IV.

RESULTADOS

A. DETERMINACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

AE = Absorbancia /minuto x g x peso

Tabla 1

Tiempo Mezcla 2 y 3 Mezcla 4 y 5 Mezcla 6 y 7

(seg.)

20 0.035 0.152 0.149

40 0.045 0.206 0.245

60 0.058 0.244 0.323

80 0.082 0.276 0.408

100 0.103 0.350 0.480

120 0.125 0.341 0.545

 GRAFICA DE LOS RESULTADOS DE LA EXPERIENCIA 1

GRAFICA DE MEZCLA TUBO 2 Y 3

Mezcla 2 y 3
0.14
0.12 120, 0.125
0.1 100, 0.103
Absorbancia

0.08 80, 0.082

0.06 60, 0.058
0.04 40, 0.045 Mezcla 2 y 3
20, 0.035
0.02
0
0 50 100 150
tiempo

0.1250.103
Actividad enzimtica (AE): = 0.073
0.3.

GRAFICA DE MEZCLA D TUBO 4 Y 5

MEZCLA 4 Y 5
0.4
0.35 100, 0.35 120, 0.341
0.3
80, 0.276
Absorbancia

0.25 60, 0.244

0.2 40, 0.206

0.15 20, 0.152 Absorbancia

0.1
0.05
0
0 20 40 60 80 100 120 140
tiempo(seg.)

..
Actividad enzimtica (AE): = .
..
 MEZCLA DE TUBO 6 Y 7

Mezcla 6 y 7
0.6
120, 0.545
0.5 100, 0.48
0.4 80, 0.408
absorbancia

0.3 60, 0.323

40, 0.245
0.2 Mezcla 6 y 7
20, 0.149
0.1

0
0 50 100 150
Tiempo (seg.)

..
Actividad enzimtica (AE): = .
.

Al comparar los valores de la actividad peroxidasa, analizamos que su actividad

incrementa de manera que a mayor enzima tendra mayor actividad enzimtica y
finalmente dando mayor producto. Es por eso que en la mezcla de tubo 6 y 7 dio
como resultado mayor que los otros (AE=0.32), en el cual hemos aadido ms
enzima (homogenado).
 B. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Tabla 2

Tiempo Mezcla Mezcla Mezcla Mezcla

(seg.) 2y3 4y5 6y7 8y9
(4) (23) (32) (48)
20 0.423 0.124 0.212 0.032
40 0.456 0.292 0.230 0.060
60 0.462 0.311 0.246 0.078
80 0.447 0.328 0.264 0.098
100 0.391 0.346 0.280 0.117
120 0.305 0.363 0.295 0.135

GRAFICA DE LOS RESULTADOS DE LA EXPERIENCIA 2

GRAFICA MEZCLA TUBO 2 Y 3 (4C)

Mezcla 2 y 3 (4) Mezcla 2 y 3 (4)

0.5
0.45 40, 0.456 60, 0.462 80, 0.447
0.4 20, 0.423
100, 0.391
0.35
Absorbancia

0.3 120, 0.305

0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 20 40 60 80 100 120 140
Tiempo(seg)

..
Actividad enzimtica (AE): = .
.
 GRAFICA MEZCLA DE TUBO (4 Y 5)(23C)

Mezcla 4 y 5 (23)
0.4
0.35 120, 0.363
100, 0.346
80, 0.328
0.3 60, 0.311
40, 0.292
absorbancia

0.25
0.2 20, 0.194
Mezcla 4 y 5 (23)
0.15
0.1
0.05
0
0 50 100 150
tiempo (SEG.)

..
Actividad enzimtica (AE): = .
.

GRAFICA MEZCLA TUBO 6 Y 7 (32C)

Mezcla 6 y 7 (32)
0.35
0.3 120, 0.295
100, 0.28
0.25 80, 0.264
60, 0.246
absorbancia

40, 0.23
0.2 20, 0.212

0.15
Mezcla 6 y 7 (32)
0.1
0.05
0
0 50 100 150
Tiempo(seg.)

..
Actividad enzimtica (AE): = 0.06
.
 GRAFICA MEZCLA TUBO 8 Y 9 (48)

Mezcla 8 y 9 (48)
0.16
0.14 120, 0.135
0.12 100, 0.117
absorbancia

0.1 80, 0.098

0.08 60, 0.078
Mezcla 8 y 9 (48)
0.06 40, 0.06
0.04
20, 0.032
0.02
0
0 50 100 150
Tiempo(seg.)

..
Actividad enzimtica (AE): = .
.

Comparacin de los resultados calculados de actividad enzimtica

(Efecto de la temperatura)

Mezclas Mezcla 2 y 3 Mezcla 4 y 5 Mezcla 6 y 7 Mezcla 8 y 9

(4c) (23c) (32c) (48c)
Actividad 0.02 0.04 0.06 0.05
enzimtica
La actividad enzimtica a 32C, se ve que la actividad es mayor que a 48C y la
actividad ms baja es a 4C que 23C. Por lo tanto, la peroxidasa alcanzo mayor
actividad enzimtica a temperatura 32C.

IDENTIFICACIN DE TEMPERATURA PTIMA DE LA ENZIMA

Temperatura( C) Absorbancia
Temperatura ptima de la 4 0.305
peroxidasa 23 0.363
0.4 32 0.295
23, 0.363
48 0.135
arborbancia

0.3 4, 0.305 32, 0.295

0.2 48, 0.135

0.1 Series1
0
0 20 40 60
temperatura (C)

Como todas las enzimas, la peroxidasa tiene una temperatura ptima cerca a
ms de 23C y menos de 32C. La velocidad de la reaccin catalizada por la
peroxidasa se incrementa al aumentar la temperatura dentro de un rango
determinadoalcanzando un valor mximo denominada temperatura ptima. A
temperaturas superiores (ms de 32C) la actividad disminuye debido a que la
enzima peroxidasa, sufre procesos de desnaturalizacin y, por lo tanto, de
inactivacin.
V. DISCUSIONES

Como la peroxidasa es una enzima que cataliza la oxidacin de compuestos

dadores de H+; el fenol (guayacol) es oxidado a un complejo coloreado de
trateaguayacol en presencia de peroxidasa. La velocidad de formacin del color
rojo ladrillo se utilizada como medida de la actividad enzimtica por lecturas
espectrofotomtricas de las absorbancias en relacin con el tiempo.

Para determinar la actividad enzimtica depender del tipo de vegetal (papa), del
substrato oxidable que se emplea como reactivo (guayacol), del pH y temperatura
a que se trabaja.

En la tabla 2, segn las grficas correspondientes se observa que las

temperaturas 32 C y 48C hay una activacin enzimtica mayor y en cambio en
temperaturas de 4C a 23C la actividad enzimtica es mnima, podemos deducir
que la peroxidasa a medida que incrementa la temperatura su actividad tambin
ejerce el mismo ritmo (aumenta). Pero en altas temperaturas(pasado los 32c) y
en mayor tiempo puede inactivarse (desnaturalizacin).
VI. CONCLUSIONES

Nosotrosdeterminamos la actividad enzimtica de la enzima Peroxidasa en

tejido vegetal (papa) de cada concentracin homogenada (enzima) y con
sus respectivos grficos.
Si la actividad enzimtica es la velocidad de una reaccin catalizada bajo
determinadas condiciones, de acuerdo con el experimento realizado
podemos concluir que, la temperatura tiene un efecto en la actividad
enzimtica. La peroxidasa a altatemperatura la velocidad de reaccin
aumenta hasta que se llega a una velocidad mxima, este incremento es el
resultado de aumento del n de molculas que tienen energa suficiente
para sobrepasar la barrera energtica y formar los productos de la reaccin.
Si las altas temperaturas aceleran la reaccin enzimtica entonces
podemos decir que las bajas temperaturas retardan la reaccin enzimtica.
Si las temperaturas sobrepasan los 50 a 60C, Alteran laconfiguracin
molecular (desnaturalizacin trmica) de la enzima, desactivndola
irreversiblemente o deteniendo por completo el metabolismo de la clula o
del individuo, provocando la muerte. Por lo tanto,la actividad enzimtica es
la velocidad de una reaccin catalizada bajo determinadas condiciones.