Marcos Lahuerta y Jordi Blasco

EXTRACCIN DE ADN

INTRODUCCIN:
ADN (cido desoxirribonucleico) localizado en el interior del ncleo, constituye el material gentico
de los organismos. Es el componente qumico primario de los cromosomas y el material del que los
genes estn formados. En los organismos superiores el ADN es nico e invariable, a lo largo de toda
la vida, para cada individuo de cada especie. Estas molculas gobiernan el desarrollo del cuerpo y
sus caractersticas especficas, ya que proporcionan la informacin hereditaria y ponen en
funcionamiento la produccin de protenas. Esta caracterstica es lo que se conoce como "huella
gentica", y es la base de los estudios de identificacin de individuos. Salvo unas pocas excepciones
(glbulos rojos en mamferos, por ejemplo), todas las clulas de un organismo vivo tienen ADN.
Gracias a ello es posible extraerlo a partir de cualquier muestra biolgica.
La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En primer lugar, tienen que
romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. A
continuacin, debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ltimo, hay
que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite
en alcohol. La extraccin de ADN de los tejidos de las
plantas, a diferencia de aislamiento de ADN de tejidos
de mamferos, sigue siendo difcil debido a la presencia
de una pared celular rgida que rodea las clulas
vegetales. Actualmente se utilizan mtodos exigen
necesariamente una laboriosa trituracin mecnica
paso, necesario para interrumpir la pared celular para
la liberacin de ADN.
Esta prctica se realiz con el fin de extraer ADN, para poder conocer tcnicas sencillas para
dicha extraccin y conocer para que es importante extraerlo, ya que, como estudiante de Biologa, es
indispensable conocer cmo se extrae el ADN y como es dicho proceso.

OBJETIVO:
Extraer el ADN de un organismo vivo de forma sencilla y utilizando materiales que tenemos en casa
(detergente lavavajillas, sal, tomates, alcohol 96 ...).

NIVEL CURRICULAR:
Para prcticas de 4 de ESO.

MATERIALES:
1.- Tomate
2.- Agua mineral
3.- Sal de mesa
4.- Detergente lavavajillas
5.- Alcohol de 96 muy fro
6.- Varilla de vidrio
7.- Colador
8.- Bolsas de plstico.
9.- Vaso de precipitado
10.-Tubos falcon de 50ml
Marcos Lahuerta y Jordi Blasco

PROCEDIMIENTO:
1.- En el vaso de precipitado pequeo echa 3 cucharaditas de detergente lavavajillas.
2.- Aade una cucharada de sal.
3.- Aade 25 mililitros de agua. Es necesario utilizar la pipeta para extraer la cantidad de agua
adecuada
4.- Mantener en un bao de hielo esta disolucin.
5.- Corta la zona central del tomate en cuadrados.
6.- Tritura los trozos del tomate (en el vaso de
precipitado grande) con un poco de agua en la batidora
(la mezcla de clulas y agua debe ser opaca), accionando
2 veces las cuchillas a impulsos de 10 segundos. As se
rompern muchas clulas.
7.- Mezcla en el recipiente grande el triturado celular con la disolucin inicial del
vaso.
8.- Agita vigorosamente la mezcla durante al menos 5 minutos, sin formar espuma.
9.- Haz pasar el lquido obtenido por un colador.
10.- Retira 5 ml de la mezcla a un tubo de ensayo y aade con la pipeta 5 mililitros de
alcohol enfriado a 0 C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna
del tubo de ensayo, teniendo ste inclinado. El alcohol quedar flotando sobre la mezcla.
11.- Deja reposar durante 5 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las 2
capas. (mientras esperas este tiempo, puedes ir recogiendo y limpiando todos los
recipientes empleados anteriormente).
12.- Introduce una varilla justo debajo del alcohol (la zona turbia que queda entre las
2 capas). Remueve la varilla hacia delante y hacia atrs y poco a poco se irn enrollando
los fragmentos de mayor tamao de ADN.
13.- Pasado un minuto, retira la varilla atravesando la capa de alcohol, con lo cual el
ADN quedar adherido a su extremo, con el aspecto de un copo de algodn mojado.

PRINCIPIO BIOLGICO RELACONADO:

1.- La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas: En primer lugar, tiene que romperse
la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. A continuacin,
debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Los jabones utilizados como
lavavajillas emulsionan los lpidos de las membranas celulares y las rompen.
2.- La sal evita la unin de las protenas (histonas) al ADN y ayuda a la precipitacin del ADN en el
alcohol.
3.- Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es una molcula polar y soluble
en agua, pero cuando se encuentra en alcohol a muy baja temperatura, hace que se vuelva apolar e
insoluble (se desenrolla y precipita) en la interfase entre el alcohol y el agua. El ADN se hace visible
porque las diferentes cadenas se van aglutinando entre s al precipitar debido a la accin de fuerzas
fsicas. Adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares,
los cuales son dejados en la solucin acuosa. El alcohol es menos denso que el agua y por eso flota
sobre la capa del extracto.

RESULTADOS:
El procedimiento no permite una purificacin completa del ADN. El producto filamentoso obtenido
de la extraccin no es ADN puro, ya que, entremezclado con l, hay fragmentos de ARN. Una
extraccin profesional se realiza aadiendo enzimas que fragmentan las molculas de ARN y que
impiden que se unan al ADN.

BIBLIOGRAFIA:
http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/howto/
http://www.scientificamerican.com/article/find-the-dna-in-a-banana-bring-sciencehome/
http://www.biologyjunction.com/extracting_dna.htm
http://www.educ.ar/educar/tecnologia-del-adn-recombinante.html
http://www.geneticaycancer.es/doc.phpop=molecular&ap=tecnicas_molecular&id=8