mpactos de los txicos ambientales en la disfuncin

reproductiva masculina
Elissa WP Wong y C. Yan Cheng

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Abstracto
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Introduccin
La infertilidad se define como la incapacidad de concebir despus de relaciones
sexuales frecuentes y sin proteccin durante ms de un ao, una condicin que
actualmente afecta al 15% de las parejas en todo el mundo [ 1 , 2 ]. Aproximadamente
el 50% de los casos se atribuyen a la pareja masculina [ 1 , 3 ]. Las afecciones
fisiopatolgicas (p. Ej., Varicocele e infeccin urogenital) estn directamente
relacionadas con solo el 23% de todos los casos de infertilidad masculina, siendo
factores ambientales, como la exposicin a txicos ambientales, una de las principales
causas de los casos restantes [ 4 ]. Se ha demostrado que numerosos txicos ambientales
afectan adversamente la espermatognesis en roedores y humanos (ver Recuadro 1).), lo
que puede conducir a un bajo conteo de espermatozoides, morfologa espermtica
anormal y mala calidad del semen [ 5 - 7 ]. Estos incluyen una gran variedad de
elementos y diferentes clases de compuestos, tales como metales pesados (por ejemplo,
mercurio, plomo y cadmio), dibenzodioxinas policloradas orgnicos (por ejemplo, 2, 3,
7, 8-tetraclorodibenzo p dioxin), fungicidas de dicarboximida (por ejemplo,
vinclozolina ) y fenoles ambientales [por ejemplo, 2, 2-bis [4-hidroxifenil] propano o
bisfenol A (BPA)], que a menudo se liberan en el medio ambiente durante procesos
industriales. A su vez, los humanos toman estos txicos ambientales por la ingestin de
alimentos y agua contaminados, el uso de productos de consumo (por ejemplo, plstico
y cosmticos) y la inhalacin de aire contaminado [ 5 - 7 ].
Cuadro 1 Espermatognesis en testculos de mamferos
La espermatognesis es la generacin de espermatozoides (haploides, 1n) a partir de
espermatogonias (diploides, 2n) a travs de la mitosis, la meiosis y la espermiognesis
[ 113 , 114] Las espermatogonias de tipo A, que se localizan en el compartimiento basal
del tbulo seminfero, sufren mitosis y diferenciacin para formar espermatogonias de
tipo B, que son las clulas germinales que se diferencian en espermatocitos
primarios. Despus de la meiosis, los espermatocitos primarios se convierten en
espermtidas (haploides, 1n), que sufren extensos cambios morfolgicos y moleculares
para convertirse en espermatozoides a travs de la espermiognesis. Todo el proceso de
la espermatognesis es complicado, y el xito de producir espermatozoides sanos y
adecuados para la fertilizacin con el vulo depende de al menos tres factores. Primero,
similar a la ovognesis, la espermatognesis est bajo la influencia de hormonas como
la hormona estimulante del folculo (FSH), la testosterona y el estrgeno
[ 111 , 115] Por lo tanto, los niveles hormonales estrictamente regulados por la hipfisis
y por las clulas de Leydig y Sertoli son necesarios para la espermatognesis normal. En
segundo lugar, la integridad de la barrera hematoenceflica (BTB) es esencial para crear
un microambiente nico para la meiosis y el desarrollo de clulas germinales post
meiticas para aislar estos eventos de la circulacin sistmica, que de lo contrario
desarrollara anticuerpos anti-esperma. La BTB entre las clulas de Sertoli se compone
de unin estrecha coexistente (TJ), desmosoma, unin de brecha y una unin adherentes
(AJ) especfica de testculo llamada especializacin ectoplsmica basal (ES). La ES
basal se caracteriza por la presencia de haces de filamentos de actina intercalados entre
la membrana plasmtica y las cisternas del retculo endoplsmico en dos clulas vecinas
de Sertoli. Se cree que la presencia de mltiples tipos de unin en la BTB contribuye a
la rigidez inherente de esta barrera de tejido sanguneo, que se encuentra entre las "ms
estrechas" en los mamferos. Sin embargo, estudios recientes muestran que los aspectos
estructurales nicos del BTB, como la presencia de la protena de adhesin focal FAK,
tambin hacen que los testculos sean altamente susceptibles al dao de los txicos
ambientales (consulte el texto para obtener ms detalles). Tercero, durante la
espermiognesis cuando las espermtidas redondas se diferencian en espermtidas
alargadas, el material gentico en la cabeza espermtica se condensa para formar el
ncleo apretado con la formacin de acrosoma por encima de la regin de la cabeza y el
alargamiento de la cola espermtica. Durante este tiempo, las espermtidas migran hacia
el compartimiento adluminal del tbulo seminfero hasta que las espermtidas alargadas
se liberan en la luz del tbulo mediante el desensamblaje de otro ES, el CE apical, en la
espermiacin. El apical ES es elsolo dispositivo de anclaje que rodea toda la regin de
la cabeza de las espermtidas del paso 8-19 (es decir, el alargamiento y espermtidas
alargadas) en ratas (en humanos, solo 6 pasos de espermtidas se encuentran durante la
espermiognesis frente a 19 y 16 en ratas y ratones, respectivamente). En contraste con
los ES basales, los haces de filamentos de actina estn restringidos a la clula de Sertoli
en la interfaz de clulas espermticas de Sertoli. Los ES apicales anclan las
espermtidas en el epitelio seminfero hasta que estn completamente desarrolladas. Por
lo tanto, la alteracin de las CE apicales (por ejemplo, por txicos ambientales) provoca
la liberacin prematura de espermtidas que son estructuralmente defectuosas (por
ejemplo, falta de acrosoma y / o cola) y son incapaces de fertilizar el vulo.
Segn la Encuesta Nacional de Salud y Nutricin realizada por los Centros para el
Control y la Prevencin de Enfermedades de EE. UU., Se detectaron niveles
biolgicamente activos de BPA en la orina de ms del 90% de la poblacin general de
los EE. UU. [ 11 , 12 ]. En China, donde hay un rpido aumento de automviles y la
produccin industrial, los metabolitos de hidrocarburos aromticos policclicos se
detectaron en el 100% de los candidatos a prueba en un estudio reciente, y los niveles
ms altos se asociaron con la infertilidad masculina [ 13 ]. Estos resultados indican
colectivamente que los txicos ambientales se han infiltrado en diferentes aspectos de la
vida humana y estn afectando a la mayora de las personas tanto en los pases en
desarrollo como en los desarrollados.
Los txicos ambientales pueden alterar la funcin reproductiva masculina afectando el
sistema endocrino (es decir, actuando como disruptores endocrinos), alterando la
expresin gentica que es pertinente para la espermatognesis y la esteroidognesis y
ejerciendo efectos epigenticos, que pueden dar lugar a anormalidades en el sistema
reproductivo masculino cras de hasta cuatro generaciones despus de laexposicin en
el tero [ 17 - 19 ]. Por ejemplo, BPA es un disruptor endocrino conocido, y en un nivel
de dosis ambientalmente relevante, es capaz de mediar en sus efectos biolgicos (por
ejemplo, aumentar la proliferacin de clulas de seminoma testicular) a travs de
supuestos receptores de membrana de estrgeno (ER) y posiblemente protena G
acoplados receptor 30 (GPR30) [ 20] De hecho, varios txicos ambientales comunes
(por ejemplo, bifenilo policlorado y metoxicloro) se unen al ER nuclear clsico a una
afinidad 1000-2000 veces menor que el 17-estradiol endgeno [ 21 ], lo que sugiere
que estos txicos pueden mediar sus efectos a travs de -genmica membrana ER-
iniciado vas [ 22 ]. Adems, se demostr que el BPA causa defectos en los sistemas
reproductivos masculino y femenino despus de la exposicin prenatal y neonatal a
menos de 50 g / kg / da (la dosis actual "segura" aceptable para la ingesta diaria
recomendada por los Estados Unidos por USA Food and Drug Administration
Administracin (FDA) [ 23]), lo que sugiere txicos ambientales pueden afectar los
sistemas reproductivos a travs de mltiples vas y diferentes mecanismos.
La creciente evidencia sugiere que una induccin de estrs oxidativo en el testculo
representa otra respuesta comn despus de la exposicin a txicos ambientales. El
aumento del estrs oxidativo puede verse en hasta el 80% de los hombres infrtiles
clnicamente probados, y la exposicin a txicos ambientales es un factor importante
que contribuye a dicho aumento [ 24 - 26 ]. Se ha demostrado que los txicos
ambientales inducen estrs oxidativo en los testculos. muy heterognea, con diferentes
estructuras qumicas, e incluyen cadmio [ 27 , 28 ], bisfenol A [ 29 ] y 2, 3, 7, 8-
tetraclorodibenzo p dioxin [ 28 ] [ 30 , 31] ,. Curiosamente, estos txicos ambientales
comnmente aumentan el estrs oxidativo al regular negativamente la produccin de
enzimas antioxidantes como la superxido dismutasa, la catalasa y la glutatin
peroxidasa [ 27 , 29 , 31 , 32 ]. A su vez, se producen especies de oxgeno reactivo
(ROS) excesivas, que daan los lpidos, las protenas, los carbohidratos y el ADN en las
clulas. Es importante destacar que estas observaciones se confirmaron en estudios que
ilustran que la administracin conjunta de antioxidantes, como la vitamina E, con
txicos ambientales podra aliviar los efectos patofisiolgicos (por ejemplo, la
reduccin en el conteo de espermatozoides) de sustancias txicas en los testculos
[ 33 , 34] Estos hallazgos demuestran que el estrs oxidativo inducido por txicos
ambientales es uno de los principales factores que contribuyen a la infertilidad
masculina. De hecho, el estrs oxidativo durante mucho tiempo se ha relacionado con la
infertilidad masculina; la mayora de los estudios se han centrado en su papel en la
causa de las anormalidades de las clulas germinales y la apoptosis [ 25 , 35 - 37 ].
Recientemente, los estudios han demostrado que el estrs oxidativo inducido por
txicos ambientales puede causar infertilidad masculina al alterar las uniones celulares y
la adhesin entre las clulas de Sertoli-Sertoli y / o las clulas germinales de Sertoli a
travs de la fosfatidilinositol 3-quinasa (PI3K) / c-Src / focal va de sealizacin de
adhesin quinasa (FAK). Estos hallazgos son importantes porque la exposicin humana
a txicos ambientales a menudo est por debajo de los niveles txicos de dosis que
causan la muerte celular [ 38].] En esta revisin, examinaremos estos hallazgos y
tambin discutiremos los roles fisiopatolgicos de la protena quinasa activada por
mitgeno (MAPK) y las citocinas (que se activan durante la exposicin a sustancias
txicas ambientales) en el testculo. Significativamente, se descubri que estas vas de
sealizacin mediaban sus efectos disruptivos sobre las uniones intercelulares mediante
protenas de polaridad. Destacaremos estudios recientes que muestran cmo los txicos
ambientales inducen la disfuncin reproductiva masculina a travs de estas vas de
sealizacin en respuesta a un aumento del estrs oxidativo en los testculos.
Conceptualmente, estos estudios pueden proporcionar un marco para desarrollar
enfoques para tratar y / o tratar teraputicamente los efectos dainos de los txicos
ambientales para la salud reproductiva masculina.
 Ir:

El dao oxidativo inducido por txicos ambientales activa la va

de sealizacin PI3K / c-Src
La exposicin a diferentes clases de txicos ambientales comnmente aumenta el estrs
oxidativo en los testculos [ 27 - 31 ]. Se sabe que el estrs oxidativo aumenta la
permeabilidad epitelial y endotelial al alterar las uniones estrechas (TJ) y las uniones
adherentes (AJ) entre las clulas [ 39 - 41 ]. De hecho, ha sido implicado en la
transicin epitelio-mesenquimal, un proceso en el que las clulas epiteliales pierden sus
estructuras de unin y polaridad para adquirir capacidad migratoria, como las clulas
mesenquimales [ 42 ]. La investigacin intensiva en la ltima dcada revela que PI3K
juega un papel central en la mediacin de la disrupcin de la unin inducida por estrs
oxidativo ( Figura 1) Tras el desafo por el estrs oxidativo, la subunidad reguladora de
PI3K p85 se transloca del citosol a cerca de la interfaz clula-clula [ 43 , 44 ]. Tal
redistribucin de p85 a la membrana plasmtica se asocia con un aumento en la
fosforilacin de la tirosina de la subunidad cataltica p110 [ 44 ]. La activacin de PI3K
a su vez estimula una tirosina quinasa no receptora c-Src [ 45 ]. En el testculo, c-Src se
localiza predominantemente y en estadio especfico en la barrera sangre-testculo (BTB)
y la especializacin ectoplsmica apical (ES) ( cuadro 1 ), asocindose con connexin43 /
plakofilin-2 y complejos de protena 1-integrina / laminina 333 en las uniones
celulares correspondientes, respectivamente [ 46 , 47] La activacin de la va de
sealizacin PI3K / c-Src en respuesta al estrs oxidativo inducido por txicos
ambientales podra ser un mecanismo comn por el cual los txicos desencadenan
daos en los testculos. La evidencia preliminar muestra que los efectos txicos de 2, 3,
7, 8-tetraclorodibenzo p dioxin en el testculo son causadas por una induccin de
actividad de la quinasa c-Src [ 48 ]. Adems, tambin se detecta un aumento
significativo en el nivel de c-Src en los testculos despus de la exposicin a cadmio en
roedores, lo que indica que c-Src se activa en respuesta a mltiples txicos ambientales
[ 49 , 50 ].

Figura 1
Vas de sealizacin activadas por sustancias txicas ambientales a travs del
aumento del estrs oxidativo
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FAK es un objetivo de la va de sealizacin PI3K / c-Src durante

la disrupcin de la unin inducida por txico ambiental
En las clulas epiteliales, FAK es un sustrato de c-Src, y se sabe que el complejo de
doble quinasa FAK-Src regula mltiples eventos celulares en condiciones fisiolgicas
(p. Ej., Migracin celular) y patolgicas (p. Ej., Desarrollo tumoral) [ 51 , 52 ] . De
hecho, FAK es un mediador posterior de la va de sealizacin PI3K / c-Src en la
disrupcin de la unin inducida por estrs oxidativo [ 45 , 53 , 54].] Se cree que la
translocacin de la membrana y la activacin de PI3K y c-Src por el estrs oxidativo
activa FAK a travs de la fosforilacin. Esto provoca un aumento en la fosforilacin de
la tirosina de las protenas de unin (p. Ej., Ocludina, N-cadherina) por FAK para alterar
la funcin adhesiva de los complejos proteicos en TJ y / o AJ. Curiosamente,
dependiendo del tipo de clula, la fuente de ROS y la duracin del tratamiento, FAK
puede defosforilarse [ 55 - 58 ]. En conjunto, es probable que, en la fase inicial durante
el estrs oxidativo, FAK se active por c-Src para causar la fosforilacin no deseada de
las protenas de unin en la interfaz clula-clula. Esto induce la redistribucin de
protenas desde la interfaz clula-clula al citosol y conduce a la disrupcin de TJ y AJ
[ 41].] Adems, la adhesin celular se ve comprometida por la disociacin de las
protenas integrales de membrana (por ejemplo, occludin y N-cadherina) con los
correspondientes adaptadores citoplsmicos (por ejemplo, ZO-1 y -catenina)
[ 41 , 43 ]. Desensamblaje del contacto de adhesin focal (p. Ej., Por disminucin y / o
inactivacin de integrinas [ 56 ]) y la formacin de aldehdos biolgicamente activos
durante el estrs oxidativo (p. Ej., 4-hidroxi-2-nonenal, 4-HNE [ 59]]) luego inactiva
FAK va dephosphorylation. Las protenas de unin de membrana integradas
endocitadas eventualmente experimentan degradacin intracelular mediada por
endosoma que desestabiliza adicionalmente las uniones en la interfaz clula-
clula. Adems, se ha informado un efecto bifsico en la fosforilacin de FAK, que
ilustra que la duracin del estrs oxidativo es un factor crtico para determinar la
activacin o inactivacin de FAK en el epitelio celular [ 55 ]. Estos resultados ilustran
que FAK es un mediador crtico de la disrupcin TJ y AJ durante el estrs
oxidativo. Por lo tanto, el sitio de fosforilacin crtico de FAK (por ejemplo, Tyr 397 )
podra proporcionar un objetivo teraputico novedoso para proteger al testculo del
estrs oxidativo.
Esta hiptesis est respaldada por los hallazgos que ilustran que el FAK es un objetivo
molecular del cadmio en el testculo [ 50 ]. FAK es una de las tirosina quinasas no
receptoras mejor estudiadas en los testculos [ 50 , 60 - 62 ]. FAK interacta
estructuralmente con el complejo de protena ocludina-ZO-1 entre las clulas de Sertoli
en el BTB en el epitelio seminfero [ 50 , 60 ]. Adems, las formas activadas y
fosforiladas de FAK (p. Ej., Phospho -FAK- Tyr 397 y phospho -FAK-Tyr 576 ) se asocian
con la integrina 1 entre las espermtidas alargadas / elongadas y las clulas de Sertoli
en la ES apical [ 62 ] .] Se sabe que el cadmio interrumpe las uniones celulares en el
testculo, como la clula BTB de Sertoli, al acelerar la endocitosis de protenas
integrales de membrana (p. Ej., Ocludina, ZO-1 y N-cadherina) ( Figura 2 ) [ 60 ]. Una
cada de FAK por RNAi en el epitelio de clulas de Sertoli con una BTB funcional
establecida demostr que desensibiliza las clulas de Sertoli a la disrupcin de la barrera
TJ inducida por cadmio [ 50]. Esto, al menos en parte, se debe a la prdida de FAK para
provocar la redistribucin de ZO-1 de la interfaz clula-clula al citosol para mantener
la integridad de la unin celular [ 50] Adems, debido a la intimidad fsica entre FAK y
las protenas de unin en la BTB, FAK media la interrupcin de la BTB (que ocurre a ~
7-16 h despus del tratamiento con cadmio a 3 mg / kg de peso corporal, ip) de forma
ms rpida y eficiente que el de la barrera TJ endotelial en el espacio intersticial (que
ocurre a ~ 20-24 h) donde FAK est restringido al contacto de adhesin focal [ 49 , 60 ]
y no es un componente integrado de la protena ocludina-ZO-1 complejo en la barrera
TJ del microvaso [ 52 , 63] La distribucin nica de FAK en el BTB explica por lo tanto
la susceptibilidad inusual del testculo al dao inducido por cadmio. Aunque se
desconoce si FAK media otra disfuncin testicular inducida por txicos ambientales en
el BTB, la evidencia recogida de estudios de estrs oxidativo [ 45 , 53 , 57 ] apoya la
nocin de que FAK es probablemente el objetivo comn en la mediacin del dao de la
unin celular causado por el medio ambiente txicos.
Figura 2
Efectos patofisiolgicos de los txicos ambientales en el epitelio seminfero de los
testculos de mamferos
Ir:

La activacin de c-Src potencia la endocitosis de las protenas de

unin
Adems de activar FAK, c-Src participa directamente en la regulacin de las uniones
celulares. La expresin y / o actividad elevada de c-Src se observa ampliamente en
mltiples tipos de carcinoma. En particular, la activacin de c-Src est vinculada a la
progresin del cncer, que est significada por la prdida de la adhesin clula-clula y
la polaridad celular [ 63 , 64 ]. De acuerdo con las observaciones en las clulas
tumorales, la sobreexpresin y / o activacin de c-Src siempre conduce a la ruptura de
las uniones celulares en clulas endoteliales y epiteliales normales [ 65 , 66 ]. Tambin
se activa comnmente durante la disrupcin de la unin inducida por txicos
ambientales [ 45 , 67 ]. En respuesta al estrs oxidativo, Tyr 418de c-Src se sabe que se
fosforila para su activacin [ 68 , 69 ]. Mientras tanto, c-Src sufre un cambio
conformacional que libera el dominio C-terminal autoinhibidor para permitir el acceso
de sustratos al dominio de la quinasa cataltica [ 64 ].
La activacin de c-Src conduce a una interrupcin de las uniones celulares a travs de
tres vas. En primer lugar, se sabe que la activacin de c-Src induce la fosforilacin de
protenas AJ, tales como E-cadherina, N-cadherina y p120 ctn [ 65 , 70 ]. p120 ctn es un
sustrato de c-Src y un adaptador perifrico de cadherinas. Se requiere su asociacin con
las cadherinas para mantener la localizacin de las cadherinas en la superficie celular
[ 71 ]. La fosforilacin de tirosina de p120 ctn por activacin de c-Src inducida por estrs
oxidativo desencadena la translocacin de p120 ctndesde la membrana plasmtica al
compartimento endosomal temprano. Esto conduce a la internalizacin y la degradacin
mediada por endosoma de N-cadherina y al desmontaje del AJ. Curiosamente, la
fosforilacin de p120 ctn por c-Src es isoforma especfica que demuestra la especificidad
en el sustrato quinasa [ 70 ]. En segundo lugar, c-Src funciona para estabilizar Hakai,
una ubiquitina-ligasa E3 implicada en la ubiquitinacin de E-cadherina. La activacin
de c-Src aumenta la asociacin entre E-cadherina y Hakai, que a su vez causa la
ubiquitinacin e internalizacin de E-cadherina [ 65 ]. Adems, la unin de Hakai a E-
cadherina compite con la interaccin de p120 ctn con E-cadherina, que potencia an ms
la endocitosis de E-cadherina [ 65].] En tercer lugar, una activacin de c-Src puede
inducir la fosforilacin de la protena constituyente de caveolae, caveolin-1, para
interferir con la endocitosis y / o transcitosis de protenas de unin celular [ 68 ]. Por
ejemplo, c-Src phosphorylates Tyr 14 de caveolin-1 durante el dao oxidativo para
facilitar la disociacin de VE-cadherin y -catenin [ 67 ]. Tal desensamblaje del
complejo de adhesin AJ se acompaa de un aumento en la endocitosis y transcitosis de
protenas internalizadas. Estas observaciones fueron apoyadas por los hallazgos que
muestran que los ratones caveolin-1 - / - eran resistentes al dao inducido por el estrs
oxidativo en la permeabilidad vascular [ 68].] En este contexto, es de inters sealar que
los txicos ambientales (por ejemplo, BPA) que pueden mediar su accin a travs de la
va no genmica pueden ejercer sus efectos a travs de PI3K / c-Src y / o MAPK (ver
ms abajo) [ 20 , 72 , 73 ]. Sin embargo, queda por determinar si estn involucrados
cambios en la ubiquitinacin de protenas, endocitosis, reciclaje y / o transcitosis.
Ir:

Activacin de MAPKs por txicos ambientales

Las vas de MAPK han surgido como una plataforma de sealizacin comn para
mltiples txicos ambientales ( Figura 1 ). Se ha demostrado que tres MAPK, a saber, la
quinasa regulada por seal extracelular (ERK), la quinasa N-terminal c-Jun (JNK) y
p38, se activan en el testculo despus de la exposicin a txicos ambientales ( Tabla
1 ). Las MAPK participan en la regulacin de las funciones reproductivas normales en
los testculos, que incluyen la espermatognesis (p. Ej., Progresin del ciclo celular,
meiosis, dinmica BTB, dinmica de adhesin celular y espermiognesis),
esteroidognesis, hiperactivacin de los espermatozoides y reaccin acrosmica
[ 74 , 75].] Como resultado, la activacin no regulada de MAPK por txicos
ambientales impone una variedad de efectos fisiopatolgicos sobre las clulas de
Sertoli, germen y Leydig en el testculo. Estos incluyen un aumento en el dao del ADN
y la apoptosis, la interrupcin de las uniones celulares y la esteroidognesis
[ 76 , 77 ]. Las MAPK se activan por el estrs oxidativo inducido por txicos
ambientales en las clulas y los tejidos. Por ejemplo, el bloqueo del estrs oxidativo por
los secuestradores de radicales libres (por ejemplo, N-acetil cistena), invierte la
activacin de MAPK inducida por cadmio [ 78 , 79 ]. Este fenmeno est parcialmente
regulado por la inhibicin de Ser / Thr protena fosfatasas 2A (PP2A) y 5 (PP5) por el
estrs oxidativo, lo que resulta en un aumento en la fosforilacin de MAPK
[ 79] Inesperadamente, el cadmio induce la expresin de MAPK fosfatasa-1 (MKP-1),
[ 80 ] un importante inhibidor de la activacin de MAPK. Esto ilustra que el efecto
protector de MKP-1 para inactivar MAPK es reemplazado por la inhibicin de las
protenas fosfatasas PP2A y PP5, lo que resulta en un aumento global en la sealizacin
MAPK despus de la exposicin a txicos ambientales. Adems, la activacin de ERK
puede conducir a la fosforilacin de c-Src, FAK y paxillin bajo estrs oxidativo, lo que
implica que MAPKs podra ser uno de los objetivos aguas arriba para activar estas
tirosina quinasas no receptoras [ 55 ].

tabla 1
Efectos fisiopatolgicos de txicos ambientales en el testculo a travs de la activacin
de MAPK y citocinas
La activacin de MAPKs por txicos ambientales tambin regula positivamente la
expresin de citoquinas proinflamatorias tales como factor de necrosis tumoral-
(TNF) en macrfagos y monocitos [ 81 , 82 ], que pueden difundir desde los
microvasos en el espacio intersticial e interrumpir el BTB porque que son conocidos
para perturbar la clula de Sertoli TJ-permeabilidad de la barrera ( Figura 1 y y2)2 )
[ 83 , 84 ]. De manera similar, el cadmio y los contaminantes del escape de la
motocicleta (p. Ej., Hidrocarburos aromticos policclicos) aumentan la expresin del
factor de crecimiento transformante- (TGF-) e interleucina-6 (IL-6) en el testculo,
respectivamente [ 85 , 86] Se sabe que TNF, TGF- e IL-1 interrumpen las uniones
de clulas Sertoli-Sertoli y Sertoli-germ a travs de regulacin negativa [ 83 , 87 ] y / o
redistribucin de protenas de unin [ 88 - 90 ], como ocludina, ZO- 1 y N-cadherina, en
el epitelio seminfero. En consecuencia, la prdida de protenas integrales de membrana
en la interfase clula-clula provoca una alteracin de la BTB y la adhesin de clulas
germinales en el epitelio seminfero, lo que conduce a la liberacin prematura de clulas
germinales del epitelio y por lo tanto infertilidad [ 83 , 87 , 88] Adems, es importante
tener en cuenta que las citoquinas proinflamatorias (p. Ej., IL-6 y TNF) activan los
leucocitos para producir ROS que amplifican los efectos nocivos del estrs oxidativo
inducido por txicos ambientales [ 25 , 37 ]. Curiosamente, otros estudios en el testculo
encontraron que las citoquinas (p. Ej., TGF-3) utilizan las vas de MAPK para
interrumpir las uniones celulares [ 91 ].
Por lo tanto, las MAPK son tanto el estimulador como el mediador de las citocinas
inducidas por sustancias txicas medioambientales. La participacin de las MAPK en la
sealizacin inducida por txicos ambientales se complica an ms por el programa de
autoproteccin de los testculos. Esta accin protectora est mediada por la va de JNK
para inducir un inhibidor de proteasa no especfico ( 2 -macroglobulina) para limitar el
dao causado por el cadmio [ 92 ]. Aunque la 2 - macroglobulina no puede rescatar la
prdida de clulas germinales del epitelio seminfero y el dao irreversible de BTB,
protege al testculo de la protelisis indeseada durante la cascada de eventos que
conduce a la prdida de clulas germinales del testculo [ 49 , 50 , 92 ].
Ir:

La endocitosis de protenas de unin a travs de sealizacin de

Src y citocina est mediada por protenas de polaridad
Adems de Hakai y caveolin-1, c-Src controla la endocitosis de protenas integrales de
membrana en las uniones celulares regulando protenas de polaridad [por ejemplo, Par3,
Par6 y PKC atpica (aPKC)] a travs de una protena adaptadora endoctica, Numb
( Figura 1 ) [ 93 ]. Los estudios en clulas epiteliales renales e intestinales han
demostrado que las protenas de polaridad funcionan como seales espaciales para el
establecimiento y mantenimiento de las uniones intercelulares. Se sabe que la prdida
de protenas de polaridad da como resultado un retraso en la formacin o una prdida
completa de las uniones clula-clula [ 94] Por lo tanto, el posicionamiento preciso de
las protenas de polaridad en un epitelio celular es esencial para la integridad de las
uniones celulares. En contraste con la mayora de las clulas epiteliales (en las que las
protenas de polaridad estn restringidas a la TJ), Par6 se encuentra en ES apical, una
unin de anclaje especfica de testculo, entre clulas de Sertoli y espermtidas
elongantes en el testculo (donde no hay ultraestructura TJ presente cuando se examina
mediante microscopa electrnica ( Figura 2 ) [ 95 ]). De forma similar, varias protenas
de polaridad tales como Par3, aPKC y 14-3-3 se encuentran ya sea en el CE apical o
expresadas en clulas germinales [ 95 , 96 ]. Sin embargo, estudios recientes han
demostrado que las protenas de polaridad tambin funcionan como molculas cruciales
para regular la integridad de la unin celular en el testculo.
La primera evidencia proviene de la observacin de que Par6 est ausente del apical ES
varias horas antes de que esta ultraestructura se desensamble para liberar las
espermtidas maduras del epitelio seminfero a la luz del tbulo en la espermiacin
[ 95 ]. Para validar que Par6 contribuye al mantenimiento de la uniones de las clulas en
el Es apicales, Adjudin [1- (2,4-diclorobencil) - 1H -indazol-3-carbohydraizde] se
administr a ratas adultas in vivo para inducir la liberacin prematura de espermtidas
de el epitelio seminfero [ 95] En el alargamiento de las espermtidas que estaban a
punto de agotarse prematuramente del epitelio seminfero, se detect una prdida de
Par6 en la CE apical. Esto fue acompaado por una desfragmentacin de los haces de
filamentos de actina que son necesarios para mantener la integridad del ES apical. Por
lo tanto, estos resultados indican el papel fundamental de Par6 para la adhesin de
espermtidas alargadas mediante el mantenimiento de los haces de filamentos de actina
en el ES apical [ 95]. En este contexto, Par6 probablemente se coordina con la protena
de nucleacin de actina Arp3, que se detecta predominantemente en la ES apical (junto
con Par6) en los tbulos de la etapa VII a la VIII temprana. Juntos, regulan los paquetes
de filamentos de actina hexagonal altamente organizados y facilitan la endocitosis de las
protenas integrales de membrana en el CE apical antes de la espermiacin [ 97].] Esta
idea es apoyada por los hallazgos que muestran que Arp3 es un efector aguas abajo del
complejo Par6 / aPKC / Cdc42 que es necesario para la ramificacin localizada de la red
de filamentos de actina y la endocitosis de E-cadherina [ 98 , 99 ]. Posteriormente, la
expresin de Par6 y Arp3 disminuye rpidamente para permitir la desintegracin de los
haces de filamentos de actina, lo que, a su vez, permite que el ES apical facilite la
espermiacin en la ltima etapa VIII del ciclo epitelial seminfero.
En las clulas MDCK transformadas v-Src en las que Src quinasa es constitutivamente
activa, Numb se une preferentemente a un PKK y Par6 en lugar de E-cadherina y Par3
[ 93 ]. La disociacin de Numb y E-cadherina parece ser necesaria para la
internalizacin de E-cadherina desde la superficie celular hasta el citosol. Esta
conclusin se ve respaldada por la observacin de que la presencia de Numb es
importante para la correcta localizacin de E-cadherina en la interfaz clula-clula
[ 93 ]. Curiosamente, la fosforilacin de Numb por aPKC disminuye la afinidad de
Numb por la integrina y evita la internalizacin de la integrina en las clulas HeLa
[ 100] Esta discrepancia podra explicarse por la especificidad de Numb para unir
protenas transmembrana selectivas a -adaptina, una subunidad del complejo de
protena adaptadora (AP) 2 que es esencial para el ensamblaje y clasificacin de cargas
en estructuras endocticas-vesiculares recubiertas de clatrina para endocitosis
[ 101 ]. Adems, no est claro si la disociacin de Numb de E-cadherina sobre la
fosforilacin de c-Src es realmente esencial para facilitar la unin de Hakai a E-
cadherina para su endocitosis porque Numb y Hakai se unen a resinas de tirosina
idnticas de E-cadherina [ 65 , 93 ]. Estos hallazgos implican que se usan mecanismos
distintos para regular la adhesin mediada por cadherina e integrina por c-Src a travs
de protenas Numb y de polaridad.
La investigacin futura generar una imagen ms clara a medida que se descubra que
ms protenas de polaridad son sustratos para c-Src [ 102 ]. Aunque queda por
determinar si la activacin de c-Src inducida por txicos ambientales fosforila protenas
de polaridad o Numb en el testculo, se sabe que la interaccin entre Src quinasa y Par6
es importante para la integridad de ES apical para alargar la adhesin de espermtidas
( Figura 2 ) [ 95 ]. Esto se ilustra por el aumento en la afinidad de la quinasa Src por
Par6 a travs de la protena adaptadora Pals1 antes de la disrupcin inducida por la
supinacin de la CE apical. Tal interaccin mejorada entre Src quinasa, Par6 y Pals1 es
probable para la fosforilacin de Par6 y / o Pals1 por Src quinasa [ 95] Sin embargo, los
objetivos moleculares (p. Ej., Protenas de membrana integrales) aguas abajo de esta
ruta de sealizacin an no se han dilucidado.
No es sorprendente que las citoquinas que se inducen despus de la exposicin a txicos
ambientales tambin regulan las uniones celulares a travs de protenas de polaridad,
similar a c-Src ( Figura 1 ). Par6 es un sustrato del receptor tirosina quinasa TGF
receptor II (TRII) [ 103 ]. La estimulacin de TGF recluta TRII para fosforilar Par6
en la superficie celular que interacta constantemente con TRI endgeno. La Par6 no
fosforilable protege las clulas epiteliales de la disrupcin de la unin inducida por
TGF, lo que ilustra que Par6 es esencialmente el mediador en esta va de sealizacin
[ 103 ]. Ser-phosphorylated Par6 por TRII promueve el montaje de E3 ubiquitin ligase
Smurf1 a la interfaz clula-clula [ 103] Actualmente, no est claro si Smurf1 facilita
directamente la ubiquitinacin de las protenas de unin celular, aunque la ocludina de
la protena TJ se asocia con el complejo TRI / II / Par6. Sin embargo, la ubiquitinacin
de la familia de genes homlogos Ras, miembro A (RhoA) por Smurf1 sin duda juega
un papel fundamental en este proceso [ 103 ]. Las citocinas (p. Ej., TGF3 y TNF) han
demostrado recientemente que regulan la dinmica de la unin en el testculo a travs de
la va mediada por vesculas endocticas [ 89 , 90 , 104 , 105 ]. Significativamente, la
endocitosis potenciada por TGF3 est mediada por la activacin de Cdc42 en el
epitelio de la clula de Sertoli [ 89].] Cdc42 activado es parte del complejo Par6, y se ha
demostrado que ambos son necesarios para el trfico de protenas mediadas por
vesculas endocticas en clulas epiteliales [ 106 ]. Juntos, estos datos sugieren
fuertemente que las protenas de polaridad estn involucradas en la dinmica de unin
celular mediada por citoquinas en los testculos, y son componentes crticos del dao
mediado por sustancias txicas ambientales a las clulas y tejidos a travs del estrs
oxidativo.
Ir:

Observaciones finales
El sistema reproductor masculino se ha convertido en uno de los principales objetivos
de toxicidad de los txicos ambientales. Aunque la exposicin aguda de sustancias
txicas contribuye a la apoptosis y la necrosis de las clulas testiculares, la exposicin
crnica y sub-letal prevalece en el pblico en general [ 38]. Debido a la inusual larga
vida media de algunos de estos txicos en el cuerpo de los mamferos (por ejemplo, el
cadmio tiene una vida media de 15 aos [ 107 ], la exposicin crnica y de bajo nivel a
los humanos puede causar efectos no deseados a largo plazo. los efectos disruptivos de
los txicos ambientales en las uniones celulares mediadas por tirosina quinasas no
receptoras (p. ej., c-Src y FAK) y citoquinas a travs del estrs oxidativo porque estos
daos a menudo se observan en niveles bajos de exposicin antes de que tenga lugar la
apoptosis. [ 108]] Significativamente, estas vas de sealizacin convergen para utilizar
protenas de polaridad para regular las uniones intercelulares. Las protenas de
polaridad, que se sabe que controlan la adhesin celular en el testculo, emergen as
como nuevos objetivos para la intervencin teraputica para limitar la infertilidad
inducida por txicos ambientales. Aunque es igualmente importante estudiar los efectos
epigenticos (p. Ej., Vinclozolin) y alteradores endocrinos (p. Ej., BPA, dioxinas,
cadmio) de los txicos medioambientales, es cada vez ms claro que estos txicos estn
imponiendo un efecto perjudicial inmediato en el testculo por disrupcin de las uniones
celulares entre las clulas testiculares debido al aumento en el estrs oxidativo. Adems,
los txicos que alteran el sistema endocrino que afectan los niveles de estrgeno pueden
causar un equilibrio alterado de ROS y estrs oxidativo, ya que el estrgeno es un
importante secuestrante de radicales libres en humanos [109 , 110 ], adems de ser
esencial para la espermatognesis [ 111 ].
Recientemente, varios estudios han enfatizado la importancia de evaluar los efectos de
una mezcla de txicos ambientales en las funciones reproductivas masculinas porque los
humanos estn expuestos a una serie de sustancias qumicas que pueden antagonizarse o
agonizarse mutuamente [ 38 , 108 ]. Aunque este tipo de estudio es intrnsecamente
difcil de realizar, es crucial para una comprensin completa del impacto de los txicos
ambientales en el sistema reproductivo. Los estudios que muestran la administracin de
suplementos de antioxidantes (por ejemplo, vitamina E y selenio) tienen cierto xito en
lo que respecta a la mejora de las cualidades espermticas (por ejemplo, la motilidad de
los espermatozoides) [ 25 , 112] ofrecen el potencial para el tratamiento. Sin embargo,
se necesita mucho trabajo para comprender los eventos moleculares precisos y los
mecanismos regulados por sustancias txicas ambientales para apuntar a las protenas c-
Src, FAK, MAPK y de polaridad en los testculos, con la esperanza de identificar
objetivos de fosforilacin especficos o isoformas para que los pequeos agonistas y / o
antagonistas de molculas pueden disearse para limitar la toxicidad sistmica in vivo .