Estimación de la medición de incertidumbre asociada a ensayos

microbiológicos

Demaria, M.(i); Ottino, P.(i); Cortes, M. (i)

; Speranza, J. (i)

(i)
INTI-Lácteos división Rafaela

INSTITUTO NACIONAL DE TECNOLOGÍA INDUSTRIAL 1

Introducción
Tradicionalmente los
resultados cuantitativos
de los análisis
microbiológicos de
alimentos se han
presentado sin ninguna
estimación de
incertidumbre, difiriendo
marcadamente de los
análisis químicos.
Existen varias razones
por las cuales ocurre esta
diferencia, entre ellas se
pueden mencionar: la no
disponibilidad de
materiales de referencia
en matrices lácteas con
un contenido de
microorganismos
establecido para ensayos
microbiológicos y la
naturaleza de los
microorganismos que
hacen difícil la aplicación
de los principios utilizados
en análisis químico.
Este trabajo tiene por
finalidad el desarrollo de
una sistemática que
permita una estimación
de la medición de
incertidumbre asociada a
ensayos microbiológicos.
Metodología /
Descripción
Experimental
Por lo enunciado
anteriormente y ante la
necesidad de expresar
los resultados de
ensayos
microbiológicos con un
valor de incertidumbre
adecuado, se realizaron
una serie de cálculos
los cuales se basan
teóricamente en la
publicación del Centro
de Metrología y
Acreditación [ 1 ]
Para la realización de
estos cálculos se
evaluaron distintas
contribuciones de
incertidumbre, como se
detalla a continuación:
—Incertidumbre
estándar relativa del
factor de dilución: el dilución estéril, u b: Donde wr: es la
término factor de incertidumbre estándar incertidumbre estándar
dilución fue de b y w a: relativa de repetibilidad
seleccionado para incertidumbre estándar
denotar el número de relativa de a
veces que la muestra —Del la pesada de la
—Del volumen de la
original fue diluida para muestra ( w b )
porción del ensayo (wv)
obtener la dilución
final. Es el reciproco
wV = uV /V
de la dilución y es
usado como un múltiplo
cuando se convierte el
Donde: uv:
incertidumbre absoluta
w B=   w
2
recuento a la del volumen y V: es la C +sP 2
porción del volumen a
concentración de
analito a la muestra analizar
original
—De la distribución Donde wB :
—Incertidumbre estadística de las incertidumbre estándar
estándar relativa del colonias (Scatter relativa de la pesada,
wC : incertidumbre
volumen de la porción Poisson) (wz)
estándar relativa de la
del ensayo
—Incertidumbre w z 2= 1 /  calibración de la
estándar relativa de la =1/Z balanza y sP :
z
distribución estadística desviación estándar de
de las colonias (Scatter Donde  z : es la suma la pesada.
Poisson) de las colonias
—Incertidumbre observadas
estándar relativa de la -Incertidumbre
lectura común del estándar relativa
laboratorio combinada:
— Incertidumbre —De la lectura común
estándar relativa de la del laboratorio (wT)
repetibilidad del ensayo
— Incertidumbre
zi 2
estándar relativa de la wi= wF2+wV
pesada de la muestra w T2 = wt 2 2
Una vez corroborada la ( zi ) 2 +wZ2+wT2+wr2
Donde wi : es la
incidencia de cada
incertidumbre
incertidumbre
Donde wT: combinada del ensayo,
individual se procedió a
incertidumbre wF : es la incertidumbre
calcular la
combinada de lectura estándar relativa del
incertidumbre relativa
de la suma de los factor de dilución, wV:
combinada.
recuentos de colonias, es la incertidumbre
wt : incertidumbre estándar del volumen,
relativa de lectura de w Z: es la
Resultados la una placa (asumida
incertidumbre estándar
La incidencia de cada constante), zi :
de la distribución de las
incertidumbre se recuento de colonias i
colonias, w T : es la
corroboró mediante la placas .
incertidumbre estándar
aplicación de las
relativa de la lectura,
siguientes fórmulas:
wr: es la incertidumbre
Incertidumbre estándar estándar relativa de
relativa: —Del la repetibilidad repetibilidad.
del ensayo ( w r )
—Del factor de dilución
(wf) log n
Conclusiones
( ub + b .wa )
2 2 2
desviación estándar Como producto de lo
wf 2 = expuesto
w r= precedentemente, se
(a+b)2 obtuvo el valor de
log n
incertidumbre relativa
promedio combinada de los
Donde a: volumen de
suspensión transferida, ensayos, la cual puede
b: es el volumen de la ser expresada en
porcentaje y transferirse
al resultado del ensayo
microbiológico en
cuestión

Referencias
[1] “Uncertainty of
quantitative determinations
derived by cultivation of
microrganisms” (Niemelä S,
2002)
[2] Guía ENAC para la
acreditación de laboratorios
que realizan análisis
microbiológicos – G-ENAC-04
Rev. 2-3-97
[3] Requisitos generales para
la competencia de los
laboratorios de ensayo y
calibración – ISO /IEC 17025
edición 1999

[4] Bacteriological Analytical

Manual – U. S. Food & Drug
Administration Center for
Food Safety & Applied
Nutrition - Enero 2001
Apendice 2 -Número más
probable para serie de
diluciones

[5] J. C Eur. J. Appl.

Biotechnol, Tabla de NMP de
Man, 17: 301-305 (1983)

Para mayor información

contactarse con:
Demaria Mónica –
demaria@inti.gov.ar

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