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Determinacin de bacterias contaminantes en el

proceso de produccin de alcohol etlico y su relacin con la


floculacin de Saccharomyces cerevisiae

Determining contaminating bacteria in the ethyl alcohol


production process and their relationship to Saccharomyces
cerevisiae flocculation
Martn Bayona*, Mara Ardua**, Oscar Castellanos***, Martha Rojas****

RESUMEN
Este trabajo se desarroll en una planta productora de etanol, y tuvo como finalidad estudiar los contaminantes
bacterianos durante las etapas de dilucin de la melaza, reproduccin de la levadura y fermentacin, mediante recuentos
microbiolgicos, aislamiento e identificacin de las bacterias predominantes, y la relacin entre la contaminacin
bacteriana y la floculacin de las clulas de levadura. Se determin el efecto de un desinfectante comercial como
microbicida en el control de dichos contaminantes. Inicialmente se procedi a realizar mustreos con el fin de
estandarizar la metodologa a nivel laboratorio para la identificacin de los contaminantes bacterianos en la melaza y la
levadura productora de etanol. Los resultados obtenidos indican que los microorganismos contaminantes en el proceso
analizado son: Lactobacillus sp. en un nivel promedio de 10 X 105 UFC/ml, y Zymomonas mobilis en un nivel promedio de
10 X 10 UFC/ml. Se comprob que la presencia de bacterias contaminantes tiene relacin directa con la floculacin de la
levadura, presentndose con niveles de 106 UFC/ml de Lactobacillus sp, 105 UFC/ml de Zymomonas mobilis o 10 UFC/ml
de la mezcla de estos microorganismos. Este fenmeno depende tambin de otros factores como las caractersticas de la
cepa de levadura, las condiciones del cultivo y el medio empleado. Adems, se utiliz un desinfectante comercial
(Sanitech ) y se observ que es muy efectivo para el control de Zymomonas mobilis. De otra parte, en inocules con
adicin de penicilina (Alipen ), se estableci que este agente acta de forma adecuada en la inhibicin del Lactobacillus
sp. Finalmente, se comprob que con una concentracin de 20 ppm del desinfectante comercial, no se afecta la viabilidad
del Saccharomyces cerevisiae, aunque los niveles de contaminacin alcanzaron poblaciones de 10 UFC/ml.

Palabras clave: Etanol, Lactobacillus sp., Zymomonas mobilis

ABSTRACT
This work was done in an ethanol production plant, its propose being to study contaminating bacteria in the
molasses' dilution, yeast reproduction and fermentation stages by microbiological count, isolation and identifi-
cation of predominating bacteria and the relationship between the bacterial contamination and yeast cell flocculation.
The effect of a commercial disinfectant such as microbicide in controlling such contaminants was deter-mined.
Samples were taken to standardise laboratory methodology for identifying contaminating bacteria in molasses
and ethanol producing yeast. The obtained results indicate that the contaminating micro-organisms analysed in the
process were Lactobacillus sp. (10 x 105 UFC/ml average) and Zynomonas mobilis (10 x 102 UFC/ml average). It was
shown that the presence of contaminating bacteria is directly related to yeast flocculation, pre-senting 106 UFC/ml
Lactobacillus sp, 105 UFC/ml Zymomonas mobilis or 103 UFC/ml for a mixture of these two micro-organisms. This
phenomenon also depends on many f actor s, such as yeast strain, culture conditions and medium employed. A
commercial disinfectant (Sanitech) was used; this was seen to be very effective for Zymononas mobilis control.
The penicillin (Alipen) contained in one inoculum had a suitable effect on Lactobacillus sp inhibition. It was also
shown that a 20 ppm concentration of commercial disinfectant did not affect Saccharomyces cerevisae feasibility,
though contamination levels reached 106 UFC/ml populations.

Key words: Ethanol, Lactobacillus sp., Zymomonas mobilis

* Bacterilogo M. Se. Docente Pontificia Universidad Javeriana. Tel: 3208320 ext. 4110 - 4030
** Bacteriloga. Pontificia Universidad Javeriana.
*** IQ, PhD. Docente. Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Ingeniera. E-mail: ocasta@ing.unal.edu.co
****Microbiloga. Sucromiles.
Recibido: septiembre 12 de 2001; aceptado: febrero 28 de 2002

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DETERMINACIN DE BACTERIAS CONTAMINANTES EN EL PROCESO DE PRODUCCIN DE ALCOHOL ETLICO

INTRODUCCIN Los efectos de los contaminantes bacterianos


en la produccin de alcohol hacen que se requie-
ra de un manejo higinico industrial adecuado, as
Gran parte del etanol industrial se obtiene por fer- como la adicin de agentes controladores de sta
mentacin. En EE.UU la materia prima ms impor- contaminacin durante el proceso de fermentacin.
tante para su produccin la constituyen los cerea- El presente trabajo consisti en identificar, aislar
les, mientras que en Europa suelen emplearse y caracterizar las bacterias contaminantes en el
melazas de remolacha y en el resto del mundo proceso fermentativo. Igualmente, se determin la
melazas de caa de azcar (Weeb,1995). En Co- relacin de stas con la floculacin de la levadura
lombia, el cultivo de caa de azcar tiene gran Saccharomyces cerevisiae, y se evalu la efecti-
importancia econmica y social, ya que es el se- vidad de un desinfectante comercial basado en
gundo cultivo agrcola permanente despus del cloro (Sanitech) en el control de los agentes con-
caf (Mora,1995). taminantes, as como su efecto sobre la viabilidad
de la levadura.
Las melazas de caa representan el residuo
en el proceso de extraccin de azcar. Las
MATERIALES Y MTODOS
melazas invertidas se obtienen del jarabe de caa
mediante una hidrlisis acida parcial, seguida de
El estudio se realiz en una planta productora de
neutralizacin y evaporacin hasta el 70% de con-
etanol ubicada en el Valle del Cauca, Colombia.
centracin de azcar total (Weeb,1995). Algunas
Para el aislamiento e identificacin de las bacte-
levaduras pueden causar fermentacin de estos
rias contaminantes en el proceso de obtencin de
substratos y convertirlos en alcohol.
alcohol etlico, la evaluacin de la relacin de es-
tos microorganismos con el fenmeno de
Uno de los problemas de las destileras es la floculacin de la levadura y el efecto de la adicin
contaminacin bacteriana durante el proceso de del desinfectante de cloro sobre la fermentacin
fermentacin, desde la llegada de la materia pri- etanlica, se sigui la metodologa descrita a con-
ma hasta la destilacin final, ocasionando prdi- tinuacin:
das en la produccin de etanol. Los contaminan-
tes bacterianos establecen un efecto competitivo
por el substrato, conduciendo a un menor rendi-
Muestreo
miento de alcohol o la introduccin de productos
indeseables (Weisser,1996). En las destileras han Se realizaron mustreos preliminares correspon-
sido encontrados microorganismos contaminantes dientes a las melazas y levaduras que participa-
como: Lactobacillus sp, Sporolactobacillus sp, ron en el proceso de reproduccin y fermentacin
Zymomonas sp, Micrococcus sp, Acetobacter sp y del alcohol. Estas muestras fueron colectadas en
Gluconobacter sp (Alltechs,1995). frascos de boca ancha esterilizados en autoclave
y debidamente identificados. Se refrigeraron a 5C,
Otro problema frecuente y de gran importan- y el tiempo mximo de almacenamiento fue de 6
cia en las destileras es la floculacin de las clu- horas, hasta el momento de la siembra.
las de levadura, observado generalmente al fina-
lizar la fermentacin. Este es un proceso complejo Siembra
que consiste en la agregacin de las clulas de
levadura, lo cual disminuye la velocidad de pro- Diluciones. Las siembras de las muestras de me-
duccin de alcohol. Depende de numerosos fac- laza que entran a la planta, as como las posterio-
tores tales como la cepa de levadura (gentica, res, se realizaron en cabina de flujo laminar, to-
estado fisiolgico y metabolismo), la composicin mando 11g de cada una de las melazas y adicio-
del medio de fermentacin, las condiciones de fer- nando 99 mi de agua peptonada estril (0.1%),
mentacin (contaminacin bacteriana, temperatu- mezclndose en un Vortex. Posteriormente se
ra, agitacin, aireacin). La influencia de cada uno realizaron diluciones de 10-1, 10-2 y 10-3. A partir
de estos parmetros en el proceso hace muy dif- de esta ltima se efectuaron las diluciones deci-
cil el estudio de este fenmeno (Abate,1996). males siguientes.

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Para sembrar en superficie se tomaron 0.5 ml Coloracin de Gram


de la dilucin 10-1. Las diluciones de las muestras de Morfologa celular. Las lminas anteriormente co-
levadura, inculos, mostos y vinos se efectuaron loreadas se observaron al microscopio con objeti-
tomando 0.1 mi de la muestra y agregando 9.9 ml de
vos de inmersin 100X y se constat la forma celu-
agua peptonada; a partir de stas se efectuaron
lar.
diluciones desde 10-2 hasta 10-8 (Collins,1989).
Se realizaron muestreos continuos para detectar el Catalasa. Mediante las siguientes reacciones:
grado de contaminacin y hallar la dilucin de la -Reaccin positiva: Se observ desprendimiento
siembra de cada muestra. inmediato de oxgeno por las colonias
evaluadas.
Recuento. Se contaron las colonias y se mul- -Reaccin negativa: Sin desprendimiento de
tiplicaron por el factor de dilucin correspondiente; oxgeno.
la interpretacin de resultados se hizo tomando el Citocromo-oxidasa. Se emplearon tiras de ensayo
intervalo entre 30 y 300. Las cajas que presentaron con zona de accin para la demostracin de la
entre 10 y 150 UFC por siembra en superficie, se citocromooxidasa en microorganismos.
contaron y sus resultados fueron interpretados de Agar hierro- tres azcares
acuerdo con dicho valor de referencia (Brock,1991). Se hicieron siembras tanto por estra en la superfi-
cie inclinada como en columna vertical mediante
Segn las caractersticas del sistema, que lo estra central; se incubaron por 48 horas a 37C
hacen selectivo, las bacterias a investigar son las
Interpretacin del proceso
presentadas en la Tabla 1.
- Anlisis de los Picos de Flauta:
- alcalino/profundidad alcalina (K/K):No
fermentacin de hidratos de carbono.
- alcalino/profundidad acida (K/A):Glucosa
Caracterizacin bacteriana
fermentada; sacarosa y lactosa no fermentadas.
- alcalino/profundidad acida (Negra) (K/A/H2S):
Para la identificacin de las bacterias aisladas en
Glucosa fermentada, lactosa no fermentada,
cada uno de los medios de cultivo se realizaron las
siguientes pruebas: produccin de H2S

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DETERMINACIN DE BACTERIAS CONTAMINANTES EN EL PROCESO DE PRODUCCIN DE ALCOHOL ETLICO

- cido/profundidad acida: Glucosa, lactosa y Preparacin de inculos


sacarosa fermentadas.
Reduccin de Nitrato. El cultivo axnico que Substrato. Se parti de una cantidad de 6 litros de
fue sometido a ensayo se incub durante 12 - melaza de tercera dilucin de la planta (pH 4.55,
24 horas a la temperatura ptima en caldo nu- 30C), esterilizada en autoclave y distribuida en los
tritivo estndar II, al que se le aadi 1.5 g/l de 10 erlenmeyer. Se adicion a cada uno urea y cido
nitrato de potasio (Merck, 94). Despus de la fosfrico para cumplir con las necesidades
incubacin se adicionaron unas gotas del reac- nutricionales de la levadura. Se tomaron muestras
tivo de nitritos. La reaccin se consideraba po- de 200 ml en perodos de 12 horas, y simultnea-
sitiva si, transcurrido un minuto aproximadamen- mente se alimentaba una cantidad igual de melaza
te, se apreciaba una coloracin roja, cuya in- estril (dilucin 10-3, pH 4.50 - 4.65, 30C), junto con
tensidad dependa de la cantidad de nitrito for- urea y el agente inhibidor correspondiente.
mada (Merck, 1994) A las reacciones negativas
se les agreg polvo de Zinc; los iones de Zinc Dilucin de bacterias. Las bacterias previamen-
indican la presencia de nitratos residuales y te aisladas e identificadas como Lactobacillus sp.
confirman una reaccin negativa verdadera. y Zymomonas sp., fueron transferidas cada dos
SIM. El cultivo sometido a examen se sembr semanas en AGAR MRS y WL respectivamente
por picadura en la capa superior del medio de (Kinner,1990). Adems, se enriquecieron en agua
cultivo y se incub por 24 horas a 37C. peptonada al 0.1% (caldo rico en sustancias nu-
tritivas que produce una alta cuota de sobreviven-
cia de bacterias daadas subletalmente y un cre-
Cuantificacin de los cimiento intenso). Se tomaron las diluciones que
presentaron un recuento de 104 UFC/ml, y se con-
contaminantes bacterianos servaron en nevera a 8C.
Se realizaron dos muestreos por semana durante Preparacin del bactericida. El dixido de cloro
21 semanas en 32 puntos, haciendo siembras des-
(Sanitech) se activ utilizando 3.25 onzas de
de 10-1 hasta 10-8de cada muestra; se obtuvo un
Sanitech para un galn y 10 gramos de cido
total de 42 recuentos, los cuales fueron prome-
ctrico. Se trabaj a una concentracin de 20 ppm
diados para determinar las UFC/ml.
de desinfectante (lo recomendado por el fabrican-
te) para no afectar la viabilidad la levadura
MODELO EXPERIMENTAL (Alltechs.1995).

Las variables evaluadas correspondieron a: Efec-


EXAMEN DIRECTO
to del dixido de cloro (Sanitech) sobre la viabi-
Se realiz a cada inoculo en perodos de 12 ho-
lidad de la levadura, este desinfectante como
ras, con el fin de evaluar la pureza de la levadura,
agente controlador de los contaminantes bacte-
observando la uniformidad del desarrollo de las
rianos identificados, y relacin de estos ltimos
clulas fngicas (Tamao, forma, distribucin,
con la floculacin de Saccharomyces cerevisiae
estado de reproduccin, floculacin).
Ensayo de fermentacin Mtodo. La muestra suspendida en un portaobje-
tos se examin al microscopio con los objetivos
Se tomaron 10 erlenmeyer de 1000 ml c/u, colo- de 10X y 40X. La distribucin aproximada fue de
cados en un agitador a 100 r.p.m. y a temperatura 200 clulas de levadura en el campo de 40X .
de 30C; se marcaron de la siguiente forma: PC,
Penicilina Control; PL, Penicilina Lcticas; PZ, Morfologa. Con el objetivo 10X se contaron los
Penicilina Zymomonas; SC, Sanitech Control; SL, flculos de 5 campos y se promediaron; si se ob-
Sanitech Lcticas; SZ, Sanitech Zymomonas; PLZ, servaban menos de 5 flculos, la prueba se consi-
Penicilina Lcticas- Zymomonas; SLZ, Sanitech deraba baja; de 5 a 10 flculos se tom como
Lcticas-Zymomonas; Bacterias Lcticas - Zymo- floculacin intermedia; ms de 10 flculos se con-
monas; Control negativo. sider como floculacin alta (Sucromiles,1996).

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Impurezas. Se report la cantidad de cristales exis- Controles microbiolgicos. Se realizaron culti-


tentes con cruces; el mnimo rango fue de O cruces y el vos cada 24 horas para evaluar la poblacin
mximo de 4 cruces en cristales y suciedad. bacteriana con respecto al estado de la levadura
y la accin de los bactericidas.(Aquarone, 1975)
Contaminacin bacteriana
Bacterias: Su presencia fue visualmente diferen Se realizaron muestreos durante ocho meses,
cial de las clulas de levadura al microscopio. desde la llegada de la materia prima a la planta
Bacilos en cadena: Los bacilos observados al mi hasta el paso a destileras, con el fin de estanda-
croscopio son compatibles con Lactobacillus sp. rizar la metodologa de muestreo y la realizacin
de cultivos microbiolgicos, obteniendo colonias
Determinacin del nmero de clulas de levadura de Lactobacillus sp y Zymomonas mobilis bien
A la cmara de Neubauer se transfiri una gota de la definidas. Los aislados de estos mustreos fue-
suspensin preparada con 1 ml de solucin de azul de ron preservados en agar MRS (Lactobacillus sp )
metileno al 1%, 1 ml de suspensin de levadura y 98 y en un medio estndar (Zymomonas mobilis).
ml de agua, y se procedi al conteo de clulas (con el Estos se enriquecieron en Agua peptonada 0.1%
cuadro de 1 mm x 1 mm), de acuerdo con la tcnica y se sembraron en cajas en un medio selectivo
propuesta por Sucromiles (1996), as: MRS y WL, para constatar la pureza de las colo-
nias (Canchos, 1991).
Los cuadros de menor tamao (0.2 mm X 0.2 mm)
sirvieron de gua para el cmputo. Se empez a contar
desde la parte superior de los cuadros menores ubica- RESULTADOS Y DISCUSIN
dos dentro del cuadro grande central (1 mm X 1 mm) y
se continu hasta la base; si las clulas tocaban los Aislamiento e identificacin
lmites de los cuadros menores, deban contarse sola-
mente aquellas que tocaban la parte inferior y el lado De las colonias de Lactobacillus sp y Zymomonas
izquierdo del cuadro; si las clulas tocaban la parte mobilis se observ crecimiento en Agar MRS y WL
superior o el lado derecho no se contaban. (ver caractersticas tabla 2).

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DETERMINACIN DE BACTERIAS CONTAMINANTES EN EL PROCESO DE PRODUCCIN DE ALCOHOL ETLICO

son contaminantes frecuentes en las des-


tileras". Igualmente, estn de acuerdo
con Altech (Fiftheen Annual International
Alcohol course, EEUU 1992): "Las Zymo-
monas son bacterias que se encuentran
en los medios de fermentacin, contami-
nantes en destileras que fermentan glu-
cosa anaerbicamente por la va de Et-
ner - Doudoroff".

Recuento de la
microcarga contaminante

El microorganismo Lactobacillus sp en el
perfil de dilucin 10-2 de melaza, corres-
pondi a un orden mximo de 104 UFC/
ml. Se observaron tres puntos crticos en
el proceso: 1. La entrada a la planta:
Puede ocurrir contaminacin debido a
que no hay vapor para garantizar las con-
diciones de esterilidad, antes de la toma
de la muestra (tanque de recepcin de
melaza, tanque elevado de almacena-
miento, lnea de conduccin o punto de
muestreo). 2. El intercambiador de la
melaza de segunda dilucin. 3. La lnea
de conduccin hacia las cubas de fer-
mentacin.

Las bacterias lcticas en el prfil de


melaza de dilucin 10-3 tuvieron un nivel
mximo de 104 UFC/ml. Los puntos crti-
cos detectados en el proceso son: el mez-
clador y la lnea de conduccin de entrada
a las cubas de reproduccin. En este
caso se debe controlar el programa de esterilidad, as
Durante los muestreos, fueron seleccionadas de mismo, evaluar si se requiere una frecuencia mayor de
los medios de cultivo las diferentes colonias para sanitizacin. Durante el proceso de produccin de
ser aisladas y purificadas, conservndose en Agar alcohol, el grado de contaminacin por Lactobacillus
MRS y SM (Medio Standard) a 8C. En el quinto mes sp fue de un orden mximo de 105 UFC/ml.
se revivieron las colonias aisladas y se inici la
caracterizacin realizando pruebas bioqumicas El microorganismo Zymomonas en el perfil de
(Tabla 3). Los resultados se compararon con las melaza de dilucin 10-2 y 10-3, registr un nivel mximo
pruebas y descripciones taxonmicas de Bergey's de 101 UFC/ml. Los puntos crticos en el proceso de
Manual of Systematic Bacteriology, Vol. 1-1994. Con produccin de etanol son los mostos inmediata-
base en stos se determin que los contaminantes mente despus de ser inoculados, con una pobla-
bacterianos anoxignicos presentes durante el cin de Zymomonas de 105 UFC/ml. Este aumento es
proceso de produccin de alcohol son: Lactobacillus causado posiblemente por los vinos que no se drenan
sp y Zymomonas mobilis. y quedan en el sistema de refrigeracin de la cuba y/o
la lnea de trasferencia del inoculo. Es importante el
Los microorganismos contaminantes identifica- control y minimizacin de las bacterias lcticas,
dos coinciden con lo reportado en la literatura por debido a que una concentracin de 1.4% de cido
Mark & Phipps Enrfab, inc. 1988: "Los Lactibacillus

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lctico inhibe la capacidad de fermentacin de la Zymomonas mobilis


levadura (Crueger,1993;Tamarit,1997). De igual
forma, la presencia de Zymomonas mobilis com- En los cultivos microbiolgicos se observ que los
pite con la levadura por el substrato y fermenta la inculos que contenan Lactobacillus sp con dixido
glucosa a etanol. En poblaciones mayores, este de cloro Sanitech y con Penicilina, ocurri slo un
microorganismo aumenta la produccin de H2S, lo ligero incremento de este microorganismo dentro de
cual genera un olor desagradable que puede con- las 48 a 72 horas del ciclo de la levadura, lo que
vertirse en un problema de carcter ambiental confirma que tanto el desinfectante analizado (dixi-
(Bergeys,1994). Finalmente se encontr que la leva- do de cloro) como la penicilina, son agentes contro-
dura seca, con una poblacin de 16X102 UFC/g, est ladores de las bacterias lcticas, debido a su poder
dentro de los valores detectados para esta clase de bactericida.
levadura.
El inoculo de dixido de cloro Sanitech y
Ensayo de fermentacin Zymomonas mobilis mostr un mayor descenso en
la poblacin de ste microorganismo a las 96 horas,
Los resultados de los exmenes directos y de via- con una poblacin de 104 UFC/ml, mientras que el
bilidad realizados cada 12 horas durante el ensa- inoculo que contena penicilina y Zymomonas mobilis
yo in vitro de fermentacin, mostraron que a las registr una poblacin de 106 UFC/ml en el mismo
36 horas, la levadura perdi aproximadamente el perodo, lo que sugiere que el dixido de cloro es
20% de viabilidad en el inoculo que no contena ms eficaz que la penicilina para la inhibicin de
desinfectante. En este mismo inoculo a las 72 ho- Zymomonas mobilis.
ras, las clulas de levadura se encontraban
floculadas y se observ una poblacin de 107 UFC/ El dixido de cloro Sanitech utilizado a 20 ppm
mi de bacilos en cadena y una viabilidad del 33.6%. no afect la viabilidad de la levadura, pero los nive-
Esto indic la necesidad de utilizacin de un agen- les de contaminacin alcanzaron poblaciones de 106
te bactericida para el control de la microcarga con- UFC/ml. Sin embargo, stos son niveles altos, por lo
taminante, ya que ocasiona prdida de viabilidad cual deben usarse concentraciones mayores del des-
de la levadura y disminucin de su capacidad de infectante para tener un mejor efecto bactericida.
fermentacin (Shepherd,1994; Schoserth, 1996).
CONCLUSIONES
En el control, que slo contena melaza, nu-
trientes y levadura, se observ a las 72 horas la El desarrollo de la investigacin planteada permiti
formacin de pequeos flculos, indicando que determinar los contaminantes microbianos durante
posiblemente uno de los numerosos factores que las etapas de dilucin de la melaza, reproduccin de
influyen en la floculacin de la levadura, es la edad la levadura y fermentacin en el proceso de produc-
de sta en el ciclo (Alltechs,1995). cin de etanol con Saccharomyces cereviciae, en-
contrndose que, de acuerdo con lo reportado, es-
Los inculos control, PC, y SC presentaron a tos microorganismos son: Lactobacillus sp. en un ni-
las 105 horas un porcentaje de viabilidad similar. vel promedio de 10 X 105 UFC/ml, y Zymomonas
En los exmenes directos en los cuales se obser- mobilis en un nivel promedio de 10 X 102 UFC/ml.
vaba floculacin, los cultivos microbiolgicos pre- Adicionalmente, poblaciones de un orden mayor a
sentaron una poblacin de 106 UFC/ml de Lacto- 106 UFC/ml de Lactobacillus sp, detectadas en los
bacillus sp y de 105 UFC/ml de Zymomonas mobi- cultivos microbiolgicos, se relacionaron con el exa-
lis, lo cual indica que niveles de contaminacin men directo en donde se observaron flculos de le-
altos de estos microorganismos se relacionan con vadura. As mismo, con un nivel de 105 UFC/ml para
la floculacin de Saccharomyces cerevisiae. Po- Zymomonas mobilis se present floculacin de
blaciones de 103 UFC/ml de los dos microorganis- Saccharomyces cerevisiae. Se observ completa
mos contaminantes inician la floculacin de la le- floculacin de Saccharomyces cerevisiae por conta-
vadura (Meagher,1996; Deanda,1996). minacin de Lactobacillus sp y Zymomonas mobilis

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DETERMINACIN DE BACTERIAS CONTAMINANTES EN EL PROCESO DE PRODUCCIN DE ALCOHOL ETLICO

en niveles mnimos de 103 UFC/ml. El uso del desin- Kinner, N. 1990. Bacterial taxonomy. NY.
fectante comercial (Sanitech) logr efectivamente
el control de Zymomonas mobilis. En inculos con Meagher, M. 1996. Cloning and Expression of the
adicin de penicilina (Alipen), se estableci que este Zymomonas mobilis "Production of Ethanol"
agente acta de forma adecuada en la inhibicin del Genes in Lactobacillus case/'. Current
Lactobacillus sp. Finalmente, se comprob que con Microbiology. 33. 1756-1761.
una concentracin de 20 ppm del desinfectante co-
mercial, no se afecta la viabilidad del Saccharomyces Merck. 1994. Manual de medios de cultivo.
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