1.

Association between BMP4 gene polymorphism and in vitro embryo production

traits in Gyr cows

Existen genes asociados a caractersticas de inters econmico. La BMP4 se relaciona

con eventos del animal durante toda su vida. El objetivo es ver la relacin entre el gen y el
desempeo de las donantes de oocitos Gyr mediante genotipado por PCR-RFLP y
evaluacin de caractersticas como tasa de complejos cumulus-oophorus viables,
clivados, transferibles, etc. El polimorfismo estuvo asociado con dichas caractersticas.

2. In vitro production of bovine embryos derived from individual donors in the Corral
dish

3. Generalidades de la produccin de embriones bovinos in vitro

La PIV es una tcnica que favorece la gentica y el estudio embrionario. Se hace

mediante recoleccin de oocitos, maduracin de los mismos, adicin de gonadotropinas y
factores de crecimiento. Por otro lado se capacitan los espermatozoides. Se hace la
fertilizacin en cocultivo especial y los embriones pasan a un cultivo especfico. Aqu se
describen las fases de la PIV y su relacin de fertilizacin y embriolgica

4. CRIOPRESERVACIN DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN VITRO

La criopreservacin se ha desarrollado durante los ltimos aos con el propsito de

conservar embriones de vacas superovuladas. La metodologa de preservacin vara
dependiendo de los oocitos y los embriones. El objetivo es revisar las modificaciones de
los mtodos tradicionales para obtener mejores tasas de supervivencia
poscriopreservacin

5. Differential gene expression and developmental competence in in vitro produced

bovine embryos

La transicin embrionaria-maternal surge en el estado de 8 clulas transcribiendo muchos

genes que explican el mecanismo. Identificamos genes de embriones con alto y bajo
desarrollo para llegar a blastocisto (PCR). Se aplic fluorescencia DDPCR y se
escogieron 2 genes para cuantificacin: PI3KCA e ITM2B. Conclusin: Hay 2 mecanismos
de activacin del genoma embrionario: Los embriones de desarrollo rpido activan genes
de desarrollo y los lentos activan genes de supervivencia o muerte celular
 6. Forskolin effect on the cryosurvival of in vitro-produced bovine embryos in the
presence or absence of fetal calf serum

Objetivo: Ver la viabilidad de embriones con y sin adicin de FCS y F. El cultivo tena
SOFaa, BSA y FCS (con y sin). Al da 6 se agreg F. Se vitrificaron los embriones. La
presencia de FCS produjo embriones con dao similar al de embriones producidos in vivo.
Conclusin: la omisin de FCS y la adicin de F no tienen efectos dainos en los rangos
de produccin de embriones y al contrario aumentan la supervivencia

7. Analysis of apoptosis and methyltransferase mRNA expression in porcine cloned

embryos cultured in vitro

8. MicroRNA-34 family expression in bovine gametes and preimplantation embryos

Los miRNA son reguladores genticos y la familia miR-34 est involucrada en la

espermatognesis y embriognesis. Se analiz esta familia en el RNA de gametos
bovinos, embriones in vitro, ovarios y testculos. Los miembros del miRNA-34 varan entre
tejidos y estados. Conclusin: Los miR-34 regulan el desarrollo de gametos y embriones.
La variacin individual del miR-34 en la esperma puede indicar la fertilidad del macho

9. Antioxidant supplementation of culture medium during embryo development and/or

after vitrification-warming; which is the most important?

Cundo debe suplementarse con antioxidantes el medio de cultivo para mejorar la

competencia de desarrollo, criotolerancia y fragmentacin del DNA?. Los cigotos fueron
cultivados en presencia/ausencia de B-ME. Se compararon blastocistos vitrificados y no
vitrificados con y sin B-ME. Existen mejoras dependiendo del da de suplementacin. El
antioxidante mejor la produccin de blastocistos. Sin embargo, debe haber un excedente
de antioxidante durante el cultivo post-calentamiento

10. Animal oocyte and embryo cryopreservation

Los oocitos y embriones son sensibles al congelamiento y no hay un protocolo perfecto

an. El dao depende de la especie, el estado y el origen. Existen la vitrificacin y el
congelamiento lento. Hay estudios para reducir los lpidos intracelulares e incrementar la
tolerancia a la micromanipulacin y criopreservacin. La adicin de cido linolico y cido
octadecadienoico mejor la viabilidad postdescongelamiento.
 11. EVALUACIN DE LA CAPACIDAD DE DESARROLLO in vitro DE OVOCITOS
BOVINOS PROVENIENTES DE VACAS CON PREDOMINANCIA FENOTPICA
Bos taurus Y Bos indicus

Evaluar el desarrollo de oocitos de vacas taurus e indicus. Oocitos obtenidos de vacas de

matadero. Maduracin y fecundacin. Toro brahman puro. Evaluacin: MIV mayor en
indicus que en Taurus (66.17% vs 50.94%) y FIV sin diferencias (14,28% y 35,72% vs
10,22% y 19,31%) haciendo referencia a oocitos penetrados normal y anormalmente.
Oocitos indicus ms competentes

12. ESTUDIO ULTRAESTRUCTURAL DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS IN

VITRO DURANTE LAS ETAPAS DEL DESARROLLO TEMPRANO Y TARDO

Anlisis de ultraesctructura embrionaria PIV en desarrollo temprano y tardo por MET.

CCO aspirados de vacas de matadero, madurados, fecundados y cultivados IV.
Temprano: 24 h. Tardo: 48 h. Se observaron estructuras como aparato de golgi, ncleo,
microvellosidades, etc. Hubo alteracin mitocondrial ms en periodos tardos. Puede tener
relevancia en el retraso del desarrollo

13. EFECTO DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDERMAL (EGF) SOBRE LA

MADURACIN DE OVOCITOS BOVINOS CULTIVADOS In vitro

Evaluar el EGF en la maduracin de oocitos. Oocitos de vacas de matadero.

Tratamientos: Sin EGF, 1 ng de EGF, 10 nm de EGF, 50 ng DE EGF. Hubo diferencia en
la produccin de oocitos. Mayor produccin en 50 ng de EGF seguido por 10 ng de EGF.
Sin embargo no hubo diferencias en la maduracin. La suplementacin del medio no
demostr efecto sobre el porcentaje de metafase II

14. EFECTO DE DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO SOBRE LA PRODUCCIN IN

VITRO DE EMBRIONES Bos taurus x indicus

Evaluar varios medios de cultivo sobre la PIV, lpidos y apoptosis de blastocistos (Base
mSOFaaci, BSA, FCS). Oocitos de hembras de matadero, maduracin, fecundacin y
cultivo en 4 tipos de medios. No hubo diferencias entre los medios para la tasa de
blastocitos. Los lpidos disminuyeron en el tratamiento 1 y 2. La apoptosis aumenta con el
suero. El medio de cultivo con PVA es capaz de soportar el desarrollo embrionario
 15. Rol de la mitocondria y el estrs oxidativo en el bloqueo del desarrollo de
embriones bovinos producidos in vitro

Unos de los obstculos ms importantes es el bloqueo del clivaje temprano. sto se

explica por disturbio de la cromatina, reordenamiento citoesqueltico, estrs oxidativo y
dao mitocondrial. Este ltimo el ms importante porque produce ROS. H2O2 puede
inducir muerte celular. El objetivo es presentar el estado del arte sobre apoptosis inducida
por ROS y mediada por la mitocondria para explicar la baja eficiencia de la PIV

16. Effect of zona pellucida removal on early development of in vitro produced bovine
embryos

Efecto de ausencia de zona pelcida en desarrollo. Comparacin clivaje, blastocistos y

celularidad entre embriones con/sin zona. 2: evaluar expresin de genes en embriones
con/sin zona. Sin diferencias en clivaje, blastocistos y celularidad. Embriones
partenognicos tuvieron los mismos resultados. Sin diferencias la expresin gentica. La
ausencia de zona no afecta el desarrollo temprano si hay un buen sistema de PIV

17. Efecto del cido linoleico conjugado sobre la proporcin de sexos y calidad de
embriones bovinos producidos in vitro

Efecto de CLA en clivaje, PIV, sexo y calidad. Mayor PIV en control. Estados: Mo, Bt, Bl y
Bx. Sexado: PCR. Calidades: 1-2. Sin diferencias en embriones M:F en ningn estado
(grupo CLA). Control tuvo ms machos. El CLA mejora calidad de Bl y Bt en machos y
hembras ( con ms embriones calidad 1). CLA afecta la PIV pero equilibra el rango de
sexo en todos los estados y mejora la calidad en algunos estados de desarrollo temprano

18. Efecto de la Vitrificacin en Pajilla Abierta Estirada Sobre la Fertilizacin in vitro de

Oocitos Bovinos

La criopreservacin de oocitos est limitada por aspectos biolgicos inherentes a estas

clulas. Efecto de crioprotectores para la vitrificacin en OPS sobre FIV. Concentraciones
20 y 40% para tratamiento 1 y 10% EG+10% DMSO y 20% EG + 20% DMSO para
tratamiento 2. Hubo diferencias entre los tratamientos. La combinacin de EG y DMSO
favorece el incremento de FIV respecto a lo alcanzado mediante el usoindividual de EG
 19. Efecto del estrs calrico sobre la produccin embrionaria en vacas superovuladas
y la tasa de gestacin en receptoras

Determinar si le estrs calrico en PIV y transferencia afecta la tasa de gestacin. Evaluar

si este estrs afecta la PIV y calidad embrionaria. Superovulacin en poca templada (ET)
y clida (EC). Coleccin de embriones, congelacin y transferencia durante la ET y EC. La
superovulacin y fertilizacin fueron similares. ET: ms vulos y embriones y embriones
transferibles/vaca. Gestaciones: Mayores durante ET + embrin de ET. Gestaciones:
Menores durante EC. Estrs calrico afecta la PIV, el embrin y la gestacin

20. Uso de ocitos bovinos como citoplasma receptor na produo de embries por
transferncia nuclear de clula somtica interespcie (NTSCi)

31. Efecto del inhibidor de fosfodiesterasa tipo 4 rolipram, sobre la maduracin in vitro
de oocitos bovinos

Se evalu el efecto del rolipram (un inhibidor de PDE 4) en el porcentaje de MNIV de

oocitos bovinos, al igual que el efecto de gonadotropinas y ambos juntos. La maduracin
se evalu por expulsin del primer cuerpo polar. El rolipram 50 estimul la maduracin
nuclear de oocitos casi igual que las gonadotropinas. El porcentaje de maduracin
depende de la dosis de rolipram

32. Factors that affect the in vitro production of bovine embryos: A review

A pesar de los avances, la produccin de embriones transferibles an es baja. Se

discuten las formas de produccin y maduracin. Existe influencia de factores de
crecimiento folicular, gonadotropinas, esteroides, etc. La fase folicular de crecimiento lento
es crucial. Hay tcnicas para donantes de oocitos. Importante entender la IVP para
permitir alternativas al incremento de resultados de programas de reproduccin

33. Simplificacin de la fertilizacin de ovocitos durante la produccin in vitro de

embriones bovinos

Evaluar la omisin de la centrifugacin de espermatozoides e introduccin de un pozo

ms pequeo. Se obtuvo una tasa de oocitos divididos de 70,8 vs 73,1 y los ovocitos que
llegaron a mrula y blastocisto fue de 18,8 vs 20,3. Los resultados obtenidos sonsimilares
a la propuesta convencional. La nueva propuesta ahorra tiempo, trabajo y recursos.
Adems permite reducir la manipulacin de las clulas espermticas
34. Cryopreservation method and composition of the vitrification solution affect viability of
in vitro bovine embryos

No hay una buena frmula para vitrificacin. Estimar si las diferencias en vitrificacin
afectan la viabilidad embrionaria comparada con aquellos criopreservados de forma
convencional. El mtodo const de la congelacin lenta y vitrificacin (2 soluciones). La
vitrificacin con ambas soluciones fue mayor que el congelamiento respecto a
supervivencia. La solucin 2 de vitrificacin present mejores resultados.

35. MODELO TERICO PARA EXPLICAR LA ACUMULACIN DE GOTAS LIPDICAS

EN EMBRIONES BOVINOS MACHOS O HEMBRAS PRODUCIDOS in vitro

La G6PD codifica un gen del cromosoma X, es la enzima limitante de la va de las PF. La

glucosa regula la transcripcin de varios genes lipognicos. Hay un retardo en la
inactivacin de uno de sus cromosomas X y una doble actividad de los genes ubicados
ah. La sobre-regulacin de la va PF lleva a dimorfismo sexual en la transcripcin de
genes ACACA y FASN que codifican enzimas limitantes en la sntesis de lpidos. Hay
mayor acmulo citoplasmtico de lpidos en embriones hembra que en machos.

36. EFECTO DE LA PREPARACIN ESPERMTICA PREVIO A LA FERTILIZACIN in

vitro SOBRE LA MEMBRANA PLASMTICA Y EL ADN DE SEMEN BOVINO SEXADO

Evaluar la centrifugacin sobre la membrana plasmtica y el ADN de semen sexado por

HOST y ensayo cometa. Se aplicaron espermatozoides sin centrifugar, centrifugados y
control positivo. No hay diferencia entre espermatozoides sin centrifugar y centrifugados.
Igual pasa con el ADN. La preparacin con percoll no afecta la integridad de la membrana
plasmtica ni el ADN bajo ciertas condiciones, se sugiere su uso. Evaluar tasas de clivaje
y blastocistos

37. EVALUACIN DE DOS MEDIOS DE CULTIVO SOBRE LA PRODUCCIN in vitro DE

EMBRIONES BOVINOS

Evaluar dos protocolos para la PIV sobre la tasa de blastocistos producidos. Protocolo I:
Medio CR-1 y. Protocolo II: Medio KSOMaa comercial. Anlisis de varianza para la
estadstica y prueba de Fisher. Diferencias estadsticamente significativas tanto para la
tasa de clivaje como para el porcentaje de blastocistos. Conclusin: Importancia de la
calidad del agua en la preparacin de los medios
 38. Influence of the subespecie of the donator cow in the quantity of total embryos
obtained in vitro a retrospective study

Bsqueda retrospectiva de relacin entre ovocitos y embriones viables producidos por

donadoras. Dependiendo de la raza, se busc determinar si existe influencia de la
donante. Las variables fueron: Toro, raza, lote, etc. Modelo Chi-cuadrado. Prueba de
anlisis de varianza ANOVA y prueba de Fisher. Diferencias estadsticamente
significativas en la produccin de embriones (40% vs 29%), taurus e indicus.

39. Efecto de la Suplementacin del Medio de Maduracin con Cisteamina y de Dos

Medios de Cultivo (KSOMaa y SOF) en la Fecundacin in vitro de Ovocitos Bovinos

Evaluar cisteamina y efecto en clivaje; evaluar medios KSOMaa y SOF en tasa de

desarrollo embrionario. Oocitos distribuidos en medio de maduracin TCM-199 y TCM-
199+Cisteamina. Fecundacin y cultivo en medio KSOMaa con evaluacin de clivaje.
Segunda fase: 2 grupos posterior al primer cultivo; un grupo cultivado en KSOMaa y otro
en SOF. Primera fase: 46% grupo Cisteamina. Fase 2: 18% blastocistos TCM-
199+KSOMaa y 21% TCM-199 Cisteamina+KSOMaa y SOF.

40. Efecto del Mtodo de Coleccin y Tensin de Oxgeno sobre el Desarrollo de Ovocitos
Bovinos Fecundados y Cultivados in vitro

Evaluar el mtodo de coleccin y tensin de oxgeno en la PIV de embriones.

Experimento 1: Aspiracin vs Diseccin en el clivaje y desarrollo. Hubo ms divisn
mediante la aspiracin. No hubo diferencias en los blastocistos. Experimento 2: 5% vs
20% pO2; clivaje mayor con pO2 de 5%. Sin diferencias en la cantidad de blastocistos. La
aspiracin y el cultivo con pO2 5%: Condiciones ptimas en PIV de embriones