Anlisis y preparacin

de materias primas
Preparacin del
agente biolgico

Homogeneizacin de
medio de cultivo
Inculo
Esterilizacin de
medio de cultivo
Aireacin

Agitacin Biorreactor Retire el dixido de

microorganismo carbono y otros
Mediciones gases
Caldo de cultivo final
Control
Separacin, filtracin, Biomasa, el medio de
centrifugacin del cultivo de residuos
Control
producto
termosttico
El sobrenadante con Residuos de fermentacin
el producto

Aislamiento del Residuos de fermentacin

producto

Purificacin del producto, Residuos de fermentacin

acondicionamiento

Deposito de residuos
Producto final
Conservacin del microorganismo

Desarrollo del inoculo

Fisiologa y metabolismo del microorganismo

Diseo del Biorreactor (Fermentador)

 CONSERVACION DE MICROORGANISMOS
La conservacin de cepas microbianas debe garantizar la viabilidad, pureza y
estabilidad gentica de los cultivos. El conocimiento de las ventajas de las desventajas
tcnicas de preservacin existentes para su correcta aplicacin, as como el seguimiento
continuo de las propiedades de las cepas, permiten su empleo como inculo confiable
en la industria, la docencia y la investigacin.

La eleccin de la tcnica ms adecuada para conservar cultivos

microbianos resulta difcil, pues deben tomarse en consideracin los criterios de
viabilidad y pureza de las cepas, cambios poblacionales y genticos, nmero y valor de
los cultivos, costo, as como la frecuencia del uso de los cultivos.

El mtodo de conservacin que se elija debe garantizar la supervivencia de al menos el

70 % de las clulas por un perodo considerable de tiempo, de forma tal que la
poblacin sobreviviente se asemeje a la original como sea posible, conserve las
propiedades de importancia de los cultivos y minimice la ocurrencia de los eventos
genticos. De igual manera debe reducir al mnimo el riesgo de contaminacin y
permitir que la pureza del cultivo permanezca inalterable.
Rev Cubana Hig Epidemiol 2005; 43(3)
 Mtodos de conservacin de
microorganismos
La Federacin Mundial de Colecciones de Cultivos (WFCC, siglas
en ingls), recomienda que por seguridad y para minimizar la
probabilidad de prdida de las cepas, cada una debe ser
mantenida por al menos 2 procedimientos diferentes.

Los mtodos de preservacin segn el tiempo en que

permanecen viables las clulas conservadas,

1. Conservacin a largo plazo,

2. Conservacin a mediano plazo
3. Conservacin corto plazos
Hawksworth DL, Sastramihardja I, Kokke R, Stevenson R. Guidelines for the
establishment and operation of collections of cultures of microorganisms. World
Federation of Culture Collection Standard Committee . UK: Simwoth Press.
1999:24.
 Conservacin de microorganismos a largo plazo
Congelacin (a 70 C y 196 C)
Liofilizacin

Ventajas
Son tcnicas que minimizan al mximo el riesgo de cambio gentico
en las clulas y las mantienen viables por 10 aos o ms. Se aplican
para conservar hongos,
bacterias y levaduras, algas, suero, clulas sanguneas, entre otros.
Son reconocidas como tcnicas de eleccin.

Desventajas
El elevado costo de los equipos que emplean estos mtodos
dificulta su implementacin en muchas instituciones, se recurre a
servicios que brindan colecciones de cultivos reconocidas.
Liofilizacin
Congelacin
a -70 C
 Conservacin de microorganismos a
mediano plazo
Agrupa las tcnicas con las que se logran mantener la viabilidad
de los cultivos entre 2 y 5 aos.

Se destacan en este grupo la desecacin en diferentes

soportes: arena, slica gel, perlas de vidrio, donde
crecimiento del microorganismo se detiene, por eliminacin
del agua disponible.

Almacenamiento en tierra, parafina lquida y la

suspensin en agua estril (destilada o de mar), mtodos bien
documentados en especial para los hongos.
Conservacin de microorganismos a corto plazo

La resiembra peridica es una tcnica que permite la

supervivencia de los cultivos en cortos perodos de tiempo, por
eso se reconoce como un mtodo de conservacin a corto
plazo.

Se basa en transferir el cultivo del medio seco a uno fresco

proporcionndole las condiciones ptimas de crecimiento,
lo que condiciona el elevado riesgo de contaminacin y
variabilidad de las caractersticas de las cepas, las cuales
constituyen sus principales desventajas