Manual Laboratorio de Sanitaria PDF

Manual de prcticas de Laboratorio de Ingeniera Sanitaria
NDICE
1. Introduccin ...................................................... 1
2. Color ...................................................... 6
3. Turbiedad ...................................................... 11
4. Potencial Hidrgeno pH ...................................................... 14
5. Alcalinidad ...................................................... 18
6. Dureza ...................................................... 23
7. Cloruros ...................................................... 27
8. Cloro residual ...................................................... 30
9. Prueba de jarras ...................................................... 36
10. Determinacin de oxigeno disuelto ...................................................... 39
11. Demanda bioqumica de oxigeno ...................................................... 44
12. Coliformes ...................................................... 50
Elabor: Ing. Regina Garca Hololavsky ndice

Actualizacin y revisin: Ing. Benito Aguirre Senz e Ing. Carlos E. Rodrguez Terrazas
1. INTRODUCCIN
Objetivo: Conocer de manera general la clasificacin de los parmetros que definen la

calidad de las aguas en fsicos, qumicos y biolgicos, lo cual le permitir conceptuar de
manera amplia la calidad del agua, haciendo referencia a la normatividad vigente.
1.1. El ciclo hidrolgico y la calidad del agua

El agua es uno de los compuestos ms abundantes en la naturaleza, cubriendo
aproximadamente partes de la superficie del planeta. A pesar de esta aparente
abundancia, algunos factores limitan considerablemente la cantidad de agua disponible para
uso humano. En la tabla 1.1 se muestra la distribucin del agua en el planeta:
Tabla 1.1. Distribucin del agua en el planeta
Localizacin Volumen, 1012 m3 % del total

reas terrestres:
Lagos de agua dulce 125 0.009
Lagos salados y mares
interiores 104 0.008
Ros 1.25 0.0001
Humedad del suelo 67 0.005
Agua subterrnea 8,350 0.61
Polos y glaciares 29,200 2.14
Total reas terrestres 37,800 2.8
Atmsfera 13 0.001
Ocanos 1320,000 97.3
Total 1360,000 100
Como puede observarse, ms del 97 por ciento del total del agua se encuentra en los
ocanos y otros cuerpos de agua salados, lo cual la hace inapropiada para la mayora de los
usos. Del remanente 3 por ciento, un poco ms del 2 % se encuentra congelada en los polos
y glaciares. La cantidad que realmente est disponible para ser utilizada por el hombre en
sus diferentes actividades (tcnicas, agrcolas y abastecimiento pblico), corresponde a un
62 %, el cual se encuentra en los lagos de agua dulce, ros y cuerpos de agua subterrnea.
El agua se encuentra en un estado de movimiento constante a travs del ciclo hidrolgico,

el cual se esquematiza en la figura 1.1. El agua atmosfrica se condensa y cae sobre la
tierra en forma de lluvia, nieve o alguna otra forma de precipitacin. Una vez en la
superficie de la tierra, el agua fluye formando corrientes superficiales, alcanzando cuerpos
de agua mayores como los lagos y eventualmente los ocanos, o se infiltra a travs del
suelo y alcanza los cuerpos de agua subterrnea, los cuales pueden estar interconectados a
algn ro. A travs de la evaporacin de las aguas superficiales, o por evapotranspiracin
de las plantas, las molculas de agua regresan a la atmsfera para repetir el ciclo.
El agua en la naturaleza se encuentra casi en estado puro cuando est en la forma de

vapor. Debido a que el proceso de condensacin requiere el contacto con una superficie, o
la presencia de ncleos, el agua adquiere impurezas en el momento mismo de la
condensacin.
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Elabor: Ing. Regina Garca Hololavsky
Figura 1.1. Esquema del ciclo hidrolgico
Adicionalmente, el agua adquiere impurezas cuando circula a travs de las otras etapas del
ciclo hidrolgico y cuando entra en contacto con materiales que se encuentran en el aire y
sobre y bajo la superficie de la tierra. Las actividades humanas contribuyen con impurezas
en forma de desechos domsticos e industriales, agroqumicos y otros contaminantes
menos obvios. A la larga, estas aguas impuras completarn el ciclo hidrolgico y regresarn
a la atmsfera como molculas de agua relativamente puras. Sin embargo el la calidad del
agua en las etapas intermedias la que tiene mayor importancia, ya que puede afectar al
humano.
Las impurezas acumuladas por el agua a travs del ciclo hidrolgico y como resultado de
las actividades humanas, pueden estar en forma disuelta o suspendida. Los materiales
disueltos consisten de molculas o iones que son sostenidas en la estructura molecular del
agua.
Contaminacin del agua puede ser definida como la presencia en el agua de impurezas en
tal cantidad y de tal naturaleza que impidan el uso del agua para un propsito establecido.
1.2. Parmetros para la calidad del agua

Los parmetros que definen la calidad del agua son muchos y muy variados y pueden ser
clasificados de muy diversas maneras, atendiendo ya sea a su origen, a su impacto en el
medio, su persistencia, su forma de remocin, o a sus caractersticas microbiolgicas,
fsicas, organolpticas, qumicas, etc.
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Aunque la cantidad de parmetros que pueden determinarse en el agua para establecer su

calidad se pueden contar por decenas, para los fines del curso de Laboratorio de Ingeniera
Sanitaria, slo se considerarn aquellos que se puedan determinar con cierta facilidad, por
razones de tiempo e infraestructura. As pues, los habremos de clasificar en parmetros
fsicos, qumicos y biolgicos.
1.2.1. Parmetros fsicos

Los parmetros que definen las caractersticas fsicas y organolpticas del agua son los que
se detectan sensorialmente. Entre ellos y para efectos de evaluacin, el sabor y olor se
ponderan por medio de los sentidos, mientras que el color y la turbiedad se determinan por
medio de mtodos analticos de laboratorio. Tambin deben considerarse otros parmetros
tales como los slidos disueltos, slidos suspendidos, fijos y voltiles para ambos, slidos
sedimentables y la temperatura.
1.2.2. Parmetros qumicos

Los parmetros asociados a las caractersticas qumicas, las debidas a elementos o
compuestos qumicos, que como resultado de investigacin cientfica se ha comprobado que
pueden causar efectos nocivos a la salud humana, incluyen, adems de otros, la alcalinidad
(iones carbonato, bicarbonato e hidrxido), la dureza (iones de calcio y magnesio), los iones
cloruro. Adems de los anteriores, se deben considerar aquellos parmetros cuya
determinacin se basa en la conjugacin de propiedades fsicas y qumicas, tales como el
potencial hidrgeno y la conductividad elctrica.
Se incluye en el curso una prueba de jarras que consiste en la aplicacin de sustancias
qumicas que favorezcan, ya sea la remocin de sustancias que imparten color y turbiedad,
o bien la remocin de sustancias que imparten dureza al agua, llamndose ste proceso de
ablandamiento, ambos basados en los principios de la coagulacin y precipitacin.
1.2.3 Parmetros biolgicos

Se entiende por caractersticas biolgicas a aquellas debidas a la presencia de
microorganismos, as como de sustancias que, por sus propiedades y caractersticas
bioqumicas, provocan, ya sea deterioro de las condiciones aerbicas de los cuerpos de
agua, o resultan nocivos a la salud humana. Para efectos de control sanitario se determina
el contenido de indicadores generales de contaminacin microbiolgica, especficamente
organismos coliformes totales y Escherichia coli o coliformes fecales. Tambin se estudia
el efecto de diversas sustancias, como el cloro y su efecto desinfectante. La presencia de
materia orgnica en las aguas residuales, se estudia a travs de las pruebas de Oxgeno
Disuelto y Demanda Bioqumica de Oxgeno
1.3. Legislacin mexicana relativa al agua

En nuestro pas existen diversas leyes, reglamentos y normas que permiten a los
ciudadanos tener un marco de referencia para actuar en relacin a las aguas. Todos estos
instrumentos jurdicos y legales tienen como fundamento lo establecido en la Constitucin
Poltica de los Estados Unidos Mexicanos, que establece en su artculo 27, prrafo quinto
que las aguas son propiedad de la nacin.
1.3.1. Ley de Aguas Nacionales

La Ley de Aguas Nacionales se public en el Diario Oficial de la Federacin el 1 de
diciembre de 1992. Esta Ley tiene por objeto regular la explotacin, uso o aprovechamiento
de dichas aguas, su distribucin y control, as como la preservacin de su cantidad y
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calidad para lograr su desarrollo integral sustentable; se considera de observancia general,

es decir que todos los ciudadanos estn sujetos a ella y se aplica en todo el mbito del
territorio nacional; es de inters social, lo cual implica que se promulga para que todos los
ciudadanos y la nacin se ven beneficiados por ella.
1.3.2. Ley General del Equilibrio Ecolgico y La Proteccin a Ambiente

Esta ley entr en vigor el 28 de enero de 1988 y su ltima modificacin se realiz el 7 de
enero de 2000, es reglamentaria de las disposiciones de la Constitucin Poltica de los
Estados Unidos Mexicanos que se refieren a la preservacin y restauracin del equilibrio
ecolgico, as como a la proteccin al ambiente, en el territorio nacional y las zonas sobre
las que la nacin ejerce su soberana y jurisdiccin. Sus disposiciones son de orden pblico
e inters social y tienen por objeto propiciar el desarrollo sustentable y establecer las
bases para:
I. Garantizar el derecho de toda persona a vivir en un medio ambiente adecuado para

su desarrollo, salud y bienestar;
II. Definir los principios de la poltica ambiental y los instrumentos para su aplicacin;
III. La preservacin, la restauracin y el mejoramiento del ambiente;
IV. La preservacin y proteccin de la biodiversidad, as como el establecimiento y
administracin de las reas naturales protegidas.
V. El aprovechamiento sustentable, la preservacin y, en su caso, la restauracin del
suelo, el agua y los dems recursos naturales, de manera que sean compatibles la
obtencin de beneficios econmicos y las actividades de la sociedad con la
preservacin de los ecosistemas;
VI. La prevencin y el control de la contaminacin del aire, agua y suelo;
VII. Garantizar la participacin corresponsable de las personas, en forma individual o
colectiva, en la preservacin y restauracin del equilibrio ecolgico y la proteccin
al ambiente.
VIII. El ejercicio de las atribuciones que en materia ambiental corresponde a la
Federacin, los Estados, el Distrito Federal y los Municipios, bajo el principio de
concurrencia previsto en el artculo 73 fraccin XXIX - G de la Constitucin;
IX. El establecimiento de los mecanismos de coordinacin, induccin y concertacin
entre autoridades, entre stas y los sectores social y privado, as como con
personas y grupos sociales, en materia ambiental, y
X. El establecimiento de medidas de control y de seguridad para garantizar el
cumplimiento y la aplicacin de esta ley y de las disposiciones que de ella se
deriven, as como para la imposicin de las sanciones administrativas y penales que
correspondan.
Como resultado de la publicacin de sta ley, cada estado de la federacin elabor y

promulg su propia ley estatal. Para el caso del Estado de Chihuahua, se promulg la Ley
Ecolgica Para el Estado de Chihuahua, que hace referencia a la preservacin y control de
la contaminacin del agua y los ecosistemas acuticos.
1.3.3. Reglamentos
Para aplicar los ordenamientos establecidos en las leyes, se crean los reglamentos
especficos, as podemos hablar del Reglamento de la Ley General de Salud en Materia de
Control Sanitario de Actividades, Establecimientos Productos y Servicios (18 enero de
1988, DOF) que en su Ttulo Tercero (Agua y hielo para uso y consumo humano y para
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refrigerar), Captulo I (Agua), Artculos 209 y subsecuentes, establece las caractersticas

que debe tener el agua si sta se considera potable.
A nivel municipal en Chihuahua existe el reglamento para La Proteccin del Ambiente en el

Municipio de Chihuahua.
1.3.4. Normas Oficiales Mexicanas

Las normas, establecen con todo detalle la forma en que se ha de cumplir con lo
establecido en leyes y reglamentos superiores. Se puede hablar de dos tipos de normas, la
Normas Oficiales Mexicanas (NOM) que son de observancia obligatoria, y las Normas
Mexicanas (NMX), las cuales no son de observancia obligatoria, pero se sugiere la
conveniencia hacerlo.
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2. COLOR
Objetivo: El alumno conceptualizar la importancia que el color tiene en la definicin de la

calidad del agua y el impacto que tiene segn el uso al que se destine y conocer el mtodo
para la determinacin del color en el agua, basndose en las normas vigentes en la
legislacin mexicana.
2.1. Origen del color en el agua

El color es una caracterstica fsica del agua producida por sustancias orgnicas e
inorgnicas que se encuentran en solucin o en forma de partculas coloidales.
En las aguas naturales el color generalmente es el resultado de sales metlicas como hierro
y manganeso o de sustancias orgnicas. Resulta del contacto del agua con extractos
vegetales provenientes de hojas, semillas, madera, humos, plankton, etc., sustancias que en
la mayora de los casos son inocuas.
2.2. Impacto del color

Las sustancias naturales le imparten al agua una coloracin amarillo pardo, produciendo
que exista por parte del consumidor una aversin natural debido a las comparaciones
antiestticas que se le asocian.
En algunos procesos industriales el color del agua puede ser perjudicial como son los de la
produccin de papel y telas. Es tambin de consideracin importante en la industria en la
que se utiliza el agua para la elaboracin de bebidas o alimentos. En el uso domstico
tambin puede producir inconvenientes como son manchas de ropa, de muebles sanitarios,
etc.
2.3. Uso y aplicacin

En ocasiones las aguas pueden parecer coloreadas por materia suspendida, como es el
caso de las aguas superficiales. Al color producido por materia suspendida se le denomina
color aparente, es decir, es el color que se le determina a la muestra sin eliminarle las
partculas suspendidas.
El trmino color significa color real y es aquel que tienen las aguas despus de que les han
sido eliminadas las partculas en suspensin por centrifugacin. No es recomendable el
filtrado por existir la posibilidad de quedarse adherido algo de color al medio filtrante.
2.4. Remocin del color

Los procesos de tratamiento preferibles desde el punto de vista econmico para la
remocin del color, son los procesos fsico qumicos de coagulacin sedimentacin y
filtracin, utilizados tambin para la remocin de turbiedad, sin embargo, para el color
resultan ms efectivos estos procesos a pHs ms bajos en el rango de 4 a 6.
2.5. Medicin del color

El color natural se debe a una gran variedad de sustancias por lo que ha sido necesario
adoptar un estndar arbitrario para su medicin. El color natural en las aguas es
generalmente amarillocafesoso por lo que se busc alguna sustancia estable que produjera
colores semejantes. Finalmente se encontr que las soluciones de cloroplatinato de potasio
(K2PtCl6) con pequeas cantidades de cloruro cobaltoso producen colores muy semejantes
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a los naturales, y se adopt como unidad estndar de color al producido por un miligramo
de platino por litro de agua destilada (como K2PtCl6).
La medicin del color a las muestras se les hace por comparacin directa con estndares
preparados en diferentes diluciones contenidos en tubos de comparacin de color llamados
comnmente tubos de Nessler, como los mostrados en la figura 2.1.
Los estndares preparados generalmente varan de 0 a 70 unidades de color y sirven por

varios meses si se encuentran bien protegidos del polvo y la evaporacin. Aquellas
muestras que exceden de 70 unidades, son diluidas de tal manera que el color quede dentro
de los estndares, usando un factor de correccin de acuerdo a la dilucin empleada.
Figura 2.1. Tubos de Nessler para comparacin de color
Para eliminar la necesidad de estar renovando los estndares de color se han desarrollado
una serie de instrumentos, los cuales, emplean discos con vidrios coloreados que simulan
los estndares de color. Estos aparatos controlan ciertos errores que pueden incluirse en el
mtodo de los tubos de Nessler debido a variaciones de la luz en los diferente estndares,
sin embargo, puede haber variaciones en los colores de los discos, o cambios de sus
caractersticas debido a huellas, polvo, etc. (ver figura 2.2)
Cuando el color del agua proviene de desechos industriales, la evaluacin del color con la
escala platino cobalto generalmente no resulta aplicable, ya que, los matices no
corresponden a la escala amarillo cafesoso. En este caso la medicin se efecta por
medio de un espectrofotmetro variando la longitud de onda hasta encontrar la longitud de
onda dominante. Ver figura 2.3
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Figura 2.2. Colormetro Aquatester de Hellige.
Figura 2.3. Espectrofotmetro Sequoia-Turner Modelo 340
2.5.1. Principio del mtodo

La determinacin del color en una muestra de agua se realizar con el mtodo de la escala
platino cobalto, utilizando un comparador colorimtrico marca Hellige. La medida del
color se basa en la comparacin visual de la muestra con soluciones coloreadas o en la
comparacin con discos de vidrios de color especiales, que han sido calibrados de acuerdo
a las soluciones coloreadas o estndares. El mtodo estndar es el mtodo de la escala
platino cobalto, en el cual una unidad de color es definida como la producida por un
miligramo de platino (en la forma de in cloroplatinato) por litro de agua destilada, con
concentraciones variadas de cloruro cobaltoso para dar diversas tonalidades.
An la ms ligera turbiedad interfiere, causando que el agua aparente sea notablemente

mayor que el color real. El valor del color del agua es sumamente dependiente del pH e
invariablemente aumenta conforme aumenta el pH, por esta razn, cuando reporten valores
de color es conveniente especificar a cual pH fue determinado.
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2.5.2. Muestreo
Las muestras deben colectarse en recipientes limpios y la determinacin deber hacerse
dentro de un periodo de tiempo razonable porque durante el almacenamiento pueden
ocurrir cambios fsicos y biolgicos que afectan el color.
Equipo y material requerido
Un comparador colorimtrico marca Hellige.

Una centrfuga.
Vasos de precipitado.
Pipetas.
Tubos de ensayo.
Tubos de Nessler
Tapn para tubos de Nessler (buzos esmerilados)
Procedimiento
1. Llenar un tubo de Nessler del aparato con agua destilada hasta la marca. Tapar con el
buzo esmerilado y colocarlo sobre el soporte izquierdo del comparador.
2. Tomar un segundo tubo de Nessler y llenarlo con agua de la muestra hasta la marca.
Tapar con el buzo y colocarlo sobre el soporte derecho del comparador.
3. Una vez colocados los tubos dentro del comparador, cerrar la portezuela y colocar en la
parte superior del aparato el disco adecuado de colores patrn. Finalmente colocar el
ocular.
4. Encender el aparato y comparar el color del agua de la muestra con los patrones del
disco. Tomar la lectura cuando los colores del agua de la muestra y del disco patrn
coincidan. Interpretar si el color de la muestra est entre dos colores patrn.
5. Si el color de la muestra excede al color del patrn de mximo valor en el disco, diluya
la muestra con agua destilada en proporciones conocidas, hasta que el color quede
dentro del rango de estndares. Si la muestra ha sido diluida, calcule las unidades del
color de acuerdo a la siguiente frmula:
AxB
U .C =
C
donde:
A = lectura de unidades de color en el comparador.
B = volumen total en la dilucin en mililitros.
C = mililitros de muestra tomados para la dilucin.
2.6. Problemas
1. Investigue cual el lmite mximo de color para agua potable establecido en las normas
vigentes.
2. A qu conclusiones llegara en los siguientes casos:

Su muestra presenta un color aparente superior al color real.
La muestra presenta un color real igual al color aparente.
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3. Qu cantidad de K2PtCl6 es necesario pesar para producir un litro de una solucin de

500 U.C. Cuntos mililitros de la solucin anterior tomara para preparar estndares
de color de 50ml que contengan: 0, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 U.C.?
2.7. Resultados y conclusiones

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3. TURBIEDAD
Objetivo: El alumno conceptualizar la importancia de la turbiedad en la definicin de la

calidad del agua, el impacto que tiene segn el uso a que se le destine y conocer los
mtodos para su medicin, basndose en las normas vigentes en la legislacin mexicana.
3.1. Origen de la turbiedad

La turbiedad es una caracterstica fsica del agua producida por material suspendido
orgnico e inorgnico tal como arcilla, limo plancton, microorganismos o materia orgnica e
inorgnica finamente dividida.
La turbiedad puede definirse como la expresin de la propiedad ptica que causa que la luz
sea dispersada o absorbida en lugar de ser transmitida en lnea recta a travs del agua.
3.2. Impacto de la turbiedad

A pesar de que la turbiedad no resulta nociva para la salud, salvo que el material que la
produzca sean microorganismos patgenos vivos, es de una consideracin muy importante
en abastecimientos pblicos de agua por varias razones.
Una de estas razones es el aspecto esttico, ya que el consumidor demanda agua libre de
turbiedad porque el agua turbia es automticamente asociada con una posible
contaminacin por aguas negras y con los peligros ocasionados por esto. En la industria la
medida de la turbiedad es importante cuando el producto es destinado para consumo
humano y el agua forma parte de dicho producto, como es el caso de las industrias que
producen alimentos y bebidas y en las plantas de tratamiento para abastecimiento
municipal. En plantas de tratamiento de agua el proceso de filtracin resulta ms difcil y
costoso conforme la turbiedad aumenta. En el proceso de desinfeccin la turbiedad
excesiva reduce la efectividad del desinfectante sobre todo en los casos en que la
turbiedad es causada por partculas de aguas residuales domsticas, ya que, gran parte de
los microorganismos patgenos, pueden quedar encerrados dentro de las partculas y ser
protegidos contra el desinfectante.
La turbiedad causada en los cuerpos de agua receptores (ros, lagos, mar, etc.) por
descargas de aguas residuales domsticas o industriales tambin es de consideracin
importante, ya que, ofrece peligro al sistema ecolgico. La turbiedad excesiva reduce la
penetracin de la luz, afectndose de esta manera la fotosntesis de los organismos
fitoplantnicos as como la vegetacin que se desarrolla en el lecho y que a su vez sirve de
alimento a la fauna acutica.
3.3. Uso y aplicacin

La turbiedad en exceso de 5 unidades es perceptible para el consumidor y por lo tanto
representa una condicin que no cumple con los requisitos de potabilidad.
3.4. Remocin de la turbiedad

Los procesos de tratamiento necesarios para eliminar la turbiedad del agua son los de
coagulacin, sedimentacin y filtracin. Cuando los procesos mencionados trabajan en
forma eficiente, deben producir agua con una turbiedad inferior a una unidad de turbiedad.
3.5. Medicin de la turbiedad

Debido a la gran variedad de materiales que causan la turbiedad, fue necesario usar un
estndar arbitrario. La unidad patrn fue definida como la obstruccin ptica a la luz
causada por una parte por milln de slice insoluble en agua destilada.
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1 mg SiO2/1 = 1 unidad de turbiedad

El estndar de slice fue usado originalmente para calibrar el turbidmetro de buja Jackson,
y el mtodo estndar para determinar la turbiedad esta basado en dicho turbidmetro,
porque es el que nos permite una medicin de la turbiedad en funcin del paso de la luz,
mientras que otros mtodos son comparaciones de la luz dispersada por la muestra, con la
luz dispersada por estndares como la slice, caoln, polmeros de formazina, etc., cuyas
caractersticas de tamao, forma e ndice de refraccin pueden ser muy diferentes al de la
muestra.
A pesar de que el mtodo visual de turbidmetro de Jackson es el mtodo estndar, no nos
permite lecturas directas menores que 25 UJT, ya que, la mayora de las aguas tratadas
varan de 0 a 5 UJT, los mtodos instrumentales por comparacin han sido de gran
aceptacin para medir bajas turbiedades.
La mayora de los turbidmetros comerciales para medir bajas turbiedades dan
comparativamente buena indicacin de la intensidad de la luz dispersada en una direccin
particular, predominantemente en ngulos rectos a la luz incidente. Estos instrumentos son
todos precalibrados con el turbidmetro de buja Jackson. El estndar de comparacin para
estos instrumentos que ha tenido gran aceptacin es el polmero de Formazin por ser ms
reproducible en sus propiedades de dispersin de la luz.
Para el caso de la presente prctica, la turbiedad de una muestra de agua se medir
utilizando el Turbidmetro de Hellige.
3.5.1. Principio del Mtodo

El mtodo Hellige est basado en la comparacin de la intensidad de la luz dispersada a 90o
por la muestra, bajo condiciones definidas, contra la intensidad de la luz dispersada por una
suspensin estndar de referencia (SiO2) bajo las mismas condiciones. A mayor luz
dispersada mayor ser la turbiedad.
Las partculas sedimentables presentan interferencia al depositarse en el fondo de los
vasos de los tubidmetros, por lo que es recomendable, cuando existan stas, se realice la
determinacin con rapidez. La cristalera sucia, la presencia de burbujas y el efecto de
vibraciones que perturben la superficie del lquido, pueden llevar a falsos resultados. La
presencia de color verdadero que absorbe luz puede causar en el mtodo de Hellige
medidas de turbiedad menores.
3.5.2. Muestreo
La turbiedad debe ser medida el mismo da en que la muestra haya sido tomada. Si es
inevitable y requiere ms tiempo, guarde las muestras en la obscuridad hasta por 24 horas.
No se recomiendan periodos ms prolongados de almacenamiento, porque pueden suceder
cambios irreversibles en la turbiedad. Todas las muestras deben ser agitadas
vigorosamente antes de la determinacin.
Equipo y material requerido

Un turbidmetro Hellige
Vasos para turbidmetro de 10, 20 y 50 milmetros
Tapones para vasos de turbidmetro
Un vaso de precipitado
Un agitador
Una pipeta
Procedimiento:
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1. Vace en el vaso la muestra de agua hasta la marca (las medidas de los vasos son 10,
20 y 50 mm. Para turbiedades altas, intermedias y bajas sucesivamente).Tape el vaso.
2. Introduzca el vaso dentro del aparato y coloque el tapn.
3. Asegure la escala del disco en cero.
4. Encienda el foco.
5. Observe por el ocular y gire el disco hasta que la mancha del centro desaparezca sin
que sea ms clara ni ms obscura que el resto.
6. Lea en la escala del disco y anotar la lectura.
7. Repita esta determinacin cuando menos tres veces.
8. Promedie las tres lecturas y vaya a la grfica correspondiente para obtener el valor de
la turbiedad.
9. Reporte las unidades ledas aproximando de acuerdo a la siguiente tabla:
Tabla 3.1. Tabla de ajuste para los resultados obtenidos en el turbidmetro Hellige
TURBIEDAD EN p.p.m. SiO2 APROXIME AL MLTIPLO MAS CERCANO
0 1.0 0.05
1.0 10 0.1
10 40 1.0
40 -100 5.0
100 - 400 10.0
Ms de 1000 100.0
3.6. Problemas
1. Explique por qu en general la turbiedad no puede ser correlacionada con el peso
de la materia suspendida en una muestra de agua.

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4. POTENCIAL HIDRGENO (pH)
Objetivo: El alumno comprender el concepto de pH y su aplicacin en el contexto de la

definicin de la calidad de las aguas, segn sea su tipo y uso al que se destinen. Conocer
los lmites establecidos y el mtodo analtico de medicin que contempla la normatividad
vigente en la legislacin mexicana.
4.1. Constante de Ionizacin del Agua

El pH es un trmino universal que expresa la intensidad de las condiciones cidas o
alcalinas de una solucin. El concepto del pH proviene de una serie de descubrimientos,
que llevaron al entendimiento completo de los cidos y las bases. Los cidos y las bases se
distinguieron originalmente por su diferencia en sabor y posteriormente por el modo en que
afectaban ciertos materiales que se denominaron como indicadores. Con la teora de
ionizacin de Arrhenius (1887) y posteriormente con el descubrimiento de que el electrodo
de hidrgeno es un aparato que nos permite la medicin de la concentracin del ion
hidrgeno, se pueden determinar las concentraciones de hidrgeno que le dan los
diferentes grados de acidez al agua.
El agua qumicamente pura se disocia en la siguiente forma:
H2O H+ + OH-
Sin embargo, el agua es muy dbilmente ionizable, esto es que una pequesima cantidad de
molculas de agua se van a separar en iones. De acuerdo a la ley del equilibrio:
[H+ ] [OH- ] = K Cte. de equilibrio

[H2 O]
Debido a que la concentracin del agua es extremadamente grande, y su concentracin

disminuye tan poco al disociarse por el pequeisimo grado de ionizacin, se puede
considerar que H2O permanece constante, por lo tanto:
H+ OH-= Kw cte. de ionizacin
El valor de Kw a 25o C es de 1 x 10-14 mol / 1.
donde:
[H +] = 10-7 mol /l.
[OH-] = 10-7 mol /l.
4.2. Rango de pH. Acidez y Basicidad

Dado que el efecto del ion H + y el ion OH- se neutraliza cuando las concentraciones son
iguales. Las concentraciones anteriores corresponden a la neutralidad. Concentraciones de
mayores de 10-7 mol /1, indican acidez y menores basicidad o alcalinidad.
La expresin de la concentracin del in hidrgeno o en otras palabras del grado de acidez,

expresado en moles por litro resulta difcil ya que sus valores son decimales pequeos.
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Para eliminar esta dificultad, Sorenson (1909) propone expresar tales valores en trminos
de sus logaritmos negativos y llamarle a este nuevo valor pH.
pH = log 1/ H+ o PH = -log H+
La escala de pH se representa de 0 a 14 en la que pH = 7 representa la neutralidad

absoluta.
|-------------------|------------------|
0 7 14
Rango cido Rango bsico o alcalino
Las condiciones cidas se incrementan conforme los valores de pH decrecen, y las

condiciones alcalinas se incrementan conforme el pH se incrementa.
4.3. Control del pH

En la prctica de la Ingeniera Ambiental, el pH tiene mucha importancia porque influye en
la mayora de los procesos de tratamiento de aguas. El sistema ecolgico puede ser
afectado porque la alteracin del pH en un cuerpo de agua puede causar la muerte de los
peces. Los procesos de tratamiento en los que el pH debe ser considerado son los
procesos de coagulacin qumica, desinfeccin, ablandamiento de agua y control de la
corrosin. En sistemas de tratamiento de aguas negras que utilicen procesos biolgicos, el
pH debe de controlarse dentro de un rango favorable a los microorganismos encargados de
la purificacin. Los tratamientos qumicos usados para coagular aguas residuales, el secado
de lodos o la oxidacin de ciertas sustancias como cianuros, requieren de un control exacto
del pH.
El pH de las aguas naturales varan entre 4 y 9, sin embargo, la mayora de las aguas son
ligeramente bsicas debido a la presencia de carbonatos. La normatividad vigente
recomienda que el pH del agua potable est comprendido entre 6 y 8 de manera general.
4.4. Medicin del pH

El pH puede ser medido colorimtrica o electromtricamente. Los mtodos colorimtricos
son mas baratos, pero sufren de interferencias debido al color, turbiedad, salinidad, materia
coloidal y sustancias oxidantes o reductoras. Los indicadores son objeto de deterioracin,
as como los estndares con los cuales se comparan. Presenta tambin el mtodo, el
inconveniente de que un solo indicador no cubre el rango de pH de inters en tratamiento
de aguas, sino que se requieren varios de ellos. Por estas razones el mtodo colorimtrico
es usado nicamente para estimaciones gruesas. El mtodo del electrodo de vidrio es la
tcnica estndar. En las figuras 4.1 a, b y c, se pueden apreciar diversos tipos de
potencimetros.
15
(a) (b)
(c)
Figura 4.1. (a) Potencimetro Digital marca Corning, modelo 350; (b) Potencimetro digital marca
Corning, modelo 125; (c) Potencimetro digital para mediciones en campo, marca Corning. Mide
tambin Oxgeno disuelto, Conductividad elctrica y slidos disueltos.

El electrodo de hidrgeno es reconocido como el estndar primario, sin embargo, el
electrodo de vidrio est sujeto a menos interferencia y es usado en combinacin con un
electrodo de referencia o comparacin (electrodo de Calomel). El par de electrodos vidrio
comparacin, producen un cambio de 59.1 mv por unidad de PH: a 25o C.
El electrodo de vidrio es relativamente libre de interferencias, excepto de un error por

sodio a pHs elevados (arriba de 10). Este error de pH alto puede ser reducido usando
electrodos especiales. Tambin la temperatura ofrece interferencias, bsicamente por dos
razones:
1. El cambio en el potencial por unidad de pH vara con la temperatura.

2. La ionizacin de la muestra tambin vara.
El primer efecto puede ser compensado en algunos instrumentos comerciales, el segundo

no puede ser compensado y se debe tomar en consideracin, midiendo la temperatura de la
muestra.
16
4.4.2. Muestreo
Se debe evitar que la muestra tenga contacto con el aire, posteriormente que fue tomada.
Es recomendable llenar el frasco completamente para evitar que quede aire atrapado
dentro de l.
Equipo, material y sustancias requeridas

Un potencimetro electromtrico marca Corning modelo 350 o 125
Vasos de precipitado
Un termmetro
Soluciones amortiguadoras para varios pHs.
Agua destilada.
Procedimiento:
Utilizando un potencimetro marca Corning, modelo 350 o modelo 125.

1. Conecte el aparato.
2. Espere 5 minutos para que se caliente.
3. Lave los electrodos con agua destilada.
4. En un vaso de precipitado ponga la solucin amortiguadora de pH conocido y mida la
temperatura de la solucin.
5. Mueva el botn de la temperatura a la temperatura medida.
6. Introduzca los electrodos en el lquido ms o menos 3 cm.
7. Mueva a la posicin pH.
8. Con el botn de calibrar, ajustar al pH de la solucin amortiguadora.
9. Con la muestra que se desea medir, repetir los pasos 3, 4, 5, y 6.
10. Anote la lectura de pH y la temperatura de la muestra.
4.5. Problemas
1. Cul es la concentracin del in hidrgeno en una solucin cuyo pH es igual a 6.25?

2. Cul es el pH de una solucin que tiene una concentracin del in hidrgeno de 3x102?

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5. ALCALINIDAD
Objetivo: El alumno reconocer las sustancias que le imparten alcalinidad al agua, as como
el origen de las mismas, su impacto y aplicacin en el contexto de la definicin de la
calidad de las aguas, segn sea su tipo y uso al que se destinen y conocer el mtodo de
medicin establecido en la normatividad vigente.
5.1. Origen de la alcalinidad

La alcalinidad es una medida de la capacidad que tiene el agua para absorber iones
hidrgeno sin tener un cambio significativo en su pH (capacidad para neutralizar cidos).
Las sustancias que le imparten alcalinidad al agua son fundamentalmente, los iones
carbonato, bicarbonato e hidrxido. Algunos otros materiales tambin le imparten
alcalinidad al agua, como son los silicatos, boratos y fosfatos, pero su contenido en las
aguas naturales es generalmente insignificante y su efecto puede ignorarse.
Esta propiedad amortiguadora que permite que las aguas reciban sustancias cidas sin
sufrir cambios fuertes en su pH, debido a la presencia de los CO3-, HCO3-, e OH- se explica
al observar las reacciones que se llevan a cabo.
CO3- + H+ = HCO3-
HCO3- + H+ = H2CO3
OH- H+ = H2O
Es decir, los CO3-, HCO3- ,OH-, reaccionan o absorben los iones H+ para constituir otras
molculas que no le dan acidez al agua, puesto que el hidrgeno no se encuentra en su
forma inica.
5.2. Relacin pH alcalinidad

Para tener la posibilidad de distinguir entre los tres tipos de alcalinidad, es decir, la debida
a bicarbonatos, carbonatos e hidrxidos, se hace distincin entre dos tipos de alcalinidad: la
alcalinidad a la fenoftalena y la alcalinidad al anaranjado de metilo, llamada tambin
alcalinidad total y est basada en lo siguiente:
Las especies de carbonato presentes en el agua son funcin del pH y su distribucin se

ilustra en la figura 5.1:
Por lo tanto los puntos de vire escogidos son 8.3 y 4.5 esto es, muestras que tienen un pH
mayor que 8.3, su alcalinidad puede ser debida a las tres formas de alcalinidad y muestras
que tienen un pH menor que 8.3 su alcalinidad es debida nicamente al in bicarbonato.
18
1.00
Fraccin de la
especie de carbonato
presente. 0.50
Lnea roja = Ac.Carbnico

Lnea azul = Bicarbonatos
Lnea negra = Carbonatos | | | | | | |
0 2 4 6 8 10 12
Figura 5.1. Relacin de la alcalinidad, segn el ion que la produce, con el pH
5.3. Impacto de la alcalinidad

La alcalinidad excesiva no produce efectos nocivos en la salud de los consumidores, pero
s le imparte un sabor desagradable al agua, que puede causar que sea rechazada. La
normatividad vigente fija como mximo admisible una alcalinidad total de 400 mg/1 CaCO3.
5.4. Usos y aplicaciones

La alcalinidad es de importancia en muchos usos y tratamientos de agua natural y aguas
residuales. Para determinar si el agua es adecuada para irrigacin debe considerarse su
alcalinidad en relacin con la del suelo. Este concepto tambin tiene aplicacin en los
tratamientos qumicos del agua de coagulacin y ablandamiento, en general la capacidad
amortiguadora del agua es de gran inters en la prctica del tratamiento de aguas
residuales.
5.5. Medicin de la alcalinidad

La determinacin de la alcalinidad en una muestra de agua se hace por medio de titulacin
con un cido mineral fuerte de concentracin conveniente, hasta puntos de neutralizacin
indicados por indicadores colorantes. Ver figura 5.2.

Los iones hidrxido presentes en una muestra de agua son neutralizados por titulacin con
un cido estndar, dependiendo la alcalinidad del pH escogido. Ya que la alcalinidad no es
funcin de una sola especie, se ha establecido como unidad de expresin el CaCO3, cuyo
peso molecular es 100.
La tabla 5.1 nos permite observar una clasificacin de las tres principales formas de
alcalinidad presentes en el agua, suponiendo la ausencia de otras sales que tambin
producen alcalinidad, como son los silicatos, boratos y fosfatos.
19
Tabla 5.1. Relacin de los diferentes tipos de alcalinidad, dependiendo de los resultados de
la titulacin con cido.
Resultado de la Alcalinidad debida al Alcalinidad debida a Alcalinidad debida

titulacin. OH en mg/1 CaCO3 CO3 en mg/1CaCO3 HCO3 mg/1CaCO3
F = 0 0 0 T
F< T 0 2F T - 2F
F = T 0 2F 0
F > T 2F - T 2 (T - F) 0
F = T T 0 0
donde:
F = Alcalinidad a la Fenoftalena
T = Alcalinidad total
La conversin a miligramos por litro CO-3 es en la siguiente forma:
mg/1 CO-3 = mg/1 CaCO3 alc. carbonatos x 0.6.
mg/1 HCO3- = mg/1 CaCO3 alc. bicarbonatos x 1.22
El color o la turbiedad altos pueden impedir identificar el punto de vire.
5.5.2. Muestreo
Las muestras se deben colectar en frascos de polietileno o pyrex y almacenar a bajas
temperaturas, ya que en las aguas de desecho puede haber accin microbiana y ganar
dixido de carbono. Tambin pueden perder o ganar CO2 cuando son expuestas al aire por
lo que se recomienda llenar los frascos completamente y cerrarlos apretadamente.

Dos matraces Erlenmeyer de 125 250 ml.
Una pipeta volumtrica de 50 ml.
Una bureta de 25 o 50 ml.
Un vaso de precipitado.
Un embudo
cido sulfrico 0.02 N
Indicador de Fenoftalena
Indicador de anaranjado de metilo
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Figura 5.2. Material para titulacin
Procedimiento:
Alcalinidad a la fenortalena:
1. Tome 50 ml. de muestra en un matraz Erlenmeyer.

2. Agregue tres gotas de indicador de fenoftalena. Si da una coloracin rosa violeta si
existe alcalinidad a la fenoftalena.
3. Titule con cido sulfrico hasta su decoloracin.
4. Tome la lectura de mililitros de cido consumido.
5. Calcule la alcalinidad a la fenoftalena por medio de la siguiente frmula:
Alcalinidad en mg/ 1 CaCO3 = A X N X 50,000

mls. de muestra
donde: A = ml. de cido estndar consumido.
N = Normalidad del cido estndar.
Alcalinidad total:
1. Tome 50 mil. de muestra en un matraz Erlenmeyer. Si se determin la alcalinidad a la

fenoftalena, se puede continuar utilizando la misma muestra, acumulando la cantidad de
cido consumido.
2. Agregar 4 gotas del indicador anaranjado de metilo, dando una coloracin amarillenta.
3. Titular con cido sulfrico, hasta un vire color naranja correspondiente a PH = 4.5.
4. Tomar la lectura de mililitros de cido consumido.
5. Calcular la alcalinidad total por medio de la misma frmula anterior.
5.6. Problemas
1. El anlisis de una serie de muestras dio los siguientes valores de pH: 5.5, 3.0, 12.4, 8.5,
7.6 y 9.0. Con estos valores de pH que conclusiones puede obtener acerca de la
presencia significativa de iones de carbonato y bicarbonato.
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6. DUREZA
Objetivo: El alumno reconocer las sustancias que le imparten dureza al agua, as como su
origen, impacto y remocin, en el contexto de la definicin de la calidad del agua, segn
sea su tipo y uso al que se le destine. Conocer los lmites y mtodos de anlisis
establecidos en la normatividad vigente.
6.1. Origen de la dureza del agua

La dureza en el agua es causada principalmente por la presencia de iones de calcio y
magnesio. Algunos otros cationes divalentes tambin contribuyen a la dureza como son,
estroncio, hierro y manganeso, pero en menor grado ya que generalmente estn contenidos
en pequeas cantidades.
La dureza la adquiere el agua a su paso a travs de las formaciones de roca que contienen
los elementos que la producen. El poder solvente lo adquiere el agua, debido a las
condiciones cidas que se desarrollan a su paso por la capa de suelo, donde la accin de las
bacterias generan CO2, el cual existe en equilibrio con el cido carbnico. En estas
condiciones de pH bajo el agua ataca las rocas, particularmente a la calcita (CaCO3),
entrando los compuestos en solucin.
La clasificacin de las aguas segn su dureza, se presenta en la tabla 6.1.
Tabla 6.1.- Clasificacin de las aguas segn su dureza.
0 75 mg/1 CaCO3 Agua blanda

75 150 mg/1 CaCO3 Agua semi-dura
150 300 mg/1 CaCO3 Agua dura
ms de 300 mg/1 CaCO3 Agua muy dura
6.2. Relacin dureza alcalinidad

Cuando la dureza es numricamente mayor que la suma de las alcalinidades de carbonatos
y bicarbonatos, la cantidad de dureza que es su equivalente a esta suma se le llama dureza
carbonatada, tambin llamada temporal, ya que al elevarse la temperatura del agua hasta el
punto de ebullicin, el calcio y el magnesio se precipitan en forma de carbonato de calcio e
hidrxido de magnesio respectivamente.
La cantidad de dureza en exceso de la carbonatada se le llama dureza de no carbonatos y

se distingue como permanente, es decir, no puede eliminarse por agitacin trmica, sino
que son necesarios procesos qumicos para eliminarla del agua. Entre estos procesos se
pueden mencionar el ablandamiento con cal, cal-soda e intercambiadores inicos como
zeolitas y ciertas resinas.
6.3. Impacto de la dureza

La dureza del agua se reconoci originalmente por la capacidad que tiene el agua para
precipitar el jabn, esto es, las aguas requieren de grandes cantidades de jabn para
producir espuma. Otra caracterstica de suma importancia en la industria, reconocida
posteriormente, es la produccin de incrustaciones en los tubos de agua caliente,
calentadores y algunas otras unidades en las que la temperatura del agua es alta.
23
La capacidad de consumo de jabn es de importancia desde el punto de vista econmico y

por la dificultad de obtener condiciones apropiadas para una limpieza ptima. Sin embargo,
con los detergentes sintticos este problema ha disminuido, por lo que, la demanda del
pblico de aguas suavizadas en las plantas de tratamiento municipal tambin ha disminuido
y la tendencia es hacia instalaciones de ablandamiento privadas e industriales excepto en
aquellos lugares en los que la dureza es sumamente alta.
El problema de las incrustaciones no ha disminuido y es de consideracin muy importante,

principalmente en la industria, porque las incrustaciones pueden obstruir las tuberas a tal
grado que se produzcan explosiones o que se inutilicen las unidades de los procesos
industriales, resultando ms econmico darle a las aguas un tratamiento de ablandamiento,
que sustituir tuberas, equipo, etc.
Las aguas duras no causan problemas al cuerpo humano y son tan satisfactorias como las
aguas blandas sin embargo, la aceptacin del pblico es variable de un lugar a otro, y su
sensibilidad depende del grado de dureza al que las personas estn acostumbradas. Muchos
consumidores ponen objecin cuando la dureza del agua excede de 150 mg/1 CaCO3.
El lmite de dureza que se establece en la normatividad actual es de 500 mg CaCO3 y

recomienda que la dureza permanente no exceda de 150 mg/ 1 CaCO3.
6.4. Remocin de la dureza

El proceso de ablandamiento con cal soda (Ca (OH)2 Na2 CO3) precipita la dureza del
agua. En este proceso se llevan a cabo las siguientes reacciones, las cuales se deben de
tener en consideracin para estimar las cantidades de cal y soda necesarias para el
ablandamiento.
1. CO2 + Ca (OH) 2 CaCO3 + H2O
2. Ca (HCO3)2 + Ca (OH) 2 2CaCO 3 + 2H 2
3. Mg (HCO3)2 + Ca (OH) 2 CaCO 3 + Mg CO3 + 2H 2
4. MgCO 3 + Ca (OH) 2 Mg(OH) 2 + CaCO3
5. 2NaHCO 3 + Ca (OH) 2 CaCO 3 + Na 2 CO3 + 2H2 O
6. MgSO 4 + Ca (OH) 2 Mg (OH) 2 + CaSO4
7. CaSO 4 + Na2 CO3 CaCO 3 + Na2 SO4
El proceso de ablandamiento por medio de intercambiadores inicos consiste en pasar

aguas duras a travs de un lecho de resinas intercambiadoras de cationes, donde los
componentes de la dureza, los iones de calcio y magnesio son eliminados de la solucin y
sustituidos por sodio o hidrgeno.
24
6.5. Medicin de la dureza del agua

Determinacin de la dureza, total y de calcio se realiza por el mtodo de titulacin con
EDTA (versenato de sodio).

El cido etilen diamino tetra actico y su sal disdica forman un complejo cuando son
aadidos a una solucin que contenga ciertos cationes metlicos. Si una pequea cantidad
del indicador negro T de Eriocromo es aadida a una solucin acuosa que contiene iones de
calcio y magnesio a un pH de10 0.1, la solucin se teir de un color rojo vino; si se
aade EDTA como titulante, el calcio y el magnesio reaccionarn con l. Despus de que
suficiente cantidad de EDTA es aadida para reaccionar o capturar todos los iones de
calcio y magnesio, la solucin cambiar de rojo vino a color azul.
La agudeza del cambio de color aumenta, aumentando el pH, sin embargo, ste no debe ser
incrementado indefinidamente ya que, existe el peligro de precipitar CaCO3 y Mg (0H)2. El
pH de 100.1 es satisfactorio y se establece un mximo de 5 minutos de duracin de la
titulacin para minimizar la tendencia hacia la precipitacin del CaCO3.
Para distinguir entre la dureza clcica y magnsica, es necesario hacer otra titulacin
agregndole a la muestra una solucin de hidrxido de sodio para subir el pH lo
suficientemente alto (entre 12 y 13), de tal manera que el magnesio sea precipitado como
Mg (0H) 2 y usando un indicador que combina solamente con el calcio, llamado murexida.
Algunos iones metlicos interfieren con el procedimiento causando prdida gradual del
color o que no se pueda identificar el punto de vire, sta interferencia se reduce con la
adiccin de ciertos inhibidores a la muestra de agua.

Dos matraces Erlenmeyer
Una pipeta volumtrica de 25 ml
Un vaso de precipitado.
Una pipeta de 1 ml
Una bureta
Un embudo
Solucin Amortiguadora de NH4 OH para pH 10.
Solucin de Hidrxido de Sodio, para pH de 12 a 13.
Solucin valorada de Versenato de sodio (EDTA) de una concentracin tal que 1 ml
= 1mg de Ca o Mg en CaCO3
Indicador en polvo negro T de Ericromo.
Indicador en polvo de Purpurato de Amonio (murexida).
Agua destilada
Procedimiento:
Dureza total:
1. Tome 25 ml de muestra y 25 ml de agua destilada en un matraz Erlenmeyer.

2. Agregue un mililitro de la solucin amortiguadora
25
3. Agregue una cucharilla del indicador negro T de Ericromo, dando una coloracin
rojo vino que indica la presencia de iones de calcio y magnesio.
4. Titule con la solucin valorada EDTA hasta su vire a color azul que se comprueba
aadiendo una gota mas de EDTA que no produzca cambio en la coloracin.
5. Lea la cantidad de EDTA consumido.
6. Calcule la dureza total por medio de la siguiente frmula:
Dureza en mg/1 CaCO3 = A x B x 1,000

ml. de muestra
donde:
A = ml de EDTA consumidos.
B = mg de Ca o Mg en CaCO3 equivalentes a 1 ml de EDTA.
Dureza de calcio:
Tome 25 ml de muestra y 25 ml de agua destilada en un matraz Erlenmeyer.

Agregue un ml de hidrxido de sodio y agitar.
Agregue una cucharilla del indicador Purpurato de Amonio (Murexida), dando una
coloracin rosada.
Titule con la solucin de Versenato de Sodio (EDTA) hasta su vire a color prpura que se
comprueba preparando un testigo con 2 ml de la solucin de hidrxido de sodio, indicador
murexida y suficiente cantidad de EDTA.
Lea la cantidad de EDTA consumido.
Calcule la dureza clcica por medio de la frmula anterior.
6.6. Problemas
1. Una muestra de agua tienen una dureza de 400 mg/1 CaCO3 a un pH de 7.8 Cul es su
dureza carbonatada y cul su dureza de no carbonatos?

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7. CLORUROS
Objetivo: El alumno reconocer a los iones cloruro como un parmetro fundamental para la
caracterizacin de las aguas y como indicadores de contaminacin, as como el origen de
los mismos, su impacto y aplicacin en la definicin de la calidad del agua, segn sea su
tipo y uso al que se destine y conocer los lmites y el mtodo analtico establecidos en la
normatividad mexicana.
7.1. Origen de los cloruros

Los cloruros son aniones que generalmente se encuentran contenidos en las aguas
naturales. La magnitud de su concentracin es muy variable, siendo mayor normalmente
cuando aumenta el contenido mineral de las aguas.
No se conocen efectos txicos para el hombre por altas concentraciones de cloruros, sin
embargo, su valor en agua potable se recomienda que no exceda de 250 mg/1 por razones
de sabor, ya que los cloruros en concentraciones superiores a este valor, cuando el agua
contiene sodio le imparten sabor salado al agua.
7.2. Indicadores de contaminacin

La determinacin de la concentracin de los cloruros en el agua resulta de utilidad como
indicador de contaminacin por aguas residuales domsticas. Un incremento de cloruros en
una fuente de abastecimiento de agua potable, puede ser indicativo de contaminacin
debido a que, el hombre en la preparacin de sus alimentos utiliza cantidades considerables
de cloruro de sodio (sal de cocina), el cual es desechado en su totalidad a travs de la orina
y excrementos. El incremento de cloruros en las aguas servidas es de aproximadamente
25mg/1 con respecto al agua del abastecimiento.
El incremento de cloruros en el agua de los pozos localizados en las zonas costeras, nos
puede indicar la tendencia a la intrusin salina. La intrusin salina ocurre al sobrebombear
el pozo, producindose una diferencia en la carga hidrosttica a favor del agua causando un
movimiento de esta agua hacia la zona de extraccin del pozo.
7.3. Remocin de iones disueltos

Al tratamiento para eliminar el exceso de cloruros en el agua y en general de las sales se
le llama desmineralizacin o conversin de agua salina. El problema limitante para obtener
agua dulce a partir de agua salada o de agua de mar es de tipo econmico. Los mtodos
existentes para esta conversin resultan en la actualidad relativamente caros, sin embargo,
la escasez de fuentes de abastecimiento viene a ser un factor limitante en el crecimiento de
muchas zonas del mundo, por lo que el uso de la desmineralizacin cada vez tiene mayor
aplicacin. Entre los tratamientos de desmineralizacin ms comunes se encuentran la
evaporacin condensacin, intercambio inico y smosis inversa.
7.4. Medicin de cloruros

Determinacin de los cloruros presentes en una muestra de agua por el mtodo
Argentomtrico o de Mohr.
27
Si se usa nitrato de plata (AgNO3) en la titulacin del in cloruro, ste se precipita como
cloruro de plata blanco.
Ag+ + Cl- = AgCl
Para estimar la cantidad de AgNO3 necesaria para reaccionar con todo el cloruro existente
en la muestra, se precisa determinar el punto de vire en el que todo el cloruro se ha
precipitado como cloruro de plata. Este punto no se puede detectar a simple vista a menos
que se agregue un indicador a la muestra. Este indicador es cromato de potasio (K2CrO4) ya
que, en una solucin neutra o ligeramente alcalina puede indicar el punto de vire, porque
una vez que se ha agotado el in cloruro, los iones de plata reaccionan con el cromato y
forman un precipitado caf rojizo.
2Ag+ + CrO4 - Ag2CrO4
El indicador le introduce un pequeo error al valor obtenido en la titulacin de muestra,

debido a que entre sus impurezas contiene cloruros. Este error debe ser corregido
substrayndose al valor de la titulacin obtenido para la muestra, el valor obtenido en la
titulacin de un blanco.
Las sustancias en las cantidades que normalmente se encuentran en el agua potable no

interfieren. Los bromuros, ioduros y cianuros se registran como concentraciones
equivalentes de cloruros. Los sulfuros, el tiosulfato y el tiosulfito interfieren al
procedimiento pero pueden ser eliminados por un tratamiento con perxido de hidrgeno.
El ortofosfato en exceso de 25mg/1 interfiere ya que se precipita como fosfato de plata. El
hierro en exceso de 10 mg/1 interfiere porque enmascara el punto de vire.

Dos matraces Erlenmeyer
Una pipeta volumtrica de 50 ml
Un vaso de precipitado
Una pipeta de 1 ml
Una bureta
Un embudo
Solucin valorada de nitrato de plata 0.0141 N
Solucin indicadora de cromato de potasio
cido Sulfrico 1N
Hidrxido de Sodio 1N
Agua destilada
Procedimiento
Tome 50 ml de muestra en un matraz Erlenmeyer.

Si la muestra tiene un pH entre 7 y 10 pasar al paso 3, si no, ajustar el pH a este rango con
cido sulfrico 1N o hidrxido de sodio 1N.
Agregue a la muestra 1ml del indicador de cromato de potasio el cual da a la muestra un
color amarillo vidrioso.
Titule con la solucin valorada de nitrato de plata.
Tome la lectura de los mililitros de nitrato de plata consumido.
28
Repita los pasos 1,2,3,4 y 5 usando agua destilada.

Calcule la cantidad de cloruros por medio de la siguiente frmula:
mg/1 de Cl- = (A-B) x N x 35 450,00

ml de muestra
donde:
A = ml de AgNO3 consumidos por la muestra
B = ml de AgNO3 consumidos por el agua destilada
N = Normalidad de la solucin de AgNO3.
7.5. Problemas
1. Explique Por qu en la determinacin de los cloruros, al valor obtenido en la titulacin

de la muestra se le debe de hacer una correccin equivalente al valor obtenido en la
titulacin de un testigo?
2. El valor obtenido de los cloruros por medio del mtodo de Mohr, ser mayor o menor o
el mismo que el valor real si accidentalmente se agrega un exceso de indicador a la
muestra
3. Segn la respuesta explicar porqu.

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8. CLORO RESIDUAL
Objetivo: El alumno reconocer la importancia de la desinfeccin de las aguas, enfatizando

el uso del cloro en sus diferentes formas, desarrollando un criterio para la seleccin de la
mejor alternativa. Conocer y aplicar el mtodo analtico para la medicin de cloro residual
y los lmites establecidos en la normatividad vigente.
8.1. Necesidad de la desinfeccin de las aguas

En los procesos de tratamiento convencional para la remocin del color y la turbiedad, la
mayora de las bacterias patgenas y muchos otros microorganismos son removidos del
agua ya sea por eliminacin fsica a travs de los procesos de coagulacin, sedimentacin y
filtracin, o por muerte natural de los microorganismos en un ambiente desfavorable
durante el almacenamiento o con la introduccin de agentes qumicos en los diferentes
procesos. Sin embargo, la remocin an no es completa y es necesario aplicar algn
mtodo de desinfeccin.
8.2. Mtodos de desinfeccin

La desinfeccin puede ser aplicada por varios mtodos, entre los cuales se pueden
mencionar el calor, ultrasonido, irradiacin con rayos ultravioletas, iones metlicos como
cobre y plata, oxidantes qumicos como bromo, yodo, cloro, ozono, permanganato de
potasio, etc., sin embargo, muchos de estos mtodos tienen sus limitantes. Los mtodos
que han encontrado mayor aplicacin a grande escala son las ionizacin y la cloracin,
siendo ste ltimo el que menos limitantes presenta en cuanto a su eficiencia, costo,
facilidad de manejo, efecto residual, control de olor y sabor, facilidad de determinacin de
su concentracin, etc.
La accin bactericida del cloro resulta de su fuerte poder oxidante en la estructura qumica
de las clulas de las bacterias, destruyendo el proceso enzimtico requerido para la vida.
La cantidad de inactivacin microbiana depende de la concentracin en forma de cloro
residual disponible, pH, temperatura del agua y del tiempo de contacto. La siguiente tabla
(8.1) muestra las concentraciones mnimas de cloro residual recomendadas para la
desinfeccin.
Tabla 8.1. Relacin entre el valor del pH y los mnimos de cloro recomendables para una
desinfeccin efectiva.
pH Mnimo cloro residual libre Mnimo cloro residual

disponible despus de 10 combinado disponible
min. de contacto en mg/1 despus de 60 min. de
contacto en mg/1.
6.0 0.2 1.0
7.0 0.2 1.5
8.0 0.4 1.8
9.0 0.8 No aplicable
10.0 0.8 No aplicable
La normatividad actual indica que el cloro libre no deber exceder de 1.00 mg/1.
30
El cloro residual se presenta en varias formas de diferente efectividad, dependiendo de las

caractersticas qumicas del agua, y puede no resultar equivalente al cloro aplicado por lo
que para tener un criterio en la cantidad de aplicacin apropiada es necesario comprender
la qumica de la cloracin.
El gas cloro es muy soluble en el agua (7160 mg/1 a 20o C y 1 atm), y se hidroliza
rpidamente para formar cido hipocloroso.
Cl2 + H2O HClO + H++ Cl-
La hidrlisis se completa a los valores de pH que generalmente tiene el agua. El cido

hipocloroso a su vez ioniza de acuerdo a la siguiente ecuacin:
HClO H- + ClO- (In hipoclorito, bactericida)
La figura 8.1 muestra la relacin entre HClO y ClO- a varios niveles de pH.
100 0
10
90
80 20
70 30
60 40
50 50
40 60
30 70
20 80
10 90
0 100
4 5 6 7 8 9 10 11
Figura 8.1. Relacin entre el valor del pH, la temperatura y la ionizacin del cido
hipocloroso
8.3. Curva de demanda de cloro y cloro residual

El cloro reacciona con el amonio que contiene el agua para formar cloraminas con la
siguiente forma:
HClO + NH3 H2O + NH2Cl (Monocloramina)
HClO + NH2Cl H2O + NHCl2 (Dicloramina)
31
HClO + NHCl2 H2O + NCl3 (Tricloramina)
El tipo de cloramina formado depende del pH del agua y de la cantidad de amonio que
contiene el agua.
Se le llama cloro residual libre a la cantidad de cloro que existe en el agua en forma de
cido hipocloroso o en forma de in hipoclorito. El cloro residual combinado es aquel que
existe en combinacin qumica con el amonio o sea las cloraminas o compuestos con
nitrgeno orgnico. La demanda de cloro es la diferencia entre la cantidad de cloro aadida
al agua y la cantidad de cloro libre y combinado que permanece al final del periodo de
contacto especificado.
Cuando el cloro es aadido al agua que contiene agentes reductores y amonio, el cloro
residual se comporta de acuerdo a la figura 8.2.:
Dosis de cloro
Figura 8.2. Curva de demanda de cloro
El cloro reacciona primero con los agentes reductores presentes (NO2, Fe, H2S), y no
presenta cloro residual medible (porcin A-B).La dosis de cloro en el punto B es la
cantidad requerida para cumplir con la demanda. La adicin de cloro en exceso de la
demanda en B resulta en la formacin de las cloraminas. Las cloraminas resultantes
representan cloro residual disponible y son efectivas como desinfectante. Cuando todo el
amonio ha reaccionado con el cloro, empieza a formarse el cloro residual libre en el punto
C. Conforme el cloro residual libre, las cloraminas producidas previamente son oxidadas, y
el cloro residual combinado decrece.
El punto D es llamado punto de quiebre y es el punto a partir del cual el cloro residual
disponible es nicamente cloro libre.
El cido hipocloroso es el principal desinfectante. Los iones hipoclorito son un poco menos
efectivos. Por lo tanto el poder del cloro residual disminuye cuando aumenta el pH. La
accin bactericida del cloro residual combinado es significativamente menor que la del
cloro residual libre.
8.4. Medicin de cloro residual
32
La determinacin del cloro residual total, libre y combinado por el mtodo de la

ortotolidina, utilizando un comparador de cloro residual marca LaMotte

La ortotolidina es un compuesto orgnico aromtico, que es oxidado en soluciones cidas
por el cloro, cloraminas y otros agentes oxidantes para producir un compuesto de color
amarillo (Holoquinona). La intensidad del color amarillo es proporcional a la cantidad de
cloro residual presente. La rapidez de la reaccin es dependiente de la temperatura. A una
temperatura de 1oC la reaccin de las cloraminas es lenta, lo que permite determinar el
cloro residual libre exclusivamente. La medicin se puede realizar con un comparador como
el ya sealado de la figura 8.3 o un comparador del tipo Hellige (ver figuras 8.4 a y b)
Tanto los nitritos, como algunas formas oxidadas del manganeso oxidan la ortotolidina para
formar holoquinona, producindose falsas indicaciones del cloro residual.
8.4.2. Muestreo
El cloro en soluciones acuosas no es estable, especialmente en aquellas de concentracin
baja. Evite la exposicin de la muestra a los rayos del sol o de luz intensa y la agitacin,
porque esto acelerar la reduccin del cloro. Realice la determinacin inmediatamente
despus de muestrear. No almacene las muestras que van a ser analizadas para cloro
residual.
Figura 8.3 Comparador para Cloro Residual marca LaMotte

Un comparador de cloro residual LaMotte
Un vaso de precipitado de 100 ml.
Reactivo de Ortotolidina
33
(a) (b)
Figura 8.4. (a) Comparador marca Hellige; (b) Disco para la comparacin del contenido de
cloro residual.
Procedimiento
Cloro residual total:
1. Enjuague el tubo de prueba con el agua que se va a analizar.

2. Llene el tubo hasta la marca con la muestra de agua.
3. Aada 8 gotas del reactivo Ortotolidina, tape el tubo y agite vigorosamente.
4. Inserte el tubo en el comparador y busque el color que se asemeje. Si el color de la
muestra se encuentra entre dos estndares, tome como valor el punto medio. Si el color
de la muestra excede al estndar de mximo valor, diluya la muestra, tomando una
parte de agua y una muestra, el valor de cloro de la muestra as diluida, ser el que se
obtenga.
Cloro residual libre:
1. Enfre la muestra de agua aproximadamente a 1oC.

2. Enjuague el tubo de prueba con una pequea cantidad de agua de la muestra fra.
3. Aada al tubo de prueba la muestra de agua fra hasta la marca.
4. Agregue 8 gotas del reactivo de ortotolidina, tape el tubo y agite. Tome los
resultados de la prueba dentro de los 5 segundos despus de aadido el reactivo.
8.5. Problemas
1. Suponiendo que el pH de la muestra analizada es 6.8 Considera que el agua contienen

un cloro residual mnimo suficiente para garantizar la desinfeccin?
2. En qu porcin de la curva de demanda de cloro se encuentra el agua analizada?
3. Estime la proporcin relativa de cloro residual libre que aparece en forma de HOCl y en
forma de OCL una muestra de agua con un pH de 7.2 y a una temperatura de 20oC.
4. Cmo estimara la cantidad de cloro a aplicar en una planta potabilizadora de gasto
conocido?
5. Qu tiempo de contacto escogera para la determinacin de la dosis de cloro?
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9. PRUEBA DE JARRAS
Objetivo: El alumno aplicar los principios de coagulacin y floculacin al desarrollar una

prueba de jarras y determinar la dosis ptima de coagulantes para la clarificacin y/o
ablandamiento del agua y los relacionar con el diseo y control de una planta
potabilizadora.
9.1. Tratamientos de agua

La coagulacin y floculacin es un proceso utilizado generalmente en todas las plantas de
tratamiento de agua (potabilizadoras) para eliminar al agua turbiedad y por lo tanto tambin
color. En general este proceso consiste en: cloracin, agitado rpido, agitado lento,
sedimentacin, filtracin y desinfeccin.
Todas las aguas naturales cuyo uso est destinado al abastecimiento pblico, requerirn de
algn grado de tratamiento para poder cumplir con las normas de calidad de agua potable.
La naturaleza e intensidad del tratamiento, depender de la naturaleza de las impurezas.
Los procesos seleccionados para el tratamiento de agua potable dependern de la calidad

de las aguas crudas. La mayora de las aguas subterrneas son claras y libres de patgenos
y no contienen cantidades significativas de materia orgnica. Tales aguas, con frecuencia
pueden ser utilizadas en sistemas de agua potable con una mnima dosis de cloro para
prevenir la contaminacin en los sistemas de distribucin. Otras aguas, pueden contener
grandes cantidades de slidos disueltos o gases. Cuando en estos se incluyen el hierro,
manganeso o dureza, se requerir de un tratamiento qumico y fsico.
Por otra parte, las aguas superficiales pueden contener una muy amplia variedad de
contaminantes y los tratamientos a los cuales deben ser sometidas pueden ser ms
complejos. La mayora de las aguas superficiales presentan turbiedad en exceso de lo
establecido en la normatividad para agua potable. La mayora de los materiales en
suspensin debern ser removidos mediante una coagulacin qumica.
9.1.1. Procesos unitarios

La terminologa utilizada en el tratamiento de aguas puede ser confusa para alguien que no
est familiarizado con ella. Por esta razn los tratamientos se han clasificado de acuerdo a
los medios que se utilizan.
Cuando la remocin de sustancias se hace mediante el desarrollo de reacciones biolgicas

y qumicas se considerar un proceso unitario, como es el caso de los lodos activados, la
coagulacin qumica, la precipitacin, etc.
9.1.2. Operaciones unitarias

Cuando el tratamiento consiste en la aplicacin de fuerzas fsica como la sedimentacin, la
filtracin, decantacin, agitacin, etc. Se le llamar operacin unitaria.
9.2. Coagulacin y floculacin

Se determinar la dosis ptima de un coagulante, a emplear que se necesita para clarificar
una muestra de agua. A esta prueba se le conoce con el nombre de prueba de jarras,
debido al equipo empleado.
36

El sulfato de Aluminio (Al2 (SO4)3) reacciona con la alcalinidad natural en el agua para
formar un flculo de hidrxido de aluminio (Al (OH)3).
Al2 (SO4)3. 14.3 H2O + 3Ca (HCO3)2 2Al (OH)3 + 3CaSO4 + 14.3 H2O + 6CO2
Cada mg. de aluminio disminuye la alcalinidad del agua en 0.5 mg/1 de CaCO3 y produce
0.44 mg/1 dixido de carbono. La produccin de dixido de carbono es indeseable porque
aumenta la corrosividad del agua. Si el agua no contiene suficiente alcalinidad para
reaccionar con el alumbre Al2(SO4)3 es preciso agregar Cal (Ca (OH)2) o soda (Na2CO3).
CAL:
Al2(SO4)3 . H20 + 3Ca(OH)2 2 Al (OH)3 + 3CaSO4 + 14.3 H20
SODA:
Al2(SO4)3 . 14.3 H20 + 3Na2CO3 + 3H20 2 Al (OH)3 + 3Na2SO4 + 3C02 + 14.3

H20
La ventaja de la soda es que, a diferencia de la cal, sta no nos aumenta la dureza del agua,
solamente la corrosividad, sin embargo la cal es ms popular y menos cara que la soda. El
sulfato de hierro es otro coagulante que opera sobre un rango ms costoso.
Las interferencias son las mismas que para las determinaciones de color, turbiedad, pH,
alcalinidad y dureza inicialmente y despus de la clarificacin, en cada prueba existen sus
interferencias ya conocidas. Pero para esta prueba la principal interferencia que nos
causara llegar a resultados errneos sera que no estuviera bien homogenizada la muestra,
ya que ocasionaramos la resuspensin de las partculas de sedimentacin, al moverla
bruscamente.

Aparato de jarras (agitadores e iluminador de flculos)
Probetas
Vasos de precipitado de 1000 ml
Equipo requerido para las pruebas de pH, color, turbiedad, alcalinidad y dureza.
Procedimiento
1. Determine a la muestra de agua bien homogenizada el color, la turbiedad, el pH, la
alcalinidad y la dureza.
2. Vace porciones de un litro en 6 vasos de precipitado y colquelos en el aparato de
Jarras.
3. Aada la solucin del coagulante a los 5 primeros vasos de precipitado con diferentes
concentraciones (Ejemplos:5,10,20,40,60 y 80 mg/1 de Al2(SO4)3.).
Si no es suficiente la alcalinidad agrguese por cada mg/1 de alumbre 0.35 mg/1 de
cada hidratada. Deje el sexto vaso como control.
4. Agitar por un minuto a 100 rpm despus de la adicin del coagulante.
37
5. Flocule las muestras a una velocidad de 30 rev / min durante 15 20 min. exactos.
Tome nota del tiempo que tardan en formarse los primeros flculos visibles para cada
vaso.
6. Despus de la floculacin saque los agitadores y deje sedimentar por 30 min.
7. Mida el color, la turbiedad, el pH, la alcalinidad y la dureza de cada vaso cuidando de no
resuspender las partculas del sedimento de la muestra.
8. Determine la dosis ptima del coagulante.
Figura 9.1. Aparato de jarras e iluminador de flculos

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38
10. DETERMINACIN DE OXGENO DISUELTO
Objetivo: El alumno comprender la importancia de la presencia del oxgeno disuelto en las

aguas naturales, como indicador de la calidad del agua y su aplicacin como parmetro de
control de sistemas de tratamiento biolgico de aguas residuales.
10.1. Solubilidad de gases en agua

La transferencia de gases desde y hacia el agua es una parte importante de los procesos
naturales de purificacin. La reposicin del oxgeno disuelto perdido por la degradacin
bacteriana de los desechos orgnicos se completa por la transferencia de oxgeno del aire
al agua. De manera inversa, los gases generados en los procesos qumicos y biolgicos
pueden ser transferidos del agua a la atmsfera.
Considere el sistema que se muestra en la figura 10.1:
Gas
absorcin desorcin
Lquido
Figura 10.1. Esquema de los procesos de absorcin y desorcin

de gases en lquidos
El recipiente se encuentra sellado y contiene un lquido y por encima de ste un gas. Si el

lquido es inicialmente puro respecto al gas, las molculas de gas migrarn a travs de la
interfase gas-lquido y se disolver en el lquido. En un momento dado, algunas molculas
de dejarn el lquido y regresarn a la fase gaseosa. La reaccin neta ser hacia el lquido
hasta que un estado de equilibrio sea alcanzado. A este punto, el nmero de molculas
dejando el lquido es igual al nmero de molculas que entran a l, dicindose que el lquido
est saturado con el gas. En este caso el equilibrio no es un estado esttico, sino que la
migracin de molculas del gas establece una estado de equilibrio dinmico estable.
El proceso est caracterizado por lo siguiente :
1. La solubilidad, o la concentracin mxima del gas en el lquido en el equilibrio.

2. El grado o velocidad de transferencia, o la velocidad de disolucin o liberacin.
La solubilidad est regida por la Ley de Henry, que se expresa de la siguiente manera :
39
P
x=
H
donde:
P = Presin del gas sobre el lquido, (mol).

H = Coeficiente de absorcin o de Henry, que es nico para cada sistema gas-lquido.
x = Fraccin molar del gas disuelto a 1 atmsfera
moles de gas (g)

x=
moles de gas (g) + moles de lquido (l)
Otros factores que afectan a x, son la temperatura y la concentracin de otros gases o

slidos disueltos.
La velocidad de transferencia de un gas en un parmetro muy importante en la aireacin y

es gobernado por varios factores y matemticamente se expresa de la siguiente manera :
dC
= (Cs - C) ka
dt
donde :
dC/dt = velocidad instantnea de cambio de concentracin de gas en el lquido

Cs = Concentracin en la saturacin
C = Concentracin actual
ka= Constante relacionada a las condiciones fsicas.(temperatura, rea interfacial y
resistencia al movimiento de una fase a otra)
La desorcin ocurre cuando C es mayor que Cs
Cuando las concentraciones de oxgeno disuelto caen por debajo de los valores de
equilibrio, el movimiento neto de oxgeno ser de la atmsfera al aire. La diferencia entre
la concentracin de equilibrio y la concentracin real se conoce como dficit de oxgeno (D)
y se representa de la siguiente manera :
D = Cs - C
Las unidades de todos los trminos son mg/L de oxgeno.
La velocidad de cambio en el dficit de oxgeno ser :
dD dC
=-
dt dt
40
El dficit se incrementa a la misma velocidad con que el oxgeno es consumido en el agua.
10.2. El Oxgeno disuelto como indicador de la calidad del agua

La autodepuracin de los sistemas de aguas naturales es un proceso muy complejo que
involucra procesos fsicos, qumicos y biolgicos.
El oxgeno disuelto es uno de los ms importantes constituyentes de las aguas naturales.

Los peces y otras especies acuticas animales requieren oxgeno, debiendo tener una
cantidad mnima de 2.0 mg / l para mantener las diferentes formas de vida. Adems de este
aspecto tan importante del oxgeno como sustentante de vida, tambin lo es por los
productos finales de las reacciones qumicas y bioqumicas en sistemas anaerobios que
conducen a condiciones antiestticas.
10.3. El Oxgeno como parmetro de control de sistemas de tratamiento

El tratamiento convencional de las aguas residuales mediante procesos biolgicos,
consiste en acelerar la degradacin de los materiales susceptibles, para tener una pronta
recuperacin de las aguas y proceder a su reuso.
Un sistema de tratamiento biolgico de aguas residuales consta de varias etapas, entre

ellas el desmenuzado, desarenado, sedimentacin primaria, un reactor biolgico, un
sedimentador secundario y desinfeccin. Es en el desarenador y en el reactor biolgico
dnde se requiere la aplicacin de oxgeno; en el primero como coadyuvante para la
separacin de las partculas de arena y en el segundo como ingrediente esencial para
garantizar el desarrollo de microorganismos aerobios que son los encargados de degradar
la materia orgnica presente. As pues, es necesario mantener los niveles de oxgeno
adecuados para favorecer el equilibrio entre las variables que intervienen en los procesos
de biodegradacin y alcanzar un funcionamiento ptimo.
10.4. Medicin del oxgeno disuelto

La determinacin del oxgeno disuelto en una muestra de agua se efectuar por el mtodo
de Winkler en su modificacin de la azida.

La prueba est basada en la adicin de una solucin de manganeso divalente, seguida por la
adicin de una base fuerte. Esta base fuerte es un reactivo llamado alcali-yoduro-nitruro
que es una solucin de hidrxido de sodio (NaOH), yoduro de potasio (Kl), y nitruro de
sodio (NaN3).
La primera reaccin que se produce es la siguiente:
Mn++ + 2OH- Mn (OH)2
Si no hay oxgeno en la muestra se forma un precipitado blanco floculento de hidrxido de

manganeso, pero si hay oxgeno, el Mn se oxida y se precipita como un oxido caf
hidratado; en la figura 10.2 se pueden observar las diferencias entre dos muestras de agua:
Mn (OH)2 + 02 MnO2 + H2O
41
Figura 10.2. Imagen que muestra botellas de Winkler en las cuales se han agregado los
reactivos de sulfato manganoso y lcali-yoduro-azida. A la izquierda las botellas que
contienen oxgeno; a la derecha las botellas que no contienen oxgeno.
A esta reaccin se le llama fijacin del oxgeno. Como la solucin contiene iones yoduro
(I-), al acidificarla el xido de manganeso oxida al yoduro para producir yodo libre (I2)
equivalente al contenido original de oxgeno disuelto en la muestra de acuerdo a la
siguiente reaccin:
MnO2 + 2I- + 4H Mn++ + I2 + 2H2O
El yodo es titulado con una solucin de tiosulfato de sodio para de este modo indirecto
estimar la cantidad de oxgeno disuelto.
Este mtodo elimina la interferencia del in (NO2) que es uno de los ms frecuentes en las
plantas de tratamiento de aguas domsticas que emplean procesos biolgicos. Hay
interferencias del in Fe+++ que pueda oxidar al yoduro (I-) a yodo libre (I2), dando valores
ms altos, hay interferencias de Fe+++ , SO3=y S- que pueden reducir al I2 a I- dando
valores ms bajos.
Muestreo
Las muestras deben ser colectadas teniendo cuidado de que no permanezca en contacto
con el aire o ser agitadas porque cualquiera de estas condiciones causa un cambio en el
contenido del gas. Se recomienda usar frascos de Winkler en el muestreo y la
determinacin debe hacerse en el campo. Cuando se desea muestrear a profundidades se
debe usar algn muestreador especial.

Botellas de Winkler
Pipetas graduadas de 10 ml
Matraces Erlenmeyer de 250 ml
Una bureta de 50 ml
42
Un embudo
Solucin de Sulfato Manganeso.
Reactivo lcali-yoduro-nitruro
cido sulfrico concentrado
Solucin de almidn
Solucin valorada de tiosulfato de sodio .025 N
Procedimiento
1. Agregue a la botella de DBO conteniendo la muestra 2 ml de sulfato manganoso con una
pipeta graduada, cuidando que la punta penetre aproximadamente medio centmetro en
el seno del agua.
2. Agregue 2 ml del reactivo lcali-yoduro-nitruro; la accin se hace en la misma forma

que el reactivo anterior, al hacer esta adicin se forma un precipitado caf si hay
oxgeno en la muestra, en caso negativo el precipitado ser blanco.
3. Una vez formado el precipitado caf tape la botella de DBO y agtela vigorosamente
durante 30 segundos.
4. Deje sedimentar el precipitado.
5. Adicione 2 ml de cido sulfrico concentrado y agite hasta la total disolucin del

precipitado.
6. Pase una alcuota de 100 ml a un matraz Erlenmeyer de 250 ml y titule con la solucin
valorada de tiosulfato de sodio hasta un color amarillo paja plido.
7. Agregue 2 ml de almidn y contine la titulacin hasta la primera desaparicin del color

azul.
8. Calcule la cantidad de oxgeno disuelto por medio de la siguiente frmula:
O2 en mg/1 = ml de tiosulfato de sodio x N x 8000
98.7
N = Normalidad de tiosulfato de sodio (0.025).

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11. DEMANDA BIOQUMICA DE OXGENO
Objetivo: El alumno conocer el mtodo de Winkler para la determinacin de la demanda

bioqumica de oxgeno, aplicando dicho conocimiento a los procesos de degradacin de la
calidad de las aguas y al diseo y operacin de sistemas de tratamiento biolgico de aguas
residuales.
11.1. Concepto de DBO

Muchos materiales orgnicos son solubles en agua. Estos materiales presentes en sistemas
acuticos naturales pueden proceder de fuentes naturales o como resultado de las
actividades humanas. La mayora de los compuestos orgnicos naturales estn constituidos
por productos del decaimiento o descomposicin de slidos orgnicos, mientras que los
compuestos orgnicos sintticos son por lo general el resultado de la descarga de aguas
residuales o de prcticas agrcolas. Los compuestos orgnicos que estn disueltos en el
agua se dividen en dos grandes categoras: biodegradables y No biodegradables
(refractarios).
La utilizacin microbiana de los compuestos orgnicos disueltos puede ser acompaada por
una oxidacin1 o una reduccin2. Aunque es posible que los dos procesos ocurran
simultneamente, el proceso de oxidacin es ms eficiente y predomina cuando hay
oxgeno libre disponible. En ambientes aerbicos (con oxgeno presente), los productos
finales de la descomposicin microbiana de los compuestos orgnicos son compuestos
estables y aceptables. La descomposicin anaerobia (oxgeno ausente) resulta en productos
finales inestables y objetables. Si posteriormente hay disponibilidad de oxgeno los
productos finales de la descomposicin anaerobia seguirn la ruta aerobia de
descomposicin. La naturaleza demandante de oxgeno de los compuestos orgnicos
biodegradables tiene la mayor importancia en los sistemas acuticos naturales. Cuando el
consumo de oxgeno ocurre ms rpido que la transferencia de oxgeno de la atmsfera al
agua, se conduce a condiciones anaerobias teniendo como resultado que se afecta
severamente a la ecologa de se sistema.
La cantidad de oxgeno consumido durante la actividad microbiana sobre los materiales

orgnicos se conoce como demanda bioqumica de oxgeno (DBO). La Demanda Bioqumica
de Oxgeno (DBO), se define como la cantidad de Oxgeno molecular requerido para
descomponer la materia orgnica degradable presente en el agua, mediante una accin
bioqumica aerobia.
11.2. Aplicaciones de la DBO

La determinacin de la DBO est entre los parmetros ms importantes para establecer la
carga de contaminacin del agua, adems de ser un parmetro utilizado para el diseo de
sistemas de tratamiento y/o como una medida de la operacin y eficiencia de una planta de
tratamiento de agua. Normalmente la DBO se determina en aguas de desecho y
dependiendo del origen de sta, ser el tipo de materia presente y la forma en que el
Oxgeno sea demandado. La DBO es ejercida por tres tipos de materia: Materia
carboncea ; Materia nitrogenada oxidable ; y compuestos qumicos reductores.
1 Oxidacin : Adicin de oxgeno o eliminacin de Hidrgeno de una molcula orgnica.

2 Reduccin : Adicin de Hidrgeno o eliminacin de oxgeno de una molcula orgnica.
44
11.3. Medicin de la DBO

La determinacin de la demanda bioqumica de oxgeno a los 5 das en una muestra de
aguas residuales domsticas, aplicando el mtodo de Winkler

En la prueba de la demanda bioqumica de oxgeno (DBO), las aguas negras abastecen de
alimento a los organismos encargados de la descomposicin y el agua de dilucin abastece
de oxgeno disuelto. La diferencia entre el oxgeno disuelto determinado inmediatamente
despus de que se hace la dilucin y el oxgeno disuelto determinado a los 5 das de
incubacin (ver figura 11.1), constituye el oxgeno consumido o demanda bioqumica de
oxgeno a los 5 das (DBO5) de la porcin de muestra utilizada. La reaccin biolgica que
tiene lugar e la siguiente:
microorganismos
Desecho orgnico + O2 CO2 + Propagacin de nuevas clulas
Esta ecuacin es una supersimplificacin de reacciones bioqumicas muy complejas que se

llevan a cabo.
Las sustancias txicas causan interferencias porque matan los organismos presentes en el
agua (cloro residual, phs extremos, etc.).
Muestreo
Una vez que se ha tomado la muestra la determinacin se debe hacer lo antes posible.
Mientras que se hace la determinacin, la muestra debe ser almacenada a una temperatura
de 4oC o menos y hacerse antes de las 6 hrs. de recolectada la muestra.

Incubadora de baja temperatura
Botellas de Winkler
Pipetas graduadas de 10 ml.
Matraces Erlenmeyer
Bureta de 50 ml.
Vasos de precipitado
Sulfato de Magnesio,
Cloruro de Calcio,
Cloruro de Hierro
Solucin amortiguadora de Fosfatos.
Reactivos para Oxgeno disuelto
45
Figura 11.1. Incubadora de baja temperatura
Figura 11.2.Electrodo para medir oxgeno disuelto
Adems del mtodo Winkler, se puede hacer uso del mtodo electromtrico, con un
electrodo de medicin (ver figura 11.2).
46
Procedimiento:
Preparacin del agua de dilucin
Sature de O2 el agua que usar para la dilucin, agitndola en un frasco parcialmente
lleno.
Ponga el volumen deseado de agua destilada en un frasco apropiado y aada un ml/litro
de cada una de las soluciones siguientes: Sulfato de Magnesio, Coruro de Calcio,
Cloruro de Hierro y solucin amortiguadora de fosfatos. Se aade la solucin
amortiguadora de fosfatos justamente antes de usar el agua de dilucin.
Siembra
El propsito de sembrar es introducir a la muestra una poblacin bioqumica capaz de
oxidar el material orgnico. Donde tales microorganismos se encuentran presentes
como en el caso de las aguas negras domsticas o afluentes de las plantas de
tratamiento que no tienen cloracin y en las aguas superficiales el sembrado se hace
innecesario y no debe ser usado.
Cuando la muestra contiene muy pocos microorganismos como resultado de la
cloracin, altas temperaturas o pHs extremos, siembre con el sedimento de aguas
domsticas que ha sido almacenada a 20o C por 24 a 36 horas.
Pretratamiento
Muestras que contienen alcalinidad acidez custica, neutralcelas a un pH cerca de 7
con cido sulfrico o hidrxido de sodio 1N.
Muestras que contienen compuestos de cloro residual, si permanecen 1 o 2 horas en
reposo, el cloro residual a menudo ser disipado. En este caso, prepare las diluciones
de DBO con agua propiamente sembrada. Destruya altos contenidos de cloro en
muestras neutralizadas aadiendo Na2SO3 en cantidades apropiadas.
Muestras supersaturadas de oxgeno disuelto que contienen ms de 9 mg/1 a 20o C
pueden ser encontradas en los meses de invierno o en localidades donde crecen algas
abundantemente. Para prever la prdida de oxgeno durante la incubacin reduzca el
oxgeno disuelto a saturacin trayendo la temperatura de 20oC en un frasco
parcialmente lleno y agitando.
Dilucin de la muestra
Haga varias diluciones de la muestra para obtener las disminuciones de oxgeno
disuelto requerido. Estime la dilucin necesaria para producir un consumo de oxgeno
de 2 6 mg/l despus de 5 das, de acuerdo a lo que establece la tabla 11.1.
Tabla 11.1. Relacin entre el tipo de desecho, el % de dilucin de la muestra y la DBO

esperada
TIPO DE DESECHO DBO5 EN mg/1 % DE DILUCIN

Industrial concentrado 500-5000 0.1 1.0
Aguas residuales domsticas 100-500 1.5 5.0
Efluentes tratados 30-100 5.0 25.0
Aguas superficiales 5-30 25.0 100. 0
contaminadas
47
Sifonee cuidadosamente el agua de dilucin a un vaso de precipitado de 1000 ml.

Llnese hasta la mitad procurando no hacer burbujas para evitar la entrada de aire.
Agregar cuidadosamente la cantidad de muestra para la dilucin deseada y diluyase al
nivel apropiado con el agua de dilucin.
Mezcle bien un agitador de tipo de mbolo, evitando la entrada de aire. Sifonee la

solucin deseada por lo menos en 2 frascos de DBO procurando que el lquido se
derrame; tape hermticamente evitando la formacin de burbujas de aire. Incube por lo
menos un frasco y en el otro determine el oxgeno disuelto inicial.
Prepare diluciones sucesivas de concentracin ms baja de la misma manera.
Incubacin
Incbese el testigo del agua de dilucin si es sembrada y las muestras diludas a 5 das a
20oC. selle hidrulicamente los frascos de DBO en la parte superior del cuello del frasco.
Clculos
SIN DILUCIN:
DBO5 en mg/ 1 = (DIOD mg/1 OD mg/1)
donde:
DIOD = Demanda inmediata de oxgeno disuelto
OD = oxgeno disuelto despus de 5 das
CON DILUCIN:
DBO5 en mg/1 = DIOD mg/1 OD mg/1 al 5o da
% de dilucin expresado en decimales
CORRECCIN POR INOCULO:
Correccin = (B1 B2)f
donde:
B1 = OD del agua de dilucin inoculada antes de la incubacin.
B2 = OD del agua de dilucin inoculada despus de la incubacin.
F= % de inculo en la muestra diluda

% de inculo en la dilucin del inculo en control
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12. COLIFORMES
Objetivo: El alumno conceptualizar la importancia del control microbiolgico de la calidad

del agua mediante el uso de organismos indicadores de contaminacin, los lmites y
mtodos de determinacin de organismos coliformes establecidos por la normatividad
mexicana.
12.1. Organismos patgenos

El agua puede servir como un medio en el cual pueden existir miles de especies biolgicas,
ya sea en su ciclo competo de vida o, al menos, una parte de ste. La variedad de los
organismos acuticos, en cuanto a su tamao y complejidad, incluye desde los
microorganismos unicelulares ms pequeos hasta los grandes peces. Todos los miembros
de la comunidad biolgica son, en algn grado, parmetros de la calidad del agua, debido a
que su presencia o ausencia puede indicar en trminos generales las caractersticas de
calidad de un cuerpo de agua.
Desde la perspectiva humana del uso y consumo, los principales organismos biolgicos en
el agua son los patgenos, que son aquellos organismos capaces de infectar o transmitir
enfermedades a los humanos. Estos organismos no son nativos de los sistemas acuticos y,
generalmente, requieren de algn animal husped para su crecimiento y reproduccin. Ellos
pueden, sin embargo, ser transportados por los sistemas de agua naturales, convirtindose
de manera temporal en miembros de la comunidad acutica. Muchas especies de patgenos
son capaces de sobrevivir en el agua y mantener su capacidad infecciosa por largos
perodos de tiempo. Estos patgenos propagados por el agua incluyen especies de
bacterias, virus, protozoarios y helmintos.
12.2. Bacterias, Virus, Protozoarios y Helmintos
12.2.1. Bacterias
Las bacterias son microorganismos unicelulares, generalmente incoloros y son la forma de
vida ms baja capaz de sintetizar protoplasma a partir del medio que las rodea. La forma de
las bacterias puede ser variada, como barras (bacilos), esfricas (cocos) o en espiral
(espirilos). Los desrdenes gastrointestinales son un sntoma comn de la mayora de las
enfermedades transmitidas por las bacterias patgenas transportadas por el agua.
El clera, la enfermedad que hasta nuestros das causa tantas defunciones, sobre todo en
poblaciones infantiles y de la tercera edad en pases en vas de desarrollo - aunque los
pases desarrollados no estn exentos- es transmitida por el Vibrio comma, que puede
ocasionar la muerte por deshidratacin ; es uno de los ms violentos agentes transmitidos
por el agua. Los sntomas de la tifoidea, enfermedad transmitida por Salmonella typhosa,
incluye desrdenes gastrointestinales, fiebre, ulceraciones intestinales y posible dao
nervioso. Aunque la inmunizacin y la desinfeccin de las aguas de abastecimiento ha
eliminado el clera y la tifoidea en la mayor parte del mundo, en reas sobrepobladas y con
pobres condiciones sanitarias, ocasionalmente se presentan brotes de estas enfermedades.
12.2.2. Virus
Los virus son las estructuras biolgicas ms pequeas hasta ahora conocidas que contienen
toda la informacin gentica necesaria para su propia reproduccin. Los virus son parsitos
obligados que requieren de un husped en el cual vivir. Los sntomas asociados con
50
infecciones virales transmitidas por el agua, involucran desrdenes del sistema nervioso
ms que del tracto intestinal. Estos virus son los que causan la poliomielitis y la hepatitis
infecciosa.
La inmunizacin ha reducido la incidencia de polio a unos cuantos casos aislados que

aparecen en pases desarrollados. Los brotes de hepatitis son ms comunes, siendo
ocasionados por el consumo de mariscos de concha, entre otros.
Aunque las prcticas comunes de desinfeccin eliminan a los virus, la confirmacin de una
efectiva desinfeccin viral es difcil, debido al tamao de los organismos y a la falta de
pruebas de laboratorio rpidas y confiables. La incertidumbre de la desinfeccin viral, es el
mayor obstculo para el reuso directo de las aguas tratadas.
12.2.3. Protozoarios
La forma ms baja de vida animal son los protozoarios, que son organismos unicelulares
con actividad funcional ms compleja que las bacterias o los virus. Son organismos
completos, pueden vivir de manera libre o como parsitos, pueden ser patgenos o no
patgenos, microscpicos o macroscpicos. Estos organismos, que son altamente
adaptables a condiciones adversas, estn ampliamente distribuidos en las aguas naturales,
aunque slo unos pocos son patgenos.
Las infecciones ocasionadas por protozoarios se caracterizan por desordenes

gastrointestinales, aunque ms leves que los asociados con bacterias. Sin embargo, las
infecciones por ellos producidas pueden llegar a ser muy importantes, como el caso de la
Entamoeba histolytica. Muchos casos de giardiasis o enfermedad de los excursionistas,
causada por Giardia lamblia, que tiene mayor incidencia en pocas de primavera y verano
en personas que consumen agua de corrientes naturales.
Bajo circunstancias ambientales adversas, los protozoarios forman quistes que son
difcilmente desactivados por la desinfeccin, siendo necesario tratamientos completos que
incluyan la filtracin para removerlos.
12.2.4. Helmintos
Los ciclos de vida de los helmintos o gusanos parsitos, con frecuencia incluyen dos o ms
animales husped, uno de los cuales puede ser el humano, y la contaminacin de las aguas
resulta de los desechos humanos (heces principalmente) o animales que contienen
helmintos. Aunque los sistemas acuticos pueden ser el vehculo de transmisin de los
helmintos, los sistemas actuales de tratamiento de aguas son muy efectivos en su
destruccin. Los helmintos son un peligro para aquellas personas que entran en contacto
con aguas sin tratar.
12.3. Organismos indicadores

Debido a que generalmente la concentracin de patgenos en las aguas naturales es
minscula, constituye una medida prctica, la incorporacin de su determinacin
cuantitativa directa dentro del anlisis rutinario de las aguas. Excepto en circunstancias
muy anormales, los analistas debern quedar satisfechos con la evidencia indirecta de la
presencia de patgenos, a travs de la determinacin de los que reciben el nombre de
organismos indicadores. Entre los organismos candidatos, el grupo de bacterias coliformes,
que tienen su hbitat primario en el conducto intestinal de los seres humanos, ha sido
51
durante mucho tiempo el indicador preferido de la contaminacin fecal del agua y de la

posible presencia consecuente de los parsitos intestinales o de los patgenos. Para que un
organismo se pueda considerar como indicador deber cumplir con lo siguiente:
Que sea aplicable a todo tipo de aguas;

Que siempre est presente cuando los patgenos estn presentes;
Que siempre est ausente cuando los patgenos estn ausentes;
Prestarse a procedimientos de prueba o exmenes rutinarios para su cuantificacin sin
que haya interferencia o confusin en los resultados por la presencia de organismos
extraos;
Por la seguridad del personal de laboratorio, que no sean patgenos.
Es una prctica comn el uso del total de grupos coliformes (fecales y no fecales) como
indicadores de la calidad sanitaria del agua potable, mientras que para las aguas residuales
y los efluentes tratados se utiliza el grupo de coliformes fecales.
12.3.1. El Grupo de bacterias coliformes

Con un amplio conocimiento del anlisis de aguas, el grupo bacterias coliformes incluye no
slo a los organismos que se originan en el tubo intestinal de los seres de sangre caliente
(colifecales, principalmente a la Escherichia Coli), sino tambin a los organismos
provenientes del suelo y de la vegetacin (principalmente al Aerobacter aergenes). El
grupo cloliforme incluye a todas las bacterias aerbicas y anaerbicas facultativas, no
formadores de esporas, gram-negativas, en forma de bastn, que fermentan a la lactosa
(azcar de leche) con produccin de gas a 35o C en 48 horas. Por lo tanto, la adicin de una
muestra de agua a caldo nutritivo que contenga lactosa, incubndola y observando el
desprendimiento de gas, proporciona una evidencia de que se encuentra presente alguno de
los coliformes. Debido a que existen otras bacterias que pueden fermentar a la lactosa, la
presencia del grupo coliforme se debe confirmar mediante reacciones verificativas. Sin
embargo, las bacterias que fermentan a la lactosa se agrupan, por lo general, en el anlisis
rutinario de aguas, una vez que se han establecido la presencia de organismos coliformes
verdaderos para aguas determinadas. De hecho, la prueba no confirmada proporciona un
factor de seguridad.
12.4. Tcnicas de identificacin y cuantificacin de microorganismos en el agua.

Para determinarla presencia de bacterias coliformes en el agua y para enumerar su
cantidad, se han desarrollado pruebas de laboratorio relativamente fciles. Las pruebas
para los coliformes totales emplea medios de cultivo ligeramente diferentes y temperaturas
de incubacin ms bajas que las utilizadas para los coliformes fecales.
12.4.1. Tcnica de filtro de membrana.

Esta tcnica, preferida por los ingenieros ambientales por la rpida obtencin de
resultados, permite cuantificar directamente a las bacterias coliformes. Una porcin de la
muestra se filtra a travs de una membrana cuyos poros no exceden las 0.45 m. Las
bacterias son retenidas en el filtro, el cual se coloca sobre un medio de cultivo selectivo
que promueve el crecimiento de bacterias coliformes e inhibe el crecimiento de otras
especies. La membrana y el medio de cultivo se incuban a 35 C por 24 horas. Este perodo
sirve para que las bacterias se reproduzcan y formen colonias visibles, las cuales pueden
contarse. Los resultados son reportados en nmero de colonias por 100 mL de agua.
52
12.4.2. Tcnica de Tubos Mltiples de Fermentacin.

Un mtodo alterno, preferido por los microbilogos, es el mtodo de tubos mltiples de
fermentacin. Es bien conocido que las bacterias del grupo coliforme fermentan la lactosa,
es decir descomponen el azcar de leche, produciendo gas. Un medio de cultivo lquido
conteniendo lactosa, otros nutrientes y sustancias que inhiben el desarrollo de organismos
no coliformes, es vertido en series de tubos de ensayo de fermentacin (tubos Durham), los
cuales son inoculados con fracciones decimales de 1 mL. Estos tubos inoculados, se
incuban a 35 C por 48 horas y se inspeccionan por la produccin de gas. Esta primera
etapa se llama prueba presuntiva y los tubos que presentan gas se presume que tienen
coliformes presentes. Una segunda etapa, llamada prueba confirmativa, similar a la
anterior, pero en caldos de cultivo selectivos para coliformes totales y fecales, sirve para
confirmar o no la presencia de organismos coliformes, mediante la observacin de la
produccin de gas. La desventaja de este mtodo es que la prueba completa se puede
prolongar hasta por nueve das.
Para conocer el nmero de bacterias se ha desarrollado un mtodo estadstico con el cual

se determina el Nmero Ms Probable de bacterias coliformes en 100 mL de muestra de
agua, NMP / 100 mL. Para lo anterior existen tablas que se basan en la combinacin de
tubos positivos en las series de prueba y los valores de NMP presentados se calculan con
la Frmula de Thomas :
No. de tubos positivos x 100

NMP/100 Ml = ----------------------------------------------------------
(Mls de muestra en todos los tubos x Mls. De muestra en los tubos negativos)
12.5. Procedimiento
12.5.1. Prueba presuntiva

Se puede usar como medio presuntivo caldo lactosado o caldo lauriltriptona (ver figura
12.1)
1. Inocular una serie de tubos de fermentacin conteniendo el medio cultivo esterilizado

con cantidades graduadas apropiadas (mltiplos o submltiplos de 10 ml) del agua que
va a hacer dilucin; se har la dilucin previamente en un tubo aparte y se agregarn 10
ml de disolucin. El agua de disolucin es una agua especial llamada solucin
amortiguadora de fosfatos.
2. Incubar los tubos de fermentacin inoculados a 350.05 oC al final de las 242 horas,
agite cada tubo y examinar si no se ha formado gas que haya sido atrapado en el tubo
inverdido, si no es as repetir este paso al final de las 483 horas. Anotar la ausencia o
presencia de la formacin del gas de cada tubo independiente de la cantidad de gas (ver
figura 12.2)
3. Interpretacin
La formacin del gas dentro de las 483 horas en cualquier cantidad en el tubo
invertido constituye una prueba presuntiva positiva.
53
La aparicin de una burbuja no debe ser confundida con la produccin de gas

verdadero, si el gas se ha formado como resultado de la fermentacin el caldo se
volver turbio. La ausencia del gas a las 483 horas constituye una prueba presuntiva
negativa.
12.5.2. Prueba confirmativa

Use caldo de bilis verde brillante (ver figura 12.1)
1. A todos los tubos que hayan mostrado una cantidad de gas al final de las 24 horas
de incubacin se les har la prueba confirmativa. Si tubos adicionales en la prueba
muestran gas al final de las 483 horas tambin sern confirmadas.
2. Realizar cualquiera de los siguientes pasos.

A todos los tubos que hayan mostrado una cantidad de gas al final de las 24 horas
de incubacin se les har la prueba confirmativa. Si tubos adicionales en la prueba
muestran gas al final de las 483 horas tambin sern confirmadas.
Agite vigorosamente o girar los tubos de la prueba presuntiva que hayan presentado
gas y con una asa estril de 3mm de dimetro; transfiera una asa llena de medio de
la prueba presuntiva al tubo de fermentacin conteniendo el caldo de bilis verde
brillante.
Agite vigorosamente o girar la prueba presuntiva que hayan presentado gas e
inserte un aplicador de lana estril cuando menos 2.5 cm dentro del medio de
cultivo de la prueba presuntiva. Sacarlo rpidamente e introducir el aplicador hasta
el fondo del tubo de fermentacin que contiene el caldo de bilis verde brillante.
Saque el aplicador y deschelo.
3. Incube los tubos de bilis verde brillante inoculados por 483 horas a 350.5oC.
4. La interpretacin es igual en procedimiento anterior (ver figura 12.2)
12.5.3. Procedimiento para coliformes fecales

1. Transferir de todos los tubos positivos de la prueba presuntiva para coliformes totales
una pequea cantidad a los tubos conteniendo el medio de cultivo EC. Este anlisis
puede llevarse a cabo simultneamente con el procedimiento de la prueba confirmativa.
Use una asa esterilizada de 3mm de dimetro o un aplicador de lana estril para hacer
transferencia de los tubos positivos al medio de cultivo EC.
Se aaden 3 asas a cada tubo.
Al hacer tales transferencias, primero, agite cuidadosamente los tubos de la prueba
presuntiva.
2. Incubar los tubos inoculados en un bao Mara a 44.5 0.2oC por 242 horas. Colocar
todos los tubos de cultivos dentro del bao Mara dentro de los 30 minutos despus del
sembrado. La profundidad del agua ser suficiente para sumergir los tubos hasta el
nivel del medio cultivo.
3. La interpretacin es igual que en los procedimientos anteriores.
54
Figura 12.1. Tubos de caldo lactosado y bilis verde brillante
Figura 12.2. Tubos de fermentacin positivos (observe la formacin de gas dentro de los
tubos)
Figura 12.3. Campana de flujo laminar para el sembrado de microorganismos
55
Figura 12.4. Incubadora

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2. Henry, J. Glynn, Heinke, Gary W. Ingeniera ambiental 2 edicin.. Prentice. Mxico. 1999
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4. Hardenberg, W.A. and Rodie Edward B. Ingeniera sanitaria
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9. EnKerlin Ernesto y otros. Ciencia ambiental y desarrollo sostenible 1 ed International
Thomson Publishing Mxico 1997 ISBN 968-7529-02-4
10. Tratado universal del medio ambiente 1 edicin. Rezza editores Espaa 1993
11. ISBN 84-7973-187-7
12. Hounslow, Arthur. Water quality data. 1 edicin Lewis Publishiers. USA 1995 ISBN 0-
87371-676-0
13. Normas Oficiales Mexicana
14. Normas mexicanas
15. Reglamento JMAS de la ciudad de Chihuahua
57
Universidad Autnoma de Chihuahua.
FACULTAD DE INGENIERA
Manual de Prcticas de Laboratorio de Sanitaria.

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Manual de prcticas de Laboratorio de Ingeniera Sanitaria

Elabor: Ing. Regina Garca Hololavsky ndice

Objetivo: Conocer de manera general la clasificacin de los parmetros que definen la

1.1. El ciclo hidrolgico y la calidad del agua

Tabla 1.1. Distribucin del agua en el planeta

Localizacin Volumen, 1012 m3 % del total

El agua se encuentra en un estado de movimiento constante a travs del ciclo hidrolgico,

El agua en la naturaleza se encuentra casi en estado puro cuando est en la forma de

Figura 1.1. Esquema del ciclo hidrolgico

1.2. Parmetros para la calidad del agua

Aunque la cantidad de parmetros que pueden determinarse en el agua para establecer su

1.2.1. Parmetros fsicos

1.2.2. Parmetros qumicos

1.2.3 Parmetros biolgicos

1.3. Legislacin mexicana relativa al agua

1.3.1. Ley de Aguas Nacionales

calidad para lograr su desarrollo integral sustentable; se considera de observancia general,

1.3.2. Ley General del Equilibrio Ecolgico y La Proteccin a Ambiente

I. Garantizar el derecho de toda persona a vivir en un medio ambiente adecuado para

Como resultado de la publicacin de sta ley, cada estado de la federacin elabor y

refrigerar), Captulo I (Agua), Artculos 209 y subsecuentes, establece las caractersticas

A nivel municipal en Chihuahua existe el reglamento para La Proteccin del Ambiente en el

1.3.4. Normas Oficiales Mexicanas

Objetivo: El alumno conceptualizar la importancia que el color tiene en la definicin de la

2.1. Origen del color en el agua

2.2. Impacto del color

2.3. Uso y aplicacin

2.4. Remocin del color

2.5. Medicin del color

Los estndares preparados generalmente varan de 0 a 70 unidades de color y sirven por

Figura 2.1. Tubos de Nessler para comparacin de color

Figura 2.2. Colormetro Aquatester de Hellige.

Figura 2.3. Espectrofotmetro Sequoia-Turner Modelo 340

2.5.1. Principio del mtodo

An la ms ligera turbiedad interfiere, causando que el agua aparente sea notablemente

Equipo y material requerido

Un comparador colorimtrico marca Hellige.

2. A qu conclusiones llegara en los siguientes casos:

3. Qu cantidad de K2PtCl6 es necesario pesar para producir un litro de una solucin de

2.7. Resultados y conclusiones

Objetivo: El alumno conceptualizar la importancia de la turbiedad en la definicin de la

3.1. Origen de la turbiedad

3.2. Impacto de la turbiedad

3.3. Uso y aplicacin

3.4. Remocin de la turbiedad

3.5. Medicin de la turbiedad

1 mg SiO2/1 = 1 unidad de turbiedad

3.5.1. Principio del Mtodo

Equipo y material requerido

TURBIEDAD EN p.p.m. SiO2 APROXIME AL MLTIPLO MAS CERCANO

100 - 400 10.0

3.7. Resultados y conclusiones

4. POTENCIAL HIDRGENO (pH)

Objetivo: El alumno comprender el concepto de pH y su aplicacin en el contexto de la

4.1. Constante de Ionizacin del Agua

El agua qumicamente pura se disocia en la siguiente forma:

[H+ ] [OH- ] = K Cte. de equilibrio

Debido a que la concentracin del agua es extremadamente grande, y su concentracin

H+ OH-= Kw cte. de ionizacin

El valor de Kw a 25o C es de 1 x 10-14 mol / 1.

4.2. Rango de pH. Acidez y Basicidad

La expresin de la concentracin del in hidrgeno o en otras palabras del grado de acidez,

La escala de pH se representa de 0 a 14 en la que pH = 7 representa la neutralidad