Departamento de Ingeniera Qumica e Ingeniera Bioqumica

UNIDAD 5
IBQ
Cintica Microbiana
INTEGRANTES:
KARLA BARRN CASAS.

ANELY CASTAEDA ANDRADE.

CLAYRE JAQUELINE RUIZ ZAMBRANO.

RAHEL BETSABETH VILLEGAS GONZALEZ.

5.1. Estequiometria del crecimiento microbiano. Rendimientos.
La estequiometra del crecimiento celular es muy compleja y vara con el sistema microorganismo/nutrimentos y
con las condiciones del entorno como pH, temperatura y potencial redo. Esta complejidad se incrementa
considerablemente cuando ms de un nutrimento contribuye al crecimiento celular, como suele suceder.

Admitiendo la presencia de un solo sustrato, la ecuacin estequimtrica de un crecimiento microbiano puede ser:

Donde YM/S y YP/S son los coeficientes de rendimiento para clulas y producto definidos de la siguiente manera:

Los coeficientes de rendimiento son tiles tambin para relacionar el crecimiento celular y la cantidad de producto
producida en la fase de crecimiento celular. As, se puede describir:

Siendo YP/M el coeficiente de rendimiento definido por la relacin:

Si el producto P se forma en otra fase del crecimiento celular, como en la estacionaria, no se puede aplicar la
ecuacin 6.3.17.

Los coeficientes anteriores permiten, ahora, formular el denominado modelo de Monod generalizado, que
considera las velocidades de formacin de nuevas clulas y de producto, y la desaparicin del sustrato durante la
fase de crecimiento:
La ecuacin 6.3.20 es la denominada ecuacin generalizada de Monod.

En el caso de considerar que los coeficientes de rendimiento no varan en los intervalos de concentraciones
considerados, la integracin de la expresin 6.3.19 a las siguientes relaciones:

Cuya combinacin conduce a:

En general, al relacionar la velocidad de consumo de sustrato con las velocidades de crecimiento celular y
formacin de producto se debe tambin considerar el consumo por mantenimiento celular. Si k M representa la
masa de sustrato por unidad de masa clulas y por segundo, consumida por mantenimiento, se puede escribir la
velocidad general de consumo de sustrato del siguiente modo:

No obstante, hay que considerar situaciones especiales. Por ejemplo, si el producto se forma durante la fase de
crecimiento, es prcticamente imposible separar la cantidad de sustrato consumido por crecimiento y el consumido
para formar producto. En estas circunstancias todo el sustrato, excepto el de mantenimiento, se suele englobar en
el coeficiente de rendimiento YS/M. Entonces:

Y la correspondiente velocidad de formulacin de producto ser:

Rendimiento

se definen como la relacin entre el producto obtenido y el sustrato consumido, usualmente referidos a la fuente de
carbono y energa. El rendimiento celular se define a travs del concepto de nutriente limitante. Un nutriente
limitante es aquel sustrato que cuyo consumo controla la velocidad de produccin de biomasa. Es decir que la
velocidad de crecimiento celular es funcin de tal nutriente. En muchos casos existen ms de un nutriente u otros
factores que intervienen en dicha velocidad, pero para simplificar se considera siempre que slo uno es el esencial
y el ms importante.

A travs de este concepto de sustrato limitante se puede definir el rendimiento del proceso.

El sustrato normalmente es la fuente de carbono. El rendimiento est en funcin de tal fuente de Carbono usada y
las condiciones del proceso. Puede variar durante el proceso.

El consumo de sustrato no est dedicado slo a la produccin de biomasa. ste tiene tres cometidos, para
asimilacin de los microorganismos como material celular, provisin de energa para la sntesis celular y energa
para el mantenimiento del cultivo.

Entonces la siguiente ecuacin representa el consumo total del sustrato:

Sustrato total = Sustrato empleado asimilacin materia celular + Provisin Energa sntesis celular + Energa
mantenimiento cultivo

Con la ayuda de la ecuacin 3 y la 4 se tiene:

El rendimiento terico se define como X/ (S) MC que es el sustrato empleado en la asimilacin de los
microorganismos como material celular. Tambin se llama el rendimiento del crecimiento. Este rendimiento
permanece constante si la composicin celular se mantiene constante. Sin embargo el rendimiento global
depender de la fraccin de sustrato consumido en cada una de las actividades celulares.
El rendimiento definido mediante la ecuacin 1 se refiere al rendimiento celular, existen otros rendimientos
referidos a otros parmetros del proceso o en funcin de otras variables. Estos pueden ser como los que siguen a
continuacin:

Donde rs (mol S/m3s) es la velocidad de desaparicin de sustrato, r x (mol X/m3s) es la velocidad de aparicin de
biomasa, rp (mol P/m3s) es la velocidad de aparicin de producto y rc (mol CO2/m3s) es la velocidad de aparicin
de CO2.

Otra manera de definir el rendimiento es a travs del calor o la energa de reaccin generada por el consumo de
sustrato. La generacin de calor es el resultado del metabolismo energtico y de crecimiento, por ello existe una
relacin entre el calor producido y la energa utilizada del sustrato.

Se introduce un nuevo factor de rendimiento, Y (gramos de biomasa/caloras generada)

5.2. Cintica de crecimiento. Ecuacin de Monod. Inhibicin del
crecimiento. Otros modelos cinticos de crecimiento microbiano.
Durante aos se ha demostrado que las velocidades de crecimiento de microorganismos suspendidos libremente
dependen de la concentracin de constituyentes del medio nutriente; estos incluyen no slo las fuentes de carbono
y de energa bsica, sino tambin factores limitantes como aminocidos, fuentes de nitrgeno, sales inorgnicas y
oxgeno. La descripcin algebraica de esta dependencia se expresa ms comnmente mediante la ecuacin de
Monod, que es una expresin emprica basada en la forma de la ecuacin normalmente asociada con la cintica
de enzimas.

Donde G es la velocidad de crecimiento especfica, G max es la velocidad de crecimiento especfica mxima, K M es

un coeficiente del sistema y C* es la concentracin de sustrato en la solucin acuosa.

Debido a la naturaleza autocataltica del crecimiento microbiano, es lgico suponer que la concentracin de
microorganismos, X, influye en la velocidad con que aumenta la poblacin, r x As:

En esta ecuacin, es la velocidad especfica de crecimiento, la cual para un tipo de microorganismo dado
depende principalmente de la composicin y concentracin del medio de cultivo, presencia de inhibidores,
temperatura y pH.

Existen diversas expresiones para : la ms difundida es la ecuacin de Monod, que relaciona el valor de m con la
concentracin de un componente del medio de cultivo que est en defecto respecto de los requerimientos del
microorganismo: el sustrato limitante.

Donde S es la concentracin de sustrato limitante, u

m es la velocidad de crecimiento especfica mxima, y Ks se conoce como constante de saturacin. El valor de Ks
est inversamente relacionado con la afinidad del microorganismo por el sustrato.

Cuando S Ks, m toma el valor de mm y rx slo depende de X.

En general Ks tiene valore muy bajos, del orden de los mg l -1 , por tanto concentraciones relativamente bajas de S
son suficientes para hacer que m=mm . En promedio las bacterias poseen valores de mm cercanos a 0.9 h-1, las
levaduras0.45 h-1 y los hongos filamentosos 0.25 h -1; de todos modos mm debe ser
determinado experimentalmente para cada caso en particular.

La presencia de inhibidores del crecimiento en el medio de cultivo causa disminucin en el valor de p. La

substancia inhibidora puede ser algn componente del medio de cultivo o algn producto formado por los
microorganismos. El tipo de inhibicin, al igual que en cintica enzimtica, puede ser competitiva o no competitiva.
Para el primer caso:

Mientras que para el segundo

Donde

Siendo I la concentracin de inhibidor. El valor de K I est inversamente relacionado con la afinidad del
microorganismo por el inhibidor. En la inhibicin competitiva, se modifica en valor de K s. Puesto que a > 1 si existe
inhibidor (ecuacin (22)), resulta que la afinidad del microorganismo por el sustrato se ve disminuida.

En la inhibicin no competitiva, es el valor de mm el que resulta afectado.

En ocasiones algn componente del medio de cultivo puede ser inhibidor del crecimiento, sobre todo cuando se
encuentra en concentraciones relativamente elevadas. Esto es factible que ocurra con la fuente de carbono y
energa por ser el componente que se encuentra en mayor proporcin en los medios. Suele emplearse la siguiente
expresin para considerar ste efecto:
El hecho de que una concentracin de sustrato elevada pueda inhibir el crecimiento, impone una restriccin a la
concentracin de los medios de cultivo que se pueden emplear en la prctica, y con esto a la concentracin final de
biomasa que se puede obtener.

En 1967 Dixon y col., desarrollaron un modelo matemtico que describe de una manera sencilla el crecimiento
microbiano de las cepas que degradan la materia orgnica, partiendo de Michaelis-Menten. Fundamentaron su
teora en la formacin de un completo enzima-sustrato (XS), indicando que posiblemente a partir de cierta
concentracin de sustrato se forma un complejo inactivo (XS 2), para generar un producto cuando molculas de
sustratos atacan el punto activo de la enzima; siendo la secuencia y constantes de reaccin las indicadas a
continuacin:

Donde X representa la biomasa, S el sustrarto, Ks es la constante de reaccin que rige la formacin del complejo
sustrato-biomasa (XS), y Ki es la constante de inhibicin que ocurre a causa del sustrato y supusieron que ocurre
en la segunda reaccin debido al ataque de una segunda molcula de sustrato al complejo biomasa-sustrato.

La tercera reaccin propuesta, permite explicar la obtencin de un producto de caractersticas distintas al sustrato,
generado luego del proceso de degradacin y lo que permitir obtener la tasa de utilizacin del sustrato y la
biomasa.

Jones y col., en 1973 desarrollaron a partir de la primera ecuacin de Haldane (8) una expresin matemtica que
facilitar el clculo de las constantes de crecimiento microbiano m Ks y KI que se muestra a continuacin.

Si la concentracin del contaminante es alta, el factor de KS/S es despreciable y por tanto la ecuacin anterior se
simplifica y la relacin genera una lnea recta la cual puede ser utilizada para calcular m y Ki como se muestra a
continuacin:
Si la concentracin del contaminante es baja, entonces el factor S/Ki es despreciable y la ecuacin 5 toma la forma
de la expresin de Monod donde no se considera el efecto inhibitorio y se puede determinar Ks segn la siguiente
ecuacin:

En 1930 Haldane, citado por Hill y col., 1975, desarroll una ecuacin que relaciona la tasa especifica de
crecimiento () con la concentracin de sustrato, con base en una tasa mxima de crecimiento ( m), una constante
de inhibicin (Ki) y una constante de saturacin (Ks); siendo la ecuacin obtenida la siguiente:

La cual seala que la tasa de crecimiento se incrementar con la concentracin del sustrato hasta un valor crtico,
despus del cual el efecto inhibitorio empezar a dominar; lo que hace de este modelo matemtico una
herramienta til al momento de estudiar el comportamiento de la biomasa que degrada la materia orgnica. En la
fig. 2. se pueden observar las etapas de un cultivo por carga, de microorganismos bajo ese tipo de condiciones.
En la etapa (1) el crecimiento es de tipo exponencial; una segunda etapa (2) de la curva responde a la ecuacin
desarrollada por Monod y la etapa (3) corresponde al efecto inhibitorio del aumento en la concentracin del
sustrato S
5.3. Consumo de sustrato. Consumo de sustrato para crecimiento.
Consumo de sustrato para mantenimiento celular. Requerimiento de
oxgeno.

La ecuacin

Establece que el consumo de sustrato slo es posible cuando hay crecimiento, sin embargo cuando el sustrato
considerado es la fuente de carbono y energa, puede darse el caso en que el crecimiento es nulo (r x = 0) y el
consumo de sustrato no. A este consumo de sustrato que no redunda en aumento de biomasa se lo asocia con el
mantenimiento de funciones vitales tales como recambio de material celular, mantenimiento de gradientes de
concentracin y movilidad.

La velocidad de desaparicin del sustrato, -r, es resultado del sustrato que se usa para el crecimiento celular y el
que se usa para el mantenimiento celular

Consumo de sustrato para el mantenimiento celular

En el caso de clulas en la fase estacionaria, donde no hay crecimiento, el mantenimiento celular y la formacin de
producto son las nicas reacciones que consumen sustrato. En estas condiciones el balance de sustrato, se
reduce a

En el caso de clulas en la fase estacionaria, donde no hay crecimiento, el mantenimiento celular y la formacin de
producto son las nicas reacciones que consumen sustrato. En estas condiciones el balance, se reduce a
Por lo regular, rp tiene la misma forma de la ley de velocidad que rg

Si se hace una dilucin la cual es constante, la concentracin de sustrato tambin ser constante y habr una
velocidad especifica de crecimiento =D que determina un estado estacionario que puede mantenerse
indefinidamente.

La concentracin efectiva se sustrato puede expresarse por:

[S]X= [S]-[S]

Donde [S]0 es la concentracin de sustrato en el depsito de medio fresco y la concentracin y [s] la concentracin
en el recipiente de cultivo. Si [S]X=0, el sustrato no es utilizado y no hay crecimiento. Para que haya crecimiento,
[S]x debe ser mayor que 0. Aumentando [S]0, puede conseguirse un valor de [S] que de una prxima a m.

Requerimiento de oxgeno.

En los microorganismos aerobios la obtencin de energa est ligada a la presencia de oxgeno. En efecto, ste es
aceptor final de los electrones provenientes de la cadena de citocromos donde se genera abundante ATP
(adenosina trifosfato). Las molculas de ATP aportarn luego la energa necesaria para las reacciones de sntesis
con las que el organismo se "fabricar" a s mismo, y la requerida para el mantenimiento celular.

Por analoga con la ecuacin:

Se puede expresar la velocidad de consumo de oxgeno (r o2) como:

Donde mo es el coeficiente de mantenimiento en base al O2 e Y'x/o es el rendimiento, en base al O 2 consumido,

que se obtendra cuando mo = 0.

Dividiendo ambos miembros de la ecuacin anterior por x, se obtiene:

Donde qo2 es la velocidad especfica de consumo de O2. En un cultivo en medio lquido los microorganismos
utilizan substancialmente el O2 que est disuelto, y el valor de qo 2 depende de cual sea esta concentracin. Por
analoga con la ecuacin de Monod, y cuando el O 2 es el sustrato limitante, se suele representar esta dependencia
como:
Donde C es la concentracin de O2 disuelto, Ko es la constante de saturacin y qo2m es la velocidad especfica
mxima de consumo de O2, la cual se obtiene cuando C Ko.

En la prctica se utiliza principalmente el concepto de concentracin crtica de oxgeno disuelto, Cc, entendindose
por tal al valor por encima del cual qo2 es independiente de la concentracin de O 2 disuelto y por lo tanto el
crecimiento no est limitado por oxgeno. En estas condiciones el valor qo2 depende de cul sea el valor se p, el
cual ser funcin del sustrato que limita el crecimiento. Si la concentracin de este es saturante, ser m=, y
qo2=qo2m

Los valores de Cc para la mayora de los organismos estn en el orden de 0.1 a 1 mg l -1, valores relativamente
bajos si se compara con el de la solubilidad del 02, que a 30 C y 0.21 atmsferas en medios acuosos diludos es
de 7.8 mg l -1.

Esto podra conducir al error de suponer que no constituye un problema satisfacer los requerimientos de O2 en los
cultivos.

5.4. Efecto de pH y la temperatura sobre el crecimiento.

Los microorganismos pueden crecer en una variada gama de pH que va desde pH = 2 para los acidfilos hasta pH
= 11 para alcalfilos. En general los microorganismos que toleran pH cidos no toleran pH alcalinos y viceversa.
Independientemente del pH que pueda soportar un microorganismo, es importante conocer cul es el pH ptimo
para el crecimiento. En la fig. 11 est representada en forma general la variacin de m con el pH para hongos y
bacterias. De la misma surge claramente que en general los hongos tienen un pH ptimo cercano a 5 mientras que
para bacterias se da alrededor de pH = 7; adems debido a la forma "achatada" de las curvas, variaciones de 0.5
unidades de pH alrededor del ptimo no tienen mayor influencia. Durante el crecimiento los microorganismos
modifican el pH del medio de cultivo, normalmente hacindolo disminuir; por tal motivo es frecuente incluir en el
medio sustancias que acten como tampon (buffer) a fin de evitar que el pH se aleje del ptimo.

El efecto de la temperatura sobre el crecimiento es complejo. Por un lado cada reaccin qumica individual, de
todas las que conforman el metabolismo, es afectada por la temperatura, por lo que un incremento de sta resulta
en una mayor velocidad de reaccin. Esto se traduce en un aumento de pm con la temperatura.
 Figura : Efecto del pH sobre m. Figura : Efecto de la temperatura
Curva a: hongos. Curva b: bacterias sobre m para un microorganismo
mesofilo

Por otra parte, aumentos posteriores de temperatura inactivan las enzimas que catalizan las reacciones, con lo que
el valor de um decrece rpidamente. La temperatura ptima resulta de la interaccin de estos dos efectos.

Como regla general, los microorganismos psicrofilos poseen temperatura ptima entre 10 y 20 C, los mesfilos
entre 30 y 40 C y, finalmente, los termfilos entre 50 y 60 C. La necesidad de mantener la temperatura de cultivo
en el valor ptimo, hace que los biorreactores (fermentadores) cuenten con dispositivos apropiados para tal fin

5.5. Formacin de producto. Productos finales del metabolismo

energtico. Productos intermediarios del metabolismo primario. Productos
del metabolismo secundario.
La diversidad de productos formados por los distintos tipos de microorganismos es sumamente amplia, desde
molculas muy simples como el etanol hasta las ms complejas como pueden serlo una enzima o un antgeno.
Formalmente se puede entonces clasificar los productos como:

1. Productos de bajo peso molecular. Estos incluyen a alcoholes, cidos carboxlicos, aminocidos,
nucletidos, antibiticos, etc.

2. Productos de alto peso molecular. Los que a su vez pueden dividirse en:

1. 2.1. Componentes estructurales:

Polisacridos, protenas, antgenos, etc

2. 2.2. Enzimas:
Pudiendo ser estas intra o extracelulares.
La industria qumica "compite con los microorganismos" tan slo en la obtencin de algunos productos de bajo
peso molecular como por ejemplo el etanol o el butanol, siendo los dems de dominio exclusivo de los
microorganismos y, por otra parte, la nica fuente disponible para el hombre.

Cualquiera sea el producto que se desee obtener, son varios los aspectos que deben considerarse. Estos segn
Pirt, pueden resumirse como:

I. Seleccin de una cepa microbiana apropiada.

II. Determinacin de los valores ptimos de temperatura, pH, presin osmtica. En procesos aerobios,
adems, es de fundamental importancia conocer el requerimiento de oxgeno a fin de poder satisfacerlo.

III. Determinacin y optimizacin de los requerimientos nutricionales y de la concentracin de biomasa.

IV. Modificacin del genoma tendiente a incrementar la formacin del producto deseado.

La formacin de biomasa y de producto son procesos contrapuestos, lo cual, si bien es cierto, podra conducir al
error de suponer que el nico objetivo en la formacin de un producto es maximizar Y p/s. Por otra parte el producto
es una consecuencia de la actividad de los microorganismos; luego la presencia de stos tambin es importante.

Este concepto puede resumirse del siguiente modo: si qp es la velocidad especfica de formacin de producto
podemos poner:

La ec. (2) indica que tanto la concentracin celular como la capacidad biosinttica de la misma (q p) son importantes
en la obtencin de un producto. El concepto que resume ambos aspectos l es de productividad, esto es la
cantidad de producto obtenido dividido el tiempo necesario para obtenerlo, la que puede ser mejorada entonces
aumentando X, qp o ambos. Puede ocurrir que un aumento de X cause disminucin de q p, siendo necesario en tal
caso encontrar una solucin de compromiso; es decir una combinacin que haga mxima la productividad.

La clasificacin dada, no pasa de ser una mera enunciacin de todos los productos que se pueden obtener de los
microorganismos.

Es ms til, al menos para los productos de bajo peso molecular, clasificar los segn qu funcin cumplan dentro
del metabolismo. Se pueden distinguir as tres grupos:

I. Productos finales del metabolismo energtico.

 II. Productos intermedios de metabolismo primario.

III. Productos de metabolismo secundario.

I. Productos finales del metabolismo energtico

Son ejemplos de este grupo el etanol, cido lctico, actico, butrico, butanol, y otros compuestos asociados a
procesos anaerobios. Su formacin es consecuencia directa de la degradacin de la fuente de carbono para
obtener energa.

La energa se emplea tanto para crecimiento como para mantenimiento celular, por lo que en este tipo de
productos la velocidad de formacin tendr dos contribuciones:

El primer trmino del segundo miembro expresa la velocidad de formacin de producto debida al crecimiento, y el
segundo la debida al mantenimiento. La estrategia para la obtencin de estos productos consiste en contar con
una concentracin celular elevada sometida a condiciones tales que el mantenimiento sea grande, lo cual puede
lograrse, como hemos visto, aumentando la tonicidad del medio y tambin modificando la temperatura. Existe otra
alternativa que consiste en limitar el cultivo en nitrgeno de modo tal que las clulas se vean impedidas de
duplicarse al no poder sintetizar ms componentes estructurales, y la fuente de carbono se derive, principalmente
va mantenimiento, hacia la formacin de producto. Por ejemplo la obtencin del etanol por levadura puede
dividirse en dos etapas: en la primera el proceso es aerobio y el medio de cultivo contiene una relacin de fuente
de carbono a fuente de nitrgeno apropiada para obtener un buen crecimiento. La segunda etapa se realiza en
condiciones anaerobias y en un medio con escasa concentracin de fuente de nitrgeno y elevada concentracin
de fuente de carbono, la cual es convertida prcticamente en un 90% en etanol y CO 2. En este caso la tolerancia
de la levadura al etanol es un aspecto importante a considerar.

II. Productos intermedios de metabolismo primario

Pertenecen a este grupo los aminocidos, los
nucletidos, las vitaminas, los cidos orgnicos, y
pueden incluirse tambin biopolmeros como
enzimas.

Los procesos de obtencin son aerobios y la

formacin de estos productos ocurre principalmente
en organismos que han sido sometidos a mutaciones
o que se los hace crecer en medios deficientes. En
cualquier caso lo que se pretende es lograr una
regulacin anormal del metabolismo tal que la fuente
de carbono y energa se derive hacia la formacin del
producto deseado. Por ejemplo, para la obtencin de
lisina se emplean cepas de Corynebacteriuin
glutamicum que carecen de la enzima Homoserina
deshidrogenasa, de este modo resulta ser auxotrofo
para metionina y

treonina (ver fig. 13). Adems la enzima deshidroxipicolinato sintetasa no es inhibida por lisina. Esta conjuntamente
con la treonina ejercen inhibicin concentrada sobe la Aspartatoquinasa de modo tal que an en este mutante no
se acumular lisina si en el medio de cultivo hay treonina libre.

La estrategia para obtener lisina consiste en realizar el cultivo en condiciones tales que la concentracin de
treonina libre sea mnima, lo cual se consigue alimentando el cultivo con este aminocido y tratando de mantener
su concentracin en valores muy pequeos. As se evita la inhibicin concertada, con lo cual la lisina, al no ejercer
retroinhibicin sobre la dihidroxipicolinato sintetasa, se acumula en el medio de cultivo.

El ejemplo visto es demostrativo de la importancia que tiene el conocimiento del metabolismo y su regulacin en el
momento de seleccionar los mutantes apropiados, como as tambin la eleccin de una tcnica de cultivo
adecuada en el momento de la produccin.

En general, y a diferencia de los productos pertenecientes al primer grupo, no existe una relacin directa entre la
generacin de energa y la sntesis de los productos de este grupo. Volviendo al ejemplo de la lisina, por cada mol
formado se forman cuatro de NADH y se consume uno de ATP, por lo que la formacin de lisina est asociada en
una formacin neta de ATP si se tiene en cuenta el poder reductor acumulado.

La cintica de formacin de estos productos es ms compleja que los del grupo 1, y no existe hasta el momento
ninguna expresin simple que abarque a todos, si bien Roels y Kossen han propuesto la siguiente ecuacin para
ser ensayada con este tipo de productos.
La misma posee gran flexibilidad ya que e puede tomar cualquier valor mayor que cero, lo que permite ajustar
distintas relaciones entre q p y m. Por ejemplo si e = 1, la relacin entre qp y p es directa; sie = 100 se tiene que
qp alcanza valores cercanos al mximo an a valores pequeos de m/mm. En general, y cualquiera sea el producto,
se trata siempre de encontrar que tipo de relacin existe entre q p y m, ya que ste es uno de los factores a tener en
cuenta en el momento de planear la estrategia d produccin.

III. Productos de metabolismo secundario

Pertenecen a este grupo los antibiticos, las toxinas, los alcaloides y las giberelinas. Histricamente se ha
considerado a los metabolitos secundarios como aquellos que no son indispensables para las funciones vitales del
microorganismo, a diferencia de los metabolitos primarios, aunque tal afirmacin se encuentre actualmente en
revisin. Cualquiera sea el caso, existen algunas caractersticas que diferencian a este grupo del anterior.

Frecuentemente los precursores especficos para la biosntesis de estos productos son obtenidos por modificacin
de metabolitos primarios. As muchos antibiticos contienen en su molcula aminocidos infrecuentes como D-
aminocidos, N-metil aminocidos, b-aminocidos o iminocidos; o azucares modificados, bajo la forma de dimetil
aminoazcares.

Por otra parte estos precursores suelen ser limitantes de la biosntesis. Por ejemplo la adicin al medio de cultivo
de cido fenil actico estimula la produccin de Bencil penicilina, los cidos a-aminobutrico ya, g-diaminobutrico
son limitantes de la biosntesis de colistina. En estos casos la supresin de los mecanismos de regulacin de la
sntesis de los precursores puede resultar en un incremento en la produccin.

Otra caracterstica interesante es que algunas enzimas del metabolismo secundario no poseen alta especificidad
por el sustrato. Un ejemplo bien conocido es el de la penicilina aciltransferasa del Penicillium chrysogenum, que
cataliza el intercambio del resto a-aminoadipil de la penicilina N (amino adipil penicilina), por restos acdicos
hidrofbicos (ver Fig. 14). La enzima es especfica para uno de los sustratos, el cido 6-amino-penicilnico,
mientras que es relativamente inespecfica para el precursor de la cadena lateral, el cual debe poseer el grupo -
CH2 - COOH terminal para ser incorporado.

Finalmente, y ya en relacin a la produccin, la mayora de los productos de este grupo comparten la propiedad de
formarse cuando los microorganismos crecen a bajos valores de m. Se cree que una de las causas sera el
fenmeno conocido como represin catablica ya comentado, por el cual estara reprimida la biosntesis de las
enzimas asociadas al metabolismo secundario cuando el crecimiento ocurre a valores de m altos, mientras que se
desreprimira a valores dem bajos.

Durante aos, se utiliz lactosa como fuente carbonada para la obtencin de penicilina porque daba mejores
rendimientos que la glucosa. La diferencia radicaba en que la lactosa era metabolizada lentamente por el hongo, y
la glucosa rpidamente.
En la actualidad se emplea esta ltima como fuente carbonada, pero suministrndola lentamente al cultivo a fin de
regular m a valores compatibles con la sntesis de penicilina.

El cultivo continuo y el bath alimentado, son sistemas de cultivo que permiten regular la velocidad de crecimiento, y
por tanto muy apropiados para obtener este tipo de productos.

Los productos de este grupo comparten con el anterior la necesidad de un adecuado suministro de oxgeno para
su formacin. Cuando este requisito no es satisfecho los rendimientos disminuyen.

5.6. Ejemplos de procesos biotecnolgicos donde intervengan enzimas

y/o microorganismos.
o Trichosporon beigelii se ha aislado de diversas fuentes como son suelo, agua, vegetales, madera, agua de
desechos industriales, frutas, animales o sus excretas, insectos, tubo digestivo, piel y heces.
 Cultivo de Trichosporon Cutaneum encontrado en aguas residuales

o Varios estudios realizados han demostrado que los cultivos puros de microorganismos poseen mayores
ventajas que los cultivos mixtos en la degradacin de ciertos contaminantes. Investigaciones como las de
Bayly y col., (1973), Busweil, (1975), Cabrera y col. (1981), Hinteregger y col., (1992), Gonzlez y col.,
(1992), Concha y col., (2005), se han enfocado al empleo de cepas puras de microorganismos para la
degradacin del fenol a diferentes concentraciones. Actualmente entre las cepas puras identificadas que
son capaces de degradar fenol se encuentra el Trichosporon cutaneum.

Clula inmovilizada de Trichosporon Cutaneum.

o Trichosporum cutaneum desempea un importante papel en los sistemas de digestin aerbica de aguas
residuales debido a su enorme capacidad de oxidacin de compuestos orgnicos, includos algunos que
son txicos para otras levaduras y hongos, como los derivados fenlicos.

o Se identific la cepa de Trichosporon cutaneum COMO 2.571 como una levadura oleaginosa que se puede
asimilar a la glucosa y la xilosa de forma simultnea.

o Trichosporon cutaneum, una levadura no fermentadora, se utiliza para convertir suero de queso en
material celular microbiano. El tiempo de duplicacin para este organismo en un propagador continuo a
escala de laboratorio fue de 2 horas en un medio de suero de leche fortificada con sulfato de amonio y licor
de maz fermentado. El crecimiento celular y la eficiencia de la conversin de lactosa a material celular fue
mayor que con Saccharomycesfragilis. Cuando se cultiva en suero de leche, el contenido de nitrgeno de
 T. Cutaneum fue 3,5% y la distribucin de los aminocidos por gramo de protena de la clula fue similar a
la de las levaduras comerciales de alimentos.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Y DIGITALES
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