UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

MESA
FACULTAD DE CIENCIAS

DEPARTAMENTO ACADMICO DE QUMICA N 4

LABORATORIO DE BIOQUMICA

PRCTICA N 9

TRIGLICRIDOS Y COLESTEROL

TOTAL

Integrantes:

1- Acua Campos, Michelle 20160327

2- Alvarez Jijon, Jim 20160328

3- Ccahuay Ramrez, Diego Armando 20160337

4- Enriquez Araujo, Fabrizio

Grupo: Lunes 2-4pm F*

Fecha de la prctica: 05/06/17

Fecha de entrega de informe: 12/06/17

2017-I
INTRODUCCIN

Los triglicridos son un tipo de grasa presente en el torrente sanguneo y en el tejido adiposo. Constituyen
95 % de las grasas que se almacenan en los tejidos y su funcin principal es la de proveer energa a la
clula, siendo transportados al torrente sanguneo. Los triglicridos estn constituidos por glicerol y cidos
grasos. Las concentraciones de triglicridos en s, tienen poco valor de prediccin y aumentan despus de
la ingestin de grasa.

El colesterol es una sustancia hidrfoba, insoluble en medio acuoso y por tanto insoluble en el plasma
sanguneo. El colesterol se sintetiza sobre todo en el hgado. El colesterol es esencial para el
funcionamiento normal del organismo. Los mtodos analticos que se emplean actualmente utilizan
colesterolesterasa para el colesterol y permite examinar muestras. La colesterol esterasa hidroliza los
steres de colesterol presentes en la muestra dando colesterol libre y cidos grasos, en una posterior
oxidacin enzimtica mediante la colesterol oxidasa se forma H2O2 y colesterona. El H2O2 se valora por la
reaccin Trinder, mediante un cromgeno, fenol y 4-Aminoantipirina, en presencia de Peroxidasa,
formando una quinonimina cuya coloracin, es proporcional a la concentracin de colesterol en la muestra.

RESULTADOS

Triglicridos

Blanco Estndar Muestra

Muestra (mL) - - 0,003
Estndar (mL) - 0,003 -
Rvo. de trabajo (mL) 0,3 0,3 0,3
Mezclar e incubar 5 minutos a 37
Agua destilada (mL) 0,7 0,7 0,7
Absorbancia opt=520nm 0,015 0,134 0,031
Absorbancia corregida 0,119 0,016
Sol. Stndar = 200mg/dL

200mg ----- 100mL

X ------------ 0,003mL ~ 1mL

X = 6x10-3mg

6103
CM = x AM = x 0,016 = 8,067x10-4
0,119

8,067x10-4 ----------- 0,003mL

X ----------------------- 100mL

X = 26,89mg%

Colesterol total

Blanco Estndar Muestra

Muestra (mL) - - 0,003
Estndar (mL) - 0,003 -
Rvo. de trabajo (mL) 0,3 0,3 0,3
Mezclar e incubar 5 minutos a 37
Agua destilada (mL) 0,7 0,7 0,7
Absorbancia opt=505nm 0,019 0,112 0,054
Absorbancia corregida 0,093 0,035
Sol. Stndar = 200mg/dL

200mg ----- 100mL

X ------------ 0,003mL ~ 1mL

X = 6x10-3mg

6103
CM = x AM = x 0,035 = 2,26x10-3
0,093

2,26x10-3 ----------- 0,003mL

X --------------------- 100mL

X = 75,3mg%

DISCUSIONES

En el tejido adiposo, los triglicridos son hidrolizados con lipasas. Los cidos grasos y el glicerol pasan al
plasma sanguneo. A travs del plasma, los cidos grasos llegan a los msculos, testculos y riones para
luego ser cuidados y servir como fuentes de energa. El glicerol es utilizado siempre y cuando los tejidos
posean glicerocinasa, esta enzima en el hgado, rin e intestino.(Lumbreras).

En laboratorio la solucin estndar era una solucin que contena lipasas ,gliceroquinasa , glicerol 3-
fosfato, peroxidasa, adenosin trifosfato(ATP) , Mg+2 , etc. En si la solucin era el triglicrido que por una
serie de reaccione pasaba hacer un complejo coloreado la solucin por ningn motivo tenia que reaccionar
ni tampoco formar productos no deseados ya que haban reacciones reversibles por eso en la solucin
estndar se incluan estabilizantes y persevantes no reactivos .

En laboratorio se proceda a marcar tres tubos de ensayos los cuales llevaban consigo el nombre de tubo
blanco, estndar y muestra.
El tubo blanco contena agua destilada el cual se pona en el espectrofotmetro y se pona como cero
absorbancia.

En el tubo estndar se agreg agua destilada para as poder leer en el espectrofotmetro ya que la
cantidad recibida de solucin estndar era muy poca (ya que esta solucin en el mercado requiere de
costos elevados para su obtencin) para ser leda en el espectrofotmetro; tambin al tubo estndar se le
agrego el reactivo de trabajo.

En el tubo muestra se agreg 0.003mL de la muestra, tambin el reactivo trabajo 0.3mL y 0.7mL de agua
destilada.

Finalmente se pasaron estos tubos al espectrofotmetro obteniendo las absorbancias de cada tubo los
cuales se llevaron a promedio con los datos de cada grupo en el laboratorio.

Llevamos a promedio los datos de la absorbancia para evitar errores ya que a medida que realicemos
mayores anlisis espectrofotomtricos el promedio de estos estar ms cerca de la absorbancia de la
solucin estndar ; el promedio nos ayudara ya que por error obtenemos otros datos y esto se debe a que
parte de la solucin estndar se nos podra haber escapado del tubo de ensayo o tambin podra haber
ocurrido el mal lavado de la cubeta y estos errores tambin ocurriran para la solucin muestra tambin.

El colesterol est presente en los tejidos y en el plasma, sea como colesterol libre o combinado con un
cido de cadena larga .El colesterol es un lpido antiptico y, como tal, es un componente estructural
esencial de las membranas, y de la capa externa de las lipoprotenas. El colesterol libre se elimina de los
tejidos por medio de la lipoprotena de alta densidad (HDL) plasmtica, y se transporta hacia el hgado,
donde se elimina del cuerpo, sea sin cambios o despus de conversin en cidos biliares en el proceso
conocido como transporte inverso de colesterol. El colesterol es un constituyente importante de los
clculos biliares. Sin embargo, su principal participacin en procesos patolgicos es como un factor en la
gnesis de arterosclerosis de arterias vitales, lo que da por resultado enfermedad cerebrovascular,
coronaria y vascular perifrica. (Harper)
CONCLUSIONES

TRIGLICRIDOS

Se observ que para su cuantificacin, los triglicridos son hidrolizados por una lipasa especfica
liberando cidos grasos y glicerol.

Se determin que el perxido de hidrogeno reacciona con el 4-antinoantipirina y el cido 3,5-

dicloro-2-hidroxibencensulfonico para producir por medio de la enzima peroxidasa un compuesto
coloreado en cantidad proporcional a la concentracin de triglicridos presente en la muestra.

COLESTEROL TOTAL

Se determin que el colesterol se determina por accin de las enzimas colesterol ester hidrolasa y
colesterol oxidasa.

Se determin que el perxido de hidrogeno, en presencia de la enzima peroxidasa reacciona con el

sistema cromogenico dando origen a un compuesto coloreado que absorbe a 505 nm.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Asociacin Fondo de Investigadores y Editores. (2006). Biologa Una perspectiva evolutiva.

Per: Lumbreras Editores.

Jeremy M. Berg. John L. Tymocsko.Lubert Stryer. (2008). Bioqumica. Espaa: Editorial

Reverte.

Manuel Ruiz Amil. (1999). Bioqumica Estructural. Mexico: Alfaomega.

Murray. Bender. Botham. Kennelly. Rodwell. Weil. (2010). Harper.Bioquimica ilustrada.

Mexico: Mc Graw Hill.

Rodney Boyer. (1999). Conceptos de Bioqumica. Mexico: Thomson.

PROBLEMAS ENCARGADOS

1. Qu es la dislipidemia?
Las dislipidemias o dislipemias son una serie de diversas condiciones patolgicas cuyo nico elemento
comn es una alteracin del metabolismo de los lpidos, con su consecuente alteracin de las
concentraciones de lpidos y lipoprotenas en la sangre. La dislipidemia aumenta las probabilidades de
arterias obstruidas (aterosclerosis), infartos, derrames cerebrales y otras complicaciones del sistema
circulatorio, especialmente en los fumadores. En los adultos, suele estar relacionada con la obesidad, una
dieta poco saludable y la falta de ejercicio.

2. Cul es el fundamento de la determinacin de triglicridos y colesterol?

La determinacin de triglicridos son hidrolizados por una lipasa especfica liberando cidos grasos y
glicerol. El glicerol es fosforilado por la enzima gliceroquinasa y posteriormente, el glicerol-3-fosfato es
oxidado a DHAP fosfato por la enzima glicerol-fosfato-oxidasa, generandose H2O2, siendo este quien
reacciona con la 4 aminoantipirina y el cido 3,5-dicloro-2-hidroxibencensulfnico para producir un
compuesto coloreado y absorbancia medible a 520 nm
Triglicridos + Lipasa Glicerol + cidos grasos
Glicerol `+ ATP Glicerol-3-fosfato + ADP
Glicerol-3-fosfato + O2 DHAP + H2O2
2H2O2 + 4-AAP + DCBS Comp.coloreado + 4H2O

La determinacin de colesterol se da por accin de las enzimas colesterol ester hidrolasa y colesterol
oxidasa. La 1era libera el colesterol de los steres de colesterol, y la segunda oxida el colesterol libre
producindose perxido de hidrgeno, el cual en presencia de la enzima peroxidasa reacciona con el
sistema cromognico dando un compuesto coloreado que absorbe a 505 nm
Colesterol ester Colesterol + cidos grasos
Colesterol + O2 Colesterol-4-en-3-ona + H2O2
2H2O2 + 4AAP + p-HBA Comp. coloreado + 4H2O
3. Qu es un sistema cromognico?
Un medio de cultivo o sistema cromognico es un medio microbiolgico adecuado para la incubacin,
diferenciacin o seleccin de muchos microorganismos usando un sustrato cromognico que da como
resultado un color. Este color ser caracterstico de cada microorganismo siendo ms fcil y precisa la
diferenciacin.

4. Explicar la accin de las diferentes lipasas que intervienen en la digestin de triglicridos humanos.

LIPASA PANCRETICA:
En los seres humanos, la lipasa pancretica es secretada por el pncreas, junto con las sales biliares en la
vescula, en respuesta a las hormonas que se liberan cuando el quimo (alimento parcialmente digerido)
entra en el intestino. Las sales biliares funcionan para emulsionar las grasas en gotitas ms pequeas, lo
que aumenta la superficie y la eficacia de la lipasa al catalizar su digestin.

LIPASA INTRACELULAR:

La lipasa tambin cumple funciones intracelulares en los lisosomas, organelos que ayudan a eliminar los
productos de desecho de las clulas.

5. Por qu se lleva a cero el espectrofotmetro con el tubo blanco de reactivo?

Debido que el tubo blanco sirve para eso, la calibracin del equipo llevndolo a 0% Absorbancia, para
tener una lectura correcta de los dems tubos ya que si la lectura de la absorbancia del tubo blanco marca
un valor diferente al de 0 habra que corregir las absorbancias restando las lecturas de los dems tubos con
el valor del tubo blanco.