATP y de ADP son reguladoras
importantes de varios procesos celulares. La relación entre las concentraciones de ATP/ADP
nos dan un índice del estado energético de la célula, el llamado potencial energético celular
(PEC). Si la concentración de ATP se eleva, el PEC es alto e indica que en la célula no se
requieren en esos momentos mucho ATP y es el propio ATP el que inhibe los procesos que lo
forman. Esto sucede, por ejemplo, en el reposo. Si las concentraciones de ATP disminuyen y
se elevan las de ADP, esto es indicador de un bajo PEC, indica que se requiere del ATP, y el
ADP es el activador alostérico de los procesos formadores de ATP. Esto sucede, por ejemplo,
en el ejercicio. Así sucede con la enzima isocítrico deshidrogenasa, enzima reguladora del
ciclo de Krebs. Al aumentar la concentración de ADP, la enzima se activa y lo mismo ocurre
con el ciclo. Si aumentan las concentraciones de ATP, la enzima se inhibe y también el ciclo.
Se considera a esta enzima como la marcapaso del ciclo.

El resumen de la regulación del ciclo lo podemos observar en la figura 7.12.

Fig.7.12. Esquema de la regulación del ciclo de Krebs. La activación fundamental de la

enzima cítrico sintasa se debe a los aportes de ácido oxalacético y del acetil-CoA a partir de
la pirúvico deshidrogenasa. La isocítrico deshidrogenasa es activada alostéricamente por el
ADP e inhibida por el ATP.

Relación del ciclo de Krebs con otros procesos metabólicos

Algunos metabolitos del ciclo de Krebs participan en procesos de biosíntesis. Se observa en

la figura 7.13, que a partir de los intermediarios se forman aminoácidos, grupos hemo y
otros compuestos.

Fig.7.13. Participación de los intermediarios del ciclo de Krebs en los procesos biosintéticos.
El ácido oxalacético y el ácido alfa-ceto-glutárico se pueden transformar en sus aminoácidos
correspondientes que son el ácido aspártico y el ácido glutámico respectivamente. Estas
reacciones, de transaminación, se estudiarán en el capítulo del metabolismo de los
compuestos nitrogenados de bajo peso molecular (capítulo 10). Los aminoácidos pueden
utilizarse en la síntesis de proteínas, pero además ellos intervienen en la síntesis de las
bases nitrogenadas tan necesarias en la síntesis de los ácidos nucleicos, y en la de algunos
cofactores.

El succinil~CoA es un precursor de la síntesis del grupo hemo, importante grupo prostético

que forma parte de la mioglobina, hemoglobina y otras hemo-proteínas como los citocromos.
Estos últimos compuestos los veremos cuando se trate la cadena transportadora de
electrones.

El ácido málico, en determinadas condiciones fisiológicas, se incorpora al proceso de

gluconeogénesis.

El ácido cítrico, al acumularse en momentos de alto potencial energético celular, sale de la

mitocondria y en el citoplasma constituye la fuente de acetil-CoA citoplasmático, precursor
para los procesos de la síntesis de los ácidos grasos y colesterol.

Por supuesto, los cofactores reducidos relacionan al ciclo con el resto de los procesos de la
respiración celular, pues son los sustratos de la cadena transportadora de electrones donde
se reoxidan y así podrán ser utilizados de nuevo por el ciclo de Krebs. En la figura 7.13
podemos ver las relaciones que tiene el ciclo de Krebs con otros procesos metabólicos a
través de sus intermediarios.

Funciones del ciclo de Krebs

De todo lo planteado anteriormente el ciclo de Krebs tiene 2 funciones importantes. Una de

ellas es la formación de los cofactores reducidos que serán sustratos de la cadena
respiratoria y se emplean en la formación de ATP. La segunda función importante es que a
partir de sus metabolitos intermediarios se sintetizan compuestos como son los aminoácidos,
grupos hemo y ácidos grasos, Esto hace que este ciclo tenga relaciones con el metabolismo
de proteínas, con el de las hemoproteínas, los ácidos nucleicos, los glúcidos y los lípidos.
Además es sumamente importante la relación que tiene con otros procesos de la cadena
respiratoria.

Anaplerosis

En las reacciones del ciclo de Krebs, al producirse el catabolismo de la acetil-CoA se

regeneran todos los intermediarios, pero como estos además se escapan del ciclo al participa
en otros procesos de síntesis, entonces al ciclo de Krebs le faltarían las cantidades necesarias
de sus metabolitos intermediarios para realizar sus funciones. Las cantidades de ácido
oxalacético disminuidas no se corresponden con las requeridas para su condensación con las
de acetil-CoA lo que implicaría un deficiente funcionamiento de este proceso.

Esto no sucede realmente porque existen ciertas reacciones que reponen los metabolitos del
ciclo; son las reacciones de anaplerosis, palabra que proviene del griego y que quiere decir
rellenar. Las propias transformaciones de los metabolitos del ciclo en aminoácidos son
reversibles y pueden aportar intermediarios a este ciclo. Pero la reacción de relleno
fundamental es la catalizada por la enzima ácido pirúvico carboxilasa, enzima localizada en la
mitocondria.
En esta reacción el ácido pirúvico se carboxila y se transforma en ácido oxalacético y el ATP
aporta la energía necesaria para que ocurra la reacción. Esta enzima tiene un activador
alostérico, el propio acetil-CoA. Se comprende la importancia de esta regulación que activa la
formación del ácido oxalacético, sustrato imprescindible para que ocurra la primera reacción
del ciclo.

El aporte del ácido oxalacético es suficiente para rellenar de metabolitos el ciclo, pues este
ácido se transforma en los otros metabolitos en las subsiguientes reacciones (Fig. 7.14).

Fig.7.14. Se representa un ciclo metabólico de 3 componentes (B, C y D). El rojo más fuerte
representa una concentración más alta del componente que el del color más pálido. En a) A
se ha transformado en B y así se aumentó su concentración, B y C se encuentran a
concentraciones muy bajas. Al funcionar el ciclo (b), B se transformó en C y este
componente también aumentó su concentración a partir de B. Finalmente en c) vemos como
ya los 3 componentes del ciclo se encuentran a concentraciones aumentadas. Y todo esto
ocurrió sólo por la formación de B a partir de A.

Transformación del piruvato en acetil CoA. Una vez formado el piruvato, este se
transloca hacia el interior de la mitocondria, en donde será transformado por acción del
complejo enzimático piruvato deshidrogenasa ( piruvato dehisrogenasa, dihidrolipoil
deshidrogenasa y dihidrolipoil transacetilasa) en Acetil CoA, vía un reacción de tipo
descarboxilación oxidativa.

Piruvato + CoA + NAD+ acetil-CoA + CO2 + NADH

Las coenzimas y grupos protéticos requeridos en esta reacción son pirofosfato de

tiamina (TPP), dinucleótido de flavina y adenina (FAD), dinculeótido de niacina y
adenina (NAD+) y lipoamida (ácido lipóico). La descarboxilación oxidativa del
piruvato, dirige a los átomos de carbono de la glucosa a su liberación como CO2 en el
ciclo de Krebs (ciclo del ácido cítrico) y por consiguiente, la producción de energía.

El ciclo de Krebs. Este proceso, se inicia con la condensación irreversible de las

moléculas de Acetil-CoA y oxaloacetato, esta reacción es catalizada por la enzima
citrato sintasa y su producto es el citrato. A partir de citrato, se despliega una serie de
reacciones irreversibles, que culminan con la generación de otra molécula de
oxaloacetato, pasando por la formación de -cetoglutarato y su tranformación en
succinil CoA + NADH + CO2, reacción catalizada por un complejo enzimático
denominado complejo del -cetoglutarato deshidrogenasa que requiere como coenzimas
y grupos prostéticos a TPP, FAD, NAD+ y lipoamida, igual a los requeridos por el
complejo de la piruvato deshidrogenasa. Otros intermediarios son: la formación de
succinato y liberación de un GTP a partir de succinil CoA y por consiguiente la síntesis
de fumarato a partir de succinato, reacción el la cual se libera un FADH2, existe
también en el ciclo de Krebs un sitio mas de descarboxilación oxidativa, en donde se
forma NADH + CO2 y otro donde únicamente se libera NADH. La estiquiometría del

ciclo de Krebs es:

Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O

2CO2 + 3NADH + FADH2 + GTP + 2H+ + CoA

El ciclo de Krebs es la vía común para la oxidación aeróbica de los sustratos energéticos,
condición que convierte a este proceso enzimático en la vía degradativa más importante para
la generación de ATP. Los 3NADH y el FADH2 liberados en el ciclo de Krebs, son reoxidados por
el sistema enzimático transportador de electrones (Figura 1), estableciendo así un flujo de
electrones, los cuales son dirigidos hacia el O2 como aceptor final, los productos de este
proceso son una molécula de agua y una gran cantidad de energía liberada, energía que es
utilizada para sintetizar ATP. Al acoplamiento entre la oxidación de los equivalentes reductores
(NADH, FADH2) y la síntesis de ATP (ATP sintetiza) se les conoce como fosforilación oxidativa

Cadena transportadora de electrones. La cadena transportadora de electrones es una serie de

cuatro complejos (I, II, III, IV) a través de los cuales pasan los electrones. Los electrones son
llevados del Complejo I y II al Complejo III por la coenzima Q (CoQ o ubiquinona) y del
Complejo III al Complejo IV por la proteína citocromo c

Los electrones del NADH mitocondrial son transferidos al FMN uno de los grupos prostéticos
de la NADH-Q oxidorreductasa (Complejo I), posteriormente los electrones se transfieren a un
segundo tipo de grupo prostético el de las proteínas hierro-azufre y de aquí pasarán a la
coenzima Q (QH2 o ubiquinol), quien también recibe electrones de la succinato-Q reductasa
(Coplejo II) a este complejo pertenece la enzima del ciclo de Krebs succinato deshidrogenasa la
que genera FADH2, quien cede sus electrones a proteínas hierro-azufre y de aquí a la coenzima
Q para formar QH2 . La función del Complejo III identificado como Q-citocromo c
oxidorreductasa es catalizar la transferencia de electrones desde QH2 al citocromo c oxidado
(cyt c). La etapa final de la cadena transportadora de electrones consiste en la oxidación del cyt
c reducido generado por el Complejo III y la consiguiente reducción del O2 a dos moléculas de
H2O. Esta reacción es catalizada por la citocromo c oxidasa (Complejo IV). Durante el flujo de
electrones por la cadena respiratoria se realiza una transferencia de protones (H + ) vía los
Complejos I, III y IV que va desde la matriz de la mitocondria hacia la zona localizada entre la
mambrana mitocondrial interna y externa (espacio intermembranal).

Complejos de la cadena respiratoria.

La coincidencia de un flujo de electrones y de protones a través de una membrana lipídica

ocasiona la generación de un gradiente de pH y un potencial de membrana, ambas condiciones
constituyen una fuerza protón-motriz que se utiliza para dirigir la síntesis de ATP vía la enzima
ATP sintasa (Figuras 1 y 2).

ADP3¯ + HPO4 2¯ + H+ ATP4¯ + H2O

Un flujo de H + a través de la ATP sintasa ocasiona la liberación del ATP hacia la matriz
mitocondrial. La fuente inmediata de estos protones es el espacio intermembranal, en donde
se localizan los protones que fueron translocados a través de los Complejos I, III y IV de la
cadena transportadora de electrones
Hasta ahora se ha considerado la oxidación del NADH y FADH2 formados en la mitocondria
(transformación del piruvato en acetil CoA y ciclo de Krebs), sin embargo, NADH citosólico
liberado durante la reacción catalizada por la gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa debe ser
reoxidado para que continúe la glucólisis, por lo que deberá ser transferido a la mitocondria
para su oxidación a nivel de la cadena transportadora de electrones, pero debido a que este
equivalente reductor no puede atravesar por sí mismo la membrana mitocondrial, la célula
contempló la reducción de un sustrato por el NADH en el citoplasma, una vez reducido este
sustrato, es transportado hacia la matriz mitocondrial por un acarreador específico , ya dentro
de la mitocondria, el sustrato reducido será oxidado y devuelto al citoplasma para
experimentar de nuevo el mismo ciclo. A este sistema de transporte específico, se le conoce
con el nombre de lanzadera, para el NADH de citoplasma son dos las lanzaderas reportadas,
uno es el de la dihidroxiacetona fosfato/glicerol-3-fosfato que genera dentro de la mitocondria
FADH2 y que es especialmente activa en el cerebro, y el otro sistema de transporte es el de la
lanzadera malato/aspartato principalmente activa en hígado y corazón, y que produce NADH.

FORMACIÓN DE LACTATO

Cuando la cantidad de oxígeno disponible para la célula es limitada, como ocurre en el

músculo durante la actividad intensa, el NADH generado durante la glucólisis no puede
reoxidarse a tasas comparables en las mitocondrias y con la finalidad de mantener la
homeostasis, el piruvato es entonces reducido por el NADH para formar lactato, reacción
catalizada por la lactato deshidrogenasa esta desviación metabólica del piruvato mantiene a la
glucólisis operativa bajo condiciones anaeróbicas. La reacción global de la conversión de
glucosa a lactato es:

Glucosa + 2Pi + 2ADP 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O